应用于肿瘤放射后副反应、咽喉部炎症的组合物及其制备

摘要

本发明目的在于提供一种中药组合物及其制备方法。该组合物能有效缓解以鼻咽癌为主的头颈部肿瘤病人放射治疗后的不良反应，并可治疗急性咽炎和扁桃腺炎。涉及的中药组合物组方及配比如下：处方总量按100份计，其中黄芩15～20份，连翘15～20份，茜草15～20份，生地黄9～14份，枸杞子5～8份，生石斛5～8份，玉竹5～8份，玄参9～14份，麦冬9～14份。

说明书

技术领域

本发明属于中药组合物、制备方法以及用途的技术领域。尤其涉及应用于治疗以鼻咽 癌为主的头颈部肿瘤放射治疗后副反应，以及急性咽炎、扁桃腺炎、及其制备方法。

背景技术

头颈部恶性肿瘤占全身恶性肿瘤的30％，近年来发病率也呈逐年上升趋势。鼻咽癌是 我国常见的恶性肿瘤之一，其发病率在头颈部恶性肿瘤中居首位。在世界上大多数地区发 病率为1/10万以下，但在我国的广东、广西、福建等省其发病率却高达33/10万。由于多数 头颈部肿瘤为低分化癌，对放射线敏感性高，所以目前鼻咽癌等头颈部肿瘤的公认和有效 治疗手段为放射治疗，或以放射治疗为主的综合治疗。放射治疗的不良反应，如唾液腺的 损伤、口干舌燥，加上免疫功能的受损，患者免疫淋巴细胞数量及免疫活性降低，因而口 腔中细菌滋生，甚至形成溃疡、伪膜，从而导致吞咽困难、恶心、食欲减退、纳少，进而 头晕、四肢乏力，这些使得患者间断治疗疗程，影响营养吸收，降低生活质量。

西医临床上对于局部放射不良反应的缓解，针对各种症状，对症治疗。研究证实，中 医治疗具有意想不到的效果，随着研究的深入，中医药在防，治鼻咽癌发生、增强放疗的 敏感性、减轻放疗的毒副反应整体调整机体、延长生存期等方面均显示出良好的作用。本 发明提供的中药组合物具有清热解毒，养阴清肺，清咽利鼻，益气祛瘀，滋补肝肾之功能。 能抑制EB病毒复制，降低鼻咽癌复发患者EB病毒EA，VCA滴度；可以增强机体免疫功能， 增加白细胞数量，并有抗菌消炎，改善口腔溃疡、消除伪膜，以及明显增加唾液腺分泌功 能，改善口干等症；从而改善各种症状，增强体质，适用于以鼻咽癌为主的头颈部肿瘤病 人放射治疗后出现的副反应，以及急性咽炎，扁桃体炎等病症的病人。

发明内容

本发明目的在于提供一种中药组合物，能有效缓解鼻咽癌病人放射治疗后的不良反 应，从而保证治疗的效果，减少复发率，提高病人的存活率。并能治疗急性咽炎和扁桃腺 炎。

为实现此目的，本发明设计了中药组合物组方及配比如下：

【处方】

按100份计

黄芩15～20份，连翘15～20份，茜草15～20份，生地黄9～14份，枸杞子5～8份， 生石斛5～8份，玉竹5～8份，玄参9～14份，麦冬9～14份。

具体制备方法如下：

(1)按照上述处方量称取以上除黄芩外的八味药材，混合，粉碎，加适量乙醇浸渍 后渗漉，收集渗漉液。

(2)另取经处理的黄芩药材以乙醇回流提取。

(3)回流液与上述渗漉液合并，放置，滤过，滤液减压浓缩。

(4)浓缩液稀释得口服液；浓缩液干燥成粉装胶囊；干粉制颗粒成颗粒剂；干粉与 适当辅料混合压片成片剂。

附图说明

图1为本发明提供的中药组合物的制备方法流程图。处方量的药材分别经渗漉和回流 提取得到提取液或提取物粉末，与药学可接受辅料适当混合制成口服液、片剂、胶囊剂和 颗粒剂。

具体实施方式

实施例1、中药组合物的组成和配比。

【处方】

按100份计

黄芩15～20份，连翘15～20份，茜草15～20份，生地黄9～14份，枸杞子5～8份，生 石斛5～8份，玉竹5～8份，玄参9～14份，麦冬9～14份。

实施例2、中药组合物的制备工艺流程：见附图1。

本发明的中药组合物可与药学上可接受的载体，例如：填充剂如淀粉、微晶纤维素等； 粘合剂如维生素衍生物、淀粉；崩解剂如羧甲基纤维素、羧甲基淀粉钠等；通过口服液、 颗粒剂、胶囊剂、片剂口服给药方式应用。

按照实施例1中的处方量称取除黄芩以外的8味药材，混合，粉碎，加入3～6倍量体 积的40～70％乙醇浸渍6～10h，参照《中国药典》2010版附录流浸膏剂与浸膏剂项下的渗 漉法(附录IO)以每kg药材2～5mL/min的速度缓缓渗漉，收集处方量9～14倍(Kg/L) 量的渗漉液(即投料1Kg药材则收集9～14升渗漉液)。另取处方量经烘烤过的黄芩药材 以8～12倍量体积的55～85％乙醇按常规方法回流提取两次，每次1～2h，合并两次的回流液， 将回流液与上述渗漉液合并，放置，普通医用纱布过滤除去粗滤渣，减压旋转蒸发浓缩至 相对密度为111-114(50℃)，或继续喷雾干燥成粉或65℃减压烘干成粉。浓缩液按照1Kg 处方量稀释得1000mL药液稀释得口服液(即1g生药/mL)；干燥粉末用60～80％乙醇湿 法制粒，干燥后，按每袋4～5g装袋即得颗粒剂；亦可干燥粉末以60～80％乙醇湿法制粒， 按照每粒0.5g装入空胶囊得胶囊剂；或每400g干燥粉末加淀粉50g，羧甲基淀粉钠5g， 为辅料混匀制颗粒后压片，包衣即得片剂。

以下实施实例中用到的是本发明提供的中药组合物颗粒剂。

实施例3、中药组合物能明显抑制EB病毒的复制

体外培养的Raji细胞换液48h后吸去原上清液，加入新配制的含10％小牛血清的 RPMI1640培养基，使细胞浓度为5×10⁶cells/mL，加入正丁酸钠及巴豆油至浓度分别为4mM 和500mg/mL，将此细胞悬液分装试管，每试管1mL，每管加入10μL稀释不同浓度的本 中药组合物颗粒剂溶解液，细胞放置37℃培养箱内培养48h，制备细胞涂片，吹干，丙酮 固定，用免疫酶方法检查EBV早期抗原(EA)，镜下计数500个细胞，记录下阳性细胞数， 计算抑制率，结果见表1。

表1中药组合物对EBV-EA的抑制作用

结果表明本组合物颗粒对EB病毒有明显的抑制作用。

实施例4、中药组合物能明显抑制细菌(口腔常见菌)的作用

实验材料同实施例3。本中药组合物颗粒剂每包4.3g用蒸馏水20mL溶解，混悬均匀 成浓度以颗粒剂计215mg/mL的混悬溶液，以此为母液，依次1∶5、1∶10、1∶20、1∶ 40稀释(药液浓度分别为43、21.5、10.8、5.4mg/mL)，另做不加药液的对照管，将8h的 细菌培养物稀释成10^-3，每管分别接种0.1mL，经24h孵育，再转种平皿，37℃培养24h， 观察分别得出其最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration，MIC)和最低杀菌浓度 (minimal bactericidal concentration，MBC)(MIC是抑制细菌生长所需药物的最低浓度，试 验时肉眼未见细菌生长的最低药物浓度为MIC；MBC为抑制99.9％或以上细菌生长所需药 物的最低浓度)结果见表2。

表2对细菌的最低抑制浓度(MIC)和最低杀灭浓度(MBC)(mg颗粒/mL)

结果表明本组合物颗粒具有杀灭细菌作用

实施例5、中药组合物能明显增强机体免疫功能。

(1)中药组合物实施实例对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

实验材料同实施例3。取体重18～22g的BALB/C雄性小鼠50只，分两次试验，随机 分为5组，每组5只，即a)水对照组；b)泼尼松造型组(5mg/kg)；c)、d)、e)本中药组合 物颗粒剂给药组，剂量按照生药计分别为2.1、3和4.3g生药/Kg。本中药组合物颗粒剂三组 灌胃给药，容量为0.2mL/10g体重，每天给药一次，连续给药10天，水对照组和造型组 给同体积的蒸馏水，从给药第7天开始，除水对照组外，其它各组均在给药的同时按照5 mg/10g的剂量肌肉注射醋酸氢化泼尼松，连续给药2天，于第8天各组均腹腔注射0.2％ 糖元溶液2mL，于末次给药后次日处死小鼠，立即向小鼠腹腔内注射RPMI 1640培养液 2mL，轻揉腹部40次，取出全部腹腔液，摇匀后取0.5mL，用5号针头加入3滴20％鸡红 细胞，摇匀后加入小玻璃条，37℃温育30min，取出小玻璃条，用生理盐水冲洗(冲去未 被巨噬细胞吞噬的鸡红细胞)，自然干燥，甲醇固定，姬姆萨染色，光学树胶封闭，高倍 显微镜下连续观察200个左右的巨噬细胞，并记录其吞噬鸡红细胞的巨噬细胞个数，用下 列公式计算吞噬百分率及吞噬指数，进行组间t检验结果见表3。

表3中药组合物实施实例对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

注：与泼尼松相比较：p＜0.01(X±SD)(下同)

结果表明，本组合物颗粒各剂量组与泼尼松组比较，均可显著增强被泼尼松抑制的小 鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，且作用较强，可使被抑制的吞噬功能恢复到正 常水平，或接近正常水平，并且两次试验结果相同。

(2)中药组合物对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响

①本中药组合物颗粒剂对正常小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响

NIH小鼠41只，随机分为4组。每组10～11只，即：a)水对照组：b)、c)、d)为本 中药组合物颗粒剂剂量组，剂量按生药计分别为1.5、2.1和3.0g生药/Kg，三组灌胃给药， 容量为0.2mL/10g体重，每天给药一次，连续给药10天，水对照组给同体积的蒸馏水， 末次给药后次日，各鼠按照0.1mL/10g体重的剂量尾静脉注射印度墨汁(印度墨汁∶生理 盐水比例为1∶9，注射后分别于1min和5min眼眶静脉取血0.02mL，溶于0.1％碳酸氢 钠溶液2mL，分光光度计测定波长620nm处的OD值，放血后称重(W)，解剖小鼠，取 肝和脾称重(Wl和Ws)，按下式计算吞噬指数K和吞噬系数α，实验结果时行组间t检验。 结果见表4。

$k=\frac{(\mathrm{LgOD}1-\mathrm{LgOD}2)}{(t2-t1)}$

$\alpha =\sqrt[3]{k}\frac{W}{(W1+\mathrm{Ws})}$

式中OD为620nm处的吸光度值，t为时间，W为体重，Wl为肝重，Ws为脾重。

表4对正常小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响

注：与水对照组比较：*P＜0.05(下同)

实验结果表明本组合物颗粒可以提高正常小鼠网状内皮系统的吞噬系数α值。

②本中药组合物颗粒剂对泼尼松诱导的小鼠网状内皮系统吞噬功能低下的增强作用

NIH小鼠40只，随机分为4组，每组9～11只，即a)水对照组b)泼尼松造型组(5mg /Kg)；c)、d)本中药组合物颗粒剂两组灌胃给药，容量为0.2mL/10g体重，每天给药一次， 连续给药10天，水对照组和造型组给同体积的蒸馏水，从给药第7天开始，除水对照组 外，其它各组在给药的同时，肌肉注射5mg/Kg的醋酸氢化泼尼松，连续给药3天，末次 给药次日，按照“①本中药组合物颗粒剂对正常小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响实验”中 所述方法，尾静脉注射印度墨汁，取血测OD值，按同样公式计算K和α值，实验结果进 行组间t检验，结果见表5。

表5对泼尼松诱导的小鼠网状内皮系统吞噬功能低下的增强作用

注：与泼尼松组比较：*P＜0.05  **P＜0.01

实验结果表明本组合物颗粒能显著提高泼尼松诱导的网状内皮系统吞噬功能低下小 鼠的吞噬系数α值。

(3)中药组合物对小鼠体液免疫——脾细胞溶血空斑的影响

BALB/C小鼠52只，随机分成5组，每组10～11只，a)水对照组；b)、c)、d)为本 中药组合物颗粒剂剂量组，剂量按生药计分别为1.5，2.1和3.0g/Kg，e)造型组为环磷酰 胺(Cyclophosphamide，CY)7.5mg/Kg。本中药组合物颗粒剂三组灌胃给药容量为0.2mL/10 g体重，每天给药一次，连续给药10天，水对照组和造型组给同体积的蒸馏水。除水对照 组外，其余各组均于给药第七天开始在给药同时每天腹腔注射环磷酰胺7.5mg/Kg，共4 天，在给药第七天，给药后10分钟，每鼠用2×10⁹绵羊红细胞静脉注射致敏，致敏后96h 行实验，先用小刀摘眼球放血处死，取出脾脏，在冰浴下反脾脏研磨，用RPMI 1640培养 液制成细胞悬液用200目不锈钢丝网过滤，离心洗涤一次(2000rpm，5min)，用RPMI 1640 培养液稀释到5×10⁸cells/mL，备用，然后每一试管依次加入稀释的脾细胞悬液，0.2％羊细 细胞悬液和1∶10豚鼠血清(补体)各0.5mL，置37℃水浴温浴1h，3000rpm离心5min， 取上清液在分光光度计上413nm波长处测定光密度，结果见表6。

表6对小鼠脾细胞溶血空斑的影响

注：与CY组比较，*：P＜0.05  **：P＜0.01

实验结果表明本组合物颗粒各剂量组均明显增加脾细胞溶血素含量，与环磷酰胺组比 较，中剂量及大剂量组有明显差异(P＜0.01)。说明本组合物颗粒对免疫功能低下的小鼠可 增强其体液免疫功能。

实施例6、中药组合物能增强唾液腺分泌功能。

昆明种小鼠90只，随机分组，每组10只，分两次试验，给药组给毛果芸香碱剂量分 别为0.05和0.8mg/kg，分组情况分别为第一次实验：1-a)水对照组；1-b)阳性药物毛果 芸香碱对照组，剂量10mg/Kg；1-c)、1-d)本中药组合物颗粒剂组，剂量分别为以生药计 1.5和2.2g生药/Kg。第二次实验：2-a)水对照组；2-b)阳性药物毛果芸香碱对照组，剂量 10mg/Kg；2-c)、2-d)、2-e)本中药组合物颗粒剂组，剂量分别为以生药计1.1、1.5和2.2g 生药/Kg。本中药组合物颗粒剂组灌胃给药，容量为0.2mL/10g体重，每天给药一次，连 续给药5天，水对照组和阳性药对照组给同体积的蒸馏水，末次给药后30min腹腔注射戊 巴比妥40mg/Kg麻醉动物(阳性药对照组皮下注射毛果芸香碱10mg/Kg后，再麻醉)， 除水对照组外，其余各组均皮下注射毛果芸香碱第一次实验剂量为0.05mg/kg，第二次实 验剂量为0.8mg/kg，观察唾液腺分泌情况，分泌分级标准如下：

0级：口唇干燥；

1级：口腔内有唾液；

2级：唾液外流，使下唇或上唇湿润；

3级：唾液外流，使下唇和上唇均湿润；

4级：使颈和前胸湿润

记录每只动物的分泌级数，求出每组平均级数，进行组间t检验，结果见表7。

表7对毛果芸香碱致涎小鼠唾液腺分泌功能的影响

注：与芸香碱组比较  **：P＜0.01

结果表明在本实验条件下，本组合物颗粒剂对于毛果芸香碱致唾液分泌障碍的小鼠， 颗粒剂各剂量组在注射毛果芸香碱0.05或0.8mg/kg后，在15min时其唾液分泌就显示促 进作用，30min促进作用有明显增强。而且，毛果芸香碱浓度为0.08mg/Kg组给药后分泌 级数明显高于毛果芸香碱浓度为0.05mg/Kg组，说明对于唾液分泌障碍越严重的患者，本 中药组合物促进唾液分泌的作用越显著。

实施例7、中药组合物具有止咳作用。

利用JWC-2B晶体管超声雾化器雾化浓氨水，使昆明种小鼠致咳，致咳时间为20s，观 察从致咳开始2min内咳嗽次数，将2min内咳嗽次数少于5次者弃之，通过筛选将动物随 机分为4组，每组13只，即a)水对照组；b)、c)、d)本中药组合物颗粒剂组，剂量按生药 计分别为2.1、3.0和4.3g生药/Kg，分别灌胃给药，容量为0.2g生药/kg，每天给药一次， 连续经药5天，于末次给药后30min，重复上述致咳，观察各组动物出现咳嗽的次数及第一 次出现咳嗽的时间(咳嗽潜伏期)，通过t检验比较各组之间的差异，结果见表8。

表8对小鼠氨水致咳的镇咳作用的影响

注：与对照组比较  **：P＜0.01

连续灌胃给药本组合物颗粒剂5天能对抗浓氨水引起的咳嗽，表现为咳嗽次数明显减 少，咳嗽潜伏期明显延长，表明本组合物颗粒剂具有镇咳作用。

实施例8、中药组合物具有祛痰作用

昆明小鼠43只，随机分为4组。每组9-12只，即a)水对照组；b)、c)、d)本中药 组合物颗粒剂组，剂量按生药计分别为2.1、3.0和4.3g生药/Kg，分别灌胃给药，容量为 0.2mL/10g体重，每天给药一次，连续给药5天，于末次给药后30min，腹腔注射0.5％ 酚红生理盐水溶液0.5mL，30min后处死动物，用5％碳酸氢钠溶液冲洗气管3次，每次 用0.5mL，反复冲洗3遍，共9遍将冲洗液收集于试管中，在GD-272连续式分光光度计 波长588nm处比色，记录光密度值，进行组间t检验，结果见表9。

表9对小鼠祛痰作用的影响

注：与对照组比较  **：P＜0.01

结果可见，灌胃给药本组合物颗粒剂能使小鼠酚红排泄量增加，表明本组合物颗粒剂 具有祛痰作用。

因为包括鼻咽癌在内的头颈部肿瘤放射治疗的部位即为咽喉口腔，其所造成的不良反 应即唾液腺的损伤、口干舌燥，加上免疫功能的受损，免疫活性降低，口腔中细菌滋生。 而实施例中的数据表明本组合物可以从例如增加唾液分泌，提高免疫能力，抑制细菌滋生 等方面有效缓解放射治疗后的这些副反应。