一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法

摘要

本发明公开了一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法，它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤，其中，所述的菌种分离培养包括以下步骤：（1）白色子实体获取；（2）菌种分离培养；（3）菌种纯化与保藏，所述的菌种鉴定又至少包括拮抗鉴定和出菇鉴定两种鉴定方法。本发明能够准确地对金针菇白色变异菌种进行分离培养与鉴定，具有简便、快速等优点。

说明书

技术领域

本发明涉及食用菌领域，特别是一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法。

背景技术

金针菇是我国主要栽培食用菌之一，是一种清香可口的菌类食品，栽培的金针菇品种分为黄色和白色两种，白色金针菇具有耐贮藏，形态美观的特点，具有较好的市场前景，我国栽培的白色金针菇主要来自国外，适宜工厂化栽培，具有培养期长，可食率低等缺点。

发明内容

本发明的目的即在于克服现有技术的不足，提供一种简便、快速、准确地对金针菇白色变异菌种进行分离培养与鉴定的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现：一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法，它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤，其中，所述的菌种分离培养包括以下步骤：

（1）白色子实体获取：从黄色金针菇川金菇3号中挑选子实体为白色的菇体作为菌种分离材料；

（2）菌种分离培养：以挑选出的白色子实体为材料，用火灼烧手术刀，待手术刀冷却后，用手术刀切取菌盖或者菌柄内部的菇组织，移植到PDA斜面培养基上；

（3）菌种纯化与保藏：将上述分离菌种在22～25℃下培养2～5天，检测菌种生长情况，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用，当菌丝生长长度达到2～3cm时，取前端菌丝体转接于PDA培养基上，每个菌种转接培养5～8支，在22～25℃下培养，选择无杂菌污染、菌丝体生长浓密的菌种使用，编号为F3W4，将菌种用纸包裹放入冷藏装置内，在4～6℃下保藏；

所述的菌种鉴定包括以下拮抗鉴定步骤：

拮抗鉴定：将F3W4的菌种块接种到PDA平板培养基上，在22～25℃黑暗下培养7～8天，再在光照下培养5～6天，与川金菇3号形成沟状线，确定为不同菌株的即为白色变异菌株；

所述的菌种鉴定还包括以下出菇鉴定步骤：

（1）培养基配制：培养基组分为：棉籽壳80~90%，麸皮10~20%，料水的重量比为：1：1.1～1.3；

（2）菌种生产方法：将装有上述培养基的培养瓶经高压灭菌后，接入菌种，在20～25℃下培养；菌丝生长满瓶后，进行出菇管理；

（3）出菇方法：将培养瓶移到菇房内，去除封口物，温度控制为 10~15℃，光照强度为100～300勒克斯，子实体生长到3～4cm时，在子实体上套上塑料袋，塑料袋规格为长33～35cm，折径为18～20cm，上端扎口，观察子实体形态特征，与川金菇3号的子实体形态特征完全不相同，并且为白色的子实体的即为白色变异菌株。

所述的冷藏装置包括冰箱；所述的培养瓶为750mL的玻璃瓶或1100mL的塑料瓶。

通过上面的叙述可以看出，本发明具有以下优点：能够快速、准确地对白色毛木耳变异菌株的菌种进行分离培养及鉴定，具有简便、实用等特点。

本发明生物材料样品保藏单位名称为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为：2011年04月08日，保藏编号为：CGMCCNo.4716，分类命名为：金针菇 Flammulina Velutipes。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的描述：

实施例1：

一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法，它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤，其中，所述的菌种分离培养包括以下步骤：

（1）白色子实体获取：从黄色金针菇川金菇3号中挑选子实体为白色的菇体作为菌种分离材料；

（2）菌种分离培养：以挑选出的白色子实体为材料，用火灼烧手术刀，待手术刀冷却后，用手术刀切取菌盖或者菌柄内部的菇组织，移植到PDA斜面培养基上； 

（3）菌种纯化与保藏：上述的分离菌种在22℃下培养5天，检测菌种生长情况，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用，当菌丝生长长度达到2cm时，取前端菌丝体转接于PDA培养基上，每个菌种转接培养5支，在25℃下培养，选择无杂菌污染、菌丝体生长浓密的菌种使用，编号为F3W4，将菌种用纸包裹放入冰箱内，在4℃下保藏；

所述的菌种鉴定包括以下拮抗鉴定步骤：

拮抗鉴定：将F3W4的菌种块接种到PDA平板培养基上，在22℃黑暗下培养8天，再在光照下培养5天，与川金菇3号形成沟状线，确定为不同菌株的即为白色变异菌株；

所述的菌种鉴定还包括以下出菇鉴定步骤：

（1）培养基配制：培养基组分为：棉籽壳80%，麸皮20%，料水的重量比为：1：1.2；

（2）菌种生产方法：用750mL的玻璃瓶或1100mL的塑料瓶做为培养瓶装上述培养基，经高压灭菌后，接入菌种，在20℃下培养；菌丝生长满瓶后，进行出菇管理；

（3）出菇方法：将培养瓶移到菇房内，去除封口物，温度控制为 15℃，光照强度为100勒克斯，子实体生长到3cm时，在子实体上套上塑料袋，塑料袋规格为长33cm，折径为18cm，上端扎口，观察子实体形态特征，与川金菇3号的子实体形态特征完全不相同，并且为白色的子实体的即为白色变异菌株。

实施例2：一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法，它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤，其中，所述的菌种分离培养包括以下步骤：

一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法，它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤，其中，所述的菌种分离培养包括以下步骤：

（1）白色子实体获取：从黄色金针菇川金菇3号中挑选子实体为白色的菇体作为菌种分离材料；

（2）菌种分离培养：以挑选出的白色子实体为材料，用火灼烧手术刀，待手术刀冷却后，用手术刀切取菌盖或者菌柄内部的菇组织，移植到PDA斜面培养基上； 

（3）菌种纯化与保藏：上述的分离菌种在25℃下培养2天，检测菌种生长情况，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用，当菌丝生长长度达到3cm时，取前端菌丝体转接于PDA培养基上，每个菌种转接培养8支，在22℃下培养，选择无杂菌污染、菌丝体生长浓密的菌种使用，编号为F3W4，将菌种用纸包裹放入冰箱内，在6℃下保藏；

所述的菌种鉴定包括以下拮抗鉴定步骤：

拮抗鉴定：将F3W4的菌种块接种到PDA平板培养基上，在25℃黑暗下培养7天，再在光照下培养6天，与川金菇3号形成沟状线，确定为不同菌株的即为白色变异菌株；

所述的菌种鉴定还包括以下出菇鉴定步骤：

（1）培养基配制：培养基组分为：棉籽壳85%，麸皮15%，料水的重量比为：1：1.1；

（2）菌种生产方法：用750mL的玻璃瓶或1100mL的塑料瓶做为培养瓶装上述培养基，经高压灭菌后，接入菌种，在25℃下培养；菌丝生长满瓶后，进行出菇管理；

（3）出菇方法：将培养瓶移到菇房内，去除封口物，温度控制为 10℃，光照强度为300勒克斯，子实体生长到4cm时，在子实体上套上塑料袋，塑料袋规格为长35cm，折径为20cm，上端扎口，观察子实体形态特征，与川金菇3号的子实体形态特征完全不相同，并且为白色的子实体的即为白色变异菌株。

实施例3：

一种金针菇白色变异菌种分离培养与鉴定方法，它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤，其中，所述的菌种分离培养包括以下步骤：

（1）白色子实体获取：从黄色金针菇川金菇3号中挑选子实体为白色的菇体作为菌种分离材料；

（2）菌种分离培养：以挑选出的白色子实体为材料，用火灼烧手术刀，待手术刀冷却后，用手术刀切取菌盖或者菌柄内部的菇组织，移植到PDA斜面培养基上； 

（3）菌种纯化与保藏：上述的分离菌种在24℃下培养4天，检测菌种生长情况，选择无细菌和霉菌感染的菌种使用，当菌丝生长长度达到2.5cm时，取前端菌丝体转接于PDA培养基上，每个菌种转接培养7支，在23℃下培养，选择无杂菌污染、菌丝体生长浓密的菌种使用，编号为F3W4，将菌种用纸包裹放入冰箱内，在5℃下保藏；

所述的菌种鉴定包括以下拮抗鉴定步骤：

拮抗鉴定：将F3W4的菌种块接种到PDA平板培养基上，在24℃黑暗下培养8天，再在光照下培养5天，与川金菇3号形成沟状线，确定为不同菌株的即为白色变异菌株；

所述的菌种鉴定还包括以下出菇鉴定步骤：

（1）培养基配制：培养基组分为：棉籽壳90%，麸皮10%，料水的重量比为：1：1.3；

（2）菌种生产方法：用750mL的玻璃瓶或1100mL的塑料瓶做为培养瓶装上述培养基，经高压灭菌后，接入菌种，在23℃下培养；菌丝生长满瓶后，进行出菇管理；

（3）出菇方法：将培养瓶移到菇房内，去除封口物，温度控制为 13℃，光照强度为200勒克斯，子实体生长到3.5cm时，在子实体上套上塑料袋，塑料袋规格为长34cm，折径为19cm，上端扎口，观察子实体形态特征，与川金菇3号的子实体形态特征完全不相同，并且为白色的子实体的即为白色变异菌株。