(二氢)吡咯并2,1-a异喹啉类

摘要

本发明涉及通式(I)的5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉和吡咯并[2，1-a]异喹啉衍生物

说明书

本发明涉及5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉和吡咯并[2，1-a]异喹啉衍生物、包含它们的药物组合物和所述化合物在制备用于治疗不育的药物中的应用。

促性腺素类适用于各种身体功能的重要功能包括代谢、体温调节和生殖程序。促性腺素类对特异性生殖细胞类型起作用以引起卵巢和睾丸分化和类固醇生成。例如，垂体促性腺激素FSH(促卵泡激素)在刺激卵泡发育和成熟中起中枢作用，而LH(促黄体激素)诱导排卵[Sharp，R.M.Clin Endocrinol.33，787-807(1990)；Dorrington 和Armstrong，Recent Prog.Horm.Res.35，301-342(1979)]。目前，FSH在临床上应用于促排卵，即用于停止排卵的不育女性体外授精(IVF)的卵巢超刺激[Insler，V.，Int.J.Fertility 33，85-97(1988)，Navot和Rosenwaks，J.Vitro Fert.Embryo Transfer 5，3-13(1988)]以及男性性腺功能减退症和男性不育。

促性腺素FSH在促性腺素释放素和雌激素影响下从垂体前叶释放和在妊娠过程中从胎盘释放。在女性中，FSH对促进卵泡发育的卵巢起作用并且是调节雌激素分泌的主要激素。在男性中，FSH负责输精管的完整性并且对支持细胞起作用以支持配子发生。纯化的FSH在临床上用于治疗女性不育和一些类型的男性精子发生失败。可以从人尿源中分离用于治疗目的的促性腺素类并且具有低纯度[Morse等人，Amer.J.Reproduct.Immunol.and Microbiology 17，143(1988)]。或者，可以将它们制备成重组促性腺素类。重组人FSH是商购的并且用于辅助生殖[Olijve等人Mol.Hum.Reprod.2，371-381(1996)；Devroey等人Lancet 339，1170-1171(1992)]。

FSH激素的作用由特异性膜受体介导，该受体是G-蛋白偶联受体大家族的成员。这些受体由具有七跨膜区域的单一多肽组成并且能够与Gs蛋白发生相互作用，从而导致腺苷酸环化酶活化。

FSH受体(FSHR)是卵泡生长过程中高度特异性靶标并且仅在卵巢内表达。低分子量FSHR激动剂可以用于与天然FSH相同的临床目的，即用于治疗不育和在进行体外受精时的卵巢超刺激。

目前在国际申请WO 2003/004028(AKZO NOBEL N.V.)中披露了一些作为FSHR调节物质的具有激动或拮抗特性的四氢喹啉衍生物。

具有激动剂特性的低分子量FSH模拟物披露在下列文献中：国际申请WO 2000/08015(Applied Research Systems ARS Holding N.V.)；WO 2004/031182(Applied Research Systems ARS Holding N.V.)；WO 2002/09706(Affymax Research Institute)；WO 2005/087765(Arena Pharmaceuticals，Inc)；WO 2006/117368(AKZO NOBEL N.V.)；WO 2006/117370(AKZO NOBEL N.V.)；WO 2006/117371(AKZO NOBELN.V.)和WO 2006/117023(AKZO NOBEL N.V.)。

显然对选择性活化FSH受体的低分子量激素模拟物存在需求。

本发明的目的在于提供5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉和吡咯并[2，1-a]异喹啉衍生物。

文献中已知一些5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉类及其不饱和类似物吡咯并[2，1-a]异喹啉类。

C.Bailly，Curr.Med.Chem.Anti-Cancer Agents，4，363-387(2004)和Fan，H.等人Chem.Rev.，108，264-287(2008)中综述了lamellarins，即多环芳香吡咯生物碱类家族，其中一些包含5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉或吡咯并[2，1-a]异喹啉骨架(参见结构A和B)。这些化合物的一些显示对体外肿瘤细胞的有效细胞毒性活性。

在D.Pla等人的J.Med.Chem.，49，3257(2006)中描述的开链Lamellarin D类似物包含通式(C)并且在低微摩尔范围显示细胞毒性。

5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉类和吡咯并[2，1-a]异喹啉类的式(D)的和式(E)描述在下列文献中：WO 2006/089815；WO 2006/075012；WO 2005/002579；WO 2005/003129；WO 2005/003130；WO 2003/051877；WO 2003/014115；WO 2003/014116；WO 2003/014117和WO 2002/48144。报道了这些化合物抑制磷酸二酯酶10A(PDE10A)。

本发明提供了通式I的化合物或其药学可接受的盐。

式I

在该式中，R¹-R¹⁰具有如下定义：

C5-C6位置上的键(式I中的虚线)可以是饱和或不饱和的。

R¹是卤素、氰基、(1-6C)烷基、(2-6C)烯基、(2-6C)炔基、(3-6C)环烷基、(5-6C)环烯基或苯基或(1-5C)杂芳基，所述苯基和杂芳基部分各独立地任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代。

R²是H、氰基、卤素、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基、羟基(1-4C)烷基、甲酰基、(1-4C)烷基羰基或C＝N-OH、C＝N-OCH₃。

R³是R¹⁵，R¹⁶-氨基或

R³是(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(二)[(1-4C)烷基]氨基(1-4C)烷基或

R³是(2-6C)杂环烷基(1-4C)烷基，其中(2-6C)杂环烷基部分可以任选被(1-4C)烷基羰基或(3-6C)环烷基羰基取代或

R³是选自如下的基团：

R⁷是H、卤素或甲基。

R⁸是H、卤素、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基或羟基。

R⁹是H、甲酰基、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、(2-6C)炔基、(3-6C)环烷氧基、(2-6C)杂环烷氧基、(2-5C)杂芳基氧基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羧基、(1-6C)烷基羰基、(1-4C)烷氧羰基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基、(2-6C)杂环烷基羰基、(二)[(1-4C)烷基]氨基、(2-6C)杂环烷基羰基氨基、(2-5C)杂芳基羰基氨基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基氨基、(1-4C)烷氧羰基氨基、(二)[(1-4C)烷基]氨基磺酰基氨基、(1-4C)烷基磺酰基氨基、1-咪唑烷基-2-酮、3-唑烷基-2-酮或1-吡咯烷基-2-酮，或

R⁹是(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、(2-6C)烯基、(1-6C)烷基羰基氨基或(2-6C)杂环烷基、(2-5C)杂芳基氨基羰基，所述烷基、烷氧基、烯基、杂环烷基和杂芳基各独立地任选被一个或多个选自R¹⁴的取代基取代，

或R⁹是(1-5C)杂芳基、苯基或苯氧基，所述杂芳基、苯基和苯氧基各独立地任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代。

R¹⁰是H、甲氧基、卤素或甲基。

其他R基团之一上举出的R¹¹-R¹⁸如下所定义：

R¹¹是H、(1-6C)烷基或(3-4C)烯基。

R¹²是(1-4C)烷基羰基或(3-6C)环烷基羰基，它们均任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代。

R¹³是羟基、氨基、卤素、硝基、三氟甲基、氰基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷硫基或(二)[(1-4C)烷基]氨基。在R¹³每次出现时，某一基团的定义可以各自独立地选择。

R¹⁴是羟基、氨基、卤素、叠氮基、氰基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷硫基、(二)[(1-4C)烷基]氨基、(3-6C)环烷基、(2-6C)杂环烷基、(1-4C)烷基羰基氨基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基氨基、(1-4C)烷基磺酰基氨基、(1-4C)烷氧羰基氨基、(1-4C)烷基羰基、(1-4C)烷氧羰基、(1-4C)烷基磺氧基(sulfoxy)、(2-6C)杂环烷氧基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基、(1-4C)烷基磺酰基、(3-6C)环烷基羰基氨基和[(1-4C)烷基][(1-4C)烷基羰基]氨基。

R³上的R¹⁵和R¹⁶独立地选自H或(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(2-6C)杂环烷基或(二)[(1-4C)烷基]氨基，它们均任选被羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷基羰基、(1-4C)烷氧羰基、(3-6C)环烷基羰基、(二)[(1-4C)烷基]氨基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基或(二)[(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基]氨基取代。

或者，R³上的R¹⁵，R¹⁶-氨基可以连接成(3-8C)杂环烷基环，其中所述环可以任选被R¹⁸取代。

或者，R³上的R¹⁵，R¹⁶-氨基还可以连接成(4-8C)杂环烷基环或(4-6C)杂环烯基环，所述环均饱和一个氮且所述环各独立地任选被一个或多个选自R¹⁷的取代基取代。

如其他R基团之一举出的R¹⁷和R¹⁸如下所定义：

R¹⁷是羟基、氨基、卤素、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(二)[(1-4C)烷基]氨基、(1-4C)烷基羰基氨基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基氨基、(1-4C)烷基磺酰基氨基、(1-4C)烷氧羰基氨基、(1-4C)烷基sulfoxy、(3-6C)环烷基羰基氨基、[(1-4C)烷基][(1-4C)烷基羰基]氨基，或R¹⁷是苯基和(2-5C)杂芳基，它们均任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代。

R¹⁸是(1-4C)烷基、(3-6C)环烷基、(4-6C)环烯基羰基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基、(1-4C)烷基磺酰基、(二)[(1-4C)烷基]氨基磺酰基、(2-6C)杂环烷基磺酰基、(2-5C)杂芳基、苯基羰基、(1-4C)烷基羰基、(3-6C)环烷基羰基、(2-5C)杂芳基羰基、苯基、苯基磺酰基、(2-5C)杂芳基磺酰基和(2-6C)杂环烷基羰基，其中(环)烷基和(杂)芳基部分可以被一个或多个选自R¹³的取代基取代。

本发明的5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉和吡咯并[2，1-a]异喹啉衍生物是有效的FSH受体活化剂并且可以用于与天然FSH相同的临床目的，因为它们表现出激动剂特性，其中优点在于它们可以通过合成方式制备、可以展示出改变的稳定性并且可以以不同方式给药。

因此，本发明的FSH-受体激动剂可以用于治疗生育障碍，例如受控的促排卵和IVF过程。

定义中使用的术语(1-4C)烷基意指具有1-4个碳原子的支链或无支链烷基，是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲-丁基和叔-丁基。

术语(1-6C)烷基意指具有1-6个碳原子的支链或无支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔-丁基、n-戊基和n-己基。优选(1-5C)烷基，最优选(1-4C)烷基。

术语(1-4C)烷基羰基意指烷基羰基，其中烷基包含1-4个碳原子具有与上述所定义的相同的含义。

术语(1-4C)烷基磺酰基意指烷基磺酰基，其中烷基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(1-4C)烷硫基意指具有1-4个碳原子的烷硫基，其中烷基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(1-4C)烷基磺氧基(Sulfoxy)意指烷基磺氧基，其中烷基包含1-4个碳原子具有与上述所定义的相同的含义。

术语(1-4C)烷基磺酰基氨基意指烷基磺酰基氨基，其中烷基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(1-6C)烷基羰基氨基意指烷基羰基，其中烷基包含1-6个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(2-6C)烯基意指具有2-6个碳原子的支链或无支链烯基，例如乙烯基、2-丁烯基和n-戊烯基。

术语(2-6C)炔基意指具有2-6个碳原子的支链或无支链炔基，例如乙炔基、丙炔基和n-戊炔基。

术语(3-6C)环烷基意指具有3-6个碳原子的环烷基，例如环丙基、乙基环丙基、环丁基、甲基环丁基、环戊基和环己基。

术语(3-6C)环烷基羰基意指环烷基羰基，其中环烷基包含3-6个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(5-6C)环烯基意指具有5-6个碳原子的环烯基，是环戊烯基、甲基环戊烯基和环己烯基。

术语(5-6C)环烯基羰基意指环烯基羰基，其中环烯基包含5-6个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(2-6C)杂环烷基意指具有2-6个碳原子、优选3-5个碳原子的杂环烷基，其包括1-3个选自N、O和/或S的杂原子，如果切实可行可以通过氮原子连接或可以通过碳原子连接。优选的杂原子是N或O。优选的杂原子数是一个或两个。最优选的是哌啶-1-基、吗啉-4-基、吡咯烷-1-基和哌嗪-1-基。

术语R³上的(4-8C)杂环烷基意指具有4-8个碳原子、优选4-5个碳原子的通过氮连接的杂环烷基，其包括一个氮。最优选的是哌啶-1-基和吡咯烷-1-基。

术语R³上的(3-8C)杂环烷基意指具有的3-8个碳原子、优选4-5个碳原子的杂环烷基，其包括2-3个选自N、O和/或S的杂原子，如果切实可行可以通过氮原子连接或可以通过碳原子连接。优选的杂原子是N或O。优选的杂原子数是两个，例如N，N或N，O。更优选[1，4]二氮杂环庚烷基。

术语(2-6C)杂环烷氧基意指2-6个碳原子的具有与上述所定义的相同的含义的杂环烷基，其通过碳原子与环外氧原子连接。

术语(2-6C)杂环烷基(1-4C)烷基意指杂环烷基烷基，其中杂环烷基包含2-6个碳原子、优选3-5个碳原子，具有与上述所定义的相同的含义且其中烷基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(2-6C)杂环烷基羰基意指杂环烷基羰基，其中杂环烷基包含2-6个碳原子、优选3-5个碳原子，并且与上述所定义的含义相同。

术语(2-6C)杂环烷基磺酰基意指杂环烷基磺酰基，其中杂环烷基包含2-6个碳原子、优选3-5个碳原子，并且与上述所定义的相同。

术语(2-6C)杂环烷基羰基氨基意指杂环烷基羰基氨基，其中杂环烷基包含2-6个碳原子、优选3-5个碳原子，并且与上述所定义的相同。

术语(4-6C)杂环烯基意指杂环烯基，其具有4-6个碳原子、优选3-5个碳原子且包括1-3个选自N、O和/或S的杂原子，如果切实可行可以通过氮原子连接或可以通过碳原子连接。优选的杂原子是N或O。优选的杂原子数是一个或两个。

术语(1-5C)杂芳基意指具有1-5个碳原子和1-4个选自N、O和S的杂原子的芳族基团，如咪唑基、噻二唑基、吡啶基、噻吩基、四唑基、唑基、咪唑基、吡唑基或呋喃基。优选的杂原子数是一个或两个。优选的杂芳基是噻吩基、唑基、咪唑基、吡唑基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基和吡啶基。最优选噻吩基、呋喃基和吡啶基。如果切实可行(1-5C)杂芳基可以通过碳原子或氮连。

术语(2-5C)杂芳基意指具有2-5个碳原子和1-3个选自N、O和S的杂原子的芳族基团，如咪唑基、噻二唑基、吡啶基、噻吩基或呋喃基。优选的杂芳基是噻吩基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基和吡啶基。如果切实可行(2-5C)杂芳基可以通过碳原子或氮连。

术语(2-5C)杂芳基羰基意指杂芳基羰基，其中杂芳基包含2-5个碳原子并且具有与上述所定义的相同和优选含义。

术语(2-5C)杂芳基氨基羰基意指杂芳基氨基羰基，其中杂芳基包含2-5个碳原子并且具有与上述所定义的相同和优选含义。

术语(2-5C)杂芳基磺酰基意指杂芳基磺酰基，其中杂芳基包含2-5个碳原子并且具有与上述所定义的相同和优选含义。

术语(2-5C)杂芳基氧基意指杂芳基氧基，其中杂芳基包含2-5个碳原子并且与上述所定义的含义和优选情况相同，通过碳原子与环外氧原子连接。

术语(1-4C)烷氧基意指具有1-4个碳原子的烷氧基，烷基部分具有与上述所定义的相同含义。优选(1-3C)烷氧基。

术语(1-4C)烷氧羰基意指烷氧羰基，其中烷氧基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。优选(1-2C)烷氧羰基。

术语(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基意指烷氧基烷基，其中烷氧基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义，其连接在包含1-4个碳原子的具有与上述所定义的相同的含义的烷基。

术语(1-4C)烷氧羰基氨基意指烷氧羰基氨基，其中烷氧基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

如本文所使用的术语羟基(1-4C)烷基意指羟基烷基，其中烷基包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

如本文所使用的术语(二)[(1-4C)烷基]氨基意指氨基，其被烷基单取代或二取代，所述烷基各包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同含义。

术语(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基意指(二)烷基氨基羰基，其中烷基各包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(二)[(1-4C)烷基]氨基磺酰基意指(二)烷基氨基磺酰基，其中烷基各包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基氧基意指(二)烷基氨基羰基氧基，其中烷基各包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基氨基意指(二)烷基氨基羰基氨基，其中烷基各包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

如本文所使用的术语(二)(1-4C)烷基氨基(1-4C)烷基意指(二)烷基氨基，其中烷基各包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义，通过氨基与包含1-4个碳原子的具有与上述所定义的相同的含义的烷基连接。

术语(二)[(1-4C)烷基]氨基磺酰基氨基意指(二)烷基氨基磺酰基氨基，其中烷基各包含1-4个碳原子并且具有与上述所定义的相同的含义。

术语卤素意指氟、氯、溴或碘。

术语“取代的”意指指定原子上的一个或多个氢被选自所示基团替代，条件是不超过在存在情况下指定原子的正常化合价并且所述取代产生稳定的化合物。只要这种组合物产生稳定的化合物，则允许取代基/或变量的组合。所谓“稳定的化合物’或“稳定的结构”是指足够稳定以从反应混合物中保持分离至有用纯度存在并且配制成有效治疗剂的化合物。

术语“任选取代的”意指被指定基团、基或部分的任选取代。

在上述具有多官能团的定义中，连接点是最后的基团。

术语药学可接受的盐表示在医学判定范围内适用于接触人和低等动物组织、但没有不适当毒性、刺激性、过敏反应等并且相当的合理利益/风险比这样的盐。药学可接受的盐是本领域众所周知的。在本发明化合物最终分离和纯化过程中可以得到它们，或可以通过使游离碱官能团与适合的无机酸或有机酸反应得到，所述无机酸例如盐酸、磷酸或硫酸，所述有机酸例如抗坏血酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、马来酸、丙二酸、富马酸、乙醇酸、琥珀酸、丙酸、乙酸、甲磺酸等。酸官能团可以与有机或无机碱如氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化锂反应。

本发明在一个方面中涉及式I的化合物，其中C5-C6键是饱和的。

本发明还涉及式I的化合物，其中R¹是(1-5C)杂芳基，其任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R²是H、氰基、卤素、(1-4C)烷氧基(1-4C)烷基或羟基(1-4C)烷基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R²是H。

另一个方面中涉及化合物，其中R³是R¹⁵，R¹⁶-氨基或

在本发明的另一个方面中涉及化合物，其中R³是R¹⁵，R¹⁶-氨基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R⁷是H。

在本发明还涉及化合物，R⁸是(1-4C)烷氧基或羟基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R⁹是卤素、氰基、硝基、(2-6C)炔基、(3-6C)环烷氧基、(2-5C)杂环烷氧基、(2-5C)杂芳基氧基、(二)[(1-4C)烷基]氨基羰基、(2-6C)杂环烷基羰基或(二)[(1-4C)烷基]氨基。R⁹还可以是(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、(2-6C烯基、(1-6C)烷基羰基氨基或(2-5C)杂芳基氨基羰基。这些后面的基团均可以独立地任选被一个或多个选自R¹⁴的取代基取代。或者，R⁹可以是任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代的(1-5C)杂芳基或苯氧基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R⁹是卤素、氰基、硝基、(2-6C)炔基或(二)[(1-4C)烷基]氨基，或

R⁹是(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、(2-6C)烯基或(1-6C)烷基羰基氨基，所述各基团独立地任选被一个或多个选自R¹⁴的取代基取代，或

R⁹是任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代的(1-5C)杂芳基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R⁹是(2-6C)炔基或其中R⁹是(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、(2-6C)烯基或(1-6C)烷基羰基氨基，所述各基团独立地任选被一个或多个选自R¹⁴的取代基取代或其中R⁹是任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代的(1-5C)杂芳基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R¹⁰是H。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R¹是(1-5C)杂芳基，其任选被一个或多个选自R¹³的取代基取代，R²是H，R³是R¹⁵，R¹⁶-氨基，R⁷是H，R⁸是(1-4C)烷氧基，R¹⁰是H。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R¹⁴是(2-6C)杂环烷基、羟基、(1-4C)烷氧基或(二)[(1-4C)烷基]氨基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R¹⁵和R¹⁶可以独立地选自(1-6C)烷基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R³是1，4二氮杂环庚烷-1-基，其任选被(1-4C)烷基羰基或(3-6C)环烷基羰基取代。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R¹⁵是甲基，R¹⁶是叔-丁基。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其中R³是2，2-二甲基吡咯烷-1-基。

本发明还涉及这样的化合物，其中如上文所定义的本发明各方面中R¹-R¹⁸的所有具体定义均出现在式I的(二氢)吡咯并[2，1-a]异喹啉化合物定义内的任意组合中。

本发明的所有化合物均具有小于10μM的EC₅₀。

在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其具有小于100nM的EC₅₀。在本发明的另一个方面中涉及式I的化合物，其具有10nM以下的EC₅₀。

本发明还涉及实施例1-4、7c、7d、8、10、11、12a、12b、14a、14d、16、20、21、36、39-43、51、55、58b、58c、59、61-62、64、65d、65f、69、70d、81-84、85b、91a、91d、92-94、96-98、100、101、104、111a、111b、121a、121b、122和123中所述的化合物。

本发明的另一个方面涉及实施例1、2、7d、14a、58b、91d、100和123中所述的化合物。

术语EC₅₀意指与化合物可得到的最大效果相比引起半数最大(50％)刺激的测试化合物浓度。例如，可以在用FSH受体基因转染并且与用指导报道基因表达的cAMP响应元件/启动子共转染的细胞系中测定该值。可以使用软件程序例如MathIQ(2.0版，ID Business Solutions Limited)测定该值。

本发明不包括化合物3-乙酰基-吡咯并[2，1-a]异喹啉-1-腈。

放弃的内容涉及数据库CA，登记号1994：655585中披露的内容。

5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉和吡咯并[2，1-a]异喹啉化合物的适合的制备方法概括如下。

文献中已知5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类。用于具体类似物的化学手段包括由吡咯酯类的总体合成，然后是依次溴化/有机金属-介导的芳基化反应。其他合成方法基于Pictet-Spengler型化学，产生取代的1-亚甲基-四氢异喹啉类，然后是Michael-型缩合，得到需要的二氢-吡咯并异喹啉衍生物或进行1，3-双极环加成反应。一个报道描述了通过乙炔类环加成至3，4-二氢-异喹啉N-氧化物、然后通过中间形成的Δ4-异唑啉的热重排合成几种二氢-吡咯并异喹啉类，得到作为最相关的(参见下文)化合物1-苯基-8，9-二甲氧基-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯。

就相关文献而言参见：M.A1varez等人，Tetrahedron Lett.，46，2041(2005)；M.Alvarez等人，J.Org.Chem.，70，8231(2005)；S.Handy，J.Org.Chem.，69，2362(2004)；M.Vennemann等人，(Altana Pharma A.G)WO 05/003130；Niewoehner等人(Bayer AG)，WO 02/48144；Banwell等人WO 99/67250.W.Anderson等人，J.Med.Chem.，27，1321(1984)；S.Eguchi等人，Tetrahedron 52，12049(1996)。

我们在本文中描述了迄今为止未知的式I的化合物，更具体地说是5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酰胺类、1-(5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-烷基-1-酮类、环烷基-(5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮类和相关的2-氨基-1-(5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-乙酮类及其不饱和类似物吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酰胺类、1-(吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-烷基-1-酮类、环烷基-(吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮类和2-氨基-1-(吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-乙酮类(具有R3＝烷基或环烷基的式I、I-a和I-b)。

我们的目的在于新的特定取代的5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类，可以通过乙炔类与衍生自四氢异喹啉-1-甲酸类(III)的更多活性反应中间体的1，3-双极环加成反应制备它们。这种化学原理由R.Huisgen等人，Chem.Ber.，103，2611(1970)描述并且进一步以F.Hershenson，J.Org.Chem.，40，740(1975)为典型。

就我们的目的而言(即在C-3上引入羰基)，通过下列步骤改进该方法：与草酸酯类(IV)进行1，3-双极环加成反应，直接得到期望的3-羧酸酯类(V)，作为例如酰胺类(I-a)的前体。根据公布的方法(S.Bajusz等人，WO 93/12091)、在由适当取代的苯乙胺类(II)与乙醛酸的Bishler-Napieralski-型闭环中合成通式III的中间体四氢异喹啉-1-甲酸类(制备草酸酯类IV所需的)。

为了合成具体化合物I-a和I-b(参见下文)，使用上述总体手段，从而利用了定制的官能团化中间体。这意味着根据所需取代基R1-R10的不同(其中R-编号意指骨架上的原子编号)，所需取代基在合成开始时引入在合适的位置(即R1＝R1’，R2＝R2’等)或经判断在式I产物合成过程中方便的任意阶段引入。就此而言，首先引入适合的可替代选择官能团，如R1’-R10’所示，允许按照一种或多种操作将它们转化成期望的R1-R10，其中R1-R10具有与上述所定义的相同含义。

通常可以将芳族环上的取代基(R7-R10)已引入苯乙胺前体(II)，从而在另一个合成过程中以不改变的形式携带它们。通式结构II的适合苯乙胺是商购的或易于通过使适当取代的苯的氯甲基化、然后转化成氰基甲基衍生物和还原腈官能团制备，得到期望的苯乙胺类。苯乙胺类(II)还可以通过根据文献充分记录的方法使适当取代的芳族醛类与硝基烷类的Henry反应、然后被氢化物试剂(LiAlH₄、硼烷等)还原得到。或者，可以通过在合成方法(参见下文)中另外操作的潜在官能团(如上所述)引入所需的R7-R10。

然后有效地在下述三步法中将所述苯乙胺类(II)随后转化成中间体1，2，3，4-四氢异喹啉甲酸类(III)：首先将苯乙胺类(II)转化成氨基甲酸酯衍生物(VII)，然后与乙醛酸反应(得到VIII)，然后使氨基甲酸酯保护基脱保护。此处优选使用烯丙基氧基(Alloxy)羰基(Alloc)(参见VII-a→VIII-a→III)，因为其易于除去。Alloc-保护和除去方法是本领域技术人员众所周知的。就在还原条件下最终脱保护而言是有害的，可替代氨基甲酸酯的保护基如9-芴基-甲氧羰基(Fmoc)也是有效的。

生成通式III化合物上存在的四氢异喹啉系统的可替代的手段包括使苯乙胺类(II)与乙基草酰氯反应，得到草酰胺类IX，其可以在脱水条件下用强酸例如甲磺酸和五氧化磷处理经历环化成二氢异喹啉类(X)。然后可以例如通过在酸性条件下用氰基硼氢化钠还原将通式X的衍生物还原成相应的四氢异喹啉类(XI)。本领域技术人员众所周知的在标准条件下四氢喹啉类(XI)皂化可以提供通式III的衍生物。

为了改变通式I(或V)衍生物的苯基部分上的取代基R7-R10，卤原子(优选溴和碘)可以用作掩蔽官能团(R7’-R10’)，其在合成的后期阶段被转化成各种靶取代基(R7-R10)，例如通过锂化，然后与亲电子试剂反应，生成羧酸类、醛类(通过随后的维蒂希反应用作烯烃类的前体，或通过还原氨基化用作胺类的前体)或羟基甲基(和衍生的醚类和酯类)。

或者，芳基卤(R7’-R10’)可以用作众所周知的有机金属反应的反应底物，如Ullmann、Suzuki-、Stille-、Sonogashira-、Heck-和Buchwald方案，生成新的碳-碳单键、双键和三键、碳氮键(苯胺衍生物)和腈类。它们可以再用作进一步官能化的底物，如一-和二羟基化(由烯类)或转化成三唑类(由乙炔类；“点去化学(click chemistry)”)和四唑类(由腈类)。

例如，通过用亲电子试剂如BCl₃选择性裂解异丙氧基醚类(R7’-R10’)解蔽酚OH基，然后转化成反应性磺酸酯类(例如三氟甲磺酸酯类)能够按照与上述举出的方案类似的方式由卤化芳基为起始通过杂芳基硼酸或有机锡衍生物连结杂环结构。芳基卤(R7’-R10’)转化成硼酸(通过锂化或过渡金属为媒介的硼化)、然后氧化提供了引入可替代氧的官能团的方式，这是本领域技术人员众所周知的。来源于脱保护烷氧基醚类的酚官能团也可以用于通过Cu-为媒介的与硼酸和(杂)芳基卤偶合形成芳基-芳基和芳基-杂芳基醚类。这些反应的含义和应用在如下概括的一些选择的文献来源中得到充分解释。

就近期参考文献而言，例如，参见：A.Suzuki，Chem.Comm.，4759(2005)；Bach等人，Tetrahedron，61，2245(2005)；R.Rossi等人，Synthesis，2419(2004)。

酚三氟甲磺酸酯类(R7’-R10’)可以(类似地如芳基溴所述，参见上文)用于将胺和酰胺官能团(R7-R10)引入苯环上，通过钯为媒介的氨基甲酸酯类、甲酰胺类、亚胺类和甲硅烷基酰胺类的偶合进行，该过程称作Buchwald-Hartwig氨基化反应。或者，合成(R7’-R10’)早期阶段上引入的硝基能够制备通式结构I的引入了胺和酰胺官能团的靶分子。

通过1，3-双极环加成反应(IV→V)合成5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉骨架需要乙炔类(VI)作为反应剂。该步骤提供了引入期望的C-1和C-2取代基的可能性。

一般而言，这些反应可以以良好的区域选择性进行，其中大部分大取代基优选最终骨架的1位，条件是R1’/R2’明显不同。因此，可得到一定范围的通式结构V的产物，其中R1’＝(杂)芳基(如2-噻吩基、3-噻吩基、3-吡啶基等)，R2’＝H。如果R2’＝H，则随后与亲电子试剂如N-氯琥珀酰亚胺(NCS)或异氰酸氯磺酰酯反应，使得C1或CN被引入骨架的C2-位(V，R2’＝CN或C1)。

甲硅烷基化乙炔(VI-a)的应用提供了C1-甲硅烷基化5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(V，R1’＝三甲代甲硅烷基)，在酸处理和溴化时得到1-溴衍生物(V，R1’＝Br)。这能够合成各种通式V的1-取代的类似物，它们不易使用上述1，3-双极环加成得到；例如，由于难以得到适合的乙炔类VI的差的可用性或一些底物与反应条件不相容，例如制备二氢-吡咯并异喹啉类V，其中R1’＝氰基、乙炔基或乙烯基。按照与将取代基R7’-R10’加工成R7-R10所述类似方式(参见上文)，用(杂)芳基硼或(杂)芳基锡衍生物处理1-溴-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类得到1-(杂)芳基化5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(如1-唑基、1-噻唑基和1-吡啶基衍生物。

还可以通过由C-1上的适合官能团构建期望的杂环在R1上引入通过上述方法难以得到的杂环取代基。例如，通过相应1-溴化物(V，R1’＝Br)的氰化物取代得到的1-氰基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(V，R1’＝CN)可以用作例如通过与甲硅烷基叠氮化物缩合得到1-四唑基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类的物质。类似地，可以通过与三甲代甲硅烷基叠氮化物反应将1-乙炔基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(V，R1’＝乙炔基)转化成1-三唑并-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类。然后可以通过与亚硫酰氯和腙反应将通过IV与乙炔类VI-b反应得到的1-乙酰基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(V-b)修饰成例如1-噻二唑并-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(V，R1’＝5-噻二唑基)。

如果使用配有被保护醛官能团的乙炔类(例如VI-c)，则得到相应的5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(V-c)，将其进一步加工成通式结构I的衍生物，其在C-2上带有取代基，如肟、醛、氨基烷基、烯基、(烷氧基、羟基)烷基和炔基。

可以通过本领域技术人员众所周知的标准两步法将5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类(V)上C-3上的羧酸酯转化成相应的酰胺类I-a，所述的两步法包括用例如NaOH水溶液在适合溶剂例如二烷或THF皂化得到相应的3-甲酸类，然后与期望的胺在(商购)肽偶合剂如DCC、TBTU、HATU、EEDC等的存在下反应。或者，通过胺类的金属衍生物将通式结构V的乙酯类可以直接转化成相应的酰胺类I-a(文献中的反应称作为Bodroux反应)，但也可以应用变化形式；例如，参见Bassett等人，J.Chem.Soc.，1188(1954；Singh等人，TetrahedronLett.，321(1971))。引起C-3上酯-酰胺转化的阶段不一定是合成的最终阶段，但认为可以在概括的转化过程中的任何时刻实施。

或者，已经可以在四氢异喹啉中间体阶段已引入通式I-a化合物C-3上的酰胺官能团。例如，通式XI化合物与适当官能化一-酰胺化草酸衍生物(XIII)在本领域技术人员众所周知的标准肽偶合条件下反应(参见上文)，然后皂化剩余的乙酯部分，可以得到通式结构XII的草酰胺类。可以通过使适合的胺类与乙基草酰氯反应、然后在标准条件下皂化乙酯得到期望的通式XIII的草酸酰胺类。然后在如上所述的通式VI的适合官能化的乙炔类的存在下对草酰胺类XII进行1，3-双极环加成，可以得到期望的式I-a的衍生物。

C-5与C-6之间另一个双键的构建(参见5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉类转化成其芳族类似物吡咯并[2，1-a]异喹啉类)一般可以通过影响脱氢化/芳构化和本领域技术人员公知的试剂进行。2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(DDQ)优选用于该目的。

为了合成通式结构I-b的3-氨基甲基酮类，实际上，是上述举出的酰胺类I-a的C1类似物，所用的总体手段相当接近。通式XV化合物上存在的5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉骨架(就此而言，R3＝H而不是羧酸酯)易于通过N-甲酰基取代的四氢异喹啉-1-甲酸类(XIV)与乙酸酐和通式VI的适当被保护的乙炔类反应得到。为了在C-3上引入期望的官能团，首先进行与适当官能化酸衍生物的Friedel-Crafts-型酰化，产生通式XVI的化合物(X＝反应基团，如卤素)或通式XVII的化合(R3＝烷基或环烷基)。这种对吡咯类反应的实例详细记录在文献中；例如，参见M.Kakushima，等人，J.Org.Chem.，48，3214(1983)；R.M.Silverstein，等人，J.Org.Chem.，20，668(1955)。然后乙酮类XVI与适合的胺类反应可以得到通式结构I-b的衍生物。

本发明的化合物可以形成水合物或溶剂合物。本领域技术人员已知带电荷的化合物在用水冻干时形成水合种类或在具有适当有机溶剂的溶液中浓缩时形成溶剂化种类。本发明的化合物包括所举出化合物的前体药物、水合物或溶剂合物。

前体药物的讨论提供在T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)14，the A.C.S.Symposium Series 和Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche，ed.，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press中。术语“前体药物”意指在体内转化成式(I)化合物或该化合物的药学可接受的盐、水合物或溶剂合物的化合物(例如药物前体)。转化可以通过各种机制(例如通过代谢或化学过程)进行，例如通过在血液中水解。前体药物应用的讨论由T.Higuchi和W.Stella，“Pro-drugs as Novel Delivery Systems，”Vol.14，the A.C.S.Symposium Series 和Bioreversible Carriers in Drug Design，ed.Edward B.Roche，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987提供。

本发明的一种或多种化合物可以以与药学可接受溶剂例如水、乙醇等的非溶剂化和溶剂化形式存在，并且指定本发明包括溶剂化和非溶剂化形式。″溶剂合物″意指本发明化合物与一种或多种溶剂分子的物理结合。这种物理结合涉及离子和共价键合的不同程度，包括氢键。在一些实例中，溶剂合物能够分离，例如在一种或多种溶剂分子被掺入结晶固体的晶格中时。″溶剂合物″包括溶液相和可分离的溶剂合物。适合的溶剂合物的非限制性实例包括乙醇化物、甲醇化物等。″水合物″是一种溶剂合物，其中溶剂分子是H₂O。

式I的化合物可以形成也属于本发明范围的盐。除非另做陈述，否则本文涉及的式I的化合物应理解为包括涉及的其盐。本文所用的术语″盐″表示与无机酸和/或有机酸形成的酸式盐以及与无机碱和/或有机碱形成的碱式盐。此外，当式I的化合物包含碱性部分例如、但不限于吡啶或咪唑和酸性部分例如、但不限于羧酸时，可以形成两性离子(″内盐″)，并且包括在本文所用的术语术语″盐″范围内。优选药学可接受的(即无毒性、生理学可接受的)盐，不过，其他盐也是有用的。例如，可以通过使式I的化合物与一定量的酸或碱例如当量在介质中反应形成式I化合物的盐，所述介质例如一种盐沉淀的介质或含水介质，然后冻干。

式(I)的化合物可以包含不对称或手性中心，且由此以不同立体异构体形式存在。指定式(I)化合物的所有立体异构体形式及其混合物包括外消旋混合物构成本发明的组成部分。此外，本发明包括所有的几何和位置异构体。例如，如果式(I)的化合物掺入了双键或稠合环，则本发明范围内包括顺式-和反式-形式及混合物。

可以将非对映异构体混合物基于其理化差异、通过本领域技术人员众所周知的方法例如通过色谱法和/或分级结晶分离成其各非对映异构体。可以通过与适合旋光化合物(例如手性助剂例如手性醇或Mosher′s酰氯)反应将对映体混合物转化成非对映异构体混合物、分离非对映异构体并且将各非对映异构体转化成(例如水解)相应的纯对映体分离对映体。此外，式(I)的一些化合物可以是阻转异构体(例如取代的联芳基)并且认为是本发明的组成部分。还可以通过使用手性HPLC柱分离对映体。

还可能的情况是，式(I)的化合物可以以不同互变体形式存在，并且本发明范围内包括所有这种形式。此外，例如，本发明包括化合物的所有酮-烯醇和亚胺-烯胺形式形式。

关注本发明化合物(包括化合物的盐、溶剂合物、酯类和前体药物以及前体药物的盐、溶剂合物和酯类这样的化合物)的所有立体异构体(例如几何异构体、光学异构体等)，例如因不同取代基上不对称碳而存在这样的化合物包括对映体形式(甚至可以在没有不对称碳的存在下存在)、旋转形式、阻转异构体和非对映异构体形式均属于本发明的范围，因为它们是位置异构体。例如，本发明化合物的各立体异构体基本上可以不含其他异构体或可以混合成例如外消旋物或与所有其他或其他选择的立体异构体混合。本发明的手性中心可以具有如IUPAC1974推荐定义的S或R构型。术语″盐″、″溶剂合物″、“酯”、″前体药物″等的应用指定同样适用于本发明化合物的对映体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、位置异构体、外消旋物或前体药物的盐、溶剂合物、酯和前体药物。

发现本发明的(二氢)吡咯并[2，1-a]异喹啉化合物刺激FSH受体。测定受体结合的方法以及测定促性腺素类生物活性的体外和体内测定法是众所周知的。一般而言，将表达的受体与测试化合物一起孵育，并且测定对功能响应的结合或刺激或抑制。

为了测定功能响应，在适合的宿主细胞中表达编码FSH受体基因、优选人受体基因的分离的DNA。这种细胞可以是中国仓鼠卵巢细胞，而其他细胞也是适合的。优选哺乳动物来源的细胞(Jia等人，Mol.Endocrin.，5，759-776，(1991))。

构建表达重组FSH受体的细胞系的方法是本领域众所周知的(Sambrook等人，Molecular Cloning：a Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor)。通过表达编码期望蛋白质的DNA实现受体表达。用于定点诱变、其他序列连接、PCR和适合表达系统构建的技术截至到目前为止均是本领域众所周知的。可以使用标准固相技术、优选包括易于连接的限制位点以合成方式构建编码期望蛋白质的部分或全部DNA。可以给DNA编码序列提供用于包括的编码序列转录和翻译的适合控制元件。正如众所周知的，表达系统目前是可得到的，它们与各种宿主相容性，包括原核宿主例如细菌和真核宿主例如酵母、植物细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞、鸟类细胞等。

然后将表达受体的细胞与测试化合物一起孵育，以观察测试化合物结合或功能响应刺激。

或者，包含表达受体的分离的细胞膜可以用于测定测试化合物的结合。

为了测定结合，可以使用放射性或荧光化合物。这种化合物也是本发明的组成部分。

在可替代选择中，还可以进行竞争性结合测定。

另一种测定法包括通过测定刺激受体介导的cAMP蓄积筛选FSH受体激动剂化合物。因此，这种方法包括在宿主细胞中表达受体并且使该细胞接触测试化合物。然后测定cAMP的量。通过刺激测试化合物在结合受体时的效果增加cAMP水平。

为了测定内在活性，人重组FSH可以用作参比化合物。

除直接测定例如接触细胞中的cAMP水平外，还可以使用细胞系，它们除转染编码FSH受体的DNA外，还与第二种编码其表达对cAMP水平有应答的报道基因的DNA一起转染。这种报道基因可以是cAMP诱导型或可以以它们与新cAMP效应元件连接这样的方式构建。一般而言，报道基因表达可以受到任何反应以改变cAMP水平的效应元件控制。适合的报道基因是例如LacZ、碱性磷酸酶、荧火虫荧光素酶和绿色荧光蛋白。这种反式激活测定法的原理是本领域众所周知的并且描述在例如Stratowa，Ch.，Himmler，A.和Czernilofsky，A.P.，Curr.Opin.Biotechnol.，6，574-581(1995)中。

为了研究LMW FSH-受体激动剂是否对卵巢具有直接效果，可以对未成熟大鼠每日两次口服处理3天，其中卵巢重量增加作为最终参数(在第4天时测定)。通过与固定量的hCG共同给药以达到雄激素产生最大化(也在安慰剂动物中)，该试验对测试化合物的FSH-活性非常具有选择性。如果存在任何LH-活性，则它受到hCG活性压制。本试验是对来自用于重组FSH释放的Steelman Pohley试验(Steelman和Pohley，1953)的改写。

可以使用GnRH-拮抗剂处理的周期性的大鼠在模型中进一步研究LMW FSH-受体激动剂对卵泡生长的效果。可以根据卵巢重量增加和排卵数量确定促排卵(用hCG排卵诱导后)。此外，可以测定临床相关生物标记如雌二醇和抑制素B。在该模型中，使用FSH(激动剂)刺激导致排卵过度(超过15个品、卵子)。

为了研究卵母细胞质量，还可以在排卵诱导后使动物交配并且可以测定生殖。

本发明还涉及药物组合物，其包含具有通式I的(二氢)吡咯并[2，1-a]异喹啉衍生物或药学可接受的盐与药学可接受助剂和其他任选治疗剂的混合物。助剂必须是“可接受的”，其含义是与组合物的其他成分相容并且对其接受者无害。

组合物包括例如适合于口服、舌下、皮下、静脉内、肌内、鼻、局部或直肠给药等这样的组合物，它们均以单位剂型给药。

就口服给药而言，可以将活性成分制成分散单位，例如片剂、胶囊、粉末、颗粒、溶液、混悬液等。

就胃肠外给药而言，可以将本发明药物组合物提供在单剂量或多剂量容器中，例如预定量的注射液体，例如在密封小瓶和安瓿中，并且还可以贮存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在使用前添加无菌液体载体例如水。

例如，如标准参考书Gennaro，A.R.等人，Remington：The Science and Practiceof Pharmacy(第20版，Lippincott Williams & Wilkins，2000，尤其是参见第5部分：Pharmaceutical Manufacturing)所述与这种药学可接受助剂混合后，可以将活性剂压制成固体剂型，例如丸剂、片剂、或加工成胶囊或栓剂。用药学可接受的液体可以将活性剂制成流体组合物，例如制成注射制剂，其形式为溶液、混悬液、乳剂，或制成喷雾剂，例如喷鼻剂。

为了制备固体单位剂型，关注常用添加剂例如填充剂、着色剂、聚合物粘合剂等的应用。一般而言，可以使用不干扰活性化合物功能的任意药学可接受的添加剂。与可以作为固体组合物给药的本发明活性剂一起使用的适合的载体包括乳糖、淀粉、纤维素衍生物等或其混合物，以适量使用。就胃肠外给药而言，可以使用包含药学可接受分散剂和/或湿润剂例如丙二醇或丁二醇的含水混悬液、等渗盐水溶液和无菌可注射溶液。

本发明进一步包括如上所述的药物组合物与适合于所述组合物的包装材料，所述包装材料包括所述组合物在如上所述中的应用的使用说明书。

活性成分或其药物组合物的给药确切剂量和方案可以根据具体化合物、给药途径和给予药物的个体受试者年龄和病情的不同改变。

一般而言，胃肠外给药需要低于更依赖于吸收的其他给药方法的剂量。然而，用于人体的适合剂量可以是0.05-25mg/kg体重。可以将期望剂量作为一次剧烈或在全天适当间隔给予的多次亚剂量提供，或就女性接受者而言，在整个月经周期的每日适当间隔给予的剂量。给药剂量和方案在女性与男性接受者之间可以不同。

本发明的化合物可以用于疗法。它们可以用于与天然FSH相同的临床目的。

本发明的另一个方面涉及具有通式I的(二氢)吡咯并[2，1-a]异喹啉化合物在制备用于治疗对FSH受体介导的途径有响应的疾病、优选用于治疗生育障碍的药物中的应用。因此，可以对有此需要的患者给予适量的本发明化合物。

本发明的另一个方面涉及具有通式I的(二氢)吡咯并[2，1-a]异喹啉化合物在制备用于治疗不育的药物中的应用。特别地，该化合物可以用于诱导排卵(OI)或受控促排卵(COS)方案。

通过下列实施例示例本发明。

实施例

一般注解：

在实施例中使用如下缩写：DIPEA＝N，N-二异丙基乙胺，TFA＝三氟酸，HATU＝O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基-脲六氟磷酸盐，Fmoc＝9-芴基甲氧基-羰基，Fmoc-Cl＝9-芴基甲氧羰基氯，Alloc＝烯丙基氧基羰基、DMF＝N，N-二甲基-甲酰胺，DME＝1，2-二甲氧基乙烷，THF＝四氢呋喃，Boc＝叔-丁氧基羰基、NMP＝N-甲基吡咯烷酮，TBTU＝O-苯并三唑-1-基-N，N，N，N′-四丁基脲四氟-硼酸盐，BOP＝(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲氨基)-磷六氟磷酸盐，HOBt＝1-羟基苯并三唑水合物，DMAP＝4-(二甲氨基)吡啶。除非另作陈述，否则如下实施例的所有终产物均从水/1，4-二烷、水/叔-丁醇或水/乙腈混合物中冻干。如果将化合物制备成TFA盐，则在冻干前向溶剂混合物中加入适量酸。

使用Beilstein Autonom程序(版本：2.02.304)生成实施例中所述终产物的名称。

下列分析型HPLC方法用于测定保留时间：

方法1：柱：5μm Luna C-18(2)150×4.6mm；流速：1ml/min；检测：210nm；柱温：40℃；溶剂A：CH₃CN/H₂O＝1/9(v/v)；溶剂B：CH₃CN；溶剂C：0.1M三氟乙酸水溶液；梯度：溶剂A/B/C＝65/30/5-10/85/5(v/v/v)，在30.00min内，然后在A/B/C＝10/85/5(v/v/v)恒定进行另外的10.00min。

方法2：与方法1相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B/C＝75/20/5-15/80/5(v/v/v)，在30.00min内，然后在A/B/C＝15/80/5(v/v/v)恒定进行另外的10.00min。

方法3：与方法1相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B/C＝35/60/5-10/85/5(v/v/v)，在30.00min内，然后在A/B/C＝15/80/5(v/v/v)恒定进行另外的10.00min。

方法4：与方法1相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B/C＝95/0/5-15/80/5(v/v/v)，在30.00min内，然后在A/B/C＝15/80/5(v/v/v)恒定进行另外的10.00min。

方法5：与方法1相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B/C＝75/25/0-0/100/0(v/v/v)，在30.00min内，然后在A/B/C＝0/100/0(v/v/v)恒定进行10.00min。

方法6：与方法1相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B/C＝60/40/0-0/100/0(v/v/v)，在30.00min内，然后在A/B/C＝0/100/0(v/v/v)恒定另外的进行10.00min。

方法7：柱：3μm Luna C-18(2)100×2mm(Phenomenex)；流速：0.25ml/min；检测：210nm；柱温：40℃；溶剂A：CH₃CN/H₂O＝1/9(v/v)；溶剂B：CH₃CN；梯度：溶剂A/B＝65/35-10/90(v/v)，在30.00min内，在2.00分钟内至A/B＝0/100(v/v)，然后在A/B＝0/100(v/v)恒定进行另外的8.00min，然后在1.00分钟内至A/B＝65/35(v/v)，最终在A/B＝65/35(v/v)恒定进行另外的15.00min。

方法8：与方法7相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B＝40/60-0/100(v/v)，在30.00min内，在2.00分钟内至A/B＝0/100(v/v)，然后在A/B＝0/100(v/v)恒定进行另外的8.00min，然后在1.00分钟内至A/B＝40/60(v/v)，最终在A/B＝40/60(v/v)恒定进行另外的15.00min。

方法9：与方法7相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B＝100/0-50/50(v/v)，在30.00min内，在2.00分钟内至A/B＝0/100(v/v)，然后在A/B＝0/100(v/v)恒定进行另外的8.00min，然后在1.00分钟内至A/B＝100/0(v/v)，最终在A/B＝100/0(v/v)恒定进行另外的15.00min。

方法10：柱：3μm Luna C-18(2)100×2mm(Phenomenex)；流速：0.25ml/min；检测：210nm；柱温：40℃；溶剂A：CH₃CN/H₂O/TFA＝1/9/0.0035(v/v)；溶剂B：CH₃CN/TFA＝I/0.0035(v/v)；梯度：溶剂A/B＝65/35-10/90(v/v)，在30.00min内，在2.00分钟内至A/B＝0/100(v/v)，然后在A/B＝0/100(v/v)恒定进行另外的8.00min，然后在1.00分钟内至A/B＝65/35(v/v)，最终在A/B＝65/35(v/v)恒定进行另外的15.00min。

方法11：与方法10相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B＝40/60-0/100(v/v)，在30.00min内，在2.00分钟内至A/B＝0/100(v/v)，然后在A/B＝0/100(v/v)恒定进行另外的8.00min，然后在1.00分钟内至A/B＝40/60(v/v)，最终在A/B＝40/60(v/v)恒定进行另外的15.00min。

方法12：与方法10相同，除采用的梯度以外：梯度：溶剂A/B＝100/0-50/50(v/v)，在30.00min内，在2.00分钟内至A/B＝0/100(v/v)，然后在A/B＝0/100(v/v)恒定进行另外的8.00min，然后在1.00分钟内至A/B＝100/0(v/v)，最终在A/B＝100/0(v/v)恒定进行另外的15.00min。

方法13：UPLC/MS(Acquity Ultra Performance LC；水)：柱：Acquity UPLC BEH C182.1x100mm 1.7μl；流速：0.65ml/min；检测：210nm；MS：100-1000AMU；柱温：40℃；溶剂A：CH₃CN/H₂O＝1/9(v/v)；溶剂B：CH₃CN；梯度：溶剂A/B＝60/40-20/80(v/v)在3.0min内，在0.2min内至A/B＝0/100(v/v)，然后在A/B＝0/100(v/v)进行0.49min，然后在0.1min内A/B＝60/40(v/v)，最终A/B＝60/40(v/v)进行1.3min。

下列制备型HPLC系统用于纯化；

系统1：5μm Luna C18(2)150x21.2mm柱，使用水/乙腈混合物，任选在0.1％TFA水溶液的存在下，使用所示梯度：流速：20ml/min：检测：210nm：运行时间：30分钟。

系统2：10μm Luna C18(2)250x50.00mm柱，使用水/乙腈混合物，任选在0.1％TFA水溶液的存在下，使用所示梯度：流速：50ml/min：检测：210nm：运行时间：60分钟。

使用带有自动采样器的Biotage微波烘箱(型号：Initiator)进行微波反应。

使用Merck TLC板(5x10cm)硅胶60F₂₅₄进行薄层色谱法(TLC)。

实施例1

(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(四氢-呋喃-2-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮

(a).4-异丙氧基-3-甲氧基-苯甲醛

将4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(100g)、碳酸钾(182g)和2-溴丙烷(81ml)在DMF(500ml)中的混合物在65℃搅拌2h。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：124g。¹H NMR(CDCl₃)：δ1.40(s，6H)，3.95(s，3H)，4.7(m，1H)，6.98(d，1H)，7.43(m，2H)，9.85(s，1H)

(b).1-异丙氧基-2-甲氧基-4-((E)-2-硝基-乙烯基)-苯

将实施例1a产物(16.1g)、硝基甲烷(120ml)和乙酸铵(6.1g)的混合物在70℃搅拌18h(谨慎：反应可在更高温下进行，但不推荐，因为可能发生爆炸)。在室温过滤沉淀。用水和冷乙醇洗涤沉淀。将沉淀溶于二氯甲烷，用盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：13.54g。¹H NMR(CDCl₃)：δ1.40(s，6H)，3.9(s，3H)，4.65(m，1H)，6.9(d，1H)，7.0(d，1H)，7.15(dd，1H)，7.52(d，1H)，7.95(d，1H)

(c).2-(4-异丙氧基-3-甲氧基-苯基)-乙胺

将实施例1b的产物(20g)溶于THF(80ml)，滴加到氢化铝锂(12.8克)在干乙醚(70ml)和干THF(70ml)中的混合物中。添加完成后，将该反应混合物在回流状态下加热2h。通过添加在THF(50ml)中的水(15ml)使该反应混合物淬灭。然后加入NaOH水溶液(30ml 2N)和H₂O(4ml)。过滤得到的混合物，真空浓缩滤液。将残余物溶于乙酸乙酯，用HC l水溶液(2N)洗涤。将固体NaOH加入到水层中至pH＝10。用乙酸乙酯萃取水层.用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：13.8g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝210.1

(d).[2-(4-异丙氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基]-ceramic酸烯丙酯

在0℃将在二氯甲烷(100ml)中的氯甲酸烯丙酯(25ml)加入到实施例1c产物(44.9g)和DIPEA(75ml)在二氯甲烷(400ml)中的混合物中。在室温搅拌1H后，用HCl水溶液(2N)、水、饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤该反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[3/2(v/v)]作为洗脱液。

产量：9.7g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝294.1

(e).7-异丙氧基-6-甲氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-1，2-二甲酸2-烯丙酯

在0℃将硫酸(120ml)加入到实施例1d产物(45.6g)、乙醛酸(21.5g)和乙酸(350ml)的溶液中。在室温搅拌1h后，将该反应混合物倾入水中，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[95/5(v/v)]作为洗脱液。

产量：43.5g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝350.2

(f).7-异丙氧基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

将实施例1e产物(43.5g)、双甲酮(26.2g)和Pd(PPh₃)₄(500mg)的混合物在THF中、在回流状态下搅拌1h。在室温将乙醚(300ml)和水(20ml)加入到该反应混合物中。将该反应混合物冷却至0℃，过滤沉淀，真空干燥(50℃)。

产量：27g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝266.2

(g).2-乙氧基草酰基-7-异丙氧基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

将乙基草酰氯(1.85ml)加入到实施例1f产物(2.2g)在回流THF(200ml)中的混悬液中。在回流状态下搅拌30min后，真空浓缩该反应混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，甲醇/二氯甲烷[1/9(v/v)]作为洗脱液。

产量：2.75g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝366.2

(h).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

使用微波照射将实施例1g产物(601mg)、乙酸酐(5ml)和2-乙炔基噻吩(178mg)在THF(5ml)中的混合物在140℃搅拌15min。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水、饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，真空浓缩。将残余物混悬于乙醇，过滤沉淀，真空干燥(50℃)。

产量：1.34g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝412.2

(i).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将KOH(1.2g)加入到实施例1h产物(2.8g)在EtOH/H₂O 1/1(v/v)中的混悬液(80ml)中。将该反应混合物在78℃搅拌1h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用NaOH水溶液(2N)萃取。用HCl水溶液(2N)酸化水层，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：2.6g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝384.2

(j).4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯

将实施例1i产物(1克)、HATU(1.47克)和1，4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(564μl)在二氯甲烷(100ml)中的混合物在室温搅拌1h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用HCl水溶液(1N)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.4g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝566.2

(k)[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将TFA(3ml)加入到实施例1j产物(1.4g)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中。在室温搅拌18H后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用NaOH水溶液(2N)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：1.3g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝466.2

(l)(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(四氢-呋喃-2-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮

将实施例1k产物(100mg)、2-四氢呋喃甲酸(31μl)，HATU(160mg)和DIPEA(110μl)在二氯甲烷(2ml)中的混合物在室温搅拌4h。真空浓缩该反应混合物，通过制备型HPLC纯化残余物(0→90％乙腈；系统1)。

产量：120mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝564.2；分析型HPLC：R_t＝18.71min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝0.9nM。

实施例2

1-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-2-甲基硫烷基-乙酮

根据实施例1l所述方法使实施例1k产物(100mg)与(甲硫基)乙酸(33mg)形成酰胺。

产量：50mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝554.2；分析型HPLC：R_t＝20.36min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝0.5nM

实施例3

(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(噻吩-2-磺酰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮

在室温将实施例1k产物(60mg)、三乙胺(54μl)和2-噻吩磺酰氯(29mg)在二氯甲烷(2ml)中的混合物搅拌1h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用H₂O和HCl水溶液(1N)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→90％乙腈；系统1)。

产量：35mg LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝612.2；分析型HPLC：R_t＝26.14min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝4.6nM

实施例4

3，3，3-三氟-2-羟基-1-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-丙烷-1-酮

将实施例1k产物(50mg)、3，3，3-三氟乳酸(32mg)、DIPEA(90μl)和BOP(114mg)在二氯甲烷(2.5ml)中的混合物在室温搅拌18h。真空浓缩该反应混合物，通过制备型HPLC纯化残余物(10→90％乙腈；系统1)。

产量：17mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝592.3；分析型HPLC：R_t＝21.77min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.3nM

实施例5

3-氨基-1-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-丙烷-1-酮

(a).(3-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-3-氧代-丙基}-氨基甲酸叔丁酯

根据实施例1l所述方法使实施例1k产物(100mg)与3-叔-丁氧羰基氨基-丙酸(60mg)偶合。

产量：53mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝637.2；HPLC：R_t＝21.63min(方法2)

(b).3-氨基-1-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-丙烷-1-酮

将实施例5a产物(40mg)和TFA(100μl)在二氯甲烷中的混合物在室温搅拌2h。真空浓缩该反应混合物，通过制备型HPLC纯化残余物(0→90％乙腈，0.1％TFA；系统1)

产量：34mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝537.2；HPLC：R_t＝9.97min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1400nM

实施例6

1-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-2-甲基氨基-乙酮

(a){2-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-2-氧代-乙基}-甲基-氨基甲酸叔丁酯

根据实施例1l所述方法使实施例1k产物(100mg)与N-叔-丁氧羰基-肌氨酸(64mg)偶合。

产量：64mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝637.2；分析型HPLC：R_t＝23.69min(方法2)

(b)1-[4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-2-甲基氨基-乙酮

根据实施例5b所述方法使实施例6a产物(40mg)Boc-脱保护。

产量：32.7mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝537.2；分析型HPLC：R_t＝10.11min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝264.0nM

实施例7

3-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基)-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-2-腈和(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

(a).4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯

将环丁烷羰基氯(3.7ml)和三乙胺(14ml)加入到[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(4.9ml)在二氯甲烷(175ml)中的溶液中。在室温搅拌1h后，用水、HCl水溶液(1N)、水和盐水洗涤该反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：7g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝283.4

(b).环丁基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-甲酮，盐酸盐

将实施例7a产物(7g)和HCl溶液(33ml，4N于二烷中)在二氯甲烷(166ml)中的混合物在室温搅拌4h。真空浓缩该反应混合物。用乙醚处理残余物，过滤沉淀，真空干燥(50℃)。

产量：4.76g(为HCl-盐)

(c).(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将实施例1i产物(250mg)、环丁基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-甲酮盐酸盐(214mg)、HATU(373mg)和DIPEA(0.25ml)在DMF(3ml)中的混合物在50℃搅拌18h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[100/0→95/5(v/v)]作为洗脱液。

产量：355mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝548.1；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.7nM

(d).3-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基)-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-2-腈

在-78℃，将氯磺酰基异氰酸酯(0.112ml)加入到实施例7c产物(350mg)在THF(3ml)中的溶液中。在-78℃搅拌1h后，加入DMF(3ml)。在室温搅拌2.5h后，将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(40％→60％乙腈；系统2)。

产量：74mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝573.5；分析型HPLC：R_t＝14.18min 1(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝0.3nM

实施例8

[4-(1-溴-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

(a).1-溴-环丁烷甲酸

将1-溴-环丁烷甲酸乙酯(1.0ml)在NaOH水溶液(10ml，2N)中的混合物在室温剧烈搅拌3h。用乙醚洗涤该反应混合物。用HCl水溶液(2N)酸化水层，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：952mg

(b).[4-(1-溴-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将BOP(580mg)、DIPEA(540μl)和实施例8a产物(280μl)在二氯甲烷(3ml)中的混合物加入到实施例1k产物(330mg)在二氯甲烷(12ml)中的溶液中。在室温搅拌2H后，将该反应混合物倾入柠檬酸水溶液(5％)中，用二氯甲烷萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/丙酮[1/0→9/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：329mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝626.3/628.3(1∶1)；分析型HPLC：R_t＝26.32min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝6.8nM

实施例9

(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(1-甲基硫烷基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮

将实施例8b产物(42mg)和硫代甲醇钠(35mg)在乙醇(5ml)中的混合物在40℃搅拌4h、在室温搅拌2天、最终在50℃搅拌2h。真空浓缩该反应混合物，溶于NaOH水溶液(0.5N)，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/丙酮[1/0→9/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：20mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝594.3；分析型HPLC：R_t＝26.36min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝16.4nM

实施例10

[4-(1-羟基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

(a).1-羟基-环丁烷甲酸

将n-丁基锂(14ml，1.6M于庚烷中)在0℃加入到二异丙基胺在THF(30ml)中的溶液中。30min后，将该反应混合物冷却至-20℃，加入在THF(10ml)中的环丁烷羧酸(960μl)。在室温搅拌30min后，使氧气通过1h，将该反应混合物在氧气气氛中搅拌18h。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯洗涤。用HCl水溶液(2N)酸化水层，用乙酸乙酯(2x)萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：690mg

(b).4-(1-羟基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯

将实施例10a产物(340mg)、1，4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(694μl)、DIPEA(2.4ml)和BOP(1.9g)在二氯甲烷(15ml)中的混合物在室温搅拌18h。将该反应混合物倾入柠檬酸水溶液(5％)中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，甲苯/丙酮[1/0→7/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：732mg

(c).[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-(1-羟基-环丁基)-甲酮，盐酸盐

将HCl溶液(2ml，2.0M的乙醚溶液)和实施例10b产物(420mg)在二氯甲烷(18ml)中的混合物在室温搅拌4h，真空浓缩。

产量：330mg

(d).[4-(1-羟基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将实施例10c产物(330mg)、DIPEA(830μl)，BOP(530mg)和实施例1k产物(383mg)在二氯甲烷(15ml)中的混合物在室温搅拌18h。将该反应混合物倾入柠檬酸水溶液(5％)中，用二氯甲烷(2x)萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/丙酮[1/0→1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：538mg。LC-MS：[M+H]⁺＝564.4；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.4nM

实施例11

(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(1-甲氧基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮

将实施例10d产物(82mg)、氢化钠(14mg，60％在油中的分散液)和碘甲烷(70μl)在DMF(3ml)中的混合物在室温搅拌1h。将该反应混合物倾入饱和NH₄Cl水溶液中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/丙酮[1/0→9/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：46mg。LC-MS：[M+H]⁺＝578.4；分析型HPLC 24.57min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝5.4nM

实施例12

1-[4-(2-氯-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-乙酮和2-乙酰基-9-乙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

(a).2-乙酰基-9-乙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例1i产物(160mg)，N-乙酰基高哌嗪(89mg)、DIPEA(370μL)和HATU(192mg)在二氯甲烷(5ml)中的混合物在40℃搅拌1h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.2M)、水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[10/0→8/2(v/v)]作为洗脱液。

产量：230mg；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝5.2nM

(b).1-[4-(2-氯-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-乙酮

搅拌实施例12a产物(230mg)和N-氯琥珀酰亚胺(64mg)在DMF(3ml)中的混合物，在120℃使用微波照射加热5min。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，乙酸乙酯[0→10％异丙基胺(v/v)]作为洗脱液。

产量：150mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝542.2；分析型HPLC R_t＝10.98(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.9nM

实施例13

1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-5-酮

将BOP(111mg)、2，3，6，7-四氢-(1H)-1，4-二氮杂-5(4H)-酮(50mg)和DIPEA(0.2ml)加入到实施例1i产物(80mg)在二氯甲烷(4ml)中的溶液中。在室温搅拌2h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.5N)和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10％→90％乙腈；系统1)。

产量：38mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝480.2；分析型HPLC：R_t＝15.51min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝106.0nM

实施例14

4-丁基-1-[9-(2-羟基-2-甲基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基]-[1，4]二氮杂坏庚烷-5-酮，4-丁基-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-5-酮和[3-(4-丁基-5-氧代-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙酸乙酯

(a).4-丁基-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-5-酮

将氢化钠(160mg，60％在油中的分散液)加入到实施例13产物(767mg)在DMF(24ml)中的溶液中。在室温搅拌5min后，加入1-碘丁烷(1.46ml)，在60℃持续搅拌18h。将该反应混合物倾入饱和NH₄Cl水溶液中，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[100/0→90/0(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.26g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝536.4；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝0.8nM

(b).4-丁基-1-(9-羟基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-5-酮

在0℃，将三氯硼烷(3.2ml)滴加到实施例14a产物(857mg)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，用水使反应停止，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[100/0→90/0(v/v)]作为洗脱液。

产量：318mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝494.3。

(c).[3-(4-丁基-5-氧代-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙酸乙酯

将实施例14b产物(100mg)、碳酸铯(198mg)和溴乙酸乙酯(27μl)在DMF(6ml)中的混合物在90℃搅拌2h。将该反应混合物倾入水中，用二氯甲烷萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0％→100％乙腈；系统1)。

产量：43mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝580.3；分析型HPLC：R_t＝11.76min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝11nM。

(d).4-丁基-1-[9-(2-羟基-2-甲基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基]-[1，4]二氮杂环庚烷-5-酮

在0℃，将氯化甲基镁(61μl)滴加到实施例14c产物(36mg)在THF(2ml)中的溶液中。将该反应混合物在室温搅拌2h。用乙酸乙酯稀释后，用饱和NH₄Cl水溶液处理该反应混合物。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0％→100％乙腈；系统1)。

产量：15.8mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝566.3；分析型HPLC：R_t＝9.15min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.5nM

实施例15

(2，5-二氢-吡咯-1-基)-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将HATU(74.5g)，2，5-二氢-1H-吡咯(30μl)和DIPEA(0.114ml)加入到实施例1i产物(50mg)在DMF(2m l)中的溶液中。在50℃搅拌18h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用饱和NH₄Cl水溶液、水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20％→100％乙腈；系统1)。

产量：16.5mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝435.3；分析型HPLC：R_t＝20.78min(方法1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝249.0nM

实施例16

1-[5-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，5]二氮杂环辛烷(diazocan)-1-基]-乙酮

(a).[1，5]二氮杂环辛烷(diazocan)-1-基-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

根据基于Richman和Atkins方案：J.E.Richman，T.J.Atkins，J.Am.Chem.Soc.96，2268，(1974)；R.C.Hoye，J.E.Richman，G.A.Dantas，M.F.Lightbourne，L.Scott Shinneman，J.Org。Chem.66，2722(2001)；G。Ewin，J.O.Hill.，J.Chem.Res(M)，3501(1985)；J.A.Halfen，H.L.Moore，D.C.Fox，Inorg。Chem.41，3935(2002)所述充分记录的大环化方法制备1，5-二氮杂环辛烷。

将实施例1i产物(170mg)和[1，5]二氮杂环辛烷(diazocan)HBr(140mg)、N-乙基吗啉(200μl)和HATU(250mg)在DMF(2ml)中的混合物在室温搅拌16h。用水稀释该反应，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[8/1→1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：75mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝480.5；TLC R_f＝0.45(二氯甲烷/甲醇8/2)。

(b).1-[5-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，5]二氮杂环辛烷(diazocan)-1-基]-乙酮

向实施例16a产物(75mg)在吡啶(0.3ml)中的溶液中加入乙酸酐(75mg)和DMAP(10mg)，将该混合物在60℃搅拌1h。用稀释该反应混合物水，用HCl水溶液(2N)酸化至pH4，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/丙酮[9/1→1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：50mg。Mp 153-155℃；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝522.5；TLCR_f＝0.35(二氯甲烷/丙酮8/2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝5.0nM

实施例17

(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[5-(甲苯-4-磺酰基)-全氢化-1，5-二氮杂环辛烷(diazocin)-1-基]-甲酮

向1-(甲苯-4-磺酰基)-全氢化-1，5-二氮杂环辛烷(diazocin)盐酸盐(60mg)和实施例1i产物(50mg)在DMF(1.5ml)中的混合物中加入N-乙基吗啉(50μl)和TBTU(100mg)。将该反应在室温搅拌16h，倾入NH₄Cl水溶液(5％)。用乙酸乙酯萃取该混合物，干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。用硅胶纯化残余物，二氯甲烷/乙酸乙酯作为洗脱液，得到白色固体。

产量：45mg。TLC R_f＝0.60(二氯甲烷/乙酸乙酯1/1)LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝634.5.¹H NMR(DMSO-d6)6.40(s，1H，H2-吡咯)，6.85，6.72(2xs，2H，H7和H107.40，7.64(2xdd，4，甲苯磺酰基)，2.38(s，3，CH3-甲苯磺酰基)，4.13(t，2，H5)，2.95(t，2，H6)，3.75(s，3，CH₃O)，1.08(d，6，iPr)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝914.0nM

实施例18

3-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-1，2，3，4，5，6-六氢-1，5-桥亚甲基-吡啶并[1，2-a][1，5]二氮杂环辛烷(diazocin)-8-酮

将实施例1i产物(125mg)和外消旋野靛碱(80mg)、N-乙基吗啉(50μl)和TBTU(200mg)在MF(2ml)中的混合物在室温搅拌3h。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/丙酮作为洗脱液。

产量：130mg。Mp 260℃；Tlc：TLC R_f＝0.50(二氯甲烷/丙酮1/1)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝556。

¹H NMR(DMSO-d6)吡啶酮环的信号在6.16(bd，1H)，6.25(dd，1H)，7.35(dd，1H)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝37.3nM

实施例19

3-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-十氢-1，5-桥亚甲基-吡啶并[1，2-a][1，5]二氮杂环辛烷(diazocin)-8-酮

根据所述方法氢化野靛碱；M.J.Johansson，L.Schwartz，S.Mamedjkouh、N.Kann，Tetrahedron Asymmetry，15，3531(2004)。Mp 98-102℃。

将实施例1i产物(125mg)和85mg四氢野靛碱(85mg)、N-乙基-吗啉(50μl)和TBTU(225mg)在DMF(2ml)中的混合物在室温搅拌16h。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过使用二氯甲烷/丙酮硅胶色谱法纯化残余物，然后在乙醚中研磨。

产量：130mg。Mp 207-208℃；TLC R_f＝0.64(二氯甲烷/丙酮1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝560；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝29.4nM

实施例20

(a).7-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-3，7-二氮杂-双环[3.3.1]壬烷-3-甲酸叔丁酯

用TBTU(188mg)和二异丙基胺(350μl)处理实施例1i产物(150mg)和3，7-二氮杂-双环[3.3.1]壬烷-3-甲酸叔丁酯(177mg)[根据O.Huttenloch、E.Laxman，H.Waldmann，Chem.Eur.J.，8(20)，4767(2002)制备]在二氯甲烷(2ml)中的混合物。将该反应混合物在室温搅拌16h。通过添加剂NH₄Cl水溶液(5％)后处理该反应，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，甲苯/丙酮作为洗脱液。

产量：153mg。¹H NMR(CDCl₃)δ1.18(d，6H、异丙氧基)，1.4(bs，9H、叔-Bu)，6.45(s，1H，H-2，吡咯)，6.69(s，1H，H7-Ar)，6.93(s，1H，H-9Ar)，7.04，7.27(m，3H，噻吩基)。TLC R_f＝0.62(甲苯/丙酮3/2)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝592

(b).3，7-二氮杂-双环[3.3.1]壬-3-基)-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮.盐酸盐.

向实施例20b产物(150mg)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入HCl溶液(3ml，2.0M的乙醚溶液)。将该混合物搅拌4h，真空浓缩。

产量：110mg(粗品)。TLC R_f＝0.23(二氯甲烷/甲醇9/1)。

(c).1-[7-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-3，7-二氮杂-双环[3.3.1]壬-3-基]-乙酮

用二异丙基胺(100μl)和乙酰氯(12μl)处理实施例20b粗产物(66mg)在二氯甲烷(2ml)中的溶液。将反应在室温搅拌2h，用柠檬酸水溶液(10％)稀释，用二氯甲烷萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→100％乙腈；系统1)。

产量：29mg。TLC R_f＝0.70(二氯甲烷/甲醇9/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝534.¹H NMR(CDCl₃)δ1.18(m，6H、异丙基)，2.18(s，3H，乙酰基)，3.85(s，3H，MeO)，3.0(t，2H，C₆H24.04(t，2H，C₅H2)，6.33(s，1H，吡咯H)，6.69(3，1H，Ar H7)，6.92(s，1H，Ar H10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝8.2nM。

实施例21

1-[7-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-3，7-二氮杂-双环[3.3.1]壬-3-基]-2-甲基硫烷基-乙酮

根据实施例20c所述方法使实施例20b产物(55mg)与甲基硫烷基-乙酰氯反应。

产量：36mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝580.¹H NMR(CDCl₃)δ1.18(m，6，异丙基)，2.16(s，3，SCH₃)，3.85(s，3，MeO)，3.0(t，2，C(6)H2)4.04(t，2，C(5)H2)，6.35(s，1，吡咯H)，6.70(3，1H，Ar H7)，6.92(s，1，Ar H10)；)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝77.8nM

实施例22

(7-环丁烷羰基-3，7-二氮杂-双环[3.3.1]壬-3-基)-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

根据实施例20c所述方法使实施例20b产物(55mg)与环丁烷羰基氯偶合。

产量：20mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝574.hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝8.9nM。

实施例23

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(2-乙酰基-八氢-环戊[c]吡咯-5(内)-基)-酰胺

(a).(3aS，5R，6aR)-5-氨基-六氢-环戊[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

为了合成衍生自八氢-环戊[c]吡咯-5-基胺的甲酰胺类，利用充分记录的方法(Pauson-Khand反应)，由烯丙基-炔丙基胺为原料制备5-氧代-六氢-环戊[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯；参见：S.W.Brown，P.L.Pauson，J.Chem.Soc.Perkin Trans I 1205(1990)；D.P.Becker，D.L.Flynn，Tetrahedron Lett.，34(10)2087(1993)；D.P.Decker，D.L.Flynn，Tetrahedron，49(23)，5047(1993)；Y.Li，T.Marks，J.Am.Chem.Soc.，120，1757(1998)。

接下来通过众所周知的用衍生的苄基亚胺的还原氨基化方法、然后Na(OAc)₃BH还原和催化脱苄基化(Pearlmans催化剂)将酮基官能团转化成内胺。

(b).5-(内)[(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-氨基]-六氢-环戊[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

向实施例1i产物(220mg)和实施例23a产物(145mg)在DMF(1.5ml)中的混合物中加入N-乙基吗啉(100μl)和TBTU(200mg)。将该反应混合物在室温搅拌2h。加入水(5ml)，然后过滤，干燥沉淀。与庚烷/二异丙基醚一起研磨，得到产物。

产量：260mg。Mp 199-200℃；TLC R_f＝0.35(庚烷/乙酸乙酯1/1)。

(c).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(八氢-环戊[c]吡咯-5(内)-基)-酰胺，盐酸盐

向实施例23b产物(250mg)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入HCl溶液(4ml，2M的乙醚溶液)。将该反应搅拌2h，真空浓缩。用乙醚处理残余物，得到白色固体。

产量：210mg。Mp 140-142℃。

(d).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(2-乙酰基-八氢-环戊[c]吡咯-5(内)-基)-酰胺

用饱和NaHCO₃水溶液处理实施例23c产物(210mg)在乙酸乙酯(10ml)中的溶液，以从其HCl盐中释放胺。真空浓缩有机溶液。将残余物溶于吡啶(2ml)，用乙酸酐(150μl)和DMAP(5mg)处理。将该反应混合物在66℃搅拌10min。将该反应倾入水中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。用乙醚处理剩余的残余物。

产量：170mg。Mp 207-208℃；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝534.5；TLCR_f＝0.45(二氯甲烷/丙酮1/1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝787.0nM

实施例24

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(2-乙酰基-八氢-环戊[c]吡咯-5(内)-基)-甲基-酰胺

用氢化钠(17mg，60％在油中的分散液)处理实施例23d产物(50mg)在干DMF(1ml)中的溶液，在65℃搅拌15min。然后将该混合物冷却至室温，加入碘甲烷(35μl)。30min后，甲基化完成。将该反应倾入水中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/丙酮作为洗脱液，得到无定形白色固体。

产量：170mg。TLC R_f＝0.45(二氯甲烷/丙酮1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝548.5；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝191.0nM

实施例25

N-[-2-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-八氢-环戊[c]吡咯-5-内-基]-乙酰胺

(a).5-内-N-(八氢-环戊[c]吡咯-5-基)-乙酰胺

用在吡啶中的乙酸酐使实施例23a产物(100mg)乙酰化，用HCl在二氯甲烷中脱保护，得到吸湿性盐酸盐。

产量：105mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝169.3

(b).N-[-2-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-八氢-环戊[c]吡咯-5-内-基]-乙酰胺

用N-乙基吗啉(200μl)和TBTU(160mg)处理实施例1i产物(153mg)和实施例25a产物(75mg)在干DMF(2ml)中的混合物。将该反应在室温搅拌16h，倾入水中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过使用二氯甲烷丙酮的硅胶色谱法纯化残余物。

产量：130mg。Mp 106-112℃；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝534.5；TLC R_f＝0.52(二氯甲烷/丙酮1/1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝45.4nM

实施例26

N-[2-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-八氢-环戊[c]吡咯-5-基]-N-甲基-乙酰胺

根据实施例24所述方法进行实施例25b产物(50mg)的甲基化.

产量：35mg。TLC R_f＝0.58(二氯甲烷/丙酮1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝548.3；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝173.0nM

实施例27

(2-乙基-吡咯烷-1-基)-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将实施例1i产物(168mg)、2-乙基-吡咯烷(130mg)、N-乙基吗啉(170μl)和TBTU(260mg)的混合物在室温搅拌18h。将该反应倾入水中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20％→100％乙腈；系统2)。

产量：150mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝465.3；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝16.2nM

实施例28

[2-(3-氟-苯基)-吡咯烷-1-基]-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

按照与实施例27所述类似的方式由实施例1i产物(168mg)和2-(3-氟-苯基)-吡咯烷制备该产物。

产量：187mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝531.3；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝752.0nM

实施例29

(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-(2-吡啶-3-基-吡咯烷-1-基)-甲酮，

按照与实施例27所述类似的方式由实施例1i产物(168mg)和3-吡咯烷-2-基-吡啶制备该产物。通过制备型HPLC纯化残余物(20％→100％乙腈；系统2)。

产量：174mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝514.3；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝624.0nM

实施例30

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-甲基-酰胺

按照与实施例27所述类似的方式由实施例1i产物(60mg)和2-甲基-2-甲基氨基-丙-1-醇[根据S.G。Kuznetsov，A.V.Eltsov，J.Gen.Chem.USSR，32，502(1962)制备]制备该产物。

产量：14mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝469.5；Mp 150-152℃；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.0nM

实施例31

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸三甲基酰肼

(a).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸N′，N′-二甲基-酰肼

将实施例1i产物(75mg)、DIPEA(0.171ml)、HATU(112mg)和1，1-二甲基肼(19.5μl)在二氯甲烷(2ml)中的混合物在室温搅拌1h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[7/3→1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：75mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝426.1

(b).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸三甲基酰肼

将碘甲烷(11μl)加入到实施例31a产物(72mg)和KOH(10mg)在丙酮(5ml)中的溶液中。在室温搅拌1h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10→90％乙腈，0.1％TFA；系统1)。

产量：42mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝440.1；分析型HPLC：R_t＝17.61min(方法4)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝241.0nM

实施例32

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸甲基-吡咯烷-1-基-酰胺

(a).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸吡咯烷-1-基酰胺

根据实施例31a所述方法使实施例1i产物(75mg)与吡咯烷-1-基胺.盐酸盐(31mg)形成酰肼。

产量：94mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝452.1

(b).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸甲基-吡咯烷-1-基-酰胺

根据实施例31b所述方法进行实施例32a产物(94mg)的甲基化。

产量：51mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝466.1；分析型HPLC：R_t＝18.92min(方法4)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝55.2nM

实施例33

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-环丁烷羰基-哌啶-3-基)-乙基-酰胺和9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-环丁烷羰基-哌啶-3-基)-酰胺

(a).((R)-1-环丁烷羰基-哌啶-3-基)-氨基甲酸叔丁酯

根据实施例20c所述方法用环丁基羰氯(0.342ml)酰化(R)-哌啶-3-基-氨基甲酸叔丁酯(300mg)。真空浓缩残余物，不经纯化用于下一步。

产量：423mg。

(b).((R)-3-氨基-哌啶-1-基)-环丁基-甲酮

根据实施例7b所述方法进行实施例33a产物(423mg)的脱保护。

产量：327mg(为HCl-盐)。

(c).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-环丁烷羰基-哌啶-3-基)-酰胺

根据实施例13所述方法使实施例33b产物(214mg)与实施例1i产物(250mg)形成酰胺。通过硅胶色谱法纯化残余物，甲苯/丙酮[100/0→6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：316mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝548.5；分析型HPLC：R_t＝25.16min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝252nM。

(d).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-环丁烷羰基-哌啶-3-基)-乙基-酰胺

将碘乙烷(80μl)和氢化钠(12.6mg，60％在油中的分散液)加入到实施例33c产物(69mg)在DMF(1ml)中的溶液中。在50℃搅拌3h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10％→100％乙腈；系统1)。

产量：26.4mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝576.5；分析型HPLC：R_t＝26.46min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝279nM

实施例34

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-乙酰基-哌啶-3-基)-甲基-酰胺和9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-乙酰基-哌啶-3-基)-酰胺

(a).((R)-1-乙酰基-哌啶-3-基)-氨基甲酸叔丁酯

根据实施例20c所述方法用乙酰氯(0.214ml)酰化((R)-1-乙酰基-哌啶-3-基)-氨基甲酸叔丁酯(300mg)。真空浓缩残余物，不经纯化用于下一步。

产量：348mg。

(b).1-((R)-3-氨基-哌啶-1-基)-乙酮

根据实施例7b所述方法进行实施例34a产物(348mg)的脱保护。

产量：256mg(为HCl-盐)。

(c).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-乙酰基-哌啶-3-基)-酰胺

根据实施例13所述方法使实施例34b产物(175mg)与实施例1i产物(250mg)形成酰胺。通过硅胶色谱法纯化残余物，甲苯/丙酮[100/0→4/6(v/v)]作为洗脱液。通过制备型HPLC纯化产物(10％→90％乙腈；系统1)。

产量：32mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝508.3；分析型HPLC：R_t＝18.32min(方法1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝251nM。

(d).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸((R)-1-乙酰基-哌啶-3-基)-甲基-酰胺

根据实施例33d所述方法用碘甲烷(62.3μl)使实施例34c产物(50mg)进行烷基化。

产量：36.6mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝522.5；分析型HPLC：R_t＝18.45min(方法1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝496.0nM

实施例35

(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(吡啶-2-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮；三氟乙酸

(a).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例1f产物(800mg)和乙基草酰氯(0.4ml)在THF(5ml)中的混合物，在100℃使用微波照射加热5min。真空浓缩该反应混合物。搅拌残余物和2-乙炔基-吡啶(340μl)在乙酸酐(5ml)中的混合物，在140℃使用微波照射加热15min。在室温用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液、盐水萃取，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：960mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝407.5

(b).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例35a产物(850mg)和固体KOH(500mg)在乙醇(15ml)和水(15ml)中的混合物在80℃搅拌1h。在室温用HCl水溶液(1.0M)将该反应混合物中和至pH＝6-7，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：673mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝379.3

(c).4-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯

向实施例35b产物(473mg)、DIPEA(1.0ml)和[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(370μl)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入HATU(950mg)。在室温搅拌18h后，用饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→75％乙腈；0.1％TFA；系统2)。

产量：768mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝561.5

(d).[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

在室温将TFA(1ml)滴加到实施例35c产物(768mg)在二氯甲烷(9ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，真空浓缩该反应混合物。

产量：630mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝461.3

(e).(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(吡啶-2-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮；三氟乙酸

将实施例35d产物(105mg)，DIPEA(200μl)、吡啶-2-甲酸(57mg)和HATU(350mg)在二氯甲烷(5ml)中的混合物在室温搅拌18h。用饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→75％乙腈；0.1％TFA；系统1)。

产量：96mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝566.5；分析型HPLC R_t＝15.08min(方法4)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝244.0nM。

实施例36

9-(2-羟基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(197mg)加入到实施例65d产物(376mg)在甲苯(10ml)中的溶液中。在室温搅拌7h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10→100％乙腈；系统2)。

产量：200mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝453.2；分析型HPLC：R_t＝15.79min(方法11)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.5nM

实施例37

1-氰基-9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺和1-溴-9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例1g产物(6.5g)和三甲代甲硅烷基-乙炔(3.3ml)在乙酸酐(15ml)中的混合物，在140℃使用微波照射加热15min。真空浓缩该反应混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→3/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.8g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝330.1。

(b).1-溴-9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将N-溴琥珀酰亚胺(980mg)加入到实施例37a产物(1.8g)在DMF(20ml)中的溶液中。在室温搅拌3h后，真空浓缩该反应混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[4/1→1/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.65g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝408.1/410.1(1∶1)。

(c).1-溴-9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将NaOH水溶液(8ml，2N)加入到实施例37b产物(1.6g)在乙醇(50ml)中的溶液中。在70℃搅拌4h后，将该反应混合物浓缩至小体积，用乙酸乙酯稀释，用HCl水溶液(2N)和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将该残余物溶于DMF(10ml)，加入HATU(2.1g)、N-甲基-N-叔-丁基-胺(3.4ml)和DIPEA(3.1ml)。在室温搅拌18h后，将该反应混合物倾入饱和NH₄Cl水溶液中，通过过滤收集固体，用水洗涤。将固体溶于乙酸乙酯，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：1.76g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝409.1/412.1(1∶1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝234.0nM

(d).1-氰基-9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

搅拌实施例37c产物(485mg)、碘化亚铜(I)(21mg)、对称-二甲基乙二胺(236μl)和氰化亚铜(I)(197mg)在NMP(10ml)中的混合物，在200℃使用微波照射加热20min。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用饱和NaCl水溶液/饱和NH₄Cl水溶液(1∶1)洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：326mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝330.1；分析型HPLC：R_t＝15.88min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝67.1nM

实施例38

9-异丙氧基-8-甲氧基-1-(1H-四唑-5-基)-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例37d产物(22.5mg)和叠氮基三丁基锡(20μl)在二甲苯(200μl)中的混合物在110℃搅拌44h。通过硅胶色谱法直接纯化该反应混合物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：9.6mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝439.3；分析型HPLC：R_t＝11.49min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1640.0nM

实施例39

2-甲酰基-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).2-(3，3-二乙氧基-丙-1-炔基)-噻吩

向丙炔醛二乙基乙缩醛(405mg)在二异丙基胺(8ml)中的溶液中加入2-碘噻吩(1.2g)和一水合乙酸铜(II)(66.4mg)。用N₂气流净化该混悬液。加入Pd(PPh₃)₄(75mg)，再用氮气净化该反应混合物。将该混悬液在55℃搅拌1h。形成沉淀，必需要用二异丙基胺(6ml)稀释该反应混合物以保持其搅拌。过滤该反应混合物，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→17/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：680mg。

(b).2-甲酰基-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例1g产物(300mg)和实施例39a产物(350mg)在乙酸酐(6.5ml)中的混合物，在140℃使用微波照射加热12min。真空浓缩该反应混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→3/2(v/v)]作为洗脱液。

产量：283mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝440.2。

(c).2-甲酰基-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(钠盐)

将NaOH水溶液(5ml，2N)加入到实施例39b产物(220mg)在乙醇(10ml)中的溶液中。在60℃搅拌2h后，真空浓缩该反应混合物。

产量：216mg。

(d).2-甲酰基-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将HATU(103mg)、N-甲基-N-叔-丁基-胺(125μl)和DIPEA(182μl)加入到实施例39c产物(86mg)在NMP(5ml)中的溶液中。在室温搅拌3h后，将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯(2x)萃取。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：45mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝481.2；分析型HPLC：R_t＝16.90min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.7nM

实施例40

2-羟基甲基-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将硼氢化钠(3.6mg)加入到实施例39d产物(38mg)在甲醇(5ml)中的溶液中。在室温搅拌2h后，再加入一定量的硼氢化钠(3.6mg)，将该反应在室温搅拌18h。真空浓缩该反应混合物，通过硅胶色谱法纯化，庚烷/乙酸乙酯[1/0→1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：27mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝482.3；分析型HPLC：R_t＝14.77min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝8.8nM

实施例41

9-异丙氧基-8-甲氧基-2-甲氧基甲基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例40产物(20mg)，氢化钠(3.3mg，60％在油中的分散液)和碘甲烷(13μl)在THF(2.5ml)中的混合物在室温搅拌18h。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：12mg。LC-MS：[M+H]⁺＝497.3；分析型HPLC 20.40min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.8nM

实施例42

2-(羟基亚氨基-甲基)-9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例39d产物(74mg)和羟基胺盐酸盐(21.5mg)在吡啶(1.5ml)中的混合物在室温搅拌18h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→3/7(v/v)]作为洗脱液。

产量：40mg。MS：[M+H]⁺＝496.3；分析型HPLC 15.33min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.2nM

实施例43

9-异丙氧基-8-甲氧基-2-(甲氧基亚氨基-甲基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

根据实施例42所述方法使实施例39d产物(76mg)与o-甲基羟基胺盐酸盐(26.4mg)形成甲肟。

产量：60mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝452.1；分析型HPLC 22.60min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝4.3nM

实施例44

2-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-乙酮

(a).2-甲酰基-7-异丙氧基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

在5℃将乙酸酐(8.9ml)滴加到实施例1f产物(5g)溶于甲酸(35.5ml)的冷却溶液中。用冰-水稀释该反应混合物，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[95/5(v/v)]作为洗脱液。

产量：2.28g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝294.3

(b).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉

搅拌实施例44a产物(400mg)和2-乙炔基噻吩(134μl)在四氢呋喃/乙酸酐＝1∶1(v/v)(10ml)中的混合物，在140℃使用微波照射加热15min。用饱和NaHCO₃水溶液中和该反应混合物，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[7/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：209mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝340.2

(c).2-溴-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-乙酮

将溴乙酰基溴(902μl)滴加到实施例44b产物(1.17g)在二烷(50ml)中的搅拌混合物中。1h后，用饱和NaHCO₃水溶液使该反应混合物淬灭，用水和盐水洗涤。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：209mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝460.0/462.0

(d).2-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-乙酮

将实施例44c产物(105mg)，DIPEA(200μl)和实施例7b产物(125mg)在THF(4ml)中的混合物在室温搅拌18h。用水和盐水洗涤该反应混合物。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10→100％乙腈，0.1％TFA；系统1)。

产量：15mg(为TFA盐)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝562.3；分析型HPLC：R_t＝13.47(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1120.0nM

实施例45

1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-3，3-二甲基-丁-1-酮

将实施例44b产物(100mg)，3，3-二甲基丁酰氯(102μl)和AlCl₃(催化量)在二烷(4ml)中的混合物在室温搅拌64h。将该反应混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(30→100％乙腈；系统1)。

产量：56mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝438.1；分析型HPLC：R_t＝27.07(方法3)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝65.1nM

实施例46

环戊基-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将实施例44b产物(100mg)、环戊烷羰基氯(90μl)和AlCl₃(40mg)在二烷(4ml)中的混合物在室温搅拌18h。将该反应混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(30→100％乙腈；系统1)。

产量：29mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝436.1；分析型HPLC：R_t＝26.71(方法3)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝78.2nM

实施例47

2-二甲基氨基-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-丙烷-1-酮

(a).2-溴-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-丙烷-1-酮

将2-溴丙酰溴(0.625ml)滴加到实施例44b产物(500mg)在二烷(20ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：700mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝474/476。

(b).2-二甲基氨基-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-丙烷-1-酮

将实施例47a产物(50mg)和二甲胺(0.133ml，40％WT的水溶液)的混合物在60℃搅拌1h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10％→90％乙腈，0.1％TFA；系统1)。

产量：20mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝439.1；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝149.0nM

实施例48

1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-2-吗啉-4-基-丙烷-1-酮

根据实施例47b所述方法用吗啉(38μl)取代实施例47a产物(68mg)上的溴。

产量：32mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝481.3；分析型HPLC：R_t＝18.64(方法4)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝89.4nM

实施例49

2-(4-乙酰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-1-(9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-丙烷-1-酮

根据实施例47b所述方法用1-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-乙酮(0.106ml)取代实施例47a产物(75mg)上的溴。

产量：28mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝536.5；分析型HPLC：R_t＝18.37(方法4)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝200.0nM

实施例50

1-环戊基-9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-叔-丁基酰胺

使实施例1g产物(270mg)和乙炔基-环戊烷(100mg)经历与实施例1所述类似的条件，得到1-环戊基-9-异丙氧基-8-甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸。在如实施例1j所述与HATU标准酰胺偶合条件下用叔-丁基胺处理酸(18mg)。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[0→100％异丙基胺(v/v)]作为洗脱液。

产量：19mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝425；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝220.0M

实施例51

9-异丙基氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).9-羟基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

在0℃将三氯化硼(100ml)滴加到实施例1h产物(51.2g)在二氯甲烷(400ml)中的溶液中。将该反应混合物在室温搅拌3h。将该反应混合物倾入水中，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[30→50％(v/v)]作为洗脱液。

产量：44.3g.

(b).8-甲氧基-1-噻吩-2-基-9-三氟甲磺酰氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

在0℃将三氟甲磺酸酐(982μl)滴加到实施例51a产物(716mg)在吡啶(5ml)中的溶液中。将该反应混合物在室温搅拌18h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用HCl水溶液(1N)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：875mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝502.1

(c).9-异丙基氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例51b产物(100mg)、异丙基胺(42μl)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(5mg)、磷酸三钾(130mg)和2-(二-叔-丁基膦基)联苯(10mg)的混合物，在150℃使用微波照射加热1h。过滤该反应混合物，真空浓缩滤液。对残余物进行使用庚烷/乙酸乙酯[1/1(v/v)]的硅胶色谱。

产量：73mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝411.1

(d).9-异丙基氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例51c产物(73mg)和KOH(过量)在甲醇/水[1/1(2ml)]中的混合物在回流状态下搅拌1h。将该反应混合物倾入水中，用柠檬酸水溶液(1M)酸化，用二氯甲烷萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：58mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝383.2

(e).9-异丙基氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例51d产物(58mg)、DIPEA(79μl)，HATU(86mg)和N-甲基-N-叔-丁基-胺(187μl)在二氯甲烷(3ml)中的混合物在40℃搅拌18h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水洗涤。干燥有机层(Mg SO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→90％乙腈；系统1)。

产量：29.7mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝452.3；分析型HPLC：R_t＝6.99min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝4.2nM

实施例52

9-羟基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将氯化乙基镁(50.8ml 2M的THF溶液)加入到N-甲基-N-叔-丁基-胺(13.4ml)在干THF(250ml)中的溶液中。将该反应混合物在65℃搅拌1h。将实施例51a产物(7.5g)在干THF(100ml)中的溶液滴加到该反应混合物中。将该反应混合物在回流状态下加热1h。用饱和NH₄-Cl水溶液使该反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。使残余物从乙醚中结晶。

产量：6.2g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝411.2；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝356.0nM

实施例53

9-(4-乙酰基-哌嗪-1-基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).三氟-甲磺酸3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基酯

根据实施例51b所述方法、由52(6.2g)为原料合成三氟-甲磺酸3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基酯53a。

产量：7.45g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝543.1

(b).9-(4-乙酰基-哌嗪-1-基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

根据实施例51c所述方法使实施例53a产物(100mg)与1-乙酰基哌嗪(60mg)反应。

产量：22mg。MS-ESI[M+H]⁺＝521.5；分析型HPLC：R_t＝8.71min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝678.0nM

实施例54

8-甲氧基-9-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

根据实施例51c所述方法用1-甲基哌嗪(46mg)取代实施例53a产物(100mg)上的三氟甲磺酸酯部分。

产量：38mg。MS-ESI[M+H]⁺＝493.5；分析型HPLC：R_t＝27.45min(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝455.0nM

实施例55

8-甲氧基-9-(1H-吡唑-4-基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

向实施例53a产物(25.5mg)在DME(2ml)中的溶液中喷氮。加入Pd(PPh₃)₄(0.5mg)，再给该溶液喷氮气。然后加入K₂CO₃(25.5mg)、1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(26.8mg)和水(200μl)。将该反应混合物在90℃搅拌18h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→90％乙腈，0.1％TFA；系统1)。

产量：10mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝561.2分析型HPLC：R_t＝36.38min(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.1nM

实施例56

8-甲氧基-9-吗啉-4-基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

根据实施例51c所述方法用吗啉(110μl)取代实施例53a产物(274mg)。

产量：65mg。LC/MS-ESI[M+H]⁺＝480.3分析型HPLC：R_t＝12.89min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝15.7nM

实施例57

8-甲氧基-9-吗啉-4-基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺；三氟乙酸

(a).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

根据实施例35a所述方法、由1f(1.5g)和3-乙炔基-吡啶为原料合成9-异丙氧基-8-甲氧基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯(57a)。

产量：2.08g。MS-ESI：[M+H]⁺＝407.4

(b).9-羟基-8-甲氧基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

根据实施例51a所述方法、由57a(634mg)为原料合成9-羟基-8-甲氧基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯(57b)。

产量：613mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝365.2

(c).8-甲氧基-1-吡啶-3-基-9-三氟甲磺酰氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例57b产物(220mg)、Cs₂CO₃(787mg)和1，1，1-三氟-N-苯基-N-[(三氟甲基)磺酰基]甲磺酰胺(647mg)在DMF(10ml)中的混合物在80℃搅拌2h。在室温将该反应混合物倾入水中，用二氯甲烷萃取。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：140mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝497.1

(d).8-甲氧基-9-吗啉-4-基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例57c产物(140mg)、吗啉(61μl)、2-(二-叔-丁基膦基)联苯(催化量)、磷酸三钾(180mg)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(催化量)在DME(1ml)中的混合物，在150℃使用微波照射加热1h。过滤该反应混合物，用二氯甲烷洗涤残余物。真空浓缩滤液，通过硅胶色谱法纯化，庚烷/乙酸乙酯[1∶3→0∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：101mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝434.4

(e).8-甲氧基-9-吗啉-4-基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例57d产物(101mg)、在乙醇中的固体KOH(3ml)和水(3ml)的混合物在78℃搅拌1h。在室温用柠檬酸水溶液(0.5M)将该反应混合物酸化至pH＝5-6，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：92mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝406.1

(f).8-甲氧基-9-吗啉-4-基-1-吡啶-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺；三氟乙酸

将HATU(129mg)加入到实施例57e产物(92mg)、DIPEA(198μl)和N-甲基-N-叔-丁基-胺(54μl)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中。在室温搅拌24h后，用水、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→100％乙腈；0.1％TFA；系统1)。

产量：46mg。分析型HPLC R_t＝17.90min(方法12))；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝276nM

实施例58

9-异丁基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺和8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).2，4，6-三-(2-甲基-丙烯基)-环三硼氧烷吡啶

在-70℃将在THF中的2-甲基-1-丙烯基镁溴化物(536ml 0.5M)滴加到硼酸三甲酯(54ml)在THF(320ml)中的溶液中。将该反应混合物在-70℃搅拌30min。将HCl水溶液(2N)加入到该反应混合物中，该反应混合物在室温搅拌1h。用HCl水溶液(2N)将pH调整至4。用乙醚萃取该反应混合物，用盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将残余物溶于吡啶(80ml)，在室温搅拌过夜。真空浓缩该反应混合物，通过与甲苯共蒸发除去残留的吡啶。在室温真空干燥残余物(3mm)1h。

产量：27.5g.

(b).8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

用氮气喷实施例53a产物(5.39g)在DME(150ml)中的溶液2min。加入Pd(PPh₃)₄(585mg)，用氮气(g)再喷该溶液2min，然后添加实施例58a产物(4.98g)、K₂CO₃(2g)和水(30ml)。将该反应在氮气气氛中在90℃搅拌过夜。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，用庚烷/乙酸乙酯[0→50％(v/v)]。

产量：3g。LC/MS-ESI[M+H]⁺：449.2；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝0.7nM

(c).9-异丁基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将10％碳载钯(20mg)加入到实施例58b产物(40mg)在乙酸乙酯(4ml)和甲醇(4ml)中的溶液中。将该反应混合物在氢气气氛中在室温搅拌8h。过滤该反应混合物，用乙酸乙酯洗涤，真空浓缩滤液。

产量：37mg。LC/MS-ES I[M+H]⁺：451.2；分析型HPLC：R_t＝31.03min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝4.3nM

实施例59

8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).2-三甲基硅烷基乙炔基-噻唑

在50℃将2-溴噻唑(3ml，新鲜蒸馏的)加入到Pd(PPh₃)₄(462mg)、Cu(OAc)₂(429mg)和乙炔基三甲基硅烷(10.5ml)在二异丙基胺(200ml，喷氮气)中的溶液中。在50℃搅拌2h后，用硅藻土过滤该反应混合物，用乙酸乙酯洗涤。真空浓缩滤液。通过硅胶色谱法纯化残余物，甲苯/乙酸乙酯[9/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.1g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝182.1

(b).2-乙炔基-噻唑

将KOH水溶液(0.5ml，0.1N)加入到实施例59a产物(1.1g)在甲醇(5ml)中的溶液中。在室温搅拌3h后，将该人反应混合物浓缩至小体积。用二氯甲烷稀释残余物，用水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：650mg。

(c).9-异丙氧基-8-甲氧基-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例59b产物(650mg)和实施例1g产物(1.46g)在乙酸酐(10ml)中的混合物，在140℃使用微波照射加热15min。真空浓缩该反应混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[9/1→7/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：580mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝413.1

(d).9-羟基-8-甲氧基-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

在0℃将三氯化硼(2.52ml)滴加到实施例59c产物(520mg)在二氯甲烷(12ml)中的溶液中。在室温搅拌30min后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：478mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝371.2

(e).8-甲氧基-1-噻唑-2-基-9-三氟甲磺酰氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将1，1，1-三氟-N-苯基-N-[(三氟甲基)磺酰基]-甲磺酰胺(901mg)、Cs₂CO₃(822mg)和实施例59d产物(467mg)在DMF(25ml)中的混合物在80℃搅拌2h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[7/3→3/2(v/v)]作为洗脱液。

产量：601mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝503.2。

(f).8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将Pd(PPh₃)₄(11mg)，K₂CO₃(60mg)、实施例58a产物(194mg)和实施例59e产物(200mg)在DME(3ml，喷氮气)中的混合物在90℃搅拌18h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[7/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：127mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝409.2

(g).8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将NaOH水溶液(4ml，1N)加入到实施例59f产物(127mg)在乙醇(8ml)中的溶液中。在60℃搅拌2h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用柠檬酸水溶液(2M)、水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：117mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝381.3。

(h).8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将HATU(175mg)、N-甲基-N-叔-丁基-胺(55μl)和DIPEA(0.286ml)加入到实施例59g产物(117mg)在DMF(5ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水、HCl水溶液(2N)、水、饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10％→90％乙腈；系统1)。

产量：63mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝450.3；分析型HPLC：R_t＝20.41min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.6nM

实施例60

9-异丁基-8-甲氧基-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

在氢气气氛中、在Parr装置内将实施例59h产物(55mg)和活性炭载钯(6mg)的混合物振摇18h。用硅藻土过滤该反应混合物，用乙酸乙酯洗涤。真空浓缩滤液。通过制备型HPLC纯化残余物(10％→90％乙腈；系统1)。

产量：50mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝452.3；分析型HPLC：R_t＝22.92min(方法5)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝19.0nM

实施例61

8-羟基-9-异丁基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

用氮气喷实施例51b产物(0.7g)在DME(20ml)中的溶液5min。加入Pd(PPh₃)₄(82mg)。再用氮气喷该溶液1min，然后添加实施例58a产物(0.7g)、K₂CO₃(0.3g)和水(4ml)。将该反应在90℃搅拌2h。然后再加入-定量的实施例58a产物(200mg)。将该反应混合物在85℃搅拌18h。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[0→40％(v/v)]。

产量：519mg。LC/MS-ESI[M+H]⁺＝408.2

(b).8-甲氧基-9-(2-甲基-丙烯基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将10％碳载钯(25mg)加入到实施例61a产物(155mg)在乙酸乙酯(4ml)和甲醇(4ml)中的溶液中。在氢气气氛中(3.2巴压力)、在室温将该反应混合物振摇48h。过滤该反应混合物，用乙酸乙酯洗涤，真空浓缩滤液。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[0→40％(v/v)]。

产量：102mg。

(c).8-羟基-9-异丁基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

在-20℃将三溴化硼(118μl)加入到实施例61b产物(100mg)在二氯甲烷(3ml)中的溶液中。将该混合物在-20℃搅拌3h。将该反应混合物温至室温，用甲醇淬灭，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[0→50％(v/v)]。

产量：48mg.

(d).8-羟基-9-异丁基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将氯化乙基镁(419μl，25％wt的THF溶液)缓慢加入到N-甲基-N-叔-丁基-胺(146μl)在THF(5ml)中的溶液中。在75℃搅拌1h后，滴加溶于THF(2ml)的实施例61c产物(48mg)。回流1h后，将冷却的反应混合物倾入饱和NH₄Cl水溶液中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20％→100％乙腈；系统1)。

产量：32mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝437.2；分析型HPLC：R_t＝23.06min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝5.2nM

实施例62

N-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-异丁酰胺

(a).9-异丁酰氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例51b产物(1g)、异丁酰胺(347mg)、Cs₂CO₃(1.9g)，4，5-双(二苯基膦基)-9，9-二甲基呫吨(196mg)和Pd₂(dba)₃(310mg)在二烷(15ml，喷氮气)中的混合物，在150℃使用微波照射加热1h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[100/0→7/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：460mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝439.2。

(b).9-异丁酰氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将KOH(588mg)加入到实施例62a产物(460mg)在乙醇/水(24ml，2/1(v/v))中的溶液中。在80℃搅拌1.5h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用柠檬酸水溶液(10％)和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：462mg.

(c).N-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-异丁酰胺

将HATU(66mg)、2，2-二甲基吡咯烷(50mg)和DIPEA(0.120ml)加入到实施例62b产物(30mg)在二氯甲烷(3ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用柠檬酸水溶液(10％)和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→100％乙腈；系统1)。

产量：17mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝492.3；分析型HPLC：R_t＝17.90min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝3.7nM

实施例63

[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙酸乙酯

将实施例52产物(250mg)、溴-乙酸乙酯(81μl)和Cs₂CO₃(595mg)在DMF(10ml)中的混合物在90℃搅拌1h。将该反应混合物冷却至室温，然后倾入水中，用二氯甲烷萃取。用HCl水溶液(0.5M)、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：270mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝497.1；LC/MS R_t＝4.60min；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝252.0nM

实施例64

8-甲氧基-9-甲基氨基甲酰基甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙酸

将实施例63产物(150mg)和固体KOH(51mg)在乙醇(5ml)和水(5ml)中的混合物在78℃搅拌1h。在室温用HCl水溶液(1.0M)将该反应混合物酸化至pH＝1-2，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：119mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝469.0

(b).8-甲氧基-9-甲基氨基甲酰基甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例64a产物(50mg)、DIPEA(93μl)、HATU(61mg)和甲胺盐酸盐(5.3mg)在二氯甲烷(3ml)中的混合物在室温搅拌18h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.5M)、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈系统1)。

产量：28mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝482.5；分析型HPLC：R_t＝11.73min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝3.1nM

实施例65

9-(2-叠氮基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺，8-甲氧基-9-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺，9-(2-羟基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺和甲磺酸2-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙酯.

(a).8-甲氧基-9-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例51a产物(600mg)、Cs₂CO₃(1.32g)和2-(2-溴-乙氧基)-四氢吡喃(294μl)在DMF(15ml)中的混合物在100℃搅拌4h。在室温将该反应混合物倾入水中，用二氯甲烷萃取。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：731mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝498.3

(b).8-甲氧基-9-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例65a产物(731mg)和固体KOH(250mg)在乙醇(10ml)和水(10ml)中的混合物在78℃搅拌2h。在室温用柠檬酸水溶液(2M)将该反应混合物酸化至pH＝5-6，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：682mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝468.1

(c).8-甲氧基-9-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例65b产物(682mg)、DIPEA(1.27ml)、N-甲基-N-叔-丁基-胺(348μl)和HATU(827mg)在二氯甲烷(10ml)中的混合物在室温搅拌18h。用饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：726mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝539.5；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝102.0nM

(d).9-(2-羟基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将HCl水溶液(2ml 5M)滴加到实施例65c产物(716mg)在甲醇(50ml)中的混合物中。在室温搅拌1h后，将该反应混合物倾入饱和NaHCO₃水溶液，用二氯甲烷萃取。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶2(v/v)]作为洗脱液。

产量：414mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝455.0；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.3nM

(e).甲磺酸2-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙酯

将甲磺酰氯(85μl)滴加到实施例65d产物(414mg)和三乙胺(380μl)在二氯甲烷(25ml)中的混合物中。在室温搅拌1h后，用饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶2(v/v)]作为洗脱液。

产量：465mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝533.0；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝15nM

(f).9-(2-叠氮基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例65e产物(250mg)和叠氮化钠(92mg)在DMF(15ml)中的混合物在90℃搅拌1h。在室温将该反应混合物倾入水中，用二氯甲烷萃取两次。用水、盐水洗涤两次有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：210mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝480.0；分析型HPLC：R_t＝24.73min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝7.1nM

实施例66

{2-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙基}-氨基甲酸甲酯

(a).9-(2-氨基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例65f产物(210mg)、结合的三苯膦聚合物(290mg；载有3mmol/g树脂)、水(1ml)在THF(5ml)和二氯甲烷(5ml)中的混合物在回流状态下加热18h。过滤该反应混合物，用二氯甲烷和甲醇洗涤残余物。真空浓缩滤液，溶于二氯甲烷，用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：197mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝454.1

(b).{2-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-乙基}-氨基甲酸甲酯

将甲基氯甲酸酯(15μl)滴加到实施例66a产物(66mg)和DIPEA(76μl)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中。在室温搅拌18h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.5M)、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：42mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝512.5；分析型HPLC：R_t＝15.50min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝31.3nM

实施例67

9-(2-乙酰基氨基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将乙酰氯(13μl)滴加到实施例66a产物(66mg)和DIPEA(76μl)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中。在室温搅拌18h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.5M)、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：49mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝496.3；分析型HPLC：R_t＝10.67min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝36.5nM

实施例68

9-(2-甲磺酰基氨基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将甲磺酰氯(15μl)滴加到实施例66a产物(66mg)和DIPEA(76μl)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中。在室温搅拌18h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.5M)和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：49mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝532.5；分析型HPLC：R_t＝13.94min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝16.0nM

实施例69

8-甲氧基-9-(四氢-吡喃-2-基氧基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).8-甲氧基-9-(四氢-吡喃-2-基氧基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

在0℃将2，3-二氢吡喃(50μl)和吡啶对-甲苯磺酸盐(催化量)加入到实施例51a产物(100mg)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中，将该反应混合物在40℃搅拌18h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：100mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝454.0

(b).8-甲氧基-9-(四氢-吡喃-2-基氧基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例69a产物(100mg)和固体KOH(37mg)在乙醇(4ml)和水(4ml)中的混合物在78℃搅拌2h。在室温将该反应混合物酸化至pH＝5，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。产量：100mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝426.3

(c).8-甲氧基-9-(四氢-吡喃-2-基氧基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例69b产物(100mg)、DIPEA(205μl)，N-甲基-N-叔-丁基-胺(56μl)和HATU(134mg)在二氯甲烷(5ml)中的混合物在室温搅拌18h。用饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：85mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝495.5；分析型HPLC Rt：23.59min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝6.9nM

实施例70

9-(3-氨基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺，8-甲氧基-9-[3-(四氢-吡喃-2-基氧基)-丙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺，9-(3-羟基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺，甲磺酸3-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-丙酯和9-(3-叠氮基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a)8-甲氧基-9-[3-(四氢-吡喃-2-基氧基)-丙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例51a产物(1.31g)、K₂CO₃(12.3g)和2-(1-溴-3-丙氧基)-四氢吡喃(1.21ml)在DMF(45ml)中的混合物在60℃搅拌2h、在室温搅拌18h。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：1.83g。LC/MS-ES I：[M+H]⁺＝512.1

(b).8-甲氧基-9-[3-(四氢-吡喃-2-基氧基)-丙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将KOH(1g)加入到实施例70a产物(1.83g)在乙醇/水(60ml，1/1(v/v))中的溶液中。在80℃搅拌1h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用柠檬酸水溶液(10％)和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：1.63g.

(c).8-甲氧基-9-[3-(四氢-吡喃-2-基氧基)-丙氧基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将HATU(1.93g)、N-甲基-N-叔-丁基胺(2.02ml)和DIPEA(2.79ml)加入到实施例70b产物(1.63g)在DMF(20ml)中的溶液中。在50℃搅拌2h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.9g。MS-ESI：[M+H]⁺＝553.1；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝155.0nM

(d).9-(3-羟基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例70c产物(1.83g)和一水合对-甲苯磺酸(942mg)在甲醇(30ml)中的混合物在室温搅拌1h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[100/0→0/100(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.28g。MS-ESI：[M+H]⁺＝469.2；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.3nM

(e).甲磺酸3-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基氧基]-丙酯

将甲磺酰氯0.99ml)和三乙胺(0.443ml)加入到实施例70d产物(500mg)在二氯甲烷(25ml)中的溶液中。在室温搅拌1h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[100/0→1/1(v/v)]作为洗脱液。产量：503mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝547.1

(f).9-(3-叠氮基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将叠氮化钠(179mg)加入到实施例70e产物(503mg)在DMF(25ml)中的溶液中。在90℃搅拌2h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：452mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝494.1；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝10.9nM

(g).9-(3-氨基-丙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将水(3ml)和结合的三苯膦聚合物(613mg；载有3mmol/g树脂)加入到实施例70f产物(454mg)在THF/二氯甲烷(30ml，1/1(v/v))中的溶液中。在40℃搅拌18h后，过滤该反应混合物。真空浓缩滤液。

产量：442mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝468.2；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝111.0nM

实施例71

8-甲氧基-9-(2-甲基硫烷基-乙氧基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例65e产物(124mg)和甲基硫化钠(32mg)在DMF(5ml)中的混合物在50℃搅拌1h。将该反应混合物倾入水中，用二氯甲烷萃取两次。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶2(v/v)]作为洗脱液。

产量：97mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝485.2；分析型HPLC R_t＝22.30min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝26.3nM

实施例72

9-(2-甲磺酰基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例71产物(30mg)和3-氯过苯甲酸(45.8mg)在二氯甲烷(3ml)中的混合物在室温搅拌1h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：12mg。MS-ESI：[M+H]⁺517.5；分析型HPLC：R_t＝15.23min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝16.9nM

实施例73

9-(2-二甲基氨基-乙氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺；三氟乙酸

将实施例52产物(50mg)、Cs₂CO₃(120mg)和(2-氯-乙基)-二甲基-胺(20mg)在DMF(5ml)中的混合物在100℃搅拌2h。使该反应混合物达到室温，用二氯甲烷稀释。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→100％乙腈；0.1％TFA；系统1)。

产量：42mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝482.5；分析型HPLC：Rt＝11.98min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝118nM

实施例74

N-叔-丁基-8-甲氧基-9-(3-甲氧基苯氧基)-N-甲基-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酰胺

(a).8-甲氧基-9-(3-甲氧基苯氧基)-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例51a产物(150mg)、3-甲氧基苯基硼酸(140mg)、二氯甲烷(2.5ml)、Cu(OAc)₂(80mg)、吡啶(250μl)、筛(2g)的混合物在室温搅拌24h。用水、饱和NH₄Cl水溶液和乙酸乙酯稀释该反应混合物。将该反应混合物搅拌10min，通过Hyflo过滤，用乙酸乙酯萃取。真空浓缩有机溶液。通过短的二氧化硅柱过滤，使用庚烷/乙酸乙酯作为洗脱液。

产量：160mg。TLC R_f＝0.55(庚烷/乙酸乙酯1/1)；¹H NMR(DMSO-d6)3.70(s，3，OCH₃)，3.78(s，3，OCH₃)，3.10(t，2，C(6)H₂)，4.55(t，2，C(5)H₂)，6.85(s，1，H(3)；LC/MS-ES I：[M+H]⁺＝476。

(b).8-甲氧基-9-(3-甲氧基苯氧基)-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例74a产物(160mg)、二烷(2ml)、水(2ml)和100mgKOH(100mg)的混合物在100℃加热90min。将该反应混合物真空浓缩至小体积，用柠檬酸水溶液(1M)酸化至pH 3-4。真空干燥作为白色结晶物质沉淀的产物(50℃)。

产量：120mg。Mp：172-174℃(分解)；TLC R_f＝0.15(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝448。

(c).N-叔-丁基-8-甲氧基-9-(3-甲氧基苯氧基)-N-甲基-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酰胺

将实施例74b产物(120mg)、N-乙基吗啉(120μl)、120μl N-甲基-N-叔-丁基胺(120μl)、1ml DMF(1ml)、HOBt(20mg)和TBTU(160mg)的混合物在室温搅拌18h。加入饱和NH₄Cl水溶液。将该反应混合物搅拌10min，用乙酸乙酯萃取。用水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯作为洗脱液。

产量：75mg。Mp：176-177℃；TLC R_f＝0.53(庚烷/丙酮1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝517；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝203.0nM

实施例75

9-(3-氟-苯氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a)9-(3-氟苯氧基)-8-甲氧基-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

按照与实施例74a所述类似的方式、以实施例51a的产物为原料制备该产物。

Mp：139-140℃；TLC R_f＝0.60(hept/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝446

(b)9-(3-氟苯氧基)-8-甲氧基-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

按照与实施例74b所述类似的方式、由实施例75a产物(130mg)制备该产物。

产量：100mg。Mp：179-183℃(脱羧)；TLC R_f＝0.15(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝436

(c)9-(3-氟-苯氧基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺.

按照与实施例74c所述类似的方式、由实施例75b产物(200mg)制备该产物。

产量：120mg。Mp：158-159℃；¹H NMR(DMSO-d6)δ6.38(s，1H，H2)，6.96(s，1H，H7)，7.18(s，1H，H10)，7.38(dd，1H，噻吩)，6.98(dd，1H，噻吩)，6.92(m，1H，噻吩)，7.30，6.85，6.62(m，4H、4F-Phe)，3.75(s，3H，OCH3)，4.18(t，2H，H6)，3.05(m，5H、H6+NMe)，1.41(s，9H、叔-丁基)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝505.5；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝16.3nM

实施例76

N-叔-丁基-8-甲氧基-N-甲基-9-(嘧啶-2-基氧基)-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酰胺

(a).8-甲氧基-9-(嘧啶-2-基氧基)-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例51a产物(100mg)、2-溴嘧啶(50mg)、Cs₂CO₃(300mg)、Cu粉(9mg)在DMF(2ml)中的混合物在140℃使用微波照射加热25min。用饱和NH₄Cl水溶液稀释该反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。使残余物通过短的二氧化硅垫(二氯甲烷/乙酸乙酯)，与二异丙基醚一起研磨，得到白色结晶。

产量：145mg。TLC R_f＝0.20(庚烷/乙酸乙酯1/1)TLC R_f原料＝0.40；Mp：163-164℃；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝448

(b).8-甲氧基-9-(嘧啶-2-基氧基)-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

按照与实施例74b所述类似的方式、由实施例76a产物(140mg)制备该产物。

产量：95mg。TLC R_f＝0.30(二氯甲烷/丙酮1/1v/v)；Mp：227℃。

(c)N-叔-丁基-8-甲氧基-N-甲基-9-(嘧啶-2-基氧基)-1-(噻吩-2-基)-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酰胺

按照与实施例74c所述类似的方式、由实施例76b产物(90mg)制备该产物。

产量：65mg。Mp：164-165℃；TLC R_f＝0.45(庚烷/丙酮1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝489.3；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝18.9nM

实施例77

1-[4-(9-环丙基甲氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-全氢化-1，4-二氮杂环庚烷-1-基]-乙酮

(a)1-[4-(9-羟基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-全氢化-1，4-二氮杂环庚烷-1-基]-乙酮.

在-10℃向实施例12a产物(315mg)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入三氯化硼溶液(5ml 1M的二氯甲烷溶液)。15min后反应完成，通过添加水使反应停止。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将残余物与丙酮/乙醚一起研磨。

产量：284mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝366

(b).1-[4-(9-环丙基甲氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-全氢化-1，4-二氮杂环庚烷-1-基]-乙酮

搅拌实施例77a产物(36mg)、K₂CO₃(70mg)和环丙基甲基溴(30mg)在DMF(1ml)中的混合物，在220℃使用微波照射加热5min。冷却该反应混合物，用水稀释，用乙酸乙酯萃取。用水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：15mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝520；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝57.6nM

实施例78

1-{4-[8-甲氧基-9-(四氢-呋喃-2-基甲氧基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基]-全氢化-1，4-二氮杂环庚烷-1-基}-乙酮

按照与实施例77b所述类似的方式、由实施例77a产物(15mg)制备该产物。

产量：2.2mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝550；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝96.2nM

实施例79

1-[4-(9-环戊基氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-全氢化-1，4-二氮杂环庚烷-1-基]-乙酮

按照与实施例77b所述类似的方式、由实施例77a产物(15mg)制备该产物。

产量：4.4mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝534；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝14.2nM

实施例80

1-{4-[8-甲氧基-9-(3-甲基-丁氧基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基]-全氢化-1，4-二氮杂环庚烷-1-基}-乙酮

按照与实施例77b所述类似的方式、由实施例77a产物(215mg)制备该产物。

产量：60mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝536；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝101.0nM

实施例81

9-异丁基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-甲基-酰胺

(a).9-异丁基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

按照与实施例1i所述类似的方式、由实施例61b产物(3.19g)为原料制备该产物。

产量：3.2g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝382.2

(k).9-异丁基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-甲基-酰胺

用草酰氯溶液(400μl 2M的二氯甲烷溶液)处理实施例81a产物(215mg)在二氯甲烷(2m l)中的淤浆。加入1滴DMF。将该混合物在室温搅拌1h。真空浓缩该反应混合物，再溶于二氯甲烷(2ml)。用2-甲基-2-甲基氨基-丙-1-醇(175mg；按照与S.G。Kuznetsov，A.V.Eltsov，J.Gen.Chem.USSR，32，502(1962)所述类似的方式制备)处理该溶液，在室温搅拌1h。将该反应混合物倾入NaHCO₃水溶液(5％)中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将残余物与庚烷/乙酸乙酯一起研磨，得到结晶物质。

产量：80mg。Mp 114-116℃；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝476.5；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝6.0nM

实施例82

(9-溴-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-甲酮

(a).3-甲氧基-4-硝基-苯甲醛

将3-羟基-4-硝基苯甲醛(51.3g)、碘甲烷(38.3ml)和K₂CO₃(85g)在DMF(250ml)中的混合物在60℃搅拌1h。将该反应混合物冷却至室温，倾入水(600ml)中。通过过滤收集固体，真空干燥(50℃)。

产量：49.7g。

(b).4-氨基-3-甲氧基-苯甲醛

将铁(112g)加入到实施例82a产物(49.7g)和氯化铵(103g)在乙醇(500ml)和水(500ml)中的混合物中。在78℃用机械搅拌器搅拌2h后，将该反应混合物冷却至室温，用乙醚(3x500ml)萃取。真空浓缩合并的有机层，将水(400ml)加入到残余物中。通过过滤收集固体，真空干燥(50℃)。

产量：38.3g.

(c).4-溴-3-甲氧基-苯甲醛

将实施例82b产物(38.3g)在乙腈(600ml)中的溶液滴加到n-丁腈(43.1ml)和溴化亚铜(I)(63.6g)在乙腈(1300ml)中的混合物中。在室温搅拌18h后，用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用HCl水溶液(1N)洗涤。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过用庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]的硅胶色谱法纯化残余物。

产量：27.4g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝215.1/217.0。

(d).1-溴-2-甲氧基-4-((E)-2-硝基-乙烯基)-苯

将实施例82c产物(27.4g)、乙酸铵(10.8g)和硝基甲烷(35ml)在乙酸(125ml)中的混合物在80℃搅拌18h。将该反应混合物冷却至室温，倾入水(11)中。通过过滤收集固体，溶于二氯甲烷(21)。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：29.8g.

(e).2-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-乙胺

在0℃和氮气气氛中将硼烷-THF复合物溶液(262ml 1M)滴加到实施例82d产物(15g)在THF(250ml)中的溶液中。添加后，除去冰浴。加入硼氢化钠(0.11g)(轻度放热反应发生)。在65℃、氮气气氛中搅拌18h后，将该反应混合物冷却至室温，倾入HCl水溶液(250ml 2M)中。在70℃搅拌1.5h后，将该反应混合物冷却至室温，用乙醚萃取两次。用固体NaOH使水层呈碱性至pH＝10，用乙酸乙酯萃取三次。用盐水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：13.5g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝230.1/232.1

(f).[2-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-乙基]-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯

将氯甲酸9-芴基甲酯(29.2g)在二氯甲烷(100ml)中的溶液滴加到实施例82e产物(22.4g)和DIPEA(51ml)在二氯甲烷(300ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，用HCl水溶液(1M)、水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将残余物溶于乙醚，通过过滤收集固体，真空干燥(50℃)。

产量：35.1g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝454.1

(g).7-溴-6-甲氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-1，2-二甲酸2-(9H-芴-9-基甲基)酯

在0℃将浓硫酸(140ml)滴加到实施例82f产物(35.1g)和水合乙醛酸(8.57g)在乙酸(700ml)中的溶液中。在室温搅拌1h后，将该反应混合物倾倒在碎冰上，用乙酸乙酯萃取两次。用HCl水溶液(0.2M)、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过与甲苯共蒸发除去残留溶剂(两次)。

产量：39.8g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝508.1/510.1

(h).7-溴-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

将实施例82g产物(37.8g)和哌啶(36.7ml)在DMF(350ml)中的混合物在室温搅拌15min。真空浓缩该反应混合物，将残余物溶于THF(200ml)和乙醚(200ml)。通过过滤收集固体，真空干燥(50℃)。

产量：18.5g

(i).9-溴-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例82h产物(3g)和乙基草酰氯(1.4ml)在THF(25ml)中的混合物在65℃搅拌30min，真空浓缩该反应混合物。将残余物和2-乙炔基-噻吩(1.24ml)在乙酸酐(10ml)中的混合物在140℃使用微波照射加热15min。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水、饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：3.82g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝432.0/434.0

(j).9-溴-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例82i产物(200mg)和固体KOH(100mg)在乙醇(4ml)和水(1ml)中的混合物在80℃搅拌1h。在室温用HCl水溶液(6M)酸化该反应混合物。用乙酸乙酯萃取水层。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：180mg.

(k).(9-溴-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-甲酮

将实施例82j产物(50mg)、DIPEA(150μl)、BOP(137mg)和环丁基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-甲酮(55mg)的混合物在室温搅拌18h。用水、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(30→90％乙腈；系统1)。

产量：42mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝568.1/570.1；分析型HPLCR_t＝23.89min；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝5.8nM

实施例83

9-氰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).9-氰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例80i产物(48mg)、氰化亚铜(I)(20mg)和碘化亚铜(I)(2.1mg)在NMP(1ml)中的混合物在180℃使用微波照射加热15min。真空浓缩该反应混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：41mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝379.3

(b).9-氰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例83a产物(41mg)和固体KOH(18mg)在乙醇(2ml)和水(2ml)中的混合物在80℃搅拌4h。在室温用柠檬酸水溶液(2M)酸化该反应混合物，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：43mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝351.1

(c).9-氰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将HATU(70mg)加入到实施例83b产物(43mg)、DIPEA(107μl)和N-甲基-N-叔-丁基-胺(29μl)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.5M)、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：26mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝420.2；分析型HPLC：R_t＝19.52min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝4.3nM

实施例84

3-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-甲酸乙酯

(a).8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3，9-二甲酸9-乙酯

在-70℃将n-丁基锂(1.26ml，1.6M于庚烷中)滴加到实施例80j产物(370mg)在THF(15ml)中的溶液中。在-70℃搅拌30min后，用氯甲酸乙酯(0.4ml)处理该反应混合物。在室温用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：100mg.

(b).3-(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-甲酸乙酯

根据实施例13所述方法使实施例7b产物(50mg)和实施例84a产物(50mg)形成酰胺。

产量：52mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝548.2；分析型HPLC：R_t＝17.3min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.9nM

实施例85

8-甲氧基-9-丙-1-炔基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺和9-溴-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).9-溴-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将溶于THF(6ml)的氯化乙基镁(6.6ml，25％WT的THF溶液)缓慢加入到N-甲基-N-叔-丁基-胺(2.3ml)在THF(6ml)中的溶液中。在75℃搅拌1h后，滴加溶于THF(3ml)的实施例82i产物(1.1g)。在75℃再搅拌1h后，将该反应混合物倾入饱和NH₄Cl水溶液中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将残余物溶于最少量乙醇，然后添加少量水。用冰浴冷却后，过滤沉淀。

产量：667mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝473/475；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝11.3nM

(b).8-甲氧基-9-丙-1-炔基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

搅拌实施例85a产物(50mg)、Pd(PPh₃)₄(12.2mg)和三丁基(1-丙炔基)锡(104mg)在甲苯(1ml，喷氮气)中的混合物，在150℃使用微波照射加热20min。过滤该反应混合物，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10→90％乙腈；系统1)。

产量：10mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝433.2；分析型HPLC：R_t＝24.47min(方法5)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.7nM

实施例86

8-甲氧基-9-(吗啉-4-羰基)-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-甲酸甲酯

用CO(g)净化实施例53a产物(1g)、三乙胺(0.771ml)和1，3-二(苯基膦基)丙烷(184mg)在10ml DMF和10ml甲醇中的混合物10min。然后加入乙酸钯(II)(103mg)。将该反应混合物在在70℃、在CO(g)气氛中搅拌72h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过庚烷/乙酸乙酯[0→50％乙酸乙酯]中的硅胶色谱法纯化残余物。

产量：476mg。LC-MS-ESI：[M+H]⁺＝453.2

(b).3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-甲酸

将实施例86a产物(500mg)混悬于甲醇(10ml)和水(10ml)。加入KOH(620mg)，将该反应混合物在回流状态下加热2h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用柠檬酸水溶液(2N)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：485mg LC-MS-ESI：[M+H]⁺＝439.2

(c).8-甲氧基-9-(吗啉-4-羰基)-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]-异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例86b产物(60mg)、HATU(86mg)、DIPEA(70μl)和吗啉(36μl)在二氯甲烷(5ml)中的混合物在室温搅拌2h。用水和盐水洗涤该反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：41mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝508.2；分析型HPLC：R_t＝1.95min(方法13)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝69.4nM

实施例87

8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3.9-二甲酸3-(叔-丁基-甲基-酰胺)9-[(2-羟基-乙基)-酰胺]

将实施例86b产物(60mg)、HATU(186mg)、DIPEA(70μl)和乙醇胺(25μl)在二氯甲烷(5ml)中的混合物在室温搅拌2h。用水和盐水洗涤该反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：30mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝482.2；分析型HPLC：R_t＝1.55(方法13)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝23.9nM

实施例88

9-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

搅拌实施例85a产物(25mg)、9，9-二甲基-4，5-双(二苯基膦基)-呫吨(6mg)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(5mg)、Cs₂CO₃(20mg)和2-吡咯烷酮(24mg)在二烷/NMP[0.5ml 9/1(v/v)]中的混合物，在150℃使用微波照射加热5min。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2/8→7/3(v/v)]作为洗脱液。

产量：1mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝448；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝310.0nM

实施例89

9-(2-氧代-唑烷-3-基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

按照与实施例88所述类似的方式、以实施例85a产物(25mg)为原料制备该产物。

产量：5mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝450；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝245.0nM

实施例90

9-(2-氧代-咪唑烷-1-基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

按照与实施例88所述类似的方式、以实施例85a产物(25mg)为原料制备该产物。

产量：5mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝449；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝218.0nM

实施例91

9-(3-羟基-丙基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺和9-甲酰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺.

(a).9-甲酰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

在-60℃向实施例85a产物(1.27g)在乙醚(12ml)和THF(3ml)混合物中的混悬液中加入n-丁基锂溶液(2ml 1.6M于庚烷中)。将该混合物在-60℃搅拌30min，然后用DMF(300μl)处理。除去冷却装置，在环境温度持续搅拌30min。通过添加水使反应停止，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过短的二氧化硅柱色谱法纯化残余物(庚烷/乙酸乙酯作为洗脱液)。将产物与庚烷/二异丙基醚一起研磨。

产量：650mg。Mp 193-194℃；TLC R_f＝0.35(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝423.3；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝6nM。

(b).(E)-3-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并-[2，1-a]异喹啉-9-基]-丙烯酸乙酯

用氢化钠(60mg，60％在油中的分散液)处理三乙基膦酰乙酸酯(200μl)在THF(2ml)中的溶液。20min后，分小部分加入实施例91a产物(400mg)。30min后反应完成。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过短的二氧化硅柱色谱法纯化残余物，与庚烷一起研磨，得到白色结晶物质。

产量：350mg。Mp 163-164℃；TLC R_f＝0.28(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝493.5

(c).3-[3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-丙酸乙酯

在2巴压力下、在10％Pd/C(200mg)的存在下氢化实施例91b产物(350mg)在乙醇和乙酸乙酯[20ml 1/2(v/v)]中溶液。48h后，缓慢的氢化几乎完成。通过短的二氧化硅柱色谱法纯化反应产物，与庚烷一起研磨，得到白色结晶物质。

产量：170mg。Mp 127-128℃TLC R_f＝0.50(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝495.5

(d).9-(3-羟基-丙基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

用LiAlH₄(6mg)处理实施例91c产物(60mg)在THF(2ml)中的溶液。搅拌60min后，还原完成。用饱和Na₂SO₄水溶液稀释该反应，用乙酸乙酯萃取。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过二氧化硅柱色谱法纯化残余物(庚烷/乙酸乙酯1/1)，然后用乙酸乙酯/乙醚处理，得到白色固体。

产量：45mg。Mp 163-164℃.TLC R_f＝0.30(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝453.5；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝0.4nM

实施例92

9-(3-羟基-3-甲基-丁基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

在室温用氯化甲基镁(200μl 2M的THF溶液)处理实施例91c产物(85mg)在THF(2ml)中的溶液。搅拌1h后，反应完成。加入饱和NH₄Cl水溶液，用乙酸乙酯萃取该混合物。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过短的二氧化硅柱色谱法纯化残余物，然后从乙醚中结晶，得到白色固体。

产量：70mg。Mp 153-154℃ TLCR_f＝0.24(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝481.5；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝6.0nM

实施例93

(9-(2，2-二氟-乙烯基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

在-70℃向由在干THF(2ml)中的二异丙基胺(50μl)和n-丁基锂(200μl 1.6M于庚烷中)制备的LDA溶液中加入二氟甲基二苯基膦氧化物(75mg；由二溴二氟甲烷和三苯膦制备)在THF(0.5ml)中的溶液。将该混合物在-70℃搅拌20min，然后加入实施例91a产物(125mg)在0.5ml干THF中的溶液。将该反应混合物在环境温度搅拌10min，在80℃加热30min。加入水，用乙酸乙酯萃取该混合物。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过二氧化硅色谱法纯化残余物(庚烷/乙酸乙酯2/1)。将分离的产物与冷庚烷一起研磨。

产量：55mg。Mp111-112℃.TLC R_f＝0.47(庚烷/乙酸乙酯1/1)，TLC R_f原料＝0.30；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝3.0nM

实施例94

8-甲氧基-9-硝基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).N-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-草酰酸乙酯

在0℃将乙基草酰氯(1.5ml)在二氯甲烷(5ml)中的溶液滴加到3-甲氧基苯乙胺(3-methoxyphenetylamine)(2.0ml)和DIPEA(4.8ml)在二氯甲烷(40ml)中的溶液中。将该反应混合物搅拌1h，用柠檬酸水溶液(2M)、水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：2.76g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝252.2

(b).6-甲氧基-3，4-二氢-异喹啉-1-甲酸乙酯

在80℃将溶于二氯甲烷(20ml)的实施例94a产物(10g)加入到五氧化二磷(10g)在甲磺酸(40ml)中的溶液中。在80℃搅拌2h后，将该反应混合物倾到在固体NaHCO₃上，用冰水稀释，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：9.3g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝234.2

(c).6-甲氧基-7-硝基-3，4-二氢-异喹啉-1-甲酸乙酯

在0℃将硝酸钾(3.59g)加入到实施例94b产物(9.2g)在硫酸(50ml)中的搅拌溶液中。在室温搅拌2h后，将该反应混合物倾入冰水中，用NaHCO₃中和，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2/8(v/v)]作为洗脱液。

产量：6.04g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝279.1

(d).6-甲氧基-7-硝基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸乙酯

在15min期限内将氰基硼氢化钠(10.64g)逐步加入到实施例94c产物(6.04g)在乙酸(100ml)中的搅拌溶液中。搅拌1h后，将该反应混合物倾入冰水，用Na₂CO₃呈碱性，用乙酸乙酯萃取，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2/8(v/v)]作为洗脱液。

产量：3.6g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝281.1

(e).N-叔-丁基-N-甲基-草酰酸乙酯

在0℃将甲基叔-丁基胺(13.2ml)滴加到甲基草酰氯(9.2ml)和吡啶(10.5ml)在二氯甲烷(140ml)中的溶液中。搅拌1h后，用HCl水溶液(2M)和盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：17.3g.

(f).N-叔-丁基-N-甲基-草酰酸

在0℃将溶于甲醇(100ml)的氢氧化钾(6.2g)滴加到实施例94e产物(17.3g)在甲醇(120ml)中的溶液中。将该反应混合物温至室温，真空浓缩。将残余物溶于水(50ml)，用硫酸溶液(10％)酸化至pH＝4，过滤，真空干燥。产量：7g.

(g).2-(叔-丁基-甲基-氨基草酰基)-6-甲氧基-7-硝基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸乙酯

将实施例94d产物(3.2g)、实施例94f产物(2.0g)、TBTU(5.5g)和DIPEA(9.94ml)在二氯甲烷(150ml)中的混合物在室温搅拌1h。用水和盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[3/7(v/v)]作为洗脱液。

产量：3.79g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝422.2

(h).2-(叔-丁基-甲基-氨基草酰基)-6-甲氧基-7-硝基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

将实施例94g产物(3.78g)和氢氧化钾(1.0g)在四氢呋喃(100ml)和水(50ml)中的混合物在室温搅拌1h。用HCl水溶液(10％)酸化该反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：3.11g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝394.2

(i).8-甲氧基-9-硝基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

在140℃使用微波照射将实施例94h产物(2.62g)和2-乙炔基噻吩(0.779ml)在乙酸酐(15ml)中的混合物加热15min。将该反应混合物倾入冰水，用NaHCO₃碱化，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2/8(v/v)]作为洗脱液。

产量：2.51g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝440.1；分析型HPLC：R_t＝19.67(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝3.0nM

实施例95

9-氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

在0℃将乙酸(0.39ml)逐步加入到实施例94产物(300mg)在THF(10ml)中的溶液中，然后逐步添加锌(893mg)。在室温搅拌2h后，用硅藻土过滤该反应混合物。真空浓缩滤液，溶于乙酸乙酯。用饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤有机层。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→100％乙腈；系统1)。

产量：159mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝410.2；分析型HPLC：R_t＝26.18min(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝44.8nM

实施例96

9-(2-二甲基氨基-乙酰基氨基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).9-(2-溴-乙酰基氨基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

在6h期限内将溴乙酰基溴(0.137ml)加入到实施例95产物(500mg)和DIPEA(0.425ml)在二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中。真空浓缩该反应混合物。

产量：648mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝530.1/532.1

(b).9-(2-二甲基氨基-乙酰基氨基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6，6a，10a-四氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例96a产物(100mg)、DIPEA(0.165ml)和N，N-二甲基胺盐酸(66mg)在THF(4ml)中的混合物在室温搅拌18h。用水和盐水洗涤该反应混合物，干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→80％乙腈，0.1％TFA；系统1)。

产量：33mg(为TFA-盐)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝495.2；分析型HPLC：R_t＝24.61(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.8nM

实施例97

9-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙酰基氨基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例96a产物(100mg)、DIPEA(0.165ml)和氮杂环丁烷(37mg)在THF(4ml)中的混合物在室温搅拌18h。用水和盐水洗涤反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→80％乙腈，0.1％TFA；系统1)。

产量：11mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝507.3；分析型HPLC：R_t＝25.06(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝4.0nM

实施例98

8-甲氧基-9-(2-甲氧基-乙酰基氨基)-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例95产物(30mg)、三乙胺(10.2μl)和甲氧基乙酰氯(6.7μl)的混合物在室温搅拌3h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→90％乙腈；系统1)。

产量：16mg。MS-ESI[M+H]⁺482.5；分析型HPLC：R_t＝35.92min(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.4nM

实施例99

[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-氨基甲酸乙酯

(a).(2，2-二甲基-吡咯烷-1-基)-氧代-乙酸乙酯

在0℃将甲基草酰氯(5ml)滴加到2，2-二甲基吡咯烷(8.11g)和吡啶(5.7ml)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中，搅拌1h后，用HCl水溶液(2N)和盐水洗涤该反应混合物，干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：6.62g.

(b).(2，2-二甲基-吡咯烷-1-基)-氧代-乙酸

在0℃将溶于甲醇(100ml)的KOH(2.20g)滴加到实施例99a产物(6.62g)在甲醇(120ml)中的溶液中。将该反应混合物温至室温，真空浓缩。将残余物溶于水(30ml)，用H₂SO₄水溶液(10％)酸化至pH＝4，过滤，真空干燥。

产量：3.35g.

(c)2-[2-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-基)-2-氧代-乙酰基]-6-甲氧基-7-硝基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸乙酯

将实施例94d产物(3.0g)、实施例99b产物(2.2g)、TBTU(5.16g)和DIPEA(9.3ml)在二氯甲烷(150ml)中的混合物在室温搅拌1h。用水和盐水洗涤该反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[10/0→0/10(v/v)]作为洗脱液。

产量：4.37g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝434.2

(d).2-[2-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-基)-2-氧代-乙酰基]-6-甲氧基-7-硝基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

将实施例99c产物(4.37g)和氢氧化钾(1.13g)在THF(100ml)和水(50ml)中的混合物在室温搅拌1h。用HCl水溶液(2N)酸化该反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：3.18g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝406.2

(e)(2，2-二甲基-吡咯烷-1-基)-(8-甲氧基-9-硝基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将实施例99d产物(3.18g)和2-乙炔基噻吩(1.82ml)在乙酸酐(15ml)中的混合物在140℃使用微波照射加热15min。将该反应混合物倾入冰水中，用NaHCO₃中和，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。使残余物从乙醚中结晶。

产量：2.28g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝452.2

(f)(9-氨基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮

在0℃将锌(29.0g)逐步加入到实施例99e产物(10.0g)在THF(500ml)和乙酸(12.7ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，用硅藻土过滤该反应混合物。用饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤滤液。用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：10.36g：LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝422.18

(g).[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-氨基甲酸乙酯

将实施例99f产物(50mg)、DIPEA(0.041ml)和氯甲酸乙酯(0.011ml)在二氯甲烷(2ml)中的溶液在20℃搅拌2h。用水和盐水洗涤该反应混合物，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10→100％乙腈；系统1)。

产量：38mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝494.1；分析型HPLC：R_t＝15.28(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝22nM

实施例100

N-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-甲磺酰胺

将实施例99f产物(50mg)、DIPEA(0.041ml)和甲磺酰氯(0.011ml)在二氯甲烷(2ml)中的溶液在20℃搅拌2h。用水和盐水洗涤该反应混合物，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→80％乙腈；系统1)。

产量：25mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝500.1；分析型HPLC：R_t＝21.15min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.0nM

实施例101

N-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-2-吗啉-4-基-乙酰胺

(a).2-溴-N-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-乙酰胺

在6h期限内将溴乙酰基溴(0.155ml)加入到实施例99f产物(500mg)和DIPEA(0.413ml)在二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中。真空浓缩该反应混合物。

产量：643mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝542.0/544.0

(b).N-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-2-吗啉-4-基-乙酰胺

将实施例101a产物(100mg)、DIPEA(0.165ml)和吗啉(62mg)在THF(4ml)中的混合物在室温搅拌18h。用水和盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(0→80％ACN，0.1％TFA；系统1)。

产量：95mg(TFA盐)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝549.2；分析型HPLC：R_t＝27.19min(方法12)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.0nM

实施例102

8-甲氧基-9-[(吡啶-3-羰基)-氨基]-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例95产物(50mg)、吡啶-3-甲酸(30mg)、TBTU(150mg)、DIPEA(300μl)和HOBt(20mg)在吡啶(1ml)中的混合物在室温搅拌1h。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过色谱法纯化粗物质(庚烷/丙酮1/1v/v)，使用乙醚研磨。

产量：30mg。Mp 223-224℃，TLC R_f＝0.25(庚烷/丙酮1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝515,3；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝13.0nM

实施例103

9-二甲基氨基磺酰基氨基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).9-氨基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

用氮气净化9-溴-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺(500mg)、LiHMDS(1.25ml 20％的THF溶液)、(叔Bu)₃P(3mg)、Pd₂(dba)₃(10mg)在甲苯(20ml)中的溶液，然后在100℃加热16hr。冷却该反应混合物，用NaOH溶液(10ml2N)和水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(庚烷/乙酸乙酯)。

产量：153mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝380

(b).9-二甲基氨基磺酰基氨基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

搅拌实施例103a产物(36mg)、三乙胺(20mg)和二甲基氨磺酰氯(15mg)在二氯甲烷(1ml)中的溶液，在140℃使用微波照射加热5min。用二氯甲烷稀释该反应，用HCl水溶液(2N)和NaHCO₃水溶液(10％)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过短硅胶柱纯化残余物，使用甲苯/EtOAc(2/1v/v)作为洗脱液。

产量：13mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝487；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝756.0nM

实施例104

(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(1-甲基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮

(a).8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

根据实施例1i所述方法合、由2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙胺合成8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸。

产量：3.16g。MS-ESI：[M+H]⁺＝356.0

(b).1-甲基-环丁烷甲酸

在0℃将n-丁基锂(13.75ml，1.6M于庚烷中)滴加到二异丙基胺(3.08ml)在THF(30ml)中的溶液中。在0℃搅拌30min后，将该反应混合物冷却至-20℃，然后滴加溶于THF(10ml，干)的环丁烷甲酸(0.956ml)，得到约0.25M阴离子溶液。在0℃将碘甲烷(1.0ml)滴加到新鲜制备的阴离子溶液(20ml，0.25M)中。在室温搅拌18h后，用饱和NH₄Cl水溶液使该反应混合物淬灭，真空浓缩至小体积。将残余物溶于NaOH水溶液(5％)，用乙醚萃取。酸化水层，用二氯甲烷萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：470mg。

(c).4-(1-甲基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯

将HATU(1.71g)，[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.813ml)和DIPEA(3.58ml)加入到实施例104b产物(470mg)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中。在室温搅拌2h后，将该反应混合物倾入柠檬酸水溶液(10％)，用乙酸乙酯萃取。用饱和NaHCO₃水溶液洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，甲苯/丙酮[100/0→3/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：591mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝297.4

(d).[14]二氮杂环庚烷-1-基-(1-甲基-环丁基)-甲酮，盐酸盐将HCl溶液(4ml，4N于二烷中)加入到实施例104c产物(580mg)在二氯甲烷(25ml)中的溶液中。在室温搅拌4h后，真空浓缩该反应混合物。

产量：473mg(为HCl-盐)。

(e).(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[4-(1-甲基-环丁烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基]-甲酮

根据实施例104c所述方法使实施例104d产物(85mg)与实施例104a产物(64mg)形成酰胺。通过制备型HPLC纯化残余物(20％→100％乙腈；系统1)。

产量：60.4mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝534.3；分析型HPLC：R_t＝18.67min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝3.0nM

实施例105

环丁烷甲酸[(S)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-哌啶-3-基]-酰胺

(a).[(S)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-哌啶-3-基]-氨基甲酸叔丁酯

根据实施例104c所述方法使(S)-哌啶-3-基-氨基甲酸叔丁酯(168mg)与实施例104a产物(200mg)形成酰胺。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/1→0/100(v/v)]作为洗脱液。

产量：345mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝538.4

(b).((S)-3-氨基-哌啶-1-基)-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

根据实施例104d所述方法进行实施例105a产物(302mg)的脱保护。

产量：245mg(为HCl-盐)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝438.2

(c).环丁烷甲酸[(S)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-哌啶-3-基]-酰胺

将BOP(280mg)，DIPEA(0.276ml)、环丁烷甲酸(45.7μl)和实施例105b产物(150mg)在二氯甲烷(2ml)中的混合物在室温搅拌5h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10→90％乙腈；系统1)。

产量：89mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝520.4；分析型HPLC：R_t＝20.88min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1730.0nM

实施例106

3-[(R)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-吡咯烷-3-基]-1，1-二甲基-脲

(a).[(R)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-吡咯烷-3-基]-氨基甲酸叔丁酯

根据实施例104c所述方法使(R)-吡咯烷-3-基-氨基甲酸叔丁酯(428mg)与实施例104a产物(400mg)形成酰胺。

产量：720mg.

(b).((R)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

根据实施例104d所述方法进行实施例106a产物(715mg)的脱保护。

产量：494mg(为HCl-盐)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝424.2

(c).3-[(R)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-吡咯烷-3-基]-1，1-二甲基-脲

根据实施例107c所述方法用N，N-二甲基氨基甲酰氯(48mg)酰化实施例106b产物(50mg)。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇[100/0→95/5(v/v)]作为洗脱液。

产量：37.4mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝495.2；分析型HPLC：R_t＝12.25min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝755.0nM

实施例107

N-[(R)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-哌啶-3-基]-N-甲基-乙酰胺

(a).[(R)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-哌啶-3-基]-氨基甲酸叔丁酯

根据实施例104c所述方法使(R)-哌啶-3-基-氨基甲酸叔丁酯(168mg)与实施例104a产物(200mg)形成酰胺。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，庚烷/(乙酸乙酯/甲醇95/5)[1/1→0/1(v/v)]作为洗脱液。

产量：303mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝538.4

(b).((R)-3-氨基-哌啶-1-基)-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

根据实施例104d所述方法进行实施例107a产物(300mg)的脱保护。

产量：265mg(为HC l-盐)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝438.2

(c).N-[(R)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-哌啶-3-基]-乙酰胺

将乙酰氯(29.9μl)和三乙胺(116μl)加入到实施例107b产物(132mg)在二氯甲烷(2ml)中的溶液中。在室温搅拌18h后，用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10％→90％乙腈；系统1)。

产量：92mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝480.4；分析型HPLC：R_t＝16.18min(方法2)。

(d).N-[(R)-1-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-哌啶-3-基]-N-甲基-乙酰胺

将碘甲烷(62.3μl)和氢化钠(7.3mg，60％的油分散液)加入到实施例107c产物(35mg)在DMF(1ml)中的溶液中。在50℃搅拌3h后，加入几滴水，真空浓缩该反应混合物。将残余物溶于乙酸乙酯，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(10→90％乙腈；系统1)。

产量：25.6mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝494.4；分析型HPLC：R_t＝18.51min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝30.9nM

实施例108

(1-溴-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-(4-环丁烷-羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-甲酮和(1-溴-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-(4-环丁烷-羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-甲酮

(a).1-溴-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

按照与实施例1g类似的方式制备2-乙氧基草酰基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸。搅拌2-乙氧基草酰基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸(3.4g)、三甲代甲硅烷基乙炔(2g)和乙酸酐(10ml)在THF(10ml)中的混合物，在150℃使用微波照射加热5min。将该反应混合物倾入水中，用碳酸钠中和。用乙酸乙酯萃取该混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[10/0→6/4(v/v)]作为洗脱液。

向分离产物在DMF中的混合物(20ml)中加入NBS(1.9g)。将该反应混合物在室温搅拌5min。用乙酸乙酯和HCl水溶液(0.2M)稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。使残余物从甲醇中重结晶。

产量：2.6g。MS-ESI：[M+H]⁺＝380/382。分析型HPLC R_t＝2.47(方法10)

(b).(1-溴-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-(4-环丁烷-羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-甲酮

搅拌实施例108a产物(2.6g)和氢氧化锂水溶液(3M)/二烷[2∶1(v/v)15ml]的混合物，在150℃使用微波照射加热5min。用HCl水溶液(6M)将该反应混合物酸化至pH＝5。过滤产物，分离。

产量：2.3g；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝99.2nM

(c).2-乙酰基-9-乙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

将实施例108b产物(1.06g)、DIPEA(2.6ml)和HATU(1.37g)在二氯甲烷(10ml)中的混合物在室温搅拌30min。加入实施例7b产物，将该混合物在环境温度搅拌2h。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用HCl水溶液(0.2M)、水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，乙酸乙酯[0→10％异丙基胺(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.4g。LCMS-ESI：[M+H]⁺＝517/519。分析型HPLC R_t＝2.92min(方法10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝100nM

实施例109

(4-苯甲酰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(1-乙炔基-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

(a).4-(1-溴-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯

将实施例108b产物(1.0g)，HATU(1.61g)，三乙胺(0.8ml)和1，4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(1.1ml)在二氯甲烷(30ml)在室温搅拌30min。用柠檬酸水溶液(3％)洗涤该反应混合物。用水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[0→10％(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.39g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝536.0

(b).(1-溴-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基-甲酮，盐酸盐

将HCl(6.3ml，4N于二烷中)加入到实施例109a产物(1.34g)在二烷(50ml)中的溶液中。将该反应混合物在室温搅拌18h。用乙醚稀释该反应混合物，通过过滤收集固体。

产量：972mg.

(c).(4-苯甲酰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(1-溴-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

将实施例109b产物(972mg)，DIPEA(740μl)和苯甲酰氯(338μl)在二氯甲烷(50ml)中的混合物在室搅拌1h温。然后依次用HCl水溶液(2N)、水和盐水洗涤该反应混合物。干燥有机层(Na₂SO₄)，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[0→5％(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.08g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝536.0

(d).(4-苯甲酰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(1-乙炔基-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

向实施例109c产物(61mg)在甲苯(3ml)中的溶液中加入三丁基乙炔基锡烷(67μl)。给该反应混合物喷氮气5min，加入Pd(PPh₃)₄(9mg)，将该溶液在100℃搅拌30min。真空浓缩该反应混合物。通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[0→5％(v/v)]作为洗脱液。收集最纯的级分，浓缩，再通过制备型HPLC纯化(20％→70％乙腈；系统1)。

产量：15mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝484.3；分析型HPLC：R_t＝14.36min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝76.2nM

实施例110

1-环己-1-烯基-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).1-环己-1-烯基-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将按照与实施例1g类似方式制备的2-乙氧基草酰基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸(5g)、1-乙炔基-环己烯(14mmol)和乙酸酐(5ml)在THF(15ml)中的混合物搅拌，在120℃使用微波照射加热15min。用乙酸乙酯和氢氧化钠水溶液(1N)稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/9→6/4(v/v)]作为洗脱液。分离化合物，为白色固体。

产量：1.8g。MS-ESI：[M+H]⁺＝440

(b).1-环己-1-烯基-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例110a产物(935mg)在LiOH水溶液(2M)/二烷[1∶1(v/v)40ml]中的混合物在回流状态下加热1h。将该反应混合物冷却至室温，酸化至pH＝5，过滤产物，分离，为棕色固体。

产量：680mg。

(c).1-环己-1-烯基-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

搅拌实施例110b产物(25mg)、N-甲基-N-叔-丁基-胺、HATU(40mg)和DIPEA(61μl)在二氯甲烷(1ml)中的混合物，在100℃使用微波照射加热5min。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和柠檬酸水溶液(3％)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[0→6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：9mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝423；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝76.5nM

实施例111

(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮和(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

(a).(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

根据实施例7c所述方法使实施例7b产物(30mg)与实施例104a产物(70mg)形成酰胺。通过制备型HPLC纯化残余物(10→90％乙腈；系统1)。

产量：40mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝520.4；分析型HPLC：R_t＝20.15min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.9nM

(b).(4-环丁烷羰基-[1，4]二氮杂环庚烷-1-基)-(8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-基)-甲酮

根据实施例36所述方法氧化实施例111a产物(15mg)。通过二氧化硅色谱法纯化残余物，乙酸乙酯作为洗脱液。

产量：12.7mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝518.2；分析型HPLC：R_t＝2.64min(方法2)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝4.9nM

实施例112

2-乙酰基-9-乙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

(a).2-乙酰基-9-乙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

按照与实施例1g类似的方式制备7-乙氧基-2-乙氧基草酰基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸。搅拌7-乙氧基-2-乙氧基草酰基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸(5g)，4-噻吩-2-基-丁-3-炔-2-酮(14mmol)和乙酸酐(5ml)在THF(15ml)中的混合物，在120℃使用微波照射加热15min。用乙酸乙酯和NaOH水溶液(1N)稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/9→6/4(v/v)]作为洗脱液，得到白色固体。

产量：1.8g。MS-ESI：[M+H]⁺＝440

(b).2-乙酰基-9-乙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

搅拌实施例112a产物(840mg)和LiOH水溶液(2M)/二烷[1∶1(v/v)4ml]的混合物，在150℃使用微波照射加热5min。将该反应混合物酸化至pH＝5。过滤产物，分离，为白色固体。

产量：776mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝354

(c).2-乙酰基-9-乙氧基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

搅拌实施例112b产物(20mg)、N-乙基-异丙基胺(12μl)、CIP(20mg)和DIPEA(42μl)在二氯甲烷(1ml)中的混合物。在100℃使用微波照射加热5min。真空浓缩该反应混合物。通过制备型HPLC纯化残余物(0→90％乙腈；系统1)。通过用碳酸氢钠水溶液洗涤产物除去TFA。

产量：9mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝481；HPLC：R_t＝3.36min(方法1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝200.0nM

实施例113

9-二氟甲氧基-8-甲氧基-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).4-二氟甲氧基-3-甲氧基-苯甲醛

将4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(6g)、Cs₂CO₃(25.7g)和2-氯-2，2-二氟乙酸甲酯(5ml)在DMF(50ml)中的混合物在90℃搅拌1h。在室温将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。用水、盐水将有机层洗涤两次，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：2.1g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝203.1

(b).1-二氟甲氧基-2-甲氧基-4-((E)-2-硝基-乙烯基)-苯

将实施例113a产物(2.1g)和乙酸铵(0.76g)在硝基甲烷(15ml)中的混合物在100℃搅拌1h。真空浓缩该反应混合物，将残余物溶于二氯甲烷。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：1.36g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝246.0

(c).2-(4-二氟甲氧基-3-甲氧基-苯基)-乙胺

在0℃，将实施例113b产物(1.36g)在干THF(5ml)中的溶液滴加到氢化铝锂在干THF(10ml)和乙醚(10ml)中的混合物。在65℃搅拌2h后，使该反应混合物达到室温，用5ml水的THF溶液(12ml)淬灭。加入NaOH水溶液(2.5ml 2M)和水(1.3ml)。用硅藻土过滤该混合物。真空浓缩滤液，溶于乙酸乙酯。用HCl水溶液(1M)将有机层洗涤两次。用NaOH水溶液将水层(2M)碱化至pH＝10，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：760mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝218.3

(d).[2-(4-二氟甲氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基]-氨基甲酸烯丙酯

在0℃将氯甲酸烯丙酯(450μl)在二氯甲烷(5ml)中的溶液滴加到实施例113c产物(760mg)和DIPEA(0.9ml)在二氯甲烷(25ml)中的溶液中。在室温搅拌2h后，用HCl水溶液(1M)、饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤该反应混合物，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：669mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝302.3

(e).7-二氟甲氧基-6-甲氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-1，2-二甲酸2-烯丙酯

在0℃将浓硫酸(2.5ml)滴加到实施例113d产物(670mg)和一水合乙醛酸(307mg)在乙酸(8ml)中的混合物中。在室温搅拌1h后，将该反应混合物倾倒在冰-水上，用二氯甲烷萃取。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1∶4(v/v)]作为洗脱液。

产量：613mg.

(f).7-二氟甲氧基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

将实施例113e产物(610mg)、双甲酮(359mg)和Pd(PPh₃)₄(1.97g)在THF(5ml)和水(0.5ml)中的混合物在65℃搅拌1h。该反应混合物变混浊。在室温加入乙醚(5ml)，用冰浴冷却该混合物。通过过滤收集固体，真空干燥(50℃)18h。

产量：350mg

(g).9-二氟甲氧基-8-甲氧基-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌实施例113f产物(85mg)和乙基草酰氯(38μl)在THF(2ml)中的混合物，在100℃使用微波照射加热5min。真空浓缩该反应混合物。将残余物和2-乙炔基-噻唑(102mg)在乙酸酐(3ml)中的混合物在140℃使用微波照射加热15min。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[2∶1(v/v)]作为洗脱液。

产量：48mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝421.1

(h).9-二氟甲氧基-8-甲氧基-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例113g产物(48mg)和固体KOH(19mg)在乙醇(2ml)和水(2ml)中的混合物在80℃搅拌1h。在室温用柠檬酸水溶液(1.0M)酸化该反应混合物。用二氯甲烷萃取水层，用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：37mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝392.9

(i).9-二氟甲氧基-8-甲氧基-1-噻唑-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

将实施例113h产物(37mg)、DIPEA(82μl)、叔-丁基-甲基-胺(23μl)和HATU(54mg)在二氯甲烷(3ml)中的混合物在室温搅拌18h。用HCl水溶液(0.1N)和盐水洗涤该反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(20→100％乙腈；系统1)。

产量：28mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝462.3；分析型HPLC：R_t＝17.31min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝39.6nM

实施例114

8，9-二甲氧基-7-甲基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

(a).7-溴-8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

按照与实施例1类似的方式、由2-(2-溴-3，4-二甲氧基-苯基)-乙胺制备7-溴-8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺。2-(2-溴-3，4-二甲氧基-苯基)-乙胺的制备可以在文献中找到：J.Weinstock，等人，J.Med.Chem.，29，2315(1986)；J.E.Tot H、P.R.Hamann和P.L.Fuchs，J.Org。Chem.，53，4694(1988)。

¹H NMR(CDCl₃)1.28(9H、3xCH₃)，3.15(t，2H，H-6)，4.20(t，2H，H-5)，4.65(m，1H，CH-异丙基)，6.40(s，1H，H2-吡咯)，6.97(s，1H，H9)，3.48(s，3H，OCH₃)，3.84(s，3H，OCH₃)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝504。

(b).8，9-二甲氧基-7-甲基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

在-70℃向实施例114a产物(50mg)在干THF(2ml)中的溶液中加入n-丁基锂溶液(70μl，1.6M于庚烷中)。将该混合物搅拌30min。加入碘甲烷(100μl)。将该混合物在-70℃搅拌30min、在环境温度搅拌1h。将该混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过短的二氧化硅柱纯化残余物，使用庚烷/乙酸乙酯(1/1v/v)作为洗脱液。

产量：25mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝439；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝321.0nM

实施例115

7-氟-8，9-二甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

按照与上述实施例1所述类似的方式、以2-(2-氟-3，4-二甲氧基-苯基)-乙胺为原料制备该产物(D.L.Ladd和J.Weinstock，J.Org。Chem.，46，203(1981)。

LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝442；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝937.0nM

实施例116

10-氟-8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

(a).2-(3-氟-4，5-二甲氧基-苯基)-乙胺

该产物可以由商购3-氟-5-羟基-4-甲氧基-苯甲醛、根据常规方法制备：K.L.Kirk，D.Cantacuzene，B.Collins，G.T.Chen，Y.Nimit，C.R.Creveling，J.Med.Chem.，25，680，(1982)；J.Dixon，F.Ince，A.C.Tinker，Eur.Pat.App.0.142.283(1984)。或者，由2-烯丙基氧基-1-氟-3-甲氧基-苯如M.T.Clark，D.D.Miller，Tetrahedron Lett.，26，4299(1985)所述制备。

(b).[2-(3-氟-4，5-二甲氧基-苯基)-乙基]-氨基甲酸乙酯

在0℃向2-(3-氟-4，5-二甲氧基-苯基)-乙胺(576mg)和三乙胺(0.8ml)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中滴加氯甲酸乙酯(300μl)。将该混合物搅拌1h，倾入冰水中，用NaHCO₃中和，用二氯甲烷萃取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。使残余物通过短的二氧化硅柱(庚烷/乙酸乙酯作为洗脱液)。

产量：210mg。¹H NMR(CDCl₃)：δ6.54(2，m，ArH’s)，4.65(s，1，NH)，4.1和2.75(t，2，-CH₂-)，3.4(m，2，-CH₂-)，1，2(t，3，乙基)，4.1(q，2，乙基)，3.86和3.90(2xs，6，OCH₃)。

(c).8-氟-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

向在乙酸(3ml)中的实施例116b产物(210mg)中加入-水合乙醛酸(80mg)。在0℃滴加硫酸(1ml)。搅拌30min后，用水稀释该混合物，用二氯甲烷萃取。干燥合并的有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。用LiOH水溶液(3ml 3M)处理残余物、在190℃使用微波照射5min，以水解氨基甲酸酯。将反应的pH调整至5.5，冷冻干燥该混合物。

产量：520mg.

(d).10-氟-8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

将实施例116c产物(500mg)和乙基草酰氯(250mg)在THF(3ml)中的混合物在100℃、使用微波照射搅拌5min以形成N-草酸酯。然后加入乙酸酐(1ml)和3-乙炔基-噻吩(220mg)。将该混合物在140℃使用微波照射加热5min。将该混合物倾入水中，搅拌15min，用乙酸乙酯萃取，用NaHCO₃溶液洗涤至中和。干燥合并的有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(庚烷/乙酸乙酯)。

产量：60mg.

(e).10-氟-8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

用LiOH的二烷溶液-水(1∶1v/v)皂化实施例116d产物，使用实施例105c所述方法与乙基二异丙基胺偶合。

产量：9mg。¹H NMR(CDCl₃)δ6.43(s，1H，吡咯H)，6.65(br s，1H，H7-Ar)，3.78(s，3H，OCH₃)，3.90(s，3H，OCH₃)，2.98(t，2H，H-6)，4.20(t，2H，H5)，1.25(9H、异丙基和乙基CH₃)，4.70(m，1H，异丙基CH)，3.45(m，2H，NCH₂)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝442；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝318.0nM

实施例117

8-溴-9-甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

(a).[2-(3-溴-4-甲氧基-苯基)-乙基]-氨基甲酸乙酯

在0℃向3-甲氧基-4-溴苯乙胺(4-bromophenethylamine)(2.3g)和三乙胺(2.7ml)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中滴加氯甲酸乙酯(1.5ml)。搅拌3h后，用水和10％NaHCO₃洗涤该反应混合物。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，使用庚烷/乙酸乙酯(1/1v/v)作为洗脱液。

产量：2.9g。TLC R_f＝0.35(庚烷/乙酸乙酯1/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝302/304。

(b).6-溴-7-甲氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-1，2-二甲酸2-乙酯

在5-10℃用硫酸(4ml)处理实施例117a产物(2.7g)和乙醛酸(1.1g)在乙酸(12ml)中的溶液。将该混合物在室温搅拌16h，倾入冰水中。用二氯甲烷萃取该混合物。干燥合并的有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(二氯甲烷/甲醇作为洗脱液)。

产量：2.9g。TLC R_f＝0.31(二氯甲烷/甲醇9/1)；LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝358/360。

(c).6-溴-7-甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸

用LiOH(1.2g)处理实施例117b产物(2.9g)在水(12ml)中的混合物，在200℃使用微波照射加热5min。冷却该混合物，酸化至pH 5。过滤产物，真空干燥剩余的固体。

产量：1.29g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝286/288

(d).8-溴-9-甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

向实施例117c产物(645mg)在THF(4ml)中的混悬液中滴加乙基草酰氯(250μl)。然后在100℃使用微波照射将该混合物加热5min。冷却该混合物。加入乙酸酐(2ml)和3-噻吩基乙炔(220μl)。搅拌该混合物，在140℃再使用微波照射加热5min。冷却该反应混合物，用40ml二氯甲烷稀释，依次用NaOH溶液(2M)和水洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(庚烷/乙酸乙酯作为洗脱液)。

产量：900mg。

(e).8-溴-9-甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

用LiOH溶液(2ml 3M)处理实施例117e产物(900mg)在二烷(5ml)中的混悬液，180℃在使用微波照射加热5min。冷却该混合物，用2N HCl酸化至pH 4。干燥沉淀。

产量：850mg.

(f).8-溴-9-甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙基-异丙基-酰胺

向实施例117c产物(850mg)在二氯甲烷(8ml)中的混悬液中加入2-氯-1，3-二甲基咪唑啉六氟磷酸盐(877mg)、N-乙基-N-异丙基-胺(1.5ml)和DIPEA(0.5ml)。将该混合物在100℃使用微波照射加热5min。然后浓缩该混合物，通过硅胶色谱法纯化(庚烷/乙酸乙酯作为洗脱液)

产量：375mg。¹H NMR(CDCl₃)：δ7.13，7.27，7.38(3m.噻吩基-H)，7.35(s，C7-H)，6.87(s，C10-)，6.36(s，C2-H)，4.65(m，1，异丙基)，4.21(t，2，H5)，2.98(t，2，H6)，3.44(q，2，乙基)，3.51(s，3，甲氧基)，0.88(t，3，乙基)，1.26(m，6，异丙基)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1100nM

实施例118

1-(2，4-二氟-苯基)-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).1-(2，4-二氟-苯基)-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

搅拌2-乙氧基草酰基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸(1g)、1-乙炔基-2，4-二氟-苯(450mg)和乙酸酐(1ml)在THF(3ml)中的混合物，在120℃使用微波照射加热15min。用乙酸乙酯和氢氧化钠水溶液(1N)稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO4)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→6/4(v/v)]作为洗脱液。分离化合物，为白色固体。

产量：980mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝414

(b).1-(2，4-二氟-苯基)-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

搅拌实施例118a产物(980mg)和LiOH水溶液(3M)/二烷[1∶1(v/v)6ml]的混合物，在150℃使用微波照射加热5min。将该反应混合物冷却至室温。加入氯化铵水溶液(10ml 4N)。过滤沉淀，用水洗涤。分离产物，为白色固体。

产量：881mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝386

(c).1-(2，4-二氟-苯基)-8，9-二甲氧基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

搅拌实施例118b产物(25mg)、N-甲基-N-叔-丁基-胺，HATU(37mg)和DIPEA(57μL)在二氯甲烷(1ml)中的混合物，在110℃使用微波照射加热5min。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和柠檬酸水溶液(3％)洗涤。干燥有机层(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[0→6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：14mg。MS-ESI：[M+H]⁺＝455；分析型HPLC：R_t＝2.56min(方法1)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝48.3nM

实施例119

8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸[(异丁基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺和[(8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-甲基-氨基]-乙酸乙酯

(a).8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

根据实施例1h所述方法、以2-乙氧基草酰基-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-1-甲酸为原料合成8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯(119a)。

产量：14.95g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝384.0

(b).8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将实施例119a产物(4.45g)和LiOH二烷溶液(88ml 2M)的混合物在回流状态下加热2h。将该反应混合物冷却至室温，用HCl水溶液酸化(2N)至pH＝6。通过过滤收集固体，真空干燥。

产量：4g。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝356.1

(c).[(8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-甲基-氨基]-乙酸乙酯

将实施例119b产物(500mg)、三乙胺(1.98ml)、CIP(1.96g)和肌氨酸乙酯盐酸盐(866mg)在二氯甲烷(100ml)在室温搅拌18h。真空浓缩该反应混合物，通过硅胶色谱法纯化残余物，二氯甲烷/甲醇[98/2(v/v)]作为洗脱液。

产量：430mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝455.1；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝42nM

(d).[(8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-羰基)-甲基-氨基]-乙酸

将实施例119c产物(430mg)和LiOH水溶液(4.8ml 2M)在二烷(4.8ml)中的混合物在室温搅拌2h。用HCl水溶液(2N)将该反应混合物酸化至pH＝6，用乙酸乙酯萃取。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：360mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝427.1

(e).8，9-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸[(异丁基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺

将实施例119d产物(15mg)、HATU(15mg)、DIPEA(12μl)和N-甲基-N-异丁基-胺(4mg)在二氯甲烷(1ml)中的混合物搅拌48h，真空浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯，用水、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[40→100％乙酸乙酯]作为洗脱液。

产量：7.6mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝496.1；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1080nM

实施例120

8，10-二甲氧基-1-噻吩-3-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

如上述实施例1a-1g所述、以3，5-二甲氧基苯乙胺为原料制备该产物。

TLC R_f＝0.34(CH₂Cl₂-丙酮8/2)；¹H NMR(CDCl₃)δ3.83，3.22(2xs，6H、OCH₃)，6.4(d，1H，2H-吡咯)，6.28，6.44(2xbd，2H，H7和H9)，6.84，7.02，7.20(3xm，3H，H3，H4，H5-噻吩)，2.98(m，2H，H6)，4.20(m，2H，H5)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝699.0nM

实施例121

8-甲氧基-9-甲氧基甲基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺和9-羟基甲基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

(a).9-羟基甲基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

向实施例91a产物(450mg)在THF和甲醇的混合物[10ml 1/1(v/v)]中的溶液中分部分加入NaBH₄(80mg)。搅拌1h后，用水稀释该混合物，用二氯甲烷萃取。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将残余物与二异丙基醚-起研磨，得到白色结晶物质。

产量：290mg。Mp 146-150℃.TLC R_f＝0.30(庚烷/乙酸乙酯1/1)。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝425.2.¹H NMR(CDCl₃)δ4.47(s，2H，CH₂OH)，7.33和6.45(2xs，2H，H7和H10)，6.75(s，1H，H2吡咯)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝10nM

(b).8-甲氧基-9-甲氧基甲基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸叔-丁基-甲基-酰胺

向实施例121a产物(156mg)在DMF(3ml)中的溶液中加入NaH(50mg；60％在油中的分散液)。将该混合物搅拌15min，然后添加碘甲烷(200μl)。将该反应再搅拌2h，倾入水中。用乙酸乙酯萃取该混合物。用水、盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。用硅胶纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯作为洗脱液。使产物从乙醚/庚烷中结晶。

产量：75mg。Mp 128-130℃.LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝439.2.¹H NMR(CDCl₃)δ3.22和3.85(2xs，6H、2xOCH₃)，3.17(s，3H，NCH₃)，6.73(s，1H，H2吡咯)，6.45和7.40(2xs，2H，H7和H10)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1.6nM

实施例122

1-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-乙酮

(a).9-乙酰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯

通过氮气2min使实施例82i产物(115mg)和1-乙氧基乙烯基三-n-丁基锡(288mg)在甲苯(4ml)中的混合物脱氧。加入氯化双(三苯膦)钯(II)(7.5mg)，再使该混悬液脱氧，在110℃搅拌6h。加入乙酸乙酯(4ml)和HCl水溶液(1N)。将该混合物剧烈搅拌5min。分离各层。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[9/1→6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：95mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝396.1。

(b).9-乙酰基-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3-甲酸

将NaOH水溶液(1ml，2N)加入到实施例122a产物(90mg)在乙醇(10ml)中的溶液中。在60℃搅拌6h后，将该反应混合物倾入柠檬酸水溶液(10％)，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。

产量：84mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝368.2。

(c).1-[3-(2，2-二甲基-吡咯烷-1-羰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-基]-乙酮

将TBTU(110mg)加入到实施例122b产物(84mg)、DIPEA(200μl)和2，2-二甲基吡咯烷盐酸盐(62μl)在NMP(5ml)中的溶液中。在室温搅拌2h后，将该反应混合物倾入饱和NH₄Cl水溶液中，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，庚烷/乙酸乙酯[1/0→6/4(v/v)]作为洗脱液。

产量：76mg。LC/MS-ESI：[M+H]⁺＝449.2；分析型HPLC：R_t＝20.08min(方法7)；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝2.0nM

实施例123

8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3，9-二甲酸3-(叔-丁基-甲基-酰胺)9-[1，3，4]噻二唑-2-基酰胺

(a).3-(叔-丁基-甲基-氨基甲酰基)-8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-9-甲酸

用NaClO₂(200mg)和NaH₂PO₄(350mg)的水(2ml)溶液处理实施例91a产物(220mg)在叔-丁醇(15ml)、二烷(2ml)和2-甲基-2-丁烯(0.5ml)的混合物中的溶液。搅拌1h后，反应完成。加入水(30ml)，然后加入饱和硫代硫酸钠(2ml)和NaH₂PO₄(0.5g)。用乙酸乙酯萃取产物。洗涤合并的有机层，干燥，真空浓缩。用二异丙基醚处理残余物，得到浅橙色固体。

产量：200mg。Mp：215-217℃(乙酸乙酯)；Rf 0.42(甲苯/丙酮1/1)；NMR(DMSO-d₆)δ12.4(bs，1，COOH)，7.78(s，1，H10)，7.12(s，1，H7)，6.4(s，1，吡咯H3)，3.83(s，3，OCH3)，3.04(s，3，NCH3)；MS-ESI：[M+1]⁺439.1

(b).8-甲氧基-1-噻吩-2-基-5，6-二氢-吡咯并[2，1-a]异喹啉-3，9-二甲酸3-(叔-丁基-甲基-酰胺)9-1，3，4-噻二唑-2-基酰胺

将实施例123a产物(45mg)、2-氨基噻二唑(25mg)、N-乙基吗啉(40μ)、TBTU(40mg)和DMF(1ml)的混合物在RT搅拌16h。将该混合物倾倒在5％NH₄Cl水溶液上，用乙酸乙酯萃取。用水洗涤合并的有机层，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物，甲苯丙酮作为洗脱液。将残余物与乙醚一起研磨，得到白色结晶。

产量：26mg。Mp：149-152℃；MS-ESI：[M+H]⁺522.14；NMR(DMSO-d6)δ12.1(s，1，NH)，9.20(s，1，噻二唑)，7.83(s，1，H10)，7.25(s，1，H7)，6.42(s，1，H3-吡咯)，3.97(s，3，OCH₃)，3.07(s，3，NCH₃)；R_f(甲苯/丙酮1/1)0.34；hFSHRago(CHO luc)EC₅₀＝1nM。

实施例124

化合物对CHO细胞中表达的人FSH受体的激动剂活性

在用人FSH受体稳定转染和与指导荧火虫荧光素酶报道基因表达的cAMP应答元件(CRE)/启动子共转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中测定化合物对人FSH受体的激动剂活性。化合物与Gs蛋白偶联FSH受体结合导致cAMP增加，由此将会诱导荧光素报道基因的增加的反式激活。在加湿气体(95％)中，在5-7％CO2和37℃下，在补充了1μg/ml牛胰岛素、5μg/ml人去铁铁传递蛋白、80U/ml青霉素G和80μg/ml链霉素与测试化合物(浓度在0.0316nM-10.0μM)的Dulbecco极限必需F12改进培养基(Invitrogen)中孵育细胞(7,500个细胞/孔的384孔培养板)，一式两份。DMSO的终浓度是1％。孵育4小时后，将培养板调整至室温1小时。然后将Luclite(PerkinElmer)溶液加入到各孔中，使细胞在室温裂解至少1小时。然后用发光计数器测定荧光素酶活性。将信号表示为每秒计数(cps)。使用软件程序MathIQ(2.0版，ID Business Solutions Limited)测定化合物的EC50(与可得到的化合物最大效果相比引起半数最大(50％)荧光素酶刺激的测试化合物浓度)和效率值(作为重组人FSH的最大效果百分比的测试化合物的最大效果)。EC₅₀数据如合成实施例中所示。