一种玉簪金旗的培育方法

摘要

本发明涉及一种玉簪金旗的培育方法，该方法是将初春挖取的玉簪“金旗”小芽首先进行无菌化处理，然后接种于小芽诱导培养基上进行芽的分化，培养1个月，然后切下带芽愈伤组织放入增殖培养基中增殖，得到丛生芽，将丛生芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基进行不定芽壮苗培养，20天后长成2-3cm的小植株，将该小植株转接入生根培养基中诱导生根，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可。与现有技术相比，本发明通过组培技术，可大大提高繁殖速度和苗木的整齐度，更好地保持原有的母本性状，并且能够提高成活率，从而提高产量，移栽成活率可达95％。

说明书

技术领域

本发明涉及一种草本植物的组织培养方法，尤其是涉及一种玉簪金旗的培 育方法。

背景技术

玉簪宿根草本。株高30cm-50cm。叶基生成丛，卵形至心状卵形；总状花 序顶生，高于叶丛，花为白色，管状漏斗形，浓香。花期6月-8月。玉簪‘金 旗’是玉簪经过人工选育得到的一个园艺品种，叶黄绿色，边缘墨绿色，呈现 清雅的叶纹，观赏性好；性强健，耐寒，喜阴，忌阳光直射，不择土壤，但以 排水良好、肥沃湿润处生长繁茂，是较好的阴生植物，在园林中可用于树下 作地被植物，或植于岩石园或建筑物北侧，也可盆栽观赏或作切花用，又可 做疏林地被植物，是良好的花镜与庭院材料。因做为国外引进的品种，观赏性 特别，数量较少，分株速度慢，但市场需求量大，所以种苗供应受限制。通过 组培技术，极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状。玉 簪‘金旗’组培的报道在国内尚未见。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可极大 提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状的一种玉簪金旗的培 育方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种玉簪金旗的培育方法，其特征在于，该方法是将初春挖取的玉簪“金 旗”小芽首先进行无菌化处理，然后接种于小芽诱导培养基上进行芽的分化， 培养1个月，然后切下带芽愈伤组织放入增殖培养基中增殖，得到丛生芽，将 丛生芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基进行不定芽壮苗培养，20天后长成 2-3cm的小植株，将该小植株转接入生根培养基中诱导生根，根系长至1-2cm 左右时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根 部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽室外，给予肥水管理即可。

所述的无菌化处理是将初春挖取的玉簪“金旗”小芽用自来水冲洗2h后 置于超净工作台上，用浓度为75wt％的乙醇浸泡20-40s，1wt‰的升汞溶液浸 泡10-20min，经无菌水冲洗5-6次后用无菌滤纸吸干表面水份。

所述的芽的分化是将无菌化处理后的小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导 培养基上，3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的 小芽愈伤组织。

所述的小芽诱导培养基的成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L或MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L，优选 MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。

所述的增殖培养基的成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L，优选 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

所述的壮苗培养基的成分为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

所述的壮苗培养基的成分优选MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。

所述的生根培养基的成分为MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或 MS+NAA0.2mg/L。

所述的生根培养基的成分优选MS+NAA0.1mg/L。

所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包 括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为24-26℃，光照为 70-90μmol/ms，pH值为5.5-6.0。

与现有技术相比，本发明通过组培技术，可大大提高繁殖速度和苗木的整 齐度，更好地保持原有的母本性状，并且能够提高成活率，从而提高产量。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

一种玉簪金旗的培育方法，该方法包括以下步骤：

(1)无菌化处理

初春挖取的玉簪“金旗”小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用 浓度为75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰的升汞溶液浸泡15min，经无菌水冲洗5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L上；

(2)芽的分化和增殖

小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突 起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖 培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不 影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长 发育良好；

(3)不定芽壮苗培养

在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处 于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；

(4)生根培养

取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.1mg/L中诱导生 根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm，根 系粗壮，须根众多，生根率为100％；

(5)炼苗与移栽

生根培养25天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可移栽 室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。

实施例2

一种玉簪金旗的培育方法，该方法包括以下步骤：

(1)无菌化处理

初春挖取的玉簪“金旗”小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用 浓度为75wt％的乙醇浸泡20s，1wt‰的升汞溶液浸泡10min，经无菌水冲洗5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L上；

(2)芽的分化和增殖

小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突 起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖 培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但 不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生 长发育良好；

(3)不定芽壮苗培养

在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处 于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；

(4)生根培养

取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.05mg/L中诱导 生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；

(5)炼苗与移栽

继续生根培养20天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌 苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可 移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。

实施例3

一种玉簪金旗的培育方法，该方法包括以下步骤：

(1)无菌化处理

初春挖取的玉簪“金旗”小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用 浓度为75wt％的乙醇浸泡40s，1wt‰的升汞溶液浸泡20min，经无菌水冲洗5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L上；

(2)芽的分化和增殖

小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突 起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖 培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但 不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生 长发育良好；

(3)不定芽壮苗培养

在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处 于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；

(4)生根培养

取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生 根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；

(5)炼苗与移栽

继续生根培养30天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌 苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可 移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。

实施例4

一种玉簪金旗的培育方法，该方法包括以下步骤：

(1)无菌化处理

初春挖取的玉簪“金旗”小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用 浓度为75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰的升汞溶液浸泡15min，经无菌水冲洗5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L上；

(2)芽的分化和增殖

小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突 起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖 培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但不 影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长 发育良好；

(3)不定芽壮苗培养

在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处 于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；

(4)生根培养

取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.1mg/L中诱导生 根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm，根 系粗壮，须根众多，生根率为100％；

(5)炼苗与移栽

继续生根培养25天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌 苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可 移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。

所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包 括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为24℃，光照为70μmol/ms， pH值为5.5。

实施例5

一种玉簪金旗的培育方法，该方法包括以下步骤：

(1)无菌化处理

初春挖取的玉簪“金旗”小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用 浓度为75wt％的乙醇浸泡20s，1wt‰的升汞溶液浸泡10min，经无菌水冲洗5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L上；

(2)芽的分化和增殖

小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突 起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖 培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但 不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生 长发育良好；

(3)不定芽壮苗培养

在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处 于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；

(4)生根培养

取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.05mg/L中诱导 生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；

(5)炼苗与移栽

继续生根培养20天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌 苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可 移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。

所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包 括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为25℃，光照为80μmol/ms， pH值为5.8。

实施例6

一种玉簪金旗的培育方法，该方法包括以下步骤：

(1)无菌化处理

初春挖取的玉簪“金旗”小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用 浓度为75wt％的乙醇浸泡40s，1wt‰的升汞溶液浸泡20min，经无菌水冲洗5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L上；

(2)芽的分化和增殖

小芽接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突 起，2周后可见明显的愈伤组织，培养1个月后，切下带芽愈伤组织放入增殖 培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L进行培养，基部愈伤组织比较多，但 不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生 长发育良好；

(3)不定芽壮苗培养

在增殖培养基上诱导出丛生芽，丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处 于矮化状态，将大丛芽分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；

(4)生根培养

取高度为2-3cm的小植株，转接入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生 根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至2-3cm；

(5)炼苗与移栽

继续生根培养30天，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌 苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即可 移栽室外，给予肥水管理即可，移栽成活率为95％。

所述的小芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基成分还包 括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，该培养基的培养温度为26℃，光照为90μmol/ms， pH值为6.0。