兽用复方右旋糖酐铁注射液制备方法及对小鼠生长的影响

摘要

本发明涉及一种兽用复方右旋糖酐铁注射液制备方法及对小鼠生长的影响，注射液原料主要包括右旋糖酐铁、右旋糖酐铜、右旋糖酐锌、氯化钴、有机溶剂和水。本发明作为一种兽用专用复方制剂，在补铁的同时给予铜、锌和钴的补充，对畜禽生长性能、畜禽机体抗病免疫力、抗贫血、仔猪出栏体重等方面都有显著的增强效果。兽用复方右旋糖酐铁注射液制备方法简单，成本低，稳定性好，使用方便，适合工业化生产。

说明书

技术领域

本发明涉及一种兽用复方右旋糖酐铁注射液制备方法及对小鼠生长的影 响，特别是一种由右旋糖酐铁、右旋糖酐铜、右旋糖酐锌和氯化钴组成的复 方制剂及其制备方法。本方法所制成的注射液与右旋糖酐铁注射液相比较， 对小鼠的增重作用极显著。

背景技术

右旋糖酐系蔗糖经肠膜状明串珠菌-1226发酵合成的一种高分子葡萄糖聚 合物，是目前最佳的血浆代用品之一。临床上常用的有中分子右旋糖酐，主要 用作血浆代用品，用于出血性休克、创伤性休克及烧伤性休克等。低、小分子 右旋糖酐，能改善微循环，预防或消除血管内红细胞聚集和血栓形成等，亦有 扩充血容量作用，用于各种休克所致的微循环障碍、弥漫性血管内凝血、心绞 痛、急性心肌梗塞及其他周围血管疾病等。右旋糖酐铁注射液为兽用注射补血 药，主要适用于重症缺铁性贫血或不宜内服铁剂的缺铁性贫血。临床主要用 于仔猪缺铁性贫血。现代研究发现，铜是体内含量第二的必需微量元素。体内 有多种重要的酶含铜，铜对血红蛋白的形成起活化作用，促进铁的吸收和利用， 在传递电子、弹性蛋白的合成、结缔组织的代谢、嘌呤代谢、磷脂及神经组织 形成方面有重要意义。现代研究发现，在畜禽养殖中，铜作为微量元素的一种， 在提高机体生长性能、增强机体免疫力、提高猪群的繁殖性能、改善肉质等方 面起着极其重要的作用，(参考：苏保全，有机铜在猪营养中的研究应用.今日 畜牧兽医)。锌作为动物生命活动所必须的微量元素，能够提高动物生长性能、 增强机体免疫力、降低腹泻、提高肠道消化吸收功能等，(参考：刘明美，吕宗 友，戎婧等，锌在养猪业中的研究进展，饲养饲料)。许多研究发现，在动物饲 料中添加氯化钴或其他钴盐，都能改善它们的生长发育状况。当猪日粮缺钴时， 补充钴盐可提高日增重和饲料利用率。文献报道，右旋糖酐铁对改善仔猪生理 性贫血、提高仔猪的育成率、增强抗病免疫能力和仔猪出栏时的增重均有明显 的效果(参考：李寿林，钟万旭，仔猪注射右旋糖酐铁的效果试验，山东畜牧 兽医)。但复方右旋糖酐铁(铁、铜、锌、钴)注射液未见过报道。为了满足畜 禽机体对多种微量元素的需求，本试验同时将铁、铜、锌、钴四种微量元素进 行组合，成功制得了复方右旋糖酐铁注射液，在补铁的同时给予铜、锌和钴的 补充，对畜禽生长性能、畜禽机体抗病免疫力、抗贫血、仔猪出栏体重等方面 都有显著的增强效果。文献报道，右旋糖酐与适量金属离子制成的配合物能增 加其生物效应，在复方右旋糖酐铁注射液的小鼠实验中，所制得的复方右旋糖 酐铁注射液，经尾静脉注射，与单独的右旋糖酐铁注射液相比，对小鼠的增重 效果明显亦充分证明了这一点。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种兽用复方右旋糖酐铁注射液制备方法，并通 过试验数据详细说明了本注射液对小鼠生长的影响。

本发明的技术特点是将右旋糖酐铁、右旋糖酐铜、右旋糖酐锌和氯化钴配 伍制成复方制剂。复方右旋糖酐铁注射液作为一种兽用专用复方制剂，在补铁 的同时给予铜、锌和钴的补充，对畜禽生长性能、畜禽机体抗病免疫力、抗贫 血、仔猪出栏体重等方面都有显著的增强效果。

一种兽用复方右旋糖酐铁注射液，原料组分如下，均为重量份：

右旋糖酐铁5-10g，右旋糖酐铜3-8g，右旋糖酐锌7-12g，氯化钴 0.01-0.05g，有机溶剂5-20g，注射用水50-80g。

上述兽用复方右旋糖酐铁注射液的制备方法，步骤如下：

(1)本发明注射液中所述的右旋糖酐铜，其特征在于：将右旋糖酐活化后 与铜盐在溶剂中、温度30-95℃条件下回流反应，反应溶液经有机溶剂精制，低 温干燥得右旋糖酐铜，溶解于水中，得右旋糖酐铜溶液。

(2)本发明注射液中所述的右旋糖酐锌，其特征在于：将右旋糖酐活化后 与锌盐在溶剂中、温度20-95℃条件下回流反应，反应溶液经有机溶剂精制，低 温干燥得右旋糖酐锌，溶解于水中，得右旋糖酐锌溶液。

(3)将右旋糖酐铁溶解于水中，得右旋糖酐铁溶液。

(4)将氯化钴溶解于水中，得氯化钴溶液。

(5)本发明注射液中所述的有机溶剂，其特征在于：所述有机溶剂选自丙 二醇、丙三醇、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜中的一种 或多种。

(6)将步骤(1)制得的右旋糖酐铜溶液、步骤(2)制得的右旋糖酐锌溶 液、步骤(3)制得的右旋糖酐铁溶液、步骤(4)制得的氯化钴溶液和有机溶 剂混合，搅拌均匀，调节pH值5.0-6.0，用0.22-0.45μm的有机滤膜过滤， 121℃、30分钟灭菌，得复方右旋糖酐铁注射液。

以上所用原料右旋糖酐铁、右旋糖酐铜、右旋糖酐锌均为自制产品，右旋 糖酐铁药典已有记载，不再做详细的说明。

为此，本发明还提供了所述右旋糖酐铜和右旋糖酐锌的制备方法。

第一：右旋糖酐铜制备方法

右旋糖酐铜的制备方法是将右旋糖酐活化后与铜盐在溶剂中、温度30～95 ℃条件下回流反应，反应溶液经有机溶剂精制，低温干燥得右旋糖酐铜，

进一步，所述右旋糖酐选自右旋糖酐5000、右旋糖酐20000、右旋糖酐40000 和右旋糖酐70000中的一种或多种。

进一步，所述活化剂选自碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、乙二 胺和乙醇胺中的一种或多种。

进一步，所述铜盐选自氯化铜、氯化亚铜、硫酸铜、硫酸亚铜、醋酸铜和 醋酸亚铜中的一种或多种。

进一步，所述溶剂选自水、丙二醇、乙醇、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲 基乙酰胺、丙酮和二甲基亚砜中的一种或多种。

进一步，所述温度选自30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃和95℃的一 种或多种。

进一步，所述右旋糖酐与铜盐的摩尔比为1∶1～5。

进一步，所述有机溶剂选自乙醇、丙酮、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、N，N- 二甲基乙酰胺和二甲基亚砜中的一种或多种。

第二：右旋糖酐锌制备方法

右旋糖酐锌的制备方法是将右旋糖酐活化后与锌盐在溶剂中、温度20～95 ℃条件下回流反应，反应溶液经有机溶剂精制，低温干燥得右旋糖酐锌。

进一步，所述右旋糖酐选自右旋糖酐5000、右旋糖酐20000、右旋糖酐40000 和右旋糖酐70000中的一种或多种。

进一步，所述活化剂选自碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、乙二 胺和乙醇胺中的一种或多种。

进一步，所述锌盐选自氯化锌、硫酸锌、硫酸亚锌和醋酸锌中的一种或多 种。

进一步，所述溶剂选自水、丙二醇、乙醇、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲 基乙酰胺、丙酮和二甲基亚砜中的一种或多种。

进一步，所述温度选自30℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃和95 ℃的一种或多种。

进一步，所述右旋糖酐与锌盐的摩尔比为1∶1～5。

进一步，所述有机溶剂选自乙醇、丙酮、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、N，N- 二甲基乙酰胺和二甲基亚砜中的一种或多种。

本发明的有益效果在于：与单独的右旋糖酐铁相比，兽用复方右旋糖酐铁 注射液，制备方法简单，成本低，稳定性好，使用方便，生物活性显著提高， 在补铁的同时给予铜、锌和钴的补充，对畜禽生长性能、畜禽机体抗病免疫力、 抗贫血、仔猪出栏体重等方面都有显著的增强效果。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明的优选实 施例进行详细的描述。实施例1-3为复方右旋糖酐铁注射液制备方法，实施例 4-6为右旋糖酐铜制备方法，实施例7-9为右旋糖酐锌制备方法。

实施例1、复方右旋糖酐铁注射液制备方法

一种兽用复方右旋糖酐铁注射液，含有如下组分，均为重量份：

右旋糖酐铁5g，右旋糖酐铜4g，右旋糖酐锌8g，氯化钴0.03g，丙二醇10g， 注射用水83g。

该兽用复方右旋糖酐铁注射液采用如下方法制备：

(1)将右旋糖酐铁5g溶解于15g水中，得右旋糖酐铁溶液。

(2)将右旋糖酐铜4g溶解于15g水中，得右旋糖酐铜溶液。

(3)将右旋糖酐锌8g溶解于15g水中，得右旋糖酐锌溶液。

(4)将氯化钴0.03g溶解于10g水中，得氯化钴溶液。

(5)有机溶剂为丙二醇10g。

(6)将步骤(1)制得的右旋糖酐铁溶液、步骤(2)制得的右旋糖酐铜溶 液、步骤(3)制得的右旋糖锌铁溶液、步骤(4)制得的氯化钴溶液和丙二醇 混合，搅拌均匀，调节pH值为5.3，用0.22-0.45μm的有机滤膜过滤后，测 pH值为5.3，121℃、30分钟灭菌，得复方右旋糖酐铁注射液。

实施例2、复方右旋糖酐铁注射液制备方法

一种兽用复方右旋糖酐铁注射液，含有如下组分，均为重量份： 右旋糖酐铁10g，右旋糖酐铜6g，右旋糖酐锌9g，氯化钴0.04g，丙三醇5g， 注射用水70g。

该兽用复方右旋糖酐铁注射液采用如下方法制备：

(1)将右旋糖酐铁10g溶解于20g水中，得右旋糖酐铁溶液。

(2)将右旋糖酐铜6g溶解于15g水中，得右旋糖酐铜溶液。

(3)将右旋糖酐锌9g溶解于15g水中，得右旋糖酐锌溶液。

(4)将氯化钴0.04g溶解于10g水中，得氯化钴溶液。

(5)有机溶剂为丙三醇5g。

(6)将步骤(1)制得的右旋糖酐铁溶液、步骤(2)制得的右旋糖酐铜溶 液、步骤(3)制得的右旋糖锌铁溶液、步骤(4)制得的氯化钴溶液和丙三醇 混合，搅拌均匀，调节pH值为5.6，用0.22-0.45μm的有机滤膜过滤后，测 pH值为5.6，121℃、30分钟灭菌，得复方右旋糖酐铁注射液。

实施例3、复方右旋糖酐铁注射液制备方法

一种兽用复方右旋糖酐铁注射液，含有如下组分，均为重量份： 右旋糖酐铁8g，右旋糖酐铜7g，右旋糖酐锌10g，氯化钴0.05g，N，N-二甲基 乙酰胺10g，注射用水65g。

该兽用复方右旋糖酐铁注射液采用如下方法制备：

(1)将右旋糖酐铁8g溶解于20g水中，得右旋糖酐铁溶液。

(2)将右旋糖酐铜7g溶解于15g水中，得右旋糖酐铜溶液。

(3)将右旋糖酐锌10g溶解于20g水中，得右旋糖酐锌溶液。

(4)将氯化钴0.03g溶解于5g水中，得氯化钴溶液。

(5)有机溶剂为N，N-二甲基乙酰胺10g。

(6)将步骤(1)制得的右旋糖酐铁溶液、步骤(2)制得的右旋糖酐铜溶 液、步骤(3)制得的右旋糖酐锌溶液、步骤(4)制得的氯化钴溶液和N，N-二 甲基乙酰胺混合，搅拌均匀，调节pH值为5.9，用0.22-0.45μm的有机滤膜 过滤后，测pH值为5.9，121℃、30分钟灭菌，得复方右旋糖酐铁注射液。

实施例4、右旋糖酐铜的制备

称取右旋糖酐5g，加水50mL使溶解，升温至95℃，在搅拌条件下将活化 的右旋糖酐与铜盐的摩尔比为1∶1缓慢加入醋酸铜，控温95℃回流反应，用 pH监测反应进程，10小时后反应完毕，反应溶液过滤，滤液经乙醇沉淀收集沉 淀物，溶解后加入乙醇，反复数次，沉淀物用乙醇洗涤，干燥，即得右旋糖酐 铜。

实施例5、右旋糖酐铜的制备

称取右旋糖酐5g，加水50mL使溶解，升温至70℃，在搅拌条件下将活化 的右旋糖酐与铜盐的摩尔比为1∶2缓慢加入氯化铜，控温70℃回流反应，用 pH监测反应进程，10小时后反应完毕，反应溶液过滤，滤液经丙酮沉淀收集沉 淀物，溶解后加入丙酮，反复数次，沉淀物用丙酮洗涤，干燥，即得右旋糖酐 铜。

实施例6、右旋糖酐铜的制备

称取右旋糖酐5g，加水50mL使溶解，升温至50℃，在搅拌条件下将活化 的右旋糖酐与铜盐的摩尔比为1∶3缓慢加入硫酸铜，控温60℃回流反应，用 pH监测反应进程，10小时后反应完毕，反应溶液过滤，滤液经乙醇沉淀收集沉 淀物，溶解后加入乙醇，反复数次，沉淀物用乙醇洗涤，干燥，即得右旋糖酐 铜。

实施例7、右旋糖酐锌的制备

称取右旋糖酐5g，加水50mL使溶解，升温至95℃，在搅拌条件下将活化 的右旋糖酐与锌盐的摩尔比为1∶1缓慢加入氯化锌，控温95℃回流反应，用 pH监测反应进程，10小时后反应完毕，反应溶液过滤，滤液经乙醇沉淀收集沉 淀物，溶解后加入乙醇，反复数次，沉淀物用乙醇洗涤，干燥，即得右旋糖酐 锌。

实施例8、右旋糖酐锌的制备

称取右旋糖酐5g，加水50mL使溶解，升温至70℃，在搅拌条件下将活化 的右旋糖酐与锌盐的摩尔比为1∶2缓慢加入醋酸锌，控温60℃回流反应，用 pH监测反应进程，10小时后反应完毕，反应溶液过滤，滤液经丙酮沉淀收集沉 淀物，溶解后加入丙酮，反复数次，沉淀物用丙酮洗涤，干燥，即得右旋糖酐 锌。

实施例9、右旋糖酐锌的制备

称取右旋糖酐5g，加水50mL使溶解，升温至80℃，在搅拌条件下将活化 的右旋糖酐与锌盐的摩尔比为1∶3缓慢加入硫酸锌，控温60℃回流反应，用 pH监测反应进程，10小时后反应完毕，反应溶液过滤，滤液经丙酮沉淀收集沉 淀物，溶解后加入丙酮，反复数次，沉淀物用丙酮洗涤，干燥，即得右旋糖酐 锌。

下面对本发明的复方右旋糖酐铁注射液的急性毒性研究进行详细的描述。

急性毒性实验例1

方法：将复方右旋糖酐铁用蒸馏水溶解制成不同浓度的溶液；(铁∶铜∶锌 ＝10∶1∶1)取体重18～22g的小鼠50只，随机分为5组，每组10只(雌雄各半)， 根据预试结果设定每支小鼠给药剂量为10mg、8mg、6mg、4mg、2mg(按金属 元素含量计)，，尾静脉注射给药，给药后连续观察14天，观察内容包括：动物 体重、外观、食欲、呼吸、大小便、腺体分泌、行为活动、死亡时间、濒死前 反应等；饲养室温度为20～26℃，湿度为40％～70％。

结果：各组小鼠均未出现明显中毒症状，无死亡，表明本发明的复方右旋 糖酐铁注射液毒性低，安全。

急性毒性实验例2

方法：将复方右旋糖酐铁用生理盐水溶解制成不同浓度的溶液；取体重 18～22g的小鼠50只，随机分为5组，每组10只(雌雄各半)，根据预试结果设 定每支小鼠给药剂量为5mg、4mg、3mg、2mg、1mg，尾静脉注射给药，给药 后连续观察14天，观察内容包括：动物体重、外观、食欲、呼吸、大小便、腺 体分泌、行为活动、死亡时间、濒死前反应等；饲养室温度为20～26℃，湿度为 40％～70％。

结果：各组小鼠均无死亡，低剂量组未出现明显中毒症状，高剂量组出现 轻微的呼吸急促、惊厥、扭体、精神萎靡、食量减退等中毒症状，表明本发明 的复方右旋糖酐铁注射液低毒，安全。

下面对本发明的复方右旋糖酐铁注射液，从对小鼠的生长影响方面进行详 细的描述。

试验方法：每组选用20g左右健康小白鼠5只，按照有机元素5mg进行尾 部静脉注射，试验分为对照组I(空白小鼠的增长)，对照组II(右旋糖酐铁注 射液组)和试验组III(复方右旋糖酐铁注射液组)，同期饲养管理，试验数据采 用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析，邓肯氏(Duncan)法多重比较。

试验结果：在复方右旋糖酐铁注射液的动物实验中，所制得的复方右旋糖 酐铁注射液，经尾静脉注射，与单独的右旋糖酐铁注射液相比，对小鼠的增重 效果明显，统计结果见表1。

表1注射复方右旋糖酐铁注射液后小鼠的体重变化      单位：g

通过对小鼠体重变化的试验数据进行分析，对照组I、右旋糖酐铁注射液 组II与复方右旋糖酐铁注射液组III之间，对照组I平均日增重0.755±0.1568^a， 右旋糖酐铁注射液组II平均日增重0.9825±0.3184^b，复方右旋糖酐铁注射液组 III平均日增重1.2625±0.2932^c，对照组III分别与对照组I、右旋糖酐铁注射液 组II相比，增重差异均极显著(P＜0.01)(注：不同字母a、b、c代表不同组 别之间差异极显著)。