用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药及其使用方法

摘要

本发明提供的用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药，包括经中草药加工而成的中药制剂I、II，它们分别是五倍子︰黄芩=1︰47~125（质量比）和蒲公英︰黄芩︰金银花=14.8~27.6︰51.7~55.6︰20.7~29.6（质量比）；以上各以提取物计量入药。其使用方法是对于水生动物在育苗生产阶段以泼洒方式给药，对于水生动物在商品养成阶段以拌饲口服方式给药。与现有技术相比，本发明所提供的两个中药制剂药理互补，可有效提高水生动物的免疫力，对致病性嗜水气单胞菌有明显抑制功效。交替使用以避免使致病性嗜水气单胞菌变异而对该药剂产生耐药性，从而可有效减少水生动物嗜水气单胞菌病的发病率，进而提高养殖成活率。

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药及其使用方法，尤其是涉及的是一种用于防控淡水水生动物嗜水气单胞菌病的中药及其使用方法，属人类生活必需之保健中医药技术领域。

背景技术

嗜水气单胞菌系自然界中具复杂血清型和易于变异的常在菌，广泛存在于淡水、土壤、污水、淤泥和人的粪便中，有致病性和非致病性菌株之分。其中致病性嗜水气单胞菌既是引起淡水养殖动物暴发性死亡的主要病原，也是淡水养殖动物细菌性疾病中经济损失最为严重的致病菌。大量研究表明，该菌对淡水鱼感染率高达90%以上，死亡率高达65%以上。以中华鳖为例，在目前已报道的25种中华鳖疾病中，由其引起的鳖病就达15种之多，仅中国淡水养殖产业每年由致病性嗜水气单胞菌病造成的经济损失就高达数百亿人民币元之巨。无疑，获取有效防控淡水养殖动物嗜水气单胞菌病的途径与方法，对于切实保障淡水养殖产业的健康发展具有极为重要的现实意义。

目前有关水产动物疾病的防控和治疗，主要有使用化学消毒剂、抗生素、使用免疫增强剂、使用疫苗，前两种已有30余年的历史，因长期使用，已产生抗药性并影响产品质量；第三种中化学增强剂有毒副作用大、局部刺激强、致癌、制备和使用麻烦或不能足够提高弱抗原的免疫原性等弊端；生态防病制剂则菌体稳定性差、活性难维持、必须在消化道中达到一定数量、对突发病作用甚微的弊端；最后一种则对于血清型复杂且易于发生变异的致病性嗜水气单胞菌而言往往效果不佳，极易免疫失败。

中国发明专利申请“一种抑制嗜水气单胞菌的植物提取物组方”（公开号101721489），提出了一种“主要含有下列重量比的植物提取物为原料，配剂而成方：五倍子提取物50%~80%，茶多酚10%~30%，大黄提取物5%~15%。提取物的制备包括以下步骤：用60%~80%的乙醇，70~80℃加热回流提取2~3h，反复3次，50℃旋转蒸发，浓缩后真空干燥得粉剂。”虽然该植物提取物组方有较好的防控水生动物嗜水气单胞菌病效果，但是单独一种组方制剂的长期使用，会使致病性嗜水气单胞菌变异而对该药剂产生耐药性。虽然其变异菌的毒性有所降低，但毒性仍具，且可通过进攻生物体使其毒性获得恢复。

发明内容

针对上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是避免致病性嗜水气单胞菌变异而产生耐药性，进而提供一种用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药及其使用方法。

本发明提供的用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药，是经中草药加工而成的中药制剂，所说中药制剂有两种：中药制剂Ι的药物成分及质量比是五倍子︰黄芩=1︰47~125；中药制剂Ⅱ的药物成分及质量比是蒲公英︰黄芩︰金银花=14.8~27.6︰51.7~55.6︰20.7~29.6；以上各以提取物计量入药。

本发明以“廉价、易得、广谱”为中草药初筛原则，采用琼脂两倍稀释法在筛选出有较好抑菌效果的单味中草药基础上，按中草药“性味归经”和“君臣佐使”配伍原理，再以菌浓度1×10⁷ cfu/ml为实验对象筛选出了两个药理互补且对致病性嗜水气单胞菌有明显抑制功效的、可交替使用的中药制剂。这两个中药制剂可作为水体抑菌剂和饲料添加剂，适用于水生动物对嗜水气单胞菌病的防控。与现有技术相比，本发明所提供的两个中药制剂药理互补，可有效提高水生动物的免疫力，对致病性嗜水气单胞菌有明显抑制功效。交替使用以避免使致病性嗜水气单胞菌变异而对该药剂产生耐药性，从而可有效减少水生动物嗜水气单胞菌病的发病率，进而提高养殖成活率。

所说中药制剂是水提物粉末混合物，使用水提物，比现有技术中使用醇提物要简单易行成本更低，水溶性也可好。所说中药制剂的粒度按标准筛目计为80目筛下物，使其水溶性更加得到保证。

本发明所提供的用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药，在淡水水生动物育苗生产阶段和商品养成阶段均可使用，预防率达到100%，对已患病的淡水水生动物的治愈率可达到80%以上。

本发明提供的用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药的使用方法，对于水生动物在育苗生产阶段以泼洒方式给药，对于水生动物在商品养成阶段以拌饲口服方式给药。

本发明提供的用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药的使用方法，有预防方法和治疗方法，其中预防方法是当水温高于15℃，且养殖水体中致病性嗜水气单胞菌达到1×10³~1×10⁴cfu/ml时进行，具体方法是：

在水生动物的育苗生产阶段，每米立方育苗水体中泼洒中药制剂Ι 48.0~65.0g一次；在水生动物的商品养成阶段，单独或隔次使用两种中药制剂拌饲口服，每天一次，连续给药7~15天，所说两种中药制剂的拌和量是用中药制剂Ι时每公斤饲料添加4.8~6.5 g，用中药制剂Ⅱ时每公斤饲料添加8.4~10.0g。

本发明提供的用于防控水生动物嗜水气单胞菌病的中药的使用方法，有预防方法和治疗方法，其中治疗方法时当水生动物体表或肠道或内脏出现充血或出血症状时，且水体中致病性嗜水气单胞菌数量密度达到1×10⁴cfu/ml以上时进行，具体方法是：

（1）当水体中未发现养殖动物死亡个体或致病性嗜水气单胞菌数量密度为1×10⁴~1×10⁵cfu /ml时，在水生动物的育苗生产阶段，每米立方育苗水体中泼洒中药制剂Ι 72.0~95.0g/m³，泼洒一次；在水生动物的商品养成阶段，单独或交替使用两种中药制剂拌饲口服，每天一次，连续给药10~20天，所说两种中药制剂的拌和量是用中药制剂Ι时每公斤饲料添加7.2~9.5g，用中药制剂Ⅱ时每公斤饲料添加17.0~20.0g。

（2）当水体中已发现有死亡个体或致病性嗜水气单胞菌数量密度超过1×10⁵cfu/ml时，在养殖动物的育苗生产阶段，每米立方育苗水体中泼洒中药制剂Ι 96.0~150.0g/m³，每天泼洒1次，连续泼洒2天；在水生动物的商品养成阶段，单独或交替使用两种中药制剂拌饲口服，每天一次，连续给药15~25天，所说两种中药制剂的拌和量是用中药制剂Ι时每公斤饲料添加9.6~15.0g，用中药制剂Ⅱ时每公斤饲料添加24.5~30.0g。

具体实施方式

1、中药制剂Ι，由五倍子醇提物20g合黄芩1000g醇提物混合而成；中药制剂Ⅱ，由蒲公英醇提物150g合黄芩醇提物555g金银花醇提物295g混合而成。

2、中药制剂Ι，由五倍子水提物10g合黄芩1000g水提物混合而成；中药制剂Ⅱ，由蒲公英醇提物270g合黄芩醇提物520g金银花醇提物210g混合而成。

3、中药制剂Ι，由五倍子水提物8g合黄芩1000g水提物混合而成；中药制剂Ⅱ，由蒲公英醇提物的标准筛80目筛下物230g合黄芩醇提物的标准筛80目筛下物535g金银花醇提物的标准筛80目筛下物235g混合而成。

水提物的制备是将各草药在水中煎汤后经干燥、粉碎、过筛所得，也有市售。中药制剂则取各成分提取物称量混合均匀后计量包装。

4、某养殖场预防应用。定期测量养殖水体温度和其中致病性嗜水气单胞菌数量密度。当水温高于15℃，且养殖水体中致病性嗜水气单胞菌达到（1×10³-1×10⁴）cfu/ml浓度水平时，就须采取预防措施。在养殖动物育苗生产阶段可在育苗水体中泼洒中药制剂Ι，泼洒剂量48.0~65.0g /m³，泼洒1次即可。在养殖动物商品养成阶段可在饲料中添加中药制剂Ι，每公斤饲料添加（4.8~6.5）g药粉；或中药制剂Ⅱ，每公斤饲料添加8.4~10.0g药粉，连续给药7~15天，中药制剂Ι和中药制剂Ⅱ可单独使用也可交替使用，若交替使用则间隔时间为2天。

2、某养殖场治疗应用。当养殖动物体表或肠道或内脏出现充血或出血症状时，应立即检测水体中致病性嗜水气单胞菌的数量密度，以判定以上症状是否由致病性嗜水气单胞菌引起。若水体中致病性嗜水气单胞菌数量密度达到（1×10⁴）cfu /ml以上时，可判定该疾病由致病性嗜水气单胞菌引起，就须采取防治措施，具体方法如下：

（1）当水体中未发现养殖动物死亡个体或致病性嗜水气单胞菌数量密度为（1×10⁴-1×10⁵）cfu /ml浓度水平时，在养殖动物育苗生产阶段可在育苗水体中泼洒中药制剂Ι，泼洒剂量72.0~95.0g/m³，泼洒1次即可；在养殖动物商品养成阶段可在饲料中添加中药制剂Ι，每公斤饲料添加7.2~9.5g药粉；或中药制剂Ⅱ，每公斤饲料添加17.0~20.0g克药粉，连续投喂给药10~20天，中药制剂Ι和中药制剂Ⅱ可单独使用也可交替使用，若交替使用则间隔时间为2天。

（2）当水体中已发现有死亡个体或致病性嗜水气单胞菌数量密度超过（1×10⁵）cfu/ml浓度水平时，在养殖动物育苗生产阶段可在育苗水体中泼洒中药制剂Ι，泼洒剂量（96.0~150.0）g/m³，每天泼洒1次，连续泼洒2天；在养殖动物商品养成阶段可在饲料中添加中药制剂Ι，每公斤饲料添加9.6~15.0g药粉；或中药制剂Ⅱ，每公斤饲料添加24.5~30.0g药粉，连续投喂给药15~25天，中药制剂Ι和中药制剂Ⅱ可单独使用也可交替使用，若交替使用则间隔时间为2天。

附1、本发明治疗效果实验：应用本发明中草药复方对浙江省余姚市6个嗜水气单胞菌病易发养殖场的鱼、虾、鳖进行预防和治疗。效果如下表：

防治嗜水气单胞菌病临床中试结果表

通过大量临床防治试验证明：在嗜水气单胞菌病高发期，以中药制剂Ⅰ0.5%或中药制剂Ⅱ1%伴饲投喂预防，未见发病，其预防效果良好；症状较轻者以中药制剂Ⅰ1%或中药制剂Ⅱ1.5%伴饲投喂，症状较重者以中药制剂Ⅰ2%或中药制剂Ⅱ3%伴饲投喂，投喂治疗20天内其治愈率为80%~90%。

附2、本发明药物安全性实验：分三个实验组进行。实验组1饲料中添加10%的中药制剂Ⅰ（10g中药制剂Ⅰ+90g饲料），实验组2饲料中添加15%的中药制剂Ⅱ（15g中药制剂II+85g饲料）。对照组只投喂基础饲料。每个实验组设3个重复。每个重复组放鲫鱼6尾（100~400g/尾）。实验前暂养两天不投喂。实验时按上述比例根据要投喂的饲料量先把中草药用水按1︰10溶解，再与饲料搅拌均匀，使中草药完全吸附在饲料颗粒上，而后投喂，通过观察鲫鱼饲料剩余情况和粪便情况确定鲫鱼的进食情况。试验持续15天。结果表明：各实验组鲫鱼无任何异常状况，各比例添加药物均没有对鲫鱼造成毒性影响，鲫鱼摄食正常，生长良好。