DNA分子克隆快速连接载体的构建方法及其涉及的DNA分子

摘要

本发明公开了一种DNA分子克隆快速连接载体构建方法及其涉及的DNA分子，该方法包括：人工合成一种可与质粒DNA一起永久扩增的具有发夹结构的DNA分子，该分子还包括DNA切刻内切酶识别序列和痘苗病毒拓扑异构酶Ib的识别序列；将所述DNA分子构建到部分消除了拓扑异构酶Ib以别序列和DNA切刻内切酶识别序列的载体的克隆区；用DNA切刻内切酶和痘苗病毒拓扑异构酶Ib对所得载体DNA分别进行处理后，制备成可快速连接载体。本发明适用于所有克隆载体和表达载体的构建，整个过程操作简单，快速，所制备的载体适合于任意来源的DNA分子的克隆，外源DNA分子可直接插入到载体中，简化了操作步骤，降低了成本，提高了工作效率。