罗非鱼抗菌肽hepcidin的基因工程制备方法

摘要

本发明提供一种制备罗非鱼抗菌肽hepcidin的方法，包括：构建融合表达载体pET32a-THM；将该融合表达载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)，构建表达工程菌；发酵培养表达工程菌，并进行IPTG诱导表达；发酵产物经亲和层析得到纯化的抗菌肽融合蛋白；及抗菌肽融合蛋白经肠激酶处理和分子筛层析纯化，得到罗非鱼hepcidin成熟肽“THM”产品。本发明在原核宿主细胞中高效表达了重组抗菌肽hepcidin，分离纯化方便、易操作，适合大规模扩大生产。产品经抗菌活性测定，对革兰氏阳性和阴性细菌具有明显的抗菌效果，且热稳定性良好。本发明可作为绿色饲料添加剂替代饲用抗生素，在水产养殖安全中具有广阔的应用前景。