刺囊酸在制备预防和治疗心血管疾病的药物中的应用

摘要

本发明提供了刺囊酸在制备预防和治疗高脂血症或动脉粥样硬化的药物中应用，本发明药物药效明确。

说明书

技术领域

本发明涉及一种心血管疾病中药物的应用，具体涉及刺囊酸在预防和治 疗高脂血症及动脉粥样硬化疾病中药物的应用。

背景技术

血脂主要是由胆固醇构成，是血液中脂质的总称，包括胆固醇、甘油三 酯、游离脂肪酸、脂溶性维生素、固醇类激素等。由于脂肪代谢或运转异常 使血浆一种或多种脂质高于正常称为高脂血症。脂质不溶或微溶于水，必须 与蛋白质结合以脂蛋白形式存在，因此，高脂血症通常为高脂蛋白血症，即 血清脂蛋白浓度升高。从临床上，可以简单地分为以下四类：①高胆固醇血 症：血清TC水平增高。②混合型高脂血症：血清TC与TG水平均增高。③ 高甘油三酯血症：血清TG水平增高。④低高密度脂蛋白血症：血清HDL- C水平减低。

高脂血症对身体的损害是隐匿、逐渐、进行性和全身性的。它的直接损 害是加速全身动脉粥样硬化，因为全身的重要器官都要依靠动脉供血、供氧， 一旦动脉被粥样斑块堵塞，就会导致严重后果。而动脉硬化引起的肾功能衰 竭等，也与高脂血症密切相关。临床研究也证明，高胆固醇血症的病人，使 其血浆胆固醇每下降1％则其冠心病发病率下降2％。近年国外大量的临床试 验观察人群几万人，随访4～5年，甚至10年以上，发现降低血浆胆固醇及 低密度脂蛋白，可降低冠心病发生率，减少冠心病急性发作事件，甚至可使 动脉粥样硬化的斑块消退、回缩。随着社会人口老龄化的到来，老年人心脑 血管疾病由高血脂引发的高血压等疾病比例正呈逐年增加趋势，严重威胁着 人们的生命安全。因此，寻求疗效显著、安全可靠的降血脂药物，一直是医 药界一个长期而又颇为热门的研究课题。

刺囊酸ECHINOCYSTIC ACID，分子式：C₃₀H₄₈O₄，分子量：472.7

目前报道的刺囊酸用于皂荚药材的质量控制，李南，等，HPLC法对皂 荚属植物中刺囊酸的含量测定，《沈阳药科大学学报》，2001年18卷3期， 采用HPLC法，对皂荚属3种植物果实中刺囊酸的含量进行了测量，用于皂荚 属植物的含量测定，刺囊酸在皂荚属植物中分布广泛，且含量较高，种间差 异明显。中国专利ZL03100676.0，发明名称：刺囊酸的制备方法、药物制剂 及医药新用途，该发明公开了一种从皂角中产业化提取制备刺囊酸的新方法 以及刺囊酸的新用途。将中药皂角用70％-95％的乙醇回流提取，通过调p H值或D101大孔树脂柱层析等方法纯化得总皂苷，再加入一定浓度和体积 的酸进行水解、纯化可得刺囊酸纯品。本发明提取纯化的刺囊酸可用于中药 制剂的原料药，且具有扩张冠状动脉的作用，可用于预防和治疗冠心病、心 绞痛、心肌缺血等疾病。

冠状动脉性心脏病(coronary artery heart disease，CHD)简称冠心病，是 一种最常见的心脏病，是指因冠状动脉狭窄、供血不足而引起的心肌机能障 碍和(或)器质性病变，故又称缺血性心肌病(IHD)。本病病因至今尚未完全清 楚，但认为与高血压、高脂血症、高粘血症、糖尿病、内分泌功能低下及年 龄大等因素有关。心绞痛(Angina Pectoris)是冠状动脉供血不足，心肌急剧 的、暂时缺血与缺氧所引起的以发作性胸痛或胸部不适为主要表现的临床综 合症。其特点为阵发性的前胸压榨性疼痛感觉，可伴有其他症状，疼痛主要 位于胸骨后部，可放射至心前区与左上肢，常发生于劳动或情绪激动时，每 次发作3～5min，可数日一次，也可一日数次，休息或用硝酸酯制剂后消失。 本病多见于男性，多数病人在40岁以上，劳累、情绪激动、饱食、受寒、阴 雨天气、急性循环衰竭等为常见的诱因。心肌缺血是指各种原因引起冠状动 脉血流量降低，致使心肌氧等物质供应不足和代谢产物清除减少的临床状态。 其可由冠心病和非冠心病所致。其病理病因：血压降低、主动脉供血减少、 冠状动脉阻塞，可直接导致心脏供血减少；心瓣膜病、血粘度变化、心肌本 身病变也会使心脏供血减少。还有一种情况，心脏供血没有减少，但心脏氧 需求量增加了，这是一种相对心肌缺血。给心脏供血的血管叫冠状动脉，开 口在升主动脉内，临床显示，引起心肌缺血最主要、最常见的病因，是冠状 动脉(偶见肺动脉)狭窄。

发明内容

本发明的技术方案是提供了刺囊酸的新用途。

本发明提供了刺囊酸在制备预防和治疗高脂血症的药物中的应用。

本发明提供了刺囊酸在制备预防和治疗动脉粥样硬化的药物中应用。

本发明提供了一种治疗高脂血症或动脉粥样硬化的药物组合物，它是由 有效量的刺囊酸为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而 成的制剂。

其中，所述的药剂是口服制剂、注射制剂。

本发明刺囊酸在预防和治疗高脂血症、动脉粥样硬化疾病的用途，药效 明确。

具体实施方式

实施例1本发明药物刺囊酸的提取分离纯化方法

大皂角药材800g，切成约1cm的短段，加8倍量水煎煮两次，第一次 1.5小时，第二次1小时，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度为1.10(室温)。 浓缩液加入适量盐酸、水，使溶液的总体积为浓缩液体积的4倍、盐酸的浓 度为2mol/L，加热、搅拌、沸腾水解3小时，过滤，滤饼用纯化水洗至流出 液pH＞6，80℃干燥得皂角提取物粗品51.0g。皂角提取物粗品加入2040mL 乙醇，加热溶解，加入81.6g药用活性炭，搅拌、沸腾30min，趁热过滤， 滤液调pH值5～6，减压浓缩至稠膏状，冷却后过滤，滤饼用纯化水洗至流 出液pH＞6，80℃干燥得皂角提取物6.2g。用高效液相色谱测定所得皂角提 取物中刺囊酸和齐墩果酸的总含量为96.33％，其中刺囊酸∶齐墩果酸＝3∶1。

将制得的皂角提取物用色谱甲醇溶解至最大浓度，上制备型高效液相， 色谱柱Kromasil C18 250×20mm(5um)；流动相比例为甲醇∶水(磷酸调pH 至3.7)＝85∶15；流速10.0ml/min；柱温30℃；检测波长为215nm；分取刺 囊酸峰收集，析晶得刺囊酸(98.5％)。

刺囊酸为白色针状结晶，熔点305～307.5℃。

IRmax^cm-1：3572，3388，3209，2641(醇羟基-OH的伸缩振动引起)；

2947，2925，2866(甲基)；1692，1679(羧基中的C＝O呼吸振动引起)；1465，1449， 1368，1363，1307(羧基)1286，1333，1235(六碳环)；

1140，1204，1187，1029，998，979，965，950，816(烯键)；788，744

EI-MSm/z(％)：471(M-H⁺：100)，453(M-H⁺：55.0)，441(M-H⁺：80.0)，

425(M-H⁺：92.0)，407(M-H⁺：100)

¹HNMR(DMSO-d₆，δ)：0.67～1.95(41H：-CH₂-，-CH＜，-CH₃)；2.21(1H：-CH₂-)； 2.88～3.00(2H：-CH＜)；4.32～4.71(2H：-OH)；5.20(1H：-CH＜)；12.01(1H：-COOH) ¹³CNMR(DMSO-d₆，δ)：38.17(C-1)，27.02(C-2)，76.89(C-3)，38.42(C-4)， 54.97(C-5)，18.00(C-6)，32.70(C-7)，38.96(C-8)，46.23(C-9)，36.63(C-10)， 22.90(C-11)，121.25(C-12)，143.98(C-13)，41.04(C-14)，35.21(C-15)， 72.98(C-16)，47.30(C-17)，40.10(C-18)，46.38(C-19)，30.26(C-20)， 34.69(C-21)，31.50(C-22)，28.28(C-23)，16.08(C-24)，15.25(C-25) 16.85(C-26)，26.50(C-27)，178.24(C-28)，32.92(C-29)，24.20(C-30)。

以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1刺囊酸对家兔脂代谢紊乱的影响

材料和方法

动物：纯种日本大耳白兔，1级，雄性。3月龄，1.5～2.0kg/只。

药品：自制刺囊酸EA(由实施例1的方法制备，含量98.5％)，纯白色 粉末；血脂康，由北京北大维信生物科技有限公司生产。

仪器：全自动血液生化分析仪(瑞士Roche Integra 400 Plus)；TGL-16G 离心机；AB 104-N电子天平；BP211D电子天平。

方法：动物适应性喂养10日后，取40只动物给予高脂饲料(由1％胆 固醇+5％炼制猪油+10％蛋黄粉+84％基本饲料组成)喂养，另取6只动物给 予基本饲料喂养。饲料喂养15日后，空腹经耳中动脉采血，离出血清，分别 测定其各项血脂指标。在40只给予高脂饲料的动物中，根据TC含量，选取 30只动物进行区组随机分组，共分5组，每组6只；给予基本饲料的6只动 物作为空白对照组。分组后，各组给予基本饲料喂养，按组别情况表开始灌 胃给药，组别情况为EA低剂量组(6mg/kg)、EA中剂量组(12mg/kg)、EA高 剂量组(24mg/kg)、血脂康组(0.8/g/kg)、模型组、空白对照组。给药周期为4 周。实验数据用SPSS 13.0统计软件包进行处理，计量资料以均数±标准差 表示，多组间比较采用随机区组设计资料的方差分析，组与组之 间的两两比较采用SNK-q检验。

结果：

各组动物分别于给药前、末次给药后24h空腹采血测定其总胆固醇(TC)、 甘油三酯(TG)含量并进行统计，见表1。

表1各组药物对血清TC、TG的影响

注：^*与模型组相比，均数的差异有统计学意义(P＜0.05)

表1中实验各组药物对血清TC影响的结果显示，刺囊酸各剂量组均有 不同程度调节脂代谢紊乱家兔血清TC的疗效，其中刺囊酸中、高剂量组与 模型组比较有明显差异(P＜0.05)；刺囊酸各组与血脂康组之间比较无明显 差异(P＞0.05)。

表1中实验各组药物对血清TG影响的结果显示，刺囊酸各剂量组均有 不同程度调节脂代谢紊乱家兔血清TG的疗效，其中刺囊酸中、高剂量组与 模型组比较有明显差异(P＜0.05)；刺囊酸各组与血脂康组之间比较无明显 差异(P＞0.05)。

综上所述，刺囊酸能够降低家兔脂代谢紊乱模型下升高的血清TC和血 清TG的作用，具有明显调节改善家兔脂代谢紊乱的疗效，并具有量效关系。

试验例2刺囊酸对家兔动脉粥样硬化预防作用

材料和方法

动物：纯种日本大耳白兔，1级，雄性。3月龄，1.5～2.0kg/只。

药品：自制刺囊酸EA(由实施例1的方法制备，含量98.5％)，纯白色 粉末；血脂康，由北京北大维信生物科技有限公司生产。牛血清白蛋白(BSA) 由美国sigma公司生产。

仪器：全自动血液生化分析仪(瑞士Roche Integra 400Plus)；TGL-16G 离心机；AB 104-N电子天平；BP211D电子天平；电动玻璃匀浆机DY89-II。

方法：动物适应性喂养10日后，将42只动物进行完全随机分组。组别 情况为EA低组(12mg/kg)、EA高组(24mg/kg)、血脂康组(0.8g/kg)、模型组， 每组9只；空白对照组6只。分组后，各给药组和模型组每日给予高脂饲料 (由1％胆固醇+5％炼制猪油+10％蛋黄粉+84％基本饲料组成)喂养，空白 组给予基本饲料喂养，同时按分组情况开始灌胃给药，周期为12周。期间给 药第4周末，经兔耳缘静脉一次性注射10％BSA 200mg/kg，促进动物AS 模型形成。实验数据用SPSS 13.0统计软件包进行处理，计量资料以均数±标 准差表示，多组间比较采用完全随机设计资料的单因素方差分析， 组与组之间的两两比较采用SNK-q检验；非参数资料数据统计采用 Kruskal-wallis H检验，组与组之间的两两比较采用Nemenyi法检验。

结果：

1、对血清脂质含量的影响

实验各组动物于末次给药24h后，空腹采血测定其总胆固醇(TC)、甘油 三酯(TG)含量并进行统计，见表2。

表2各给药组对血清脂质含量的影响

注：^*与模型组相比，均数的差异有统计学意义(P＜0.05)；

^**与模型组相比，均数的差异有统计学意义(P＜0.01)。

表2中实验各组药物对血清TC影响的结果显示，刺囊酸各剂量组均有 不同程度降低脂代谢紊乱家兔血清TC的疗效，刺囊酸高剂量组与模型组比 较有显著性差异(P＜0.01)，刺囊酸低剂量组与模型组比较有明显差异(P ＜0.05)；刺囊酸各组与血脂康组之间比较无明显差异(P＞0.05)。

表2中实验各组药物对血清TG影响的结果显示，刺囊酸各剂量组均有 不同程度降低脂代谢紊乱家兔血清TG的疗效，与模型组比较均有明显差异 (P＜0.05)；刺囊酸各组与血脂康组之间比较无明显差异(P＞0.05)。

从药物对血清脂质含量的影响可以看出，刺囊酸能够降低家兔动脉粥样 硬化模型下升高的血清TC和血清TG的作用，具有预防改善家兔脂代谢紊 乱的疗效。

2、对组织匀浆中脂质的影响

(1)实验各组动物于末次给药24h后处死，取主动脉做组织匀浆测定其脂 质含量并进行统计，见表3。

表3各给药组对主动脉组织匀浆中脂质的影响

注：^*与模型组相比，均数的差异有统计学意义(P＜0.05)

表3中实验各组药物对主动脉组织匀浆中TC影响的结果显示，刺囊酸 各组均有不同程度降低脂代谢紊乱家兔主动脉中TC含量的作用，与模型组 比较均有明显差异(P＜0.05)；各刺囊酸组与血脂康组比较无明显差异(P ＞0.05)。

表3中实验各组药物对主动脉组织匀浆中TG影响的结果显示，刺囊酸 组也均有不同程度降低脂代谢紊乱家兔主动脉中TG含量的作用，刺囊酸高 剂量组与模型组比较有明显差异(P＜0.05)；刺囊酸各组与血脂康组比较无 明显差异(P＞0.05)。

从药物对主动脉组织匀浆中脂质含量的影响可以看出，刺囊酸具有降低 主动脉中脂质含量的作用，表现为改善主动脉因高脂饮食导致的粥样硬化作 用。

(2)实验各组动物于末次给药后24h处死，取肝脏做组织匀浆测定其脂质含 量并进行统计，见表4。

表4各给药组对肝脏组织匀浆中脂质的影响

注：^*与模型组相比，均数的差异有统计学意义(P＜0.05)；

表4中实验各组药物对肝脏组织匀浆中TC影响的结果显示，刺囊酸各 组均有不同程度降低脂代谢紊乱家兔肝脏组织中TC含量的作用，与模型组 比较均有明显差异(P＜0.05)；与血脂康组比较无明显差异(P＞0.05)。

表4中实验各组药物对肝脏组织匀浆中LDL-C影响的结果显示，刺囊酸 各组也均有不同程度降低脂代谢紊乱家兔肝脏组织中LDL-C含量的作用，与 模型组比较均有明显差异(P＜0.05)；与血脂康组比较无明显差异(P＞0.05)。

从药物对肝脏组织匀浆中脂质含量的影响可以看出，刺囊酸具有降低肝 脏组织中胆固醇含量的作用，表现为抑制肝脏组织中胆固醇的合成。