公开/公告号CN102429912A
专利类型发明专利
公开/公告日2012-05-02
原文格式PDF
申请/专利权人 庞飞;
申请/专利号CN201110329663.4
申请日2011-10-26
分类号A61K31/5685(20060101);A61P15/00(20060101);A61P19/10(20060101);A61P17/00(20060101);A61P15/02(20060101);A61P13/02(20060101);
代理机构北京宇生知识产权代理事务所(普通合伙);
代理人倪骏
地址 100006 北京市东城区南河沿紫金宫饭店509室北京康迈迪科生物技术开发有限公司
入库时间 2023-12-18 05:08:35
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2015-07-08
专利权的转移 IPC(主分类):A61K31/5685 变更前: 变更后: 登记生效日:20150619 申请日:20111026
专利申请权、专利权的转移
2013-04-24
授权
授权
2012-06-27
实质审查的生效 IPC(主分类):A61K31/5685 申请日:20111026
实质审查的生效
2012-05-02
公开
公开
技术领域
本发明述及一种药物微粉化技术，特别述及微粉化的硫酸普拉睾酮钠和普拉睾酮的药物组合物及其在医学上的应用，即：一种微粉化普拉睾酮或硫酸普拉睾酮钠制备的药物组合物及其在制备治疗和／或预防性功能减退、骨质疏松症、红斑狼疮、皮肤美容以及妇女泌尿生殖道萎缩综合征药物上的用途。
背景技术
超微粉碎是近几十年来发展起来的新技术。物料经超微粉碎后能有效改善粉体的颗粒粒度及晶体结构。而颗粒的微粉化导致物料表面积和空隙率大大增加 ，使得超微粉体具有独特的理化特性 ，如良好的分散性 、吸附性 、溶解性等。在食品、医药、化工等领域中有着广泛研究和应用价值。
药物的溶解性是影响药物生物利用度的重要因素之一。水中难溶性药物在机体很难被机体吸收，生物利用度也差。如何提高难溶性药物的溶解度和生物利用度，就成了药学研究的热点、难点。
有研究报道，灰黄霉素是一种溶解度很小的药物，超微粉化灰黄霉素与一般微粉的灰黄霉素制剂相比，治疗真菌感染的用药剂剂量可减少50％。芬必得在肠道中溶解度很小，当将其制备成细粉后即可大大提高它的溶解度，从而提高药效并降低成本。
由此可知，将药物微粉化可以提高难溶性药物溶解度和溶出度，从而提高产品质量。
硫酸普拉睾酮钠（以下简称DHEAS）化学名称为3β-羟基-5-雄甾烯-17-酮硫酸钠。化学分子式 C19H27NaO5S .2H2O。具有的化学结构式如图1所示。
普拉睾酮（以下简称DHEA）化学名称为3β-羟基-5-雄甾烯-17-酮，化学分子式 C19H28O2具有的化学结构式如图2所示。
DHEA与DHEAS为甾体化合物。均是水难溶性物质。普通制剂难以发挥好的疗效。
本发明探索了微粉化的硫酸普拉睾酮钠和普拉睾酮制备的药物在溶出度和药效学上的特征。
经文献检索，没有发现微粉化的DHEA或DHEAS组合物在药学、药效、临床效果方面的类似专利。
发明内容
本发明人探索了硫酸普拉睾酮钠和普拉睾酮微粉化技术，意外地发现，认为微粉化程度越大其得到的产品效果更好的常规看法并不成立，其微粉粒度并不是越细越好。本发明人在此技术上对硫酸普拉睾酮钠和普拉睾酮适合的微粉化粒度进行研究，发现特定的粒度范围的硫酸普拉睾酮钠和普拉睾酮能获得很好的效果，在此范围之外或大或小的粒度均无法实现上述的效果，由此完成本发明。
本发明的一个目的是提供一种微粉化普拉睾酮或硫酸普拉睾酮钠制备的药物组合物，该药物组合物药效成分为普拉睾酮或硫酸普拉睾酮钠，其粒度大小为1微米~120微米，优选为正态分布1微米~50微米，更优选为正态分布10微米。
优选地，在单个剂量药物组合物中药效成分的含量为10mg~200mg，优选25~100mg。
上述药物组合物，可配合药用辅料制备成药学上可接受的任何一种剂型产品。
优选地，药用辅料包括一种或二种以上药学上可接受的辅料，如玉米淀粉、微晶纤维素、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、液状石蜡等。
优选地，所述剂型如片剂、胶囊剂、薄膜片、软膏、栓剂。
本发明的另一个目的是提供上述药物组合物在制备治疗和／或预防性功能减退、骨质疏松症、红斑狼疮、皮肤美容以及妇女泌尿生殖道萎缩综合征药物上的用途。
附图说明
图1：DHEAS的化学结构式。
图2：DHEA的化学结构式。
图3A：DHEAS原料和微粉化后的显微照片（硫酸普拉睾酮钠原料，50~65目）。
图3B：DHEAS原料和微粉化后的显微照片（100~120目）。
图3C：DHEAS原料和微粉化后的显微照片（中心10微米微粉）。
图3D：DHEAS原料和微粉化后的显微照片（中心0.5微米微粉）。
图4：微粉化DHEAS薄膜片的溶出度曲线。
图5：微粉化DHEA胶囊的溶出度曲线。
具体实施方式
下面的具体实施方式和实施例仅为了进一步说明本发明，而不是限制本发明的范围。
实施方式1、DHEA和DHEAS粉体的制备
DHEAS原料：江苏扬州制药厂；
DHEA原料：常州佳尔科药业集团有限公司；
超微气流粉碎机 (The Jet Pulverizer Company,Inc.)；
Z R S -8型药物溶出度仪 ( 天津大学无线电厂) 。
1. 1.DHEA不同粒径颗粒的制备
常规筛分法获取过50目而不过65目的颗粒为普粉1（相当于230~270微米）；
常规筛分法获取过100目而不过120目的颗粒为普粉2（相当于120~150微米）；
用超微气流粉碎机获取中心为10微米正态分布的超微细粉为微粉3；
用超微气流粉碎机获取中心为0.5微米正态分布的超微细粉为微粉4。
1. 2. 不同粒径DHEAS粉体的制备
常规筛分法，获取过50目而不过65目的颗粒为普粉I（相当于230~270微米）；
常规筛分法，获取过100目而不过120目的颗粒为普粉II（相当于120~150微米）；
用超微气流粉碎机获取中心为10微米正态分布的超微细粉为微粉III；
用超微气流粉碎机获取中心为0.5微米正态分布的超微细粉为微粉IV。
实施方式2、不同粒度DHEAS薄膜衣片的溶出度试验
2.1.供试药物：上述（1. 2. DHEAS不同粒径颗粒的制备）的DHEAS普粉及微粉。
2.2.处方：每片重100（mg）；
DHEAS：50；
羧甲基纤维素钠：30；
玉米淀粉：10；
微晶纤维素：6；
硬脂酸镁：适量；
5%羟丙基甲基纤维素：适量。
2.3.工艺：取DHEAS及羧甲基纤维素钠、玉米淀粉、微晶纤维素按常规工艺制成素片，再以羟丙基甲基纤维素为成膜剂，70%酒精溶液为溶剂，邻苯二甲酸二乙酯为增塑剂包衣，制得薄膜衣片。
制得薄膜衣片分别为：普粉片I、普粉片II、微粉片III、微粉片IV，供试验。
2.4.溶出度测定方法：
取各试样，照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录X C第二法)，以0.1mol/L盐酸溶液500ml为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经0、4、8、12、16、20、24、28、32、36分钟时，吸取溶剂10mL(以0.1mol/L的盐酸溶液同体积10mL , 以补充溶剂总量)，滤过，取续滤液作为供试品溶液；照下述色谱条件，精密量取续滤液50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取硫酸普拉睾酮钠对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中含0.05mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算每片的溶出量。各试样取二份，求出平均值，作图分析。
2.5.色谱条件：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－水－三乙胺－4mol/L硫酸溶液（650：350：50：40）（用4mol/L硫酸溶液调节pH值至5.3±0.1）为流动相；检测波长为210nm。理论板数按硫酸普拉睾酮钠峰计算应不低于2000。
2.6.结果与分析：见表1。
表1
从结果看出，用不同粒度原料制备的薄膜衣片，溶出度与药物粒度的关系密切。微粉III、微粉IV号片，在16分钟后即溶出度已达到95%以上，20分钟已趋完全溶出。而普粉I号片的溶出度差，30分钟接近80%。可见溶出度与药物粒度关系很大。只有微粉化，药物的溶出度才有保障，但是并不是越细越好。总体来讲，微粉III优于微粉IV号片，粒径0.5微米不比10微米的更好，工艺成本却大大增加。
实施方式3、DHEA制备的普粉1、普粉2、微粉3、微粉4胶囊的溶出度试验
3.1.供试药物：上述（1. 1.DHEA不同粒径颗粒的）的普粉及微粉。
3.2.处方：每个胶囊重100 (mg)
DHEA：50；
玉米淀粉：25；
微晶纤维素：22；
2%HMPC：适量；
硬脂酸镁：0.6。
3.3.工艺：分别取DHEA制备的普粉1、普粉2、微粉III、微粉IV和辅料，按常规工艺制备颗粒、分装胶囊。
处方中玉米淀粉为崩解剂、分散剂和稀释剂。羟丙甲纤维素为粘合剂。硬脂酸镁为润滑剂。分别得到普粉胶囊1、普粉胶囊2、微粉胶囊3、微粉胶囊4。
3.4.溶出度测定方法：
取本品，照溶出度测定法（附录XC第一法），以0.1mol/L盐酸溶液500ml为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，分别在0、4、8、12、16、20、24、28、32、36分钟分别吸取溶剂10mL(以0.1mol/L的盐酸溶液同体积10mL ,以补充溶剂总量)，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取硫酸普拉睾酮钠对照品适量，精密称定，用同溶剂溶解并制成0.05mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照下述的色谱条件，精密量取上述两种溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算出每片的溶出量。各试样取二份，求出平均值，作图分析。
3.5.色谱条件：
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水（80：20），紫外检测器: 检测波长2 1 5 n m。
3.6.结果与分析：见表2。
表2
从结果看出，用不同粒度原料制备的胶囊，溶出度与药物粒度的关系密切。微粉3、微粉4号胶囊，在16分钟后即溶出度已达到95%以上，24分钟已接近完全溶出。而微粉1号胶囊的溶出度很差，32分钟才接近74.57%。可见溶出度与药物粒度关系很大。只有微粉化，药物的溶出度才有保障，但是并不是越细越好，总体来讲，微粉3胶囊优于微粉4号，粒径0.5微米的不比10微米的更好，工艺成本却大大增加。
实施方式4、不同微粉粒度DHEAS的不同批薄膜衣片溶出度试验的变异系数
参照《实施例2》项下的配方、工艺制备5批DHEAS的微粉III和微粉IV的薄膜衣片，按照《实施例2》项下的溶出度测定方法，在5、10、20、30分钟分别测定各批号溶出度，结果见表3。
表3
由表3可以看出：微粉粒度不同的DHEAS的批号不同的薄膜衣片，在不同取样时间测得的溶出度，从变异系数分析，微粉IV的变异系数比微粉III的大。由于粒度过细，有微粒凝聚出现，反而导致溶出度不稳定。说明粒度并不是越小越好。
实施方式5、DHEAS和DHEA普粉及微粉的药效学考察
5.1．试药：上述《实施例1》下DHEAS和DHEA的各普粉和微粉。
5.2.试验条件：
5.2.1.试验剂量：100mg/kg；
5.2.2.配制方法：DHEAS各试样粉体0.5g，加水，超声振荡，混匀，即得0.5%溶液；
5.2.3.动物：SD雌性大鼠，体重：200-220g；
5.2.4.实验分组：DHEAS的普粉I组、微粉II、微粉III、微粉IV组以及DHEA的普粉1组、普粉2组、微粉3、微粉4组；
5.2.5.给药途径：按体重灌胃各组均按每100克体重,灌胃2mL0.5%液。
5.3.去卵巢大鼠模型的建立：大鼠行双侧摘除卵巢术，大鼠阴道内取液体，镜检涂片，加5%的美兰染色，显微镜下观察。选用连续涂片十天阴道涂片角化上皮细胞为零、清洁度为II以上的大鼠进行以下试验。
5.4.试验内容：
5.4.1.各组大鼠分别给药25天、50天。大鼠阴道内取液体，镜检涂片，加5%的美兰染色，显微镜下观察。
5.4.2.各组末次给药后的次日进行涂片检查，称体重后，断头处死，于腹正中线，剪开腹腔，摘子宫，称重，然后浸泡于10%福尔马林液中进行病理切片，作镜下检查。
5.4.3.在50天组在处死前，取血，进行血浆β—内啡肽含量的测定。
5.5.观察指标：
5.5.1.阴道角化上皮细胞——阴道涂片；
5.5.2.子宫腺体数量；
5.5.3.血浆—内啡肽含量——酶联免疫法。
5.6.试验结果：
5.6.1.对阴道角化上皮细胞的影响
各组大鼠10只，分别给药25天、50天。大鼠阴道内取液体，镜检涂片，加5%的美兰染色，显微镜下观察。给药前各组阴道涂片角化上皮细胞均为零，25天、50天后，涂片，统计各组所处阴道周期角化上皮细胞数分类的动物数占该组动物总数的百分数。
表4：DHEAS和DHEA粉体对大鼠阴道角化上皮细胞的影响
备注：0未见角化细胞，+偶见角化细胞，++稍多，+++较多，++++大量；
“*”饲养至46天时，摘除组大鼠死亡1只。
由表4可知：DHEA和DHEAS的微粉组均明显优于普粉组。粒度为5纳米级的角化上皮细胞增加值不如10微米的。角化上皮细胞随给药时间的延长有增多趋势，角化细胞的增加表征更年期症状的改善和性功能的提升。
5. 6. 2.对子宫腺体数量的影响
5.6.2.1.标本处理：各组大鼠10只，分别给药25天、50天后，取子宫，分别在分叉处下方约1cm 处横断宫腔取材，常规石蜡包埋切片，HE染色。
5.6.2.2.观察方法：分别镜下测量每只大鼠子宫腺体数量；观察腺体形态及间质情况，每组动物计算腺体数量。
5.6.2.3.结果：见表5。
表5
表5中：** 各组与摘除组相比较 p <0.01。
由表5可知：在对摘除卵巢大鼠子宫腺体数量的增加作用上，30天及50天喂养后， DHEAS和DHEA各普粉组比摘除组均无显著差异；各微粉组均优于摘除组，且有非常显著差异P<0.01；另，5纳米微粒组对摘除卵巢大鼠子宫腺体数量增加作用比10微米级的小。
5.7.血清—内啡肽含量测定
5.7.1.药盒：进口-Endorphin（Rat）放射免疫测定药盒；
5.7.2.仪器：国产SM-2型自动化酶免分析仪测定；
5.7.3.方法：按药盒提供的处理方法测定；
5.7.4.结果：见表6。
表6
表6中：** 各组与摘除组相比较 p <0.01。
由表6可知：对摘除卵巢大鼠，经50天喂养后，DHEAS和DHEA微粉组对血浆中-内啡肽的水平有升高作用，DHEAS和DHEA的微粉组优于摘除组，且有极显著差异P<0.01；由表6也可以看出，5纳米微粒组对血浆中-内啡肽的水平有升高作用比10微米级的差。血浆中-内啡肽的水平的升高作用提示对阴道萎缩症的预防和治疗作用。
小结：DHEAS和DHEA微粉化后可使摘除卵巢大鼠的萎缩性“阴道炎”模型有角化细胞增加、子宫腺体数目增多的作用以及血清—内啡肽含量升高的作用；但是并不是粒度愈小愈好，也出现粒度更小而作用反而差的情况。以上作用提示DHEAS和DHEA适当微粉化后制备的制剂比较普通粒度制备的制剂在药效学上有更好的作用；粒度达到纳米级时因为聚合等作用反而影响产品的质量和药效的发挥。
这些药效学作用提示，适当微粉化后制备的DHEAS和DHEA制剂有治疗和／或预防性功能减退、皮肤美容、延缓衰老以及妇女泌尿生殖道萎缩综合征药物上的用途。
实施例（以下DHEA或DHEAS原料均采用粒径为10微米正态分布的微粉）
实施例1：一种DHEAS薄膜衣片
1.1. 处方：每片重100（mg）；
DHEAS：50；
羧甲基纤维素钠：30；
玉米淀粉：10；
微晶纤维素：6；
硬脂酸镁：适量；
2%羟丙基甲基纤维素：适量。
2.2.工艺：取DHEAS及羧甲基纤维素钠、玉米淀粉、微晶纤维素按常规工艺制成素片，再以羟丙基甲基纤维素为成膜剂，70%酒精溶液为溶剂，邻苯二甲酸二乙酯为增塑剂包衣，制得薄膜衣片。
实施例2：一种DHEA胶囊
2.1. 处方：每个胶囊重100（mg）；
DHEA：50；
玉米淀粉：25；
微晶纤维素：22；
2%HPMC：适量；
硬脂酸镁：0.6%。
2.2. 制备方法：
以2%羟丙基甲基纤维素为粘合剂，将DHEA、微晶纤维素、玉米淀粉按常规工艺制成颗粒，再以硬脂酸镁为润滑剂装填胶囊、分装、包装、产品检验合格即得成品。
实施例3：一种微粉化的普拉睾酮制备的1%普拉睾酮霜
3.1.处方：总量1000（g）；
DHEA：10；
硬脂酸：120；
单硬脂酸甘油酯：36；
白凡士林：48；
三乙醇胺：4；
十二烷基硫酸钠：4；
甘油：120；
尼泊金乙酯：1.5；
纯净水：加到1000。
3.2.制备方法：取硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、白凡士林、液体石蜡加热熔融，维持温度 84℃；另取三乙醇胺、十二烷基硫酸钠、尼泊金乙酯、甘油及水，加热溶解, 维持温度 86℃。在搅拌下，将水相倒入油相中，保持同方向快速搅拌3~ 15分钟，再慢速搅拌，冷却至 50℃以下，分次加入DHEA微粉， 搅拌均匀直至室温即得。
实施例4：微粉化硫酸普拉睾酮钠制备的1%硫酸普拉睾酮钠阴道栓
4.1.处方：每个2500 （mg）；
DHEAS：50；
聚乙二醇1000：1800；
聚乙二醇4000：540；
普流罗尼F68：100；
尼泊金乙酯：10；
水：适量。
4.2.制备方法：称取选定的栓剂基质物料, 在水浴中加热融化，加入DHEAS微粉，充分搅匀，放冷到50℃，按常规倒模成型、脱模，包装。制得每个含2%DHEAS的阴道栓。按照对栓剂的质量要求，进行熔点、融变时限、重量差异等方面检测。
机译： 盐酸普拉格雷的制备方法，oxtp含量降低的游离普拉格雷的制备方法，普拉格雷酸加成盐的制备方法，盐酸普拉格雷，药物组合物，药物组合物的使用，游离普拉格雷的用途和普拉格雷酸的盐加成方法
机译： tanaproget多晶型物ii，其制备方法以及制备化合物的微粉化形式的方法，药物组合物，制备药物组合物的方法以及tanaproget多晶型物ii或微粉化形式的用途
机译： 固体药物组合物，其包含乙炔基雌二醇和屈螺酮的组合物，该药物具有对未微粉化的药物具有适当的均质表面活性剂和竞争性适度的表面活性剂，用于制备所述组合物的方法，以及该组合物在制备药物中的用途。
