作为快速解离多巴胺2受体拮抗剂的哌嗪-1-基-三氟甲基取代的吡啶

摘要

本发明涉及为快速解离多巴胺2受体拮抗剂的哌嗪-1-基-三氟甲基取代的吡啶、用于制备这些化合物的方法、包含这些化合物作为活性组分的药用组合物。所述化合物发现具有作为通过发挥抗精神病作用用于治疗或预防中枢神经系统病症如精神分裂症而没有运动神经副作用的药物的用途。

说明书

发明领域

本发明涉及为快速解离多巴胺2受体拮抗剂的哌嗪-1-基-三氟甲基取代的吡啶、用于制备这些化合物的方法和包含这些化合物作为活性组分的药用组合物。所述化合物作为通过发挥抗精神病作用用于治疗或预防中枢神经系统病症而没有运动神经副作用的药物发现具有用途。

本发明的描述

精神分裂症为影响约1％人口的严重和慢性精神疾病。临床症状在生命早期相对明显，通常出现在青春期或成年早期。精神分裂症的症状通常分为称作阳性的那些症状(包括幻想、错觉和思维混乱)和称为阴性的那些症状(包括社交退缩、感动减退、语言贫乏和不能体验愉悦)。另外，精神分裂症患者具有认知不足例如注意力和记忆损伤的缺点。疾病的病原学仍为未知的，但是已经假设异常的神经递质作用为精神分裂症症状的基础。多巴胺能假说为最通常认为的一种，其提出了多巴胺传递活动过强决定着在精神分裂症患者观察到的阳性症状。该假说基于多巴胺增强药物例如安非他明或可卡因可引起精神病的观察结果和基于在抗精神病药物的临床剂量与其阻断多巴胺D2受体潜力之间存在的相关性。所有上市的抗精神病药物通过阻断多巴胺D2受体介导其对阳性症状的治疗效力。除了临床效力不算外，似乎抗精神病药物的主要副作用例如椎体外系症状(EPS)和迟发性运动障碍也与多巴胺拮抗作用相关。那些使人衰弱的副作用最通常出现于典型或第一代抗精神病药物(例如氟哌啶醇)。它们较少表现于非典型或第二代抗精神病药物(例如利培酮、奥氮平)并且甚至实际上不存在于其被认为是典型的非典型抗精神病药物的氯氮平。在被建议用于说明对非典型抗精神病药物观察到的较低EPS发生率的不同理论中，在最近15年中已经引起一些注意的一种理论是多受体假说。其是根据受体结合研究得出的，这些研究显示许多非典型抗精神病药物除与多巴胺D2受体外，还与多种其它神经递质受体，尤其是血清素5-HT2受体相互作用，而典型的抗精神病药物象氟哌啶醇更加选择性地结合于D2受体。该理论在近年来已经受到挑战，因为以临床相关剂量存在的全部主要的非典型抗精神病药物完全占据血清素5-HT2受体，但是在引起运动神经副作用方面仍然不同。作为多受体假说的选择，Kapur和Seeman(“自多巴胺D2受体的剂量快速解离说明了非典型抗精神病药物的作用？：一种新假说”，Am.J.Psychiatry 2001，158：3第360-369页)已经提出非典型抗精神病药物可根据它们自多巴胺D2受体解离的速度区别于典型抗精神病药物。自D2受体的快速解离将使抗精神病药物更加适应生理的多巴胺传递，使得具有抗精神病作用而没有运动神经副作用。该假说在考虑氯氮平和喹硫平时尤其具有说服力。这两种药物具有自多巴胺D2受体的最快解离速度并且它们具有引起人EPS的最低风险。相反地，与EPS高度流行有关的典型抗精神病药物为最慢解离的多巴胺D2受体拮抗剂。因此，基于其自D2受体的解离速度鉴定新药似乎是提供新型非典型抗精神病药物的有效策略。

如同先前所指出的那样，现行的非典型抗精神病药物与许多不同的神经递质受体相互作用。当考虑认知损伤和阴性症状时，这些相互作用中的一些作用(例如阻断血清素5-HT6和多巴胺D3受体)可以是有益的。确实，许多临床前数据已经显示5-HT6受体拮抗作用对啮齿动物认知过程具有阳性作用(Mitchell和Neumaier(2005)5-HT6受体：一种用于认知增强的新靶标.Pharmacology&Therapeutics108：320-333)。5-HT6拮抗作用也已经与食欲和进食抑制作用有关。另外，D3受体拮抗作用增强大鼠社会交往，提示对精神分裂症患者阴性症状的可能益处(Joyce和Millan(2005)多巴胺D3受体拮抗剂作为治疗药物.Drug Discovery Today 10：917-925)。在另一方面，其它的相互作用(例如与肾上腺素能α1、组胺H1和血清素5-HT2C受体)与介导副作用，包括低血压、镇静作用、代谢失调和体重增加有关。因此，另一个目标是在不存在与肾上腺素能α1、组胺H1和血清素5-HT2C受体的相互作用下，结合快速解离D2受体性质与血清素5-HT6和多巴胺D3受体抑制作用。预计这样的特征(profile)提供有效抗阳性症状、阴性症状和认知缺陷同时具有更少或没有与现行抗精神病药物相关的主要副作用的新型化合物。

本发明的目的是提供为快速解离的多巴胺2受体拮抗剂及血清素5-HT6和多巴胺D3受体拮抗剂的新化合物，其具有如上文说明的有利的药理学特性，尤其是具有减少的运动神经副作用和导致减少发生代谢障碍风险的与其它受体的中度或者很少相互作用。

本发明涉及式(I)的化合物或其立体异构体形式或其溶剂合物或其盐：

其中：

-A¹＝A²-为-N＝CR¹-或-CR¹＝N-；

R¹为氢、羟基、卤代、氰基、C_1-3烷氧基或C_1-3烷基；

R²为苯基；用1、2或3个选自以下的取代基取代的苯基：卤代、氰基、C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、单-和多卤代-C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、C_1-3烷氧基C_1-3烷基、氨基羰基、单-和二(C_1-3烷基)氨基羰基、氨基、单-和二(C_1-3烷基)氨基；吡啶基；用1或2个选自以下的取代基取代的吡啶基：卤代、C_1-3烷氧基、芳基C_1-3烷氧基、单-和二(C_1-3烷基)氨基和芳基C_1-3烷基氨基；用1或2个选自卤代和C_1-3烷基的取代基取代的噻吩基。

本发明的化合物为快速解离的D2受体拮抗剂。另外，本发明化合物对多巴胺D3和血清素5-HT6受体具有与多巴胺D2受体大约相同的亲和力。在所试范围内，化合物为3种受体亚型的拮抗剂。该性质使得本发明化合物能够尤其适合于用作治疗或预防以下疾病的药物：精神分裂症、精神分裂症样障碍(schizophreniform disorder)、分裂情感性障碍(schizoaffective disorder)、妄想症、短暂性精神障碍、共有型精神障碍(shared psychotic disorder)、由于一般医疗状况引起的精神障碍、物质滥用引起的精神障碍、没有另外特别分类的精神障碍；与痴呆有关的精神病、重度抑郁症、心境恶劣障碍、经前烦躁不安症(premenstrual dysphoric disorder)、没有另外特别分类的抑郁症、I型双相性精神障碍、II型双相性精神障碍、循环性情感障碍、没有另外特别分类的双相性精神障碍、由于一般医疗状况引起的心境障碍、物质诱发的心境障碍、没有另外特别分类的心境障碍；广泛性焦虑症、强迫性精神失调、恐慌症、急性应激障碍、创伤后应激障碍、智力迟钝、广泛性发育障碍(pervasive developmental disorders)、注意力缺陷障碍、注意力缺陷/过度反应症、破坏性行为障碍(disruptive behaviour disorders)、偏执型人格障碍、分裂型人格障碍、精神分裂症样类型的人格障碍(personality disorder of the schizotypical type)、抽搐障碍(tic disorders)、图雷特氏综合征(Tourette’s syndrome)、物质依赖、物质滥用、物质戒断症、拔毛发癖；和其中认知受到损伤的病症、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷顿氏病、路易体痴呆、由于HIV病引起的痴呆、由于克-雅氏病(Creutzfeldt-Jakob)引起的痴呆、遗忘症、轻度认知障碍、及年龄相关性认知功能下降；及进食障碍例如食欲缺乏和贪食症；以及肥胖症。

技术人员可基于在下文的实验部分中提供的实验数据选择化合物。化合物的任何选择包括在本发明中。

本发明涉及式(I)化合物及其立体异构体形式及其溶剂合物和盐，其中

-A¹＝A²-为-N＝CR¹-；

R¹为氢、氰基或甲氧基；

R²为苯基或用卤代取代的苯基。

本发明进一步涉及式(I)化合物及其立体异构体形式及其溶剂合物和盐，其中

-A¹＝A²-为-CR¹＝N-；

R¹为氢、甲基、氰基、羟基或甲氧基；

R²为苯基或用卤代取代的苯基。

在式(I)化合物及其立体异构体形式中，最重要的化合物为例如，

5-苯基-3-哌嗪-1-基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇(A17)，

1-[4-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-基]-哌嗪(B1)，

4-苯基-6-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-吡啶-2-腈(B2)，

1-(6-甲氧基-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪(B3)，

1-(5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪(B4)，

1-(2-甲氧基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪(B5)，

1-[5-(4-氟-苯基)-2-甲氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基]-哌嗪(B6)，

5-苯基-3-哌嗪-1-基-6-三氟甲基-吡啶-2-腈(B7)和

1-(2-甲基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪(B8)

及其溶剂合物和盐。

贯穿该申请书，术语“C_1-3烷基”在单独使用和以组合方式例如“C_1-3烷氧基”、“二C_1-3烷基氨基”使用时，包括例如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基；术语卤代包括氟、氯、溴和碘；术语“单卤代C_1-3烷基”包括例如氟代甲基、氯代甲基和1-氟代乙基；术语“多卤代C_1-3烷基”包括例如二氟甲基、三氟甲基、1，1，1-三氟乙基、五氟乙基、七氟丙基和九氟丁基。

为了治疗用途，式(I)化合物的盐为其中反离子为药学上可接受的那些盐。然而，为非药学上可接受的酸和碱的盐也可例如在制备或纯化药学上可接受的化合物方面发现具有用途。所有的盐，无论药学上可接受与否，都包括在本发明的范围内。

药学上可接受的盐被定义包括式(I)化合物能够形成的治疗活性的非毒性酸加成盐形式。通过用以下合适的酸处理式(I)化合物的碱形式可得到所述盐：例如无机酸，如氢卤酸，尤其是盐酸、氢溴酸，硫酸、硝酸和磷酸；有机酸，如乙酸、羟基乙酸、丙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、扁桃酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、枸橼酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对-氨基水杨酸、扑酸和扁桃酸。相反地，所述盐形式可通过用合适的碱处理转化为游离形式。

术语溶剂合物指式(I)化合物可形成的水合物和醇化物。

如上文使用的术语“立体化学异构形式”定义为式(I)化合物可具有的所有可能的异构形式。除非另外提及或指明，化合物的化学名意指所有可能立体化学异构形式的混合物，所述混合物包含基本分子结构的所有非对映体和对映体。更具体地讲，立体异构中心可具有R-或S-构型；在二价环状(部分)饱和基团上的取代基可具有或者顺式-或者反式-构型。包含双键的化合物在所述双键可具有E或Z-立体化学。式(I)化合物的立体化学异构形式包含在本发明的范围内。

在该申请的框架内，尤其是在提及式(I)化合物时，元素包括天然存在或合成产生的，天然富含的或以同位素富集形式存在的该元素的所有同位素和同位素混合物。放射性标记的式(I)化合物可包括选自³H、¹¹C、¹⁸F、¹²²I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br和⁸²Br的放射性同位素。优选地，放射性同位素选自³H、¹¹C和¹⁸F。

如用以下描述的方法制备的式(I)化合物可以对映体的外消旋混合物形式合成，其可按照本领域已知的拆分方法相互分离。式(I)的外消旋化合物可通过与合适的手性酸反应转化为相应的非对映体盐形式。随后所述非对映体盐形式例如通过选择性或分步结晶进行分离并且用碱从中释放对映体。分离式(I)化合物的对映体形式的另一种可供选择的方式包括采用手性固定相的液相色谱法。所述纯的立体化学异构形式也可自合适起始原料的相应的纯立体化学异构形式衍生，条件是反应立体有择地发生。优选地如果要求特定的立体异构体，所述化合物将通过立体有择的制备方法合成。这些方法将有利地采用对映体纯的起始原料。

制备

通过在合适的碱例如二异丙基乙胺存在下，于合适的溶剂例如乙腈中，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或在微波辐射下一定时间期间以确保反应完全，使其中A¹为N，R²如前定义和卤代为氯代、溴代或碘代的以下式(II)化合物与哌嗪反应，可制备其中-A¹＝A²-为-N＝CR¹-，R¹为氢和R²如前定义的式(I)化合物。

通过在合适的催化剂例如四重(三苯基膦)钯(0)存在下，于合适的碱例如磷酸钾存在下，在合适的惰性溶剂例如1，4-二烷和水的混合物中，于合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或在微波辐射下一定时间段以确保反应完全，使其中A¹为N，R²如前定义和卤代¹与卤代²独立地为氯、溴或碘的式(III)化合物与芳基硼酸反应，可制备其中A¹为N，R²如前定义和卤代为氯代、溴代或碘代的式(II)化合物，

其中A¹为N，卤代¹为氯和卤代²为碘的式(III)化合物可市售得到。通过与在Noble，S.A.；Oshiro，G.；Malecha，J.W.；Zhao，C.；Robinson，C.K.M.；Duron，S.G.；Sertic，M.；Lindstrom，A.；Shiau，Andrew；B.，Christopher；K.，Mehmet；L.，Boliang；G.，Steven.2006，WO 2006055187A120060526中描述的那些类似的方法，得到其中A¹为N且卤代¹与卤代²为氯的式(III)化合物。

通过在合适的条件下，例如当L表示叔丁氧基羰基时，在二氯甲烷中的三氟乙酸或在1，4-二烷中的盐酸中，脱除以下式(IV)化合物中的保护基，其中L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基，-A¹＝A²-、R¹和R²如前定义，也可制备其中-A¹＝A²-、R¹和R²如前定义的式(I)化合物。

通过在合适的催化剂例如四重(三苯基膦)钯(0)存在下，于合适的溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺存在下，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使式(IVa)化合物与氰化锌反应，其中A¹为N，R²如前定义，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和Y表示卤代例如氯、溴或碘，可制备式(IV)化合物，其中-A¹＝A²-为-N＝CR¹-，R¹为氰基和R²如前定义并且L表示合适的保护基，例如叔丁氧基羰基。

通过在合适的催化剂例如反式-Pd(OAc)₂(Cy₂NH)₂(通过按照在Tao，B.；Boykin，D.W.Tetrahedron Lett.2003，44，7993-7996中描述的方法制备)存在下，于合适的碱例如磷酸钾存在下，在合适的惰性溶剂例如乙醇中，于合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使式(V)化合物

与芳基硼酸反应，其中A¹为N，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代表示氯、溴或碘，可制备其中A¹为N和R²如前定义并且Y表示卤代例如氯、溴或碘的式(IVa)化合物。

通过在合适的碱例如丁基锂与2，2，6，6-四甲基哌啶的混合物存在下，于合适的惰性溶剂例如四氢呋喃中，在通常于-78℃至0℃范围内的低温下，使式(VI)化合物与碘反应，其中A¹为N，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代表示氯、溴或碘，可制备其中A¹为N，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代表示氯、溴或碘的式(V)化合物。

通过在合适的碱例如二异丙基乙胺存在下，于合适的溶剂例如乙腈中，和在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中A¹为N和卤代为氯代、溴代或碘代的式(VII)化合物与其中L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(VIII)哌嗪反应，可制备其中A¹为N，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代为氯代或碘代的式(VI)化合物，

其中A¹为N和卤代为氯代或碘代的式(VII)化合物可市售得到。

其中L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(VIII)化合物可市售得到。

通过在合适的催化剂例如双(三苯基膦)二氯化钯(II)存在下，和于合适的无机盐例如氯化锂存在下，在合适的溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺中，于合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中A¹为N，R²如前定义，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代为氯代、溴代或碘代的式(IVa)化合物与烷基锡试剂反应，可制备其中-A¹＝A²-为-N＝CR¹-，R¹为C_1-3烷基，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IV)化合物。

通过在合适的碱例如相应醇的钠或钾盐存在下，于合适的溶剂例如相应的醇中，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中A¹为N，R²如前定义，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代为氯代、溴代或碘代的式(IVa)化合物与醇反应，可制备其中-A¹＝A²-为-N＝CR¹-，R¹为C_1-3烷氧基，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IV)化合物。

通过在合适的催化剂例如碘化酮(I)存在下，于合适的溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺中，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IX)化合物与氟代磺酰基二氟乙酸甲酯反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IV)化合物。

通过在合适的碱例如三氟乙酸银存在下，于合适的溶剂例如甲醇中，在合适的反应条件例如通常在室温和100℃之间范围内的便利温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(X)化合物与碘反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IX)化合物。

通过在合适的催化剂例如10％披钯活性炭存在下，于合适的配体例如双环己基膦-2’，4’，6’-三异丙基联苯存在下，在合适的碱例如碳酸钾存在下，于合适的惰性溶剂例如N，N-二甲基乙酰胺与水的混合物中，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢，L表示合适的保护基和卤代为氯代、溴代或碘代的式(XI)化合物与芳基硼酸反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(X)化合物：

通过在合适的催化剂例如三(二亚苄基丙酮)二钯(0)氯仿加合物存在下，于合适的配体例如(R)-(+)-2，2’-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘存在下，在合适的碱例如叔丁醇钠存在下，于合适的溶剂例如甲苯中，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢和卤代¹与卤代²为氯、溴或碘的式(XII)化合物与其中L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(VIII)哌嗪反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢，L表示合适的保护基和卤代为氯代、溴代或碘代的式(XI)化合物，

其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氢和卤代¹与卤代²独立地为氯、溴或碘的式(XII)化合物可市售得到。

通过在合适的催化剂例如10％披钯活性炭存在下，于合适的配体例如双环己基膦-2’，4’，6’-三异丙基联苯存在下，在合适的碱例如碳酸钾存在下，于合适的惰性溶剂例如N，N-二甲基乙酰胺与水的混合物中，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为C_1-3烷氧基，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代为氯代、溴代或碘代的以下式(XIII)化合物与芳基硼酸反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为C_1-3烷氧基，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IV)化合物。

通过在合适的催化剂乙酸钯(II)存在下，于合适的配体例如(R)-(+)-2，2’-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘存在下，在合适的碱例如碳酸铯存在下，于合适的溶剂例如甲苯中，和在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为C_1-3烷氧基和卤代为氯代、溴代或碘代的以下式(XIV)化合物与其中L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(VIII)哌嗪反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为C_1-3烷氧基，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和卤代为氯代、溴代或碘代的式(IV)化合物。

通过在碱例如碳酸银或二异丙基乙胺存在下，于合适的溶剂例如苯或乙腈中和在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中卤代为氯代、溴代或碘代的以下式(XV)化合物与其中R³为C_1-3烷基和W表示离去基团例如卤代如氯、溴或碘或者磺酰氧基如甲磺酰氧基、三氟甲基磺酰氧基或甲基苯基磺酰氧基的式R³-W试剂反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为C_1-3烷氧基和卤代为氯代、溴代或碘代的式(XIV)化合物。

通过在合适的溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺或乙腈存在下，于合适的反应条件例如通常在0℃和100℃之间范围内的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使以下式(XVI)化合物与N-卤代-琥珀酰亚胺反应，可制备其中卤代为氯代、溴代或碘代的式(XV)化合物。

通过在合适的碱例如碳酸钾存在下，于合适的溶剂例如水中，在合适的反应条件例如通常在0℃和100℃之间范围内的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使以下式(XVII)化合物与碘反应，可制备式(XVI)化合物。

通过在合适的催化剂例如四重(三苯基膦)钯(0)存在下，于合适的溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺中，在合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中A²为氮，R²如前定义，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和X表示磺酰氧基例如甲磺酰氧基、三氟甲基磺酰氧基或甲基苯基磺酰氧基的以下式(XVIII)化合物与氰化锌反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为氰基，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IV)化合物。

通过在合适的碱例如吡啶存在下，于合适的溶剂例如二氯甲烷中，在合适的反应条件例如通常在0℃和室温之间范围内的温度下，使其中A²为氮，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的以下式(XIX)化合物与磺酸酐例如三氟甲磺酸酐反应，可制备其中A²为氮，R²如前定义，L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基和X表示磺酰氧基例如甲磺酰氧基三氟甲磺酰氧基或甲基苯基磺酰氧基的式(XVIII)化合物。

通过在合适的碱例如N，N-二异丙基乙胺存在下，于合适的溶剂例如二氯甲烷中，在合适的反应条件例如通常在0℃和室温之间范围内的便利温度下，使其中A²为氮和R²如前定义的以下式(XX)化合物与保护试剂例如二叔丁基二碳酸酯反应，可制备其中A²为氮，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(XIX)化合物。

通过在合适的溶剂例如水中，于合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为甲氧基，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IV)化合物与合适的酸例如氢溴酸反应，可制备其中A²为氮和R²如前定义的式(XX)化合物。

通过在合适的催化剂例如双(三苯基膦)二氯化钯(II)存在下，和于合适的无机盐例如氯化锂存在下，在合适的溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺中，于合适的反应条件例如便利的温度下，通过常规加热或经微波辐射一段时间以确保反应完全，使式(XVIII)化合物与烷基锡试剂反应，可制备其中-A¹＝A²-为-CR¹＝N-，R¹为C_1-3烷基，R²如前定义和L表示合适的保护基例如叔丁氧基羰基的式(IV)化合物。

药理学

为了发现对阳性和阴性症状及认知损伤具有活性并具有改善的安全性特征(低EPS发生率和没有代谢障碍)的抗精神病化合物，我们已经对与多巴胺D2受体选择性相互作用和自该受体快速解离并进一步对多巴胺D3受体以及血清素5-HT-6受体具有亲和力的化合物进行筛选。首先采用[³H]螺哌隆和人D2L受体细胞膜，以结合实验对化合物筛选其D2亲和力。以改编自Josee E.Leysen和Walter Gommeren，Journal of Receptor Research，1984，4(7)，817-845所公开方法的间接试验，测试显示IC₅₀少于10μM的化合物，以评价其解离速率。

以一组多于50种常用G-蛋白偶联受体(CEREP)进一步筛选其中一些化合物并且发现具有明显的分布(clean profile)，即对于所试受体具有低亲和力，但多巴胺D3受体和血清素5-HT6受体除外。

其中一些化合物已经被进一步测试体内模型例如“阿扑吗啡诱导的大鼠激动实验的拮抗作用”并且发现为活性和可生物利用的。

鉴于式(I)化合物的以上提及的药理学，从而它们适合用作药物，尤其是用作抗精神病药物。更加特别的是化合物适合用作治疗或预防以下疾病的药物：精神分裂症、精神分裂症样障碍、分裂情感性障碍、妄想症、短暂性精神障碍、共有型精神障碍、由于一般医疗状况引起的精神障碍、物质滥用引起的精神障碍、没有另外特别分类的精神障碍、与痴呆有关的精神病、重度抑郁症、心境恶劣障碍、经前烦躁不安症、没有另外特别分类的抑郁症、I型双相性精神障碍、II型双相性精神障碍、循环性情感障碍、没有另外特别分类的双相性精神障碍、由于一般医疗状况引起的心境障碍、物质诱发的心境障碍、没有另外特别分类的心境障碍、广泛性焦虑症、强迫性精神失调、恐慌症、急性应激障碍、创伤后应激障碍、智力迟钝、广泛性发育障碍、注意力缺陷障碍、注意力缺陷/过度反应症、破坏性行为障碍、偏执型人格障碍、分裂型人格障碍、精神分裂症样类型的人格障碍、抽搐障碍、图雷特氏综合征、物质依赖、物质滥用、物质戒断症和拔毛发癖。鉴于其5-HT6拮抗活性，本发明化合物可进一步用于治疗或预防其中认知受到损伤的病症、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷顿氏病、路易体痴呆、由于HIV病引起的痴呆、由于克-雅氏病引起的痴呆、遗忘症、轻度认知障碍及年龄相关性认知功能下降。

为了使患有如在上述段落中所提及疾病患者的治疗最佳化，式(I)化合物可与其它精神治疗化合物一起给药。因此，在精神分裂症的情况中，可靶向阴性和认知症状。

本发明也提供了治疗患有这样疾病的温血动物的方法，所述方法包括全身给予有效治疗以上所描述疾病的治疗量的式(I)化合物。

本发明也涉及如上文定义的式(I)化合物用于制备药物，尤其是抗精神病药物，更加特别的是治疗或预防以下疾病的药物中的用途：精神分裂症、精神分裂症样障碍、分裂情感性障碍、妄想症、短暂性精神障碍、共有型精神障碍、由于一般医疗状况引起的精神障碍、物质滥用引起的精神障碍、没有另外特别分类的精神障碍、与痴呆有关的精神病、重度抑郁症、心境恶劣障碍、经前烦躁不安症、没有另外特别分类的抑郁症、I型双相性精神障碍、II型双相性精神障碍、循环性情感障碍、没有另外特别分类的双相性精神障碍、由于一般医疗状况引起的心境障碍、物质诱发的心境障碍、没有另外特别分类的心境障碍、广泛性焦虑症、强迫性精神失调、恐慌症、急性应激障碍、创伤后应激障碍、智力迟钝、广泛性发育障碍、注意力缺陷障碍、注意力缺陷/过度反应症、破坏性行为障碍、偏执型人格障碍、分裂型人格障碍、精神分裂症样类型的人格障碍、抽搐障碍、图雷特氏综合征、物质依赖、物质滥用、物质戒断症和拔毛发癖；以及其中认知受到损伤的病症、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷顿氏病、路易体痴呆、由于HIV病引起的痴呆、由于克-雅氏病引起的痴呆、遗忘症、轻度认知障碍及年龄相关性认知功能下降。

治疗这样疾病的那些技术人员可自下文提出的实验结果确定每天有效治疗量。每天有效治疗量应为约0.01mg/kg-约10mg/kg体重，更优选地为约0.02mg/kg-约1mg/kg体重。

药用组合物

本发明也涉及包含药学上可接受的载体和作为活性组分的治疗有效量的式(I)化合物的药用组合物。

为了易于给药，所述化合物可被配制为用于给药目的的各种药用形式。本发明的化合物，尤其是式(I)化合物、其药学上可接受的酸或碱加成盐、其立体化学异构形式、其N-氧化物形式及其前药或者其任何亚组或联合可被配制为用于给药目的的各种药用形式。作为合适的组合物可列举通常用于全身给予药物的所有组合物。为了制备本发明的药用组合物，有效量的任选地以加成盐形式存在的作为活性组分的具体化合物以与药学上可接受的载体的紧密混合物形式混合，其载体可依对于给药所要求的制剂形式而定采取广泛种类的形式。这些药用组合物以适合于尤其是经口服、直肠、经皮、经非肠道注射或经吸入给药的单位剂型存在是合乎需要的。例如，在制备以口服剂型存在的组合物中，可使用任何常用的药用媒介物，例如在口服液体制剂例如混悬剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和溶液剂的情况中可使用水、二醇类、油类、醇类等；或者在散剂、丸剂、胶囊剂和片剂的情况中可使用固体载体例如淀粉、糖类、高岭土、稀释剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。因为它们易于给药，片剂和胶囊剂代表最有利的口服单位剂型，在这样的情况中，固体药用载体明显得到使用。对于非肠道给药，载体应通常包括至少以大部分存在的无菌水，尽管可包括例如有助于溶解的其它组分。例如可制备可注射溶液剂，其中载体包括盐水溶液、葡萄糖溶液或者盐水与葡萄糖溶液的混合液。例如可制备可注射溶液剂，其中载体包括盐水溶液、葡萄糖溶液或者盐水与葡萄糖溶液的混合液。可以油形式配制包含式(I)化合物的可注射溶液剂用于延长的作用。用于该目的的合适油类为例如花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油、大豆油、长链脂肪酸的合成甘油酯及这些油与其它油的混合物。也可制备可注射混悬剂，在这样的情况中，可使用合适的液体载体、助悬剂等。也包括在内的是打算在使用之前立即转化为液体形式制剂的固体形式制剂。在适合于经皮给药的组合物，载体任选地包括任选地与以较少比例存在的任何性质的合适添加剂组合的促渗剂和/或合适的润湿剂，所述添加剂不对皮肤引起显著的有害作用。所述添加剂可便于给予皮肤和/或可有助于制备要求的组合物。这些组合物可以多种方式给药，例如作为经皮贴剂、作为定点作用剂(spot-on)、作为软膏剂。式(I)化合物的酸或碱加成盐由于其超过相应碱或酸形式的增加的水溶性更加适合于制备含水组合物。

尤其有利的是以易于给药和均匀的剂量的单位剂型配制以上提及的药用组合物。如在此使用的单位剂型指适合用作单一剂量的物理分散单位，每一单位包含与所要求药用载体组合的经计算以产生所要求治疗作用的预定量的活性组分。这样单位剂型的实例为片剂(包括压痕或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、散剂袋、糯米纸囊剂、栓剂、可注射溶液剂或混悬剂等及其分离的多重形式。

因为本发明化合物为有效的可口服给药的化合物，包含所述化合物的用于口服给药的药用组合物是尤其有利的。

为了增强药用组合物中式(I)化合物的溶解性和/或稳定性，可以有利的是使用α-、β-或γ-环糊精或其衍生物，尤其是羟基烷基取代的环糊精，例如2-羟基丙基-β-环糊精。而且共溶剂例如醇可改善药用组合物中本发明化合物的溶解性和/或稳定性。

依给药方式而定，药用组合物应包含0.05-99％重量，优选地为0.1-70％重量，更优选地为0.1-50％重量的活性组分和1-99.95％重量，优选地为30-99.9％重量，更优选地为50-99.9％重量的药学上可接受的载体，所有百分数均基于组合物的总重量计。

以下实施例意指举例说明但是不限制本发明的范围。

实验部分

在下文，术语“LCMS”意指液相色谱/质谱法，“GCMS”意指气相色谱/质谱法，“HPLC”意指高效液相色谱法，“UPLC”意指超高效液相色谱法，“trans-Pd(OAc)₂(Cy₂NH)₂”意指反式-1，1’-双(二环己基胺)乙酸钯(II)，“min.”意指分钟，“h.”意指小时，“R_t”意指保留时间(以分钟表示)，“[M+H]⁺”意指化合物的游离碱的质子化质量，“[M-H]^-”意指化合物游离碱的去质子化质量，‘m.p.”意指熔点。

以单一模式反应器实施微波辅助反应：Emrys^TM Optimizer微波反应器(Personal Chemistry A.B.，currently Biotage)。

采用试剂级溶剂，在硅胶60F254板(Merck)上实施薄层色谱法(TLC)。在标准技术条件下，在硅胶上实施快速柱层析法，粒度网目＝230-400(Merck)。采用来自默克的随时连接柱，在来自Armen Instrument的SPOT或FLASH系统上，在不规则硅胶上实施自动化快速柱层析法，粒度15-40μm(正向一次性使用的快速柱)。

在具有标准脉冲序列，分别在400MHz和500MHz下操作的Bruker DPX-400或在Bruker AV-500光谱仪上记录¹H NMR光谱。化学位移(δ)以距离用作内标的四甲基硅烷(TMS)下场的每百万分之几(ppm)报导。

A.中间体的制备

实施例A1

2-氯-4-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶

中间体1的制备

将四重(三苯基膦)钯(0)(0.030g，0.00034mmol)加入到2-氯-4-碘-5-三氟甲基-吡啶(0.350g，0.0011mol)和4-氟苯基硼酸(0.175g，0.0013mol)在1，4-二烷(3ml)和碳酸钾在水中的饱和溶液(3ml)的混合物中的搅拌溶液中。在微波辐射下，于密封管中，在140℃下加热混合物20分钟，并在150℃下加热另外10分钟。用二氯甲烷稀释反应混合物并用碳酸钠在水中的饱和溶液洗涤。分离有机层，经棉花过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；庚烷在二氯甲烷中20/80-50/50)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A1(0.285g，85％)。C₁₂H₆ClF₄N。

实施例A2

4-(6-氯-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体2的制备

向2，6-二氯-3-三氟甲基-吡啶(0.5g，0.0023mol)和N-Boc-哌嗪(0.52g，0.0028mol)在乙腈(10ml)中的搅拌溶液中加入二异丙基乙胺(1ml，0.0057mol)。在微波辐射下，于密封管中，在140℃下加热混合物20分钟。用二氯甲烷稀释反应混合物并用氯化铵在水中的饱和溶液和水洗涤。分离有机层，经棉花过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；庚烷在二氯甲烷中30/70-0/100)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A2(0.72g，85％)。C₁₅H₁₉ClF₃N₃O₂。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：1.49(s，9H)，3.48-3.59(m，4H)，3.60-3.69(m，4H)，6.48(d，J＝8.8Hz，1H)，7.69(d，J＝8.8Hz，1H)。

实施例A3

4-(6-氯-4-碘-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体3的制备

向于己烷中的正丁基锂(3.21ml，0.0064mol)在四氢呋喃(10ml)中的0℃的溶液2.5M中加入2，2，6，6-四甲基哌啶(1.73ml，0.0096mol)。在室温下搅拌反应混合物1.5小时。使混合物冷却至-78℃并然后加入4-(6-氯-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A2)(1.174g，0.0032mol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液。在-78℃下搅拌混合物1小时，之后加入碘(0.977g，0.0039mol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液。在-78℃下搅拌混合物另外45分钟并然后在盐酸于水中的1M溶液和乙醚之间分配。使混合物达到室温，然后分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中0/100-5/95)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发。将粗产物自庚烷中结晶，得到为白色固体的A3(1.025g，65％)。C₁₅H₁₈ClF₃IN₃O₂。

¹H NMR(500MHz，CDCl3)δppm：1.48(s，9H)，3.44-3.57(m，4H)，3.57-3.68(m，4H)，7.13(s，1H)。

实施例A4

4-(6-氯-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体4的制备

将反式-Pd(OAc)₂(Cy₂NH)₂(0.015g，0.000026mol)(按照在Tao，B.；Boykin，D.W.Tetrahedron Lett.2003，44，7993-7996中描述的方法制备)(0.012g，0.000020mol)加入到4-(6-氯-4-碘-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A3)(0.50g，0.0010mol)、苯基硼酸(0.136g，0.0011mol)和磷酸钾(0.647g，0.0031mol)在乙醇(3ml)中的搅拌溶液中。于密封管中，在60℃下搅拌混合物1小时。通过硅藻土垫过滤混合物并真空蒸发滤液。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中0/100-10/90)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为澄明浆状物的A4(0.445g，99％)。C₂₁H₂₃ClF₃N₃O₂。

实施例A5

4-(6-氰基-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体5的制备

将四重(三苯基膦)钯(0)(0.058g，0.000050mol)加入到4-(6-氯-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A4)(0.22g，0.00050mol)和氰化锌(0.082g，0.00070mol)在二甲基甲酰胺(5ml)中的搅拌溶液中。在微波辐射下，于密封管中，在150℃下加热混合物1.5小时。在庚烷与二氯甲烷的混合物和水之间分配混合物。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中0/100-10/90)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为白色固体的A5(0.137g，64％)。C₂₂H₂₃F₃N₄O₂。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：1.49(s，9H)，3.45-3.60(m，4H)，3.69(br.s.，4H)，6.60(s，1H)，7.19-7.32(m，2H)，7.37-7.49(m，3H)。

实施例A6

4-(6-甲氧基-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体6的制备

将甲醇钠在甲醇中的25％溶液(2.53ml，0.00060mol)加入到4-(6-氯-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A4)(0.22g，0.00050mol)在甲醇(2ml)中的搅拌溶液中。在微波辐射下，于密封管中，在125℃下加热混合物30分钟。用二氯甲烷稀释混合物并用盐酸在水中的1N溶液提取。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中0/100-5/95)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为白色固体的A6(0.083g，38％)。C₂₂H₂₆F₃N₃O₃。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：1.48(s，9H)，3.49-3.56(m，4H)，3.57-3.64(m，4H)，3.98(s，3H)，5.94(s，1H)，7.21-7.30(m，2H)，7.33-7.41(m，3H)。

实施例A7

4-(5-氯-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体7的制备

在N₂流下，将N-Boc-哌嗪(0.52g，0.0028mol)加入到3-溴-5-氯-吡啶(1g，0.0052mol)、三(二亚苄基茚丙酮)二钯(0)氯仿加合物(0.269g，0.00026mol)、(R)-(+)-2，2’-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘(0.324g，0.00052mol)和叔丁醇钠(1g，0.010mol)在甲苯(20ml)中的搅拌溶液中。在100℃下加热混合物18小时，然后通过硅藻土垫过滤。用水提取滤液。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中25/75)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A7(1.3g，88％)。C₁₄H₂₀ClN₃O₂。

实施例A8

4-(5-苯基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体8的制备

于N₂下，将4-(5-氯-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A7)(1.3g，0.0044mol)、苯基硼酸(0.798g，0.0065mol)、2-二环己基膦基-2’，4’，6’-三异丙基联苯(0.416g，0.00087mol)、10％披钯活性炭(0.116g)和碳酸钾(2.413g，0.017mol)在N，N-二甲基乙酰胺(20ml)和水(2ml)的混合物中的混合物在85℃下加热18小时。通过硅藻土垫过滤混合物。用乙酸乙酯稀释滤液并用水提取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中1/99)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A8(1.3g，88％)。C₂₀H₂₅N₃O₂。

实施例A9

4-(6-碘-5-苯基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体9的制备

向4-(5-苯基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A8)(1g，0.0029mol)在甲醇(10ml)中的搅拌溶液中加入三氟乙酸银(0.784g，0.0035mol)和碘(0.897g，0.0035mol)。于室温下搅拌混合物18小时。在该期间之后，加入另外的三氟乙酸银(0.784g，0.0035mol)和碘(0.897g，0.0035mol)并搅拌混合物另外5小时。过滤混合物并向滤液中加入硫代硫酸钠在水中的饱和溶液。于室温下搅拌混合物5分钟，然后用二氯甲烷稀释。用水和盐水提取混合物。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在二氯甲烷中10/90)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为浆状物的A9(0.280g，16％)。C₂₀H₂₄IN₃O₂。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm：1.48(s，9H)，3.12-3.24(m，4H)，3.53-3.63(m，4H)，7.04(d，J＝3.2Hz，1H)，7.30-7.40(m，2H)，7.39-7.50(m，3H)，8.05(d，J＝3.2Hz，1H)。

实施例A10

4-(5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体10的制备

于N₂下，将碘化酮(I)(0.164g，0.00086mol)和氟代磺酰基二氟乙酸甲酯(0.108ml，0.00086mol)加入到4-(6-碘-5-苯基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A9)(0.2g，0.00043mol)在二甲基甲酰胺(5ml)中的搅拌溶液中。于密封管中，在90℃下加热混合物4小时，并在冷却之后用乙醚稀释且用12％铵水溶液洗涤。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中5/95)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为浆状物的A10(0.06g，34％)。C₂₁H₂₄F₃N₃O₂。

实施例A11

3-碘-6-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮

中间体11的制备

将6-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮(5g，0.031mol)和碘(11.67g，0.046mol)加入到碳酸钾(12.71g，0.092mol)在水中的搅拌溶液中。于室温下搅拌混合物24小时。加入硫代硫酸钠在水中的饱和溶液并于室温下搅拌混合物5分钟。通过加入在水中的1N盐酸溶液酸化混合物并用二氯甲烷提取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中20/80)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A11(6.1g，69％)。C₆H₃F₃INO。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：6.59(d，J＝7.4Hz，1H)8.19(d，J＝7.4Hz，1H)，10.55(br.s.，1H)。

实施例A12

5-氯-3-碘-6-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮

中间体12的制备

将N-氯代琥珀酰亚胺(8.32g，0.062mol)加入到3-碘-6-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮(6g，0.021mol)在N，N-二甲基甲酰胺(30ml)中的搅拌溶液中。于室温下搅拌混合物24小时。加入另外的N-氯代琥珀酰亚胺(4.16g，0.031mol)并搅拌混合物另外48小时。真空蒸发溶剂。使残余物溶于二氯甲烷中并用水提取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中2/98)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A12(2.95g，44％)。C₆H₂ClF₃INO。

实施例A13

3-氯-5-碘-6-甲氧基-2-三氟甲基-吡啶

中间体13的制备

将碳酸银(2.58g，0.0093mol)和碘甲烷(1.16ml，0.019mol)加入到5-氯-3-碘-6-三氟甲基-1H-吡啶-2-酮(A12)(3g，0.0093mol)在苯(15ml)中的搅拌溶液中。在50℃下搅拌混合物16小时并然后用乙酸乙酯稀释且滤除。用水提取滤液。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中2/98)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为油的A13(1.2g，38％)。C₇H₄ClF₃INO。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm：4.01(s，3H)，8.16(s，1H).

实施例A14

4-(5-氯-2-甲氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体14的制备

于N₂下，将N-Boc-哌嗪(0.828g，0.0044mol)加入到3-氯-5-碘-6-甲氧基-2-三氟甲基-吡啶(A13)(1g，0.0030mol)、乙酸钯(II)(0.033g，0.00015mol)、(R)-(+)-2，2’-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘(0.0.277g，0.00044mol)和碳酸铯(1.93g，0.0059mol)在甲苯(15ml)中的搅拌溶液中。于85℃下加热混合物18小时，然后通过硅藻土垫过滤并真空蒸发。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中1/99)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A14(0.98g，84％)。C₁₆H₂₁ClF₃N₃O₃。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm：1.49(s，9H)，3.03-3.19(m，4H)，3.54-3.66(m，4H)；4.02(s，3H)，7.04(s，1H)。

实施例A15

4-(2-甲氧基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体15的制备

于N₂下，将4-(5-氯-2-甲氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A14)(0.98g，0.0025mol)、苯基硼酸(0.906g，0.0074mol)、2-二环己基膦基-2’，4’，6’-三异丙基联苯(0.472g，0.00099mol)、10％披钯活性炭(0.132g)和碳酸钾(1.369g，0.010mol)在N，N-二甲基乙酰胺(12ml)和水(1.2ml)的混合物中的混合物在90℃下加热18小时。通过硅藻土垫过滤混合物。用乙酸乙酯稀释滤液并用水提取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中1/99)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为浆状物的A15(0.95g，88％)。C₂₂H₂₆F₃N₃O₃。

实施例A16

4-[5-(4-氟-苯基)-2-甲氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基]-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体16的制备

按照与用于合成作为浆状物的中间体15的类似方法，自中间体14制备中间体16。C₂₂H₂₅F₄N₃O₃。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δppm 1.47(s，9H)，3.08-3.13(m，4H)，3.57-3.64(m，4H)，4.07(s，3H)，6.90(s，1H)，7.09(t，J＝8.7Hz，2H)，7.24-7.29(m，2H)。

实施例A17

5-苯基-3-哌嗪-1-基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇

中间体17的制备

将4-(2-甲氧基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A15)(0.70g，0.0016mol)在氢溴酸于水中的47％溶液(10ml)中的混合物于密封管中在100℃下加热4小时。真空蒸发溶剂并自乙醚中沉淀粗产物，得到为白色固体的A17(0.62g，96％)。C₁₆H₁₆F₃N₃O·HBr。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：3.24(br.s.，4H)，3.39(br.s.，4H)，7.01(br.s.，1H)，7.29-7.37(m，2H)，7.38-7.50(m，3H)，8.76(br.s.，2H)，12.10(br.s.，1H)。

实施例A18

4-(2-羟基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体18的制备

将二碳酸二叔丁基酯(0.404g，0.0019mol)和N，N-二异丙基乙胺(0.43ml，0.0025mol)加入到5-苯基-3-哌嗪-1-基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇(A17)(0.5g，0.0012mol)在二氯甲烷(25ml)中的搅拌着的混悬液中。于室温下搅拌混合物3小时。真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为白色固体的A18(0.38g，72％)。C₂₁H₂₄F₃N₃O₃。

¹H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm：1.47(s，9H)，3.22-3.29(m，4H)，3.57-3.62(m，4H)；6.53(s，1H)，7.27-7.32(m，2H)，7.34-7.46(m，3H)，10.10(br.s，1H)。

实施例A19

4-(5-苯基-2-三氟甲磺酰氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体19的制备

在0℃下，将三氟甲磺酸酐(0.297ml，0.0018mol)和吡啶(0.362ml，0.0045mol)加入到4-(2-羟基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A18)(0.38g，0.0009mol)在二氯甲烷(25ml)中的搅拌着的混悬液中。使混合物温热至室温，搅拌16小时，然后用二氯甲烷稀释并用氯化铵在水中的饱和溶液提取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在庚烷中2/98)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到A19(0.395g，79％)。C₂₂H₂₃F₆N₃O₅S。

实施例A20

4-(2-氰基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体20的制备

在N₂下，将氰化锌(0.085g，0.00072mol)和四重(三苯基膦)钯(0)(0.063g，0.000054mol)的混合物加入到4-(5-苯基-2-三氟甲磺酰氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A19)(0.20g，0.00036mol)在N，N-二甲基甲酰胺(5ml)中的搅拌溶液中。于密封管中在90℃下加热混合物5小时。用二氯甲烷稀释混合物并用碳酸氢钠在水中的饱和溶液提取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；在二氯甲烷中的7M氨甲醇溶液0/100-1/99)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为浆状物的A20(0.145g，93％)。C₂₂H₂₃F₃N₄O₂。

实施例A21

4-(2-甲基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯

中间体21的制备

在N₂下，将双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.013g，0.000018mol)和氯化锂(0.076g，0.0018mol)及四甲基锡(0.119ml，0.00072mol)的混合物加入到4-(5-苯基-2-三氟甲磺酰氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A19)(0.20g，0.00036mol)在N，N-二甲基甲酰胺(5ml)中的搅拌溶液中。于密封管中在130℃下加热混合物2小时。在该时间期间之后，通过硅藻土垫过滤混合物。用二氯甲烷稀释滤液并用水提取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；乙酸乙酯在二氯甲烷中0/100-40/60)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为浆状物的A21(0.115g，76％)。C₂₂H₂₆F₃N₄O₂。

B.最终化合物的制备

实施例B1

1-[4-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-基]-哌嗪

化合物1的制备

将2-氯-4-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶(A1)(0.095g，0.00035mol)和哌嗪(0.237g，0.0028mol)在乙腈(3ml)中的溶液于微波辐射下在150℃加热20分钟。将反应混合物倾入到碳酸钠在水中的饱和溶液与水的混合物中并用二氯甲烷提取。分离有机层，经棉花过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；在二氯甲烷中的7M氨甲醇溶液0/100-1/99)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，得到为白色固体的B1(0.104g，93％)。

¹H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm：2.90-3.04(m，4H)，3.58-3.69(m，4H)，6.43(s，1H)，7.06-7.14(m，2H)，7.27-7.34(m，2H)，8.46(s，1H)。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δppm：1.71(s，1H)，2.98(t，J＝4.9Hz，4H)，3.63(t，J＝5.2Hz，4H)，6.43(s，1H)，7.10(t，J＝8.7Hz，2H)，7.29(dd，J＝8.5，5.3Hz，2H)，8.46(s，1H)。

实施例B2

4-苯基-6-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-吡啶-2-腈

化合物2的制备

将三氟乙酸(1ml)加入到4-(6-氯-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A5)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中。于室温下搅拌混合物3小时。真空蒸发溶剂。将粗产物自异丙醚/乙酸乙酯中结晶，得到为白色固体的B2(0.085g，85％)。C₁₇H₁₅F₃N₄·CF₃CO₂H。

¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δppm：3.14-3.27(m，4H)，3.89-4.02(m，4H)，7.16(s，1H)，7.27-7.41(m，2H)，7.42-7.58(m，3H)，8.92(br.s.，2H)。

¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δppm：3.16-3.25(m，4H)，3.88-3.97(m，4H)，7.17(s，1H)，7.36(dd，J＝6.5，2.7Hz，2H)，7.45-7.54(m，3H)，8.93(br.s.，2H)。

实施例B3

1-(6-甲氧基-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪

化合物3的制备

将三氟乙酸(0.5ml)加入到4-(6-甲氧基-4-苯基-5-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A6)(0.083g，0.00019mol)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中。于室温下搅拌混合物16小时。用另外的二氯甲烷稀释反应混合物并用碳酸氢钠饱和溶液提取。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发溶剂。经柱层析(硅胶；在二氯甲烷中的7M氨甲醇溶液0/100-5/95)纯化粗产物。收集要求的流分并真空蒸发，且使残余物溶于异丙醚中并通过加入盐酸在乙醚中的4M溶液转化为其盐酸盐，得到为白色固体的B3(0.032g，45％)。C₁₇H₁₈F₃N₃O·HCl。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：3.10-3.22(m，4H)，3.81-3.90(m，4H)，3.94(s，3H)，6.27(s，1H)，7.19-7.34(m，2H)，7.35-7.55(m，3H)，9.14(br.s.，2H)。

实施例B4

1-(5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪

化合物4的制备

将三氟乙酸(1.25ml)加入到4-(5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A10)(0.060g，0.00015mol)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中。于室温下搅拌混合物2小时。真空蒸发溶剂。使残余物自乙醚中沉淀，得到为白色固体的B4(0.040g，64％)。C₁₆H₁₆F₃N₃·CF₃CO₂H。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：3.25-3.34(m，4H)，3.65-3.75(m，4H)，7.38(d，J＝2.5Hz，1H)，7.40-7.45(m，2H)，7.47-7.62(m，3H)，8.53(d，J＝2.8Hz，1H)，8.90(br.s.，2H)。

实施例B5

1-(2-甲氧基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪

化合物5的制备

将三氟乙酸(1.25ml)加入到4-(2-甲氧基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A15)(0.180g，0.00041mol)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中。于室温下搅拌混合物2小时。真空蒸发溶剂。使残余物自乙醚中沉淀，得到为白色固体的B5(0.175g，94％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：3.22-3.28(m，4H)，3.35-3.41(m，4H)，3.99(s，3H)，7.17(s，1H)，7.32-7.38(m，2H)，7.42-7.50(m，3H)，8.82(br.s.，2H)。

实施例B6

1-[5-(4-氟-苯基)-2-甲氧基-6-三氟甲基-吡啶-3-基]-哌嗪

化合物6的制备

按照与用于化合物5的合成类似的方法，自中间体A16制备化合物6。C₁₇H₁₇F₄N₃O·CF₃CO₂H。

¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δppm：3.22-3.28(m，4H)，3.35-3.42(m，4H)，3.98(s，3H)，7.18(s，1H)，7.30(t，J＝8.8Hz，2H)，7.40(dd，J＝8.7，5.5Hz，2H)，8.78(br.s.，2H)。

实施例B7

5-苯基-3-哌嗪-1-基-6-三氟甲基-吡啶-2-腈

化合物7的制备

将三氟乙酸(2ml)加入到4-(2-氰基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A20)(0.145g，0.00034mol)在二氯甲烷(8ml)中的搅拌溶液中。于室温下搅拌混合物2小时。在此期间后，真空蒸发溶剂。使残余物自乙醚中沉淀，得到为白色固体的B7(0.135g，90％)。C₁₇H₁₅F₃N₄·CF₃CO₂H。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：3.27-3.32(m，4H)，3.63-3.74(m，4H)，7.41(dd，J＝6.5，2.8Hz，2H)，7.48-7.56(m，3H)，7.71(s，1H)，8.90(br.s.，2H)。

实施例B8

1-(2-甲基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪

化合物8的制备

将4-(2-甲基-5-苯基-6-三氟甲基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(A21)(0.115g，0.00027mol)在盐酸于1，4-二烷中的4M溶液中的溶液于室温下搅拌2小时。真空蒸发溶剂。使残余物自乙醚中沉淀，得到为白色固体的B8(0.09g，92％)。C₁₇H₁₈F₃N₃·HCl。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：2.56(s，3H)，3.25(m，8H)，7.35(s，1H)，7.35-7.39(m，2H)，7.43-7.51(m，3H)，9.20(br.s.，2H)。

C.分析部分

熔点：

数值为峰值并且伴随通常与该分析方法有关的实验不确定性得到。

对于多种化合物，在Mettler FP62仪器上以开口毛细管测定熔点。用10℃/分钟的温度梯度测量熔点。最大温度为300℃。自数字显示器读取熔点。

核磁共振(NMR)

在具有标准脉冲序列，分别在400MHz和500MHz下操作的Bruker DPX-400或在Bruker AV-500光谱仪上记录¹H NMR光谱。化学位移(δ)以距离用作内标的四甲基硅烷(TMS)下场的每百万分之几(ppm)报导。

LCMS-方法

为了本发明化合物的LCMS-表征，采用以下方法。

通法A

采用来自Agilent Technologies包含如在以下相应方法中详细说明的具有脱气器的泵(四元或二元)、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器(DAD)和柱的HP 1100实施HPLC测量。来自柱的流量被分流至MS光谱仪。MS检测器被装配为具有电喷雾离子化源。氮气用作雾化气体。源温度保持在140℃。用MassLynx-Openlynx软件实施数据采集。

通法B

采用来自Agilent Technologies包含如在以下相应方法中详细说明的具有脱气器的二元泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器(DAD)和柱的HP1100实施HPLC测量。来自柱的流量被分流至MS光谱仪。MS检测器被装配为具有ESCI双离子化源(电喷雾联合大气压化学电离)。氮气用作雾化气体。源温度保持在100℃。用Chemsation-Agilent Data Browser软件实施数据采集。

方法1

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为1ml/分钟，于60℃下，在来自Agilent的XDB-C18柱(1.8μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在6.5分钟内为90％A(0.5g/l乙酸铵溶液)，5％B(乙腈)，5％C(甲醇)-50％B和50％C，在7分钟时至100％B，并在7.5分钟时平衡至初始条件，直到9.0分钟。注射体积2μl。仅以通过采用0.1秒的停留时间在0.5秒内从100至750扫描的正电离模式获得高分辨质谱(Time of Flight(飞行时间法)，TOF)。毛细注射针电压为2.5kV和锥形电压(cone voltage)为20V。亮氨酸-脑啡肽为用于锁定质量校正的标准物质。

方法2

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为0.8ml/分钟，在来自Agilent的XDB-C18柱(1.8μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在6.0分钟内为90％A(0.5g/l乙酸铵溶液)，10％B(乙腈/甲醇的混合物，1/1)-100％B，保持直至6.5分钟，并在7.0分钟时平衡至初始条件，直到9.0分钟。注射体积2μl。仅以通过采用0.08秒通道间延迟在0.1秒内从100至1000扫描的正电离模式获得低分辨质谱(SQD检测器；四级管)。毛细注射针电压为3kV和锥形电压为20V。

方法3

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为0.8ml/分钟，在来自Agilent的XDB-C18柱(1.8μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在6.0分钟内为90％A(0.5g/l乙酸铵溶液)，10％B(乙腈/甲醇的混合物，1/1)-100％B，保持直至6.5分钟，并在7.0分钟时平衡至初始条件，直到9.0分钟。注射体积2μl。以通过采用0.08秒通道间延迟在0.1秒内从100至1000扫描的正电离模式获得低分辨质谱(SQD检测器；四级管)。毛细注射针电压为3kV。锥形电压对于正电离模式为20V和50V和对于负电离模式为30V。

方法4

除了通法B以外：在60℃下，伴随流速为1.0ml/分钟，在来自Waters的Sunfire-C18柱(2.5μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在3.5分钟内为90％A(0.5g/l乙酸铵溶液)，10％B(乙腈/甲醇的混合物，1/1)，保持0.20分钟，至100％B，保持直至3.65分钟，并在3.8分钟时平衡至初始条件，直到5.0分钟。注射体积2μl。以通过步长为0.30和色谱峰区域宽度为0.10分钟在0.99秒内于100至1000扫描的电喷雾模式获得低分辨质谱(四级管，MSD)。毛细注射针电压为1.0kV和碎裂器电压(fragmentor voltage)对于正和负电离模式两者为70V。

方法5

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为1ml/分钟，在来自Agilent的XDB-C18柱(1.8μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在5.20分钟内为90％A(0.5g/l乙酸铵溶液)，5％B(乙腈)，5％C(甲醇)，至50％B，50％C，保持直至5.6分钟，并在5.8分钟时平衡至初始条件，直到7.0分钟。注射体积2μl。通过采用0.3秒的停留时间在0.5秒内从100至750扫描获得高分辨质谱(Time of Flight(飞行时间法)，TOF)。毛细注射针电压对于正电离模式为2.5kV和对于负电离模式为2.9kV。锥形电压对于正和负电离模式两者为20V。亮氨酸-脑啡肽为用于锁定质量校正的标准物质。

方法6

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为1.0ml/分钟，在来自Waters的Sunfire-C18柱(2.5μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在6.5分钟内为95％A(0.5g/l乙酸铵溶液+5％乙腈)，2.5％B(乙腈)，2.5％C(甲醇)-50％B，50％C，保持直至7.0分钟，并在7.3分钟时平衡至初始条件，直到9.0分钟。注射体积2μl。通过采用0.3秒的停留时间在0.5秒内从100至750扫描获得高分辨质谱(Time of Flight(飞行时间法)，TOF)。毛细注射针电压对于正电离模式为2.5kV和对于负电离模式为2.9kV。锥形电压对于正和负电离模式两者为20V。亮氨酸-脑啡肽为用于锁定质量校正的标准物质。

方法7

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为0.8ml/分钟，在来自Waters的BEH-C18柱(1.7μm，2.1x50mm)上实施反相HPLC而没有分流至MS检测器。所采用的梯度条件为：在3.5分钟内为95％A(0.5g/l乙酸铵溶液+5％乙腈)，5％B(乙腈/甲醇的混合物，1/1)，保持0.2分钟，至20％A，80％B，在3.8分钟内至100％B，保持直至4.15分钟，并在4.3分钟时平衡至初始条件，直到5.0分钟。注射体积0.5μl。通过采用0.08秒通道间延迟在0.1秒内从100至1000扫描获得低分辨质谱(SQD检测器；四级管)。毛细注射针电压为3kV。锥形电压对于正电离模式为20V和对于负电离模式为30V。

方法8

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为0.8ml/分钟，在来自Agilent的XDB-C18柱(1.8μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在3.0分钟内为90％A(0.5g/l乙酸铵溶液)，10％B(乙腈/甲醇的混合物，1/1)，保持0.2分钟，至100％B，保持直至3.15分钟，并在3.3分钟时平衡至初始条件，直到5.0分钟。注射体积2μl。通过采用0.08秒通道间延迟在0.1秒内从100至1000扫描获得低分辨质谱(四级管；SQD)。毛细注射针电压为3kV。锥形电压对于正电离模式为20V和50V和对于负电离模式为30V。

方法9

除了通法B以外：在60℃下，伴随流速为1.0ml/分钟，在来自Waters的XBridge-C18柱(2.5μm，2.1x30mm)上实施反相HPLC。所采用的梯度条件为：在3.0分钟内为95％A(0.5g/l乙酸铵溶液+5％乙腈)，5％B(乙腈/甲醇的混合物，1/1)，保持0.2分钟，至100％B，保持直至3.15分钟，并在3.3分钟时平衡至初始条件，直到5.0分钟。注射体积2μl。以通过步长为0.30和色谱峰区域宽度为0.10分钟在0.99秒内于100至1000扫描的电喷雾模式获得低分辨质谱(四级管，MSD)。毛细注射针电压为1.0kV和碎裂器电压对于正和负电离模式两者为70V。

方法10

除了通法A以外：在60℃下，伴随流速为0.8ml/分钟，在来自Waters的BEH-C18柱(1.7μm，2.1x50mm)上实施反相HPLC而没有分流至MS检测器。所采用的梯度条件为：在4.9分钟内为95％A(0.5g/l乙酸铵溶液+5％乙腈)，5％B(乙腈/甲醇的混合物，1/1)，至20％A，80％B，在5.3分钟内至100％B，保持直至5.8分钟，并在6.0分钟时平衡至初始条件，直到7.0分钟。注射体积0.5μl。通过采用0.08秒通道间延迟在0.1秒内从100至1000扫描获得低分辨质谱(SQD检测器；四级管)。毛细注射针电压为3kV。锥形电压对于正电离模式为20V和对于负电离模式为30V。

表1：分析数据-Rt意指保留时间(以分钟表示)，[M+H]⁺意指化合物游离碱的质子化质量，方法指用于LCMS的方法。

  化合物号  R_t  [M+H]⁺  方法  熔点  盐形式  A1  3.84  n.i.  1  n.d.  A2  5.38  n.i  1  127.6  A3  5.62  n.i  2  156.0  A4  5.84  442  2  n.d.  A5  5.39  433  3  211.7  A6  5.71  438  3  156.2  A7  3.14  298  4  n.d.  A8  3.37  340  4  n.d.  A9  3.67  466  4  浆状物  A10  3.59  408  5  浆状物  A11  1.92  289  4  n.d.  A12  2.38  322^a  4  油  A13  3.54  n.i.  4  n.d.  A14  3.77  n.i.  4  116.7℃  A15  3.89  438  4  浆状物

  A16  3.90  n.i.  4  浆状物  A17  2.45  324  6  分解  ·HBr  A18  3.47  424  4  212.9℃  A19  3.87  556  7  n.d.  A20  3.55  433  8  浆状物  A21  4.22  422  9  浆状物  B1  3.59  326  1  80.6℃  B2  3.74  333  1  255.3℃  ·CF₃CO₂H  B3  3.83  338  1  分解  ·HCl  B4  3.03  308  1  n.d.  ·CF₃CO₂H  B5  3.65  338  1  184.8℃  ·CF₃CO₂H  B6  3.86  333  1  227.7℃  ·CF₃CO₂H  B7  3.87  356  3  202℃  ·CF₃CO₂H  B8  2.56  322  10  分解  ·HCl

n.i.：未观察到电离。

n.d.：未测定。

a[M-H]^-

药理学

人D2_L受体的体外结合亲合力

把冷冻的人多巴胺D2_L受体转染的CHO细胞的膜解冻，采用Ultra-Turrax T25匀浆器短暂匀浆化并用包含NaCl、CaCl₂、MgCl₂、KCl(分别为50、120、2、1和5mM，用HCl调节至pH 7.7)的Tris-HCl试验缓冲液稀释至最佳用于特异性和非特异性结合的合适的蛋白浓度。用2nmol/L浓度的试验缓冲液稀释放射配体[³H]螺哌隆(NEN，比活性～70Ci/mmol)。然后，所制备的放射配体(50μl)，和50μl的10％DMSO对照物、布他拉莫(10^-6mol/l最终浓度)或者感兴趣的化合物一起，与400μl的所制备膜溶液一起温育(30分钟，37℃)。通过Packard Filtermate收获器在GF/B过滤型微孔板上过滤膜-结合活性并用冰冷的Tris-HCl缓冲液(50mM，pH 7.7，6x0.5ml)冲洗。干燥滤器后加入闪烁液并用Topcount闪烁计数器计数。采用S-Plus软件(Insightful)计算百分比特异性结合和竞争性结合曲线。大多数化合物具有＞5.0的pIC₅₀值。

快速离解

以自Josee E.Leysen和Walter Gommeren，Journal of Receptor Research，1984，4(7)，817-845公开的方法改编的间接试验检验显示IC₅₀低于10μM的化合物以评价它们的离解速率。在它们IC₅₀的4倍浓度下，将化合物首先于25℃下与2ml体积的人D2L受体细胞膜温育1小时，然后在抽吸下采用40孔multividor经玻璃纤维滤器过滤。之后立即释放真空。于5分钟内向滤器加入0.4ml预先温热(25℃)的含有1nM[³H]螺哌酮的缓冲液。通过开启真空终止温育并立即用2x5ml冰冷的缓冲液冲洗。在液体闪烁光谱仪上测量滤器-结合的放射性。试验原理基于这样的假设，即化合物从D2受体解离越快，[³H]螺哌酮与D2受体结合越快。例如，当D2受体与1850nM(4xIC₅₀)浓度下的氯氮平一起温育时，在滤器上温育5分钟后，[³H]螺哌酮结合相当于其总结合容量(在不存在药物下测定)的60-70％。当与其它抗精神病药物一起温育时，[³H]螺哌酮结合在介于20和50％之间变化。因为氯氮平被包含在每一过滤操作中，如果受试化合物离解的与氯氮平同样快或者比氯氮平更快，就认为它们是快速离解的D2拮抗剂。大多数受试化合物具有比氯氮平更快的离解速率，即＞50％。

人D3受体的体外结合亲合力

把冷冻的人多巴胺D3受体转染的CHO细胞的膜解冻，采用Ultra-Turrax T25匀浆器短暂匀浆化并以50mM包含120mM NaCl、2mM CaCl₂、1mM MgCl₂、5mM KCl和0.1％BSA(用HCl调节至pH 7.4)的Tris-HCl试验缓冲液稀释至最佳用于特异性和非特异性结合的合适的蛋白浓度。以2nM浓度下的试验缓冲液稀释放射配体[¹²⁵I]碘代舒必利(Amersham，比活性～2000Ci/mmol)。然后，所制备的放射配体(20μl)，和40μl的10％DMSO对照物、利培酮(10^-6M最终浓度)或者感兴趣的化合物一起，与70μl的所制备膜溶液和70μl的WGA包衣PVT珠(0.25mg/孔最终浓度)一起温育。在RT板上振摇24小时后以Topcount^TM闪烁计数器计数。采用S-Plus软件(Insightful)计算百分比特异性结合和竞争性结合曲线。

人5HT6受体的体外结合亲合力

把冷冻的人血清素5HT6受体转染的HEK细胞的膜解冻，采用Ultra-Turrax T25匀浆器短暂匀浆化并以50mM包含10mM MgCl₂、1mM EDTA和10μM帕吉林(用HCl调节至pH 7.4)的Tris-HCl试验缓冲液稀释至最佳用于特异性和非特异性结合的合适的蛋白浓度。以20nM浓度下的试验缓冲液稀释放射配体[³H]麦角酰二乙胺(Perkin Elmer，比活性～80Ci/mmol)。然后，放射配体(20μl)，与40μl的10％DMSO对照物、甲替平(Methiothepine)(10^-5M最终浓度)或者感兴趣的化合物一起，与70μl的所制备膜溶液和70μl的WGA包衣PVT珠(0.25mg/孔最终浓度)一起温育。在RT板上振摇24小时后以Topcount^TM闪烁计数器计数。采用S-Plus软件(Insightful)计算百分比特异性结合和竞

  实施例  D2_L结合的pIC₅₀  D2解离  5-HT6结合的pIC₅₀  D3结合的pIC₅₀  A16  5.10  83％  6.65  5.68

  B1  5.41  n.d.  6.91  n.d.  B2  6.89  60％  8.09  7.97  B3  6.64  45％  7.73  7.33  B4  6.32  69％  6.86  7.47  B5  6.69  66％  7.03  n.d.  B6  6.33  n.d.  6.89  n.d.  B7  5.47  89％  6.51  6.43  B8  5.32  95％  6.77  5.68

n.d.：未测定。