一种6-O-甲基红霉素A衍生物和克拉霉素的制备方法

摘要

本发明提供了一种式III化合物的制备方法，其特征在于：其包括下述步骤：在2-甲基四氢呋喃和其他极性惰性溶剂的混合溶剂中，在碱和甲基化试剂的作用下，对式II化合物的6位羟基进行甲基化反应，得如式III化合物；其中，R

说明书

技术领域

本发明涉及药物合成领域，尤其涉及一种6-O-甲基红霉素A衍生物和克拉霉素的制备方法。

背景技术

6-O-甲基红霉素A(又名克拉霉素)是一种红霉素A的半合成新型大环内酯类抗生素，它具有抗菌活性强，生物利用度高，组织分布广和半衰期长的优点，有着非常广泛的临床应用前景。

美国专利US 4,331,803中首次公开了克拉霉素。此后，文献中也报道了多种不同的制备克拉霉素的方法。其中，最常规的方法包括以下步骤：(a)保护9位肟羟基；(b)保护2’和4”位羟基；(c)甲基化6位的羟基；(d)除去2’，4”和9位的保护基。合成克拉霉素的关键步骤是(c)步骤中6位羟基上的选择性甲基化。

其中R₁是烷基，它被取代或没有被取代；芳基取代甲基；或取代烷氧基；R₂是三甲基硅烷基、苄氧羰基、烯丙氧羰基或其它烃基保护基。

美国专利US4,990,602公开了使用如二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺和六甲基磷酸三酰胺中的一种或多种与四氢呋喃组成的混合物等极性惰性溶剂在6位进行选择性甲基化。在其方法实例中，在0～20℃下，反应2小时即可反应完全，使用二甲胺溶液终止甲基化作用后再用己烷萃取。该方法的缺点在于，四氢呋喃总是均匀的分布在二甲基亚砜水层和己烷层，因此非常难于回收套用，成本较高。该反应的产率一般在82～95％之间，但是混合溶剂混溶且都溶于水，故分离困难，导致溶剂成本高，无法在工业上生产。此外，该专利还公开了使用硅烷化试剂和路易斯酸对式I化合物2’和4”位羟基进行选择性硅烷化的方法，如使用三甲基氯硅烷和三乙胺，三甲基氯硅烷和三甲基硅基咪唑，六甲基二硅胺烷和氯化氨，或六甲基二硅胺烷和吡啶盐酸盐等进行反应。该种方法制得的纯度一般在80～98％，若要获得高纯度如98％的产物，就要使用价格较高的硅烷化试剂，如三甲基氯硅烷或三甲基硅基咪唑，导致生产成本高而不适合工业化生产。

美国专利US5,719,272公开了一种甲基化作用的方法，其中使用甲基叔丁基醚与极性惰性溶剂的混合溶剂。

美国申请专利US2003/0023053和US2004/0010128A分别描述了一种甲基化作用的方法，其中使用二氯甲烷或者甲苯与极性惰性溶剂形成的混合溶剂。

上述甲基化方法大多都具有纯度低的主要缺点，有鉴于此，需要发展一种简单、经济、环保并且易于工业化生产的红霉素A衍生物的6位羟基选择性甲基化作用方法。

上述硅烷化方法的缺陷在于：路易斯酸的用量非常大，为式I化合物摩尔数的150～300％，工业化生产会导致三废过多，且大多方法都具有纯度低或成本高的主要缺点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服了现有的如式II所示的红霉素A衍生物的6位羟基选择性甲基化方法产量低、纯度低、溶剂难以回收、污染大、成本高等缺陷，提供了一种简单、经济、环保并且易于工业化生产的如式III所示的6-O-甲基红霉素A衍生物及克拉霉素的制备方法，该方法能够在反应结束后将2-甲基四氢呋喃与其他极性惰性溶剂充分分离，节约溶剂的用量，并能制得高产率、高纯度的式III化合物及克拉霉素。

本发明提供了一种如式III所示的6-O-甲基红霉素A衍生物的制备方法，其包括下述步骤：在2-甲基四氢呋喃和其他极性惰性溶剂的混合溶剂中，在碱和甲基化试剂的作用下，对式II化合物的6位羟基进行甲基化反应，得式III化合物；其中，R₁为肟羟基保护基，R₂为羟基保护基。

本发明中采用其他极性惰性溶剂和2-甲基四氢呋喃的混合溶剂，能够在甲基化反应结束后进行萃取时，使2-甲基四氢呋喃与含极性惰性溶剂的水层分离，从而便于溶剂的回收利用。

其中，所述的肟羟基保护基为本领域中常规的用于保护肟羟基的保护基，优选为取代或未取代的C₁～C₁₂、较佳的C₁～C₆烷基，C₆～C₁₀芳基取代甲基或取代C₁～C₁₂、较佳的C₁～C₆烷氧基；

所述的取代C₁～C₁₂、较佳的C₁～C₆烷基中的取代基为C₁～C₆的烃基、卤素取代的苯基和C₁～C₆烷氧基中的一种或多种；所述的C₁～C₆的烃基较佳的为烷烃和/或芳烃，更佳的为苯基、甲基、乙基、异丙基和环己基中的一种或多种；所述的C₁～C₆烷氧基为甲氧基、乙氧基和异丙氧基中的一种或多种；

所述的取代C₁～C₁₂、较佳的C₁～C₆烷氧基中的取代基为苯基、卤素取代苯基、甲基、乙基、异丙基和环己基中的一种或多种。

本发明所述的肟羟基保护基更佳的为三苯甲基、苄基、2-氯苄基、1-甲氧基-1-甲基乙基、1-乙氧基-1-甲基乙基、1-甲氧基-1-环己基、1-乙氧基-1-环己基或1-异丙氧基-1-环己基，最佳的为1-异丙氧基-1-环己基。

其中，所述的羟基保护基为本领域中用于保护羟基的常用基团，较佳的为三甲基硅烷基、苄氧羰基或烯丙氧羰基。

在本发明一较佳的实施方式中，所述的式II化合物中R₁为1-异丙氧基-1-环己基，R₂为三甲基硅烷基，其结构式如下所示：

其中，2-甲基四氢呋喃和其他极性惰性溶剂的体积比可根据本领域常规方法进行选择，较佳的为1∶0.5～1∶5，更佳的为1∶1。

其中，所述的其他极性惰性溶剂是本领域此类甲基化反应中常规使用的、不与式II化合物发生反应的、除2-甲基四氢呋喃以外的极性溶剂，较佳的为N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、1，2-二甲氧基乙烷和六甲基磷酸三酰胺等中的一种或多种，更佳的为二甲基亚砜。

其中，所述的甲基化试剂是现有技术中公知的常规甲基化试剂，如氯甲烷、溴甲烷、碘甲烷、硫酸二甲酯、对甲苯磺酸甲酯和甲基磺酸甲酯等中的一种或多种。所述的甲基化试剂的用量可根据本领域常规方法进行选择，较佳的为式II化合物摩尔量的1～10倍，更佳的为1～2倍。

其中，所述的碱是本领域此类甲基化反应中常规使用的碱，较佳的为无机碱，更佳的为金属氢氧化物、金属氢化物和金属碳酸化物中的一种或多种，最佳的为氢氧化钾、氢氧化钠、氢化钠、氢化钾、碳酸钾和碳酸钠中的一种或多种。所述的碱的用量可根据本领域常规方法进行选择，较佳的为式II化合物摩尔量的1～10倍，更佳的为1～2倍。

本发明的甲基化反应能够在温和条件下进行，具体反应条件可根据本领域常识进行选择，反应温度较佳的为0～60℃，更佳的为5～20℃。在本发明优选的反应温度范围内能够减少不需要的副产物。所述的甲基化反应的反应时间通过高效液相色谱检测反应物消耗完为止，较佳的为0.5～4小时，更佳的为2小时。

本发明的甲基化反应结束后，较佳的采用下述方法进行后处理：用二甲胺水溶液稀释反应混合物，使2-甲基四氢呋喃层和含其他极性惰性溶剂的水层分离，用蒸馏的方法分离式III化合物，从而实现对溶剂的大量回收利用。

本发明还提供了一种克拉霉素的制备方法，其包括下述步骤：(1)在2-甲基四氢呋喃和其他极性惰性溶剂的混合溶剂中，在碱和甲基化试剂的作用下，对式II化合物的6位羟基进行甲基化反应，得式III化合物；(2)将式III化合物2’、4”位上的羟基保护基脱保护，9位上的肟羟基保护基水解成羰基，得克拉霉素；其中，R₁和R₂同前述。

其中，所述的步骤(1)的方法和优选条件同前述的甲基化反应，步骤(2)可采用本领域此类反应中常规使用的脱保护基方法进行。

在本发明一较佳的实施方式中，所述的式II化合物由下述方法制得：溶剂中，在糖精类化合物的作用下，式I化合物与硅烷化试剂进行2’和4”位羟基的硅烷化反应，即可；其中，R₁同前述；R₂为三甲基烷基。

其中，所述的糖精类化合物较佳的为糖精和/或N-三甲基硅基糖精；所述的糖精类化合物的用量较佳的为催化量，更佳的为式I化合物摩尔量的0.1～10％，最佳的为0.5～5％。本发明中的糖精类化合物同样起到现有的此类反应中路易斯酸的作用，但是其用量与常规的路易斯酸相比大幅下降，仅为催化量，使反应成本大幅下降。

其中，所述的硅烷化试剂是本领域中常规使用的硅烷化试剂，只要其能将式I化合物2’和4”位的羟基硅烷化即可，较佳的为六甲基二硅胺烷、三甲基硅基咪唑、N，N-二(三甲基硅基)乙酰胺和N，N’-二(三甲基硅基)尿素中的一种或多种。所述的硅烷化试剂的用量可根据本领域常识进行选择，较佳的为式I化合物摩尔量的1～10倍。

其中，所述的溶剂为本发明此类反应中常规使用的溶剂，如二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、甲基叔丁基醚和乙酸乙酯中的一种或多种，优选二氯甲烷。所述溶剂的用量可根据本领域常识进行选择，较佳的为5～30ml/g式I化合物。

其中，所述的硅烷化反应能够在温和条件下进行，反应温度较佳的为0～100℃，更佳的为15～40℃。在该优选的反应温度范围内能够减少不需要的副产物。所述的硅烷化反应的反应时间通过高效液相色谱检测反应物消耗完为止，较佳的为12～48小时，更佳的为24小时。

本发明的硅烷化反应结束后，较佳的采用下述方法进行后处理：用饱和碳酸氢钠水溶液稀释反应混合物，使溶剂层和水层分离，用蒸馏的方法分离式II化合物，从而实现对溶剂的大量回收利用。

本发明中，上述优选条件在符合本领域常识的基础上可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明的原料和试剂均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：

(1)本发明的甲基化反应能在温和条件下进行，有利于工业生产和环境保护，使用的混合溶剂易于分离，可以大量回收利用。

(2)本发明的甲基化反应能获得高产率、高纯度的式III化合物和克拉霉素。

(3)用本发明制得的式III化合物制备克拉霉素，能够得到高产率、高选择性的克拉霉素。

(4)本发明的式III化合物的制备方法不受式II化合物种类的限制，能够适用于各类式II化合物的甲基化反应，使用范围广泛，尤其对于R₁为1-异丙氧基-1-环己基，R₂为三甲基硅烷基的式II化合物，效果更佳。

(5)在本发明一优选的实施方式中，所述的式II化合物由优选的方法制得，该方法中利用糖精类化合物替代现有技术中常规使用的其他路易斯酸，大大降低了用量，并能保持式II化合物的产率和纯度没有下降，能够大幅降低反应成本。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明并不受其限制。

表1

实施例1

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)红霉素A 9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至10℃，加入1.4克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.9克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为85％。

实施例2

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-乙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至15℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.7克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-乙氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为90％。

实施例3

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至10℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.7克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为92％。

实施例4

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至15℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.7克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为93％。

实施例5

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至20℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.7克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为95％。

实施例6

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至15℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和1.8克溴甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为90％。

实施例7

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至15℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.5克硫酸二甲酯(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟，纯度为91％。

实施例8

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-三苯甲基肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入500毫升六甲基磷酸三酰胺，降温至0℃，加入2克氢化钠(式II化合物摩尔量的10倍)和17克对甲苯磺酸甲酯(式II化合物摩尔量的10倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(三苯甲基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为92％。

实施例9

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-苄基肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升N，N-二甲基甲酰胺，于60℃，加入1.4克碳酸钾(式II化合物摩尔量的1倍)和1.1克甲基磺酸甲酯(式II化合物摩尔量的1倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-苄基肟(式III化合物，见表1)，纯度为91％。

实施例10

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(2-氯苄基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入50毫升1，2-二甲氧基乙烷，降温至5℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.5克硫酸二甲酯(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A9-O-(2-氯苄基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为91％。

实施例11

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)红霉素A 9-O-(1-甲氧基-1-甲基乙基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至10℃，加入1.4克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.9克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为82％。

实施例12

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-甲氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至15℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.7克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-甲氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为89％。

实施例13

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(苄氧羰基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至10℃，加入1.2克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.5克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(苄氧羰基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为90％。

实施例14

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克2’，4”-O-二(烯丙氧羰基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，然后再加入100毫升2-甲基四氢呋喃，搅拌使其溶解，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至10℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)(式II化合物摩尔量的2倍)和2.7克碘甲烷(式II化合物摩尔量的2倍)，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得10克2’，4”-O-二(烯丙氧羰基)-6-O-甲基红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式III化合物，见表1)，纯度为90％。

实施例15制备克拉霉素

将实施例3中的式III化合物10克溶解于100毫升乙醇/水(1∶1)，加入4克亚硫酸氢钠和1克98％甲酸，并将反应混合物回流3小时。然后，将反应混合物用50毫升水稀释并用氢氧化钠溶液将pH值调整到10，冰水浴下搅拌反应混合物1小时，过滤沉淀物，水洗并乙醇结晶得到6克克拉霉素，其纯度为98％。

实施例16制备式II化合物

在装有搅拌器，冷凝管和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟，然后再加入100毫升二氯甲烷，搅拌使其溶解，在40℃回流下，加入4.5克六甲基二硅胺烷和0.07克N-三甲基硅基糖精(式I化合物摩尔量的2％)，反应24小时后，加入50毫升饱和碳酸氢钠水溶液，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得11.4克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟，HPLC检测纯度为98％。

实施例17制备克拉霉素

(1)制备式II化合物

在装有搅拌器和温度计的250毫升四口反应瓶中加入10克红霉素A9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟，然后再加入100毫升二氯甲烷，搅拌使其溶解，在25℃下，加入4.5克六甲基二硅胺烷和0.05克糖精(式I化合物摩尔量的2％)，反应24小时后，加入50毫升饱和碳酸氢钠水溶液，搅拌30分钟，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂即得11.0克2’，4”-O-二(三甲基硅基)-红霉素A 9-O-(1-异丙氧基-1-环己基)肟(式II化合物，见表1)，HPLC检测纯度为98％。

(2)制备式III化合物

将式II化合物10克溶解于100毫升四氢呋喃，再加入100毫升二甲基亚砜，降温至10℃，加入1.3克氢氧化钾(含量≥82％)和2.7克碘甲烷，反应2小时后，加入二甲胺水溶液和200毫升水，搅拌30分钟，用100毫升乙酸乙酯萃取，分离有机层并水洗，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂得白色固体(式III化合物)；

(3)将得到的白色固体溶解于100毫升乙醇/水(1∶1)中，加入4克亚硫酸氢钠和1克98％甲酸，并将反应混合物回流3小时。然后，将反应混合物用50毫升水稀释并用氢氧化钠溶液将pH值调整到10，冰水浴下搅拌反应混合物1小时，过滤沉淀物，水洗并乙醇结晶得到6克克拉霉素，其纯度为98％。