一种检测脱氧核糖核酸结合蛋白的荧光检测方法

摘要

本发明的检测脱氧核糖核酸结合蛋白的荧光检测方法以荧光素标记的含有蛋白结合位点的双链核酸为探针，该探针结合靶蛋白后形成的“核酸探针/脱氧核糖核酸结合蛋白”复合物为核酸探针提供了空间保护，可以使其不被核酸酶水解，从而可以与阳离子的水溶性共轭聚合物之间通过静电反应进行结合，使荧光素与聚合物之间有较近的距离可以发生高效的荧光共振能量转移。该方法基于水溶性共轭聚合物和核酸外切酶Ⅲ，包括以下步骤：a.制备可特异性结合蛋白质的双链脱氧核糖核酸荧光探针；b.将双链脱氧核糖核酸荧光探针与脱氧核糖核酸结合蛋白进行结合；c.用核酸外切酶Ⅲ对上述复合物进行酶切；d.在上述的反应体系中加入水溶性共轭聚合物进行荧光检测。