清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用

摘要

一种清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用，其中，所述清热解毒软胶囊的活性成分由以下重量份的原料制成：石膏670、金银花134、玄参107、地黄80、连翘67、栀子67、甜地丁67、黄芩67、龙胆67、板蓝根67、知母54、麦冬54。本发明在临床试验结果表明，清热解毒软胶囊能够降低肺指数，对病毒感染引起的小鼠病毒性肺炎有显著抑制作用，可以用于制备治疗病毒性肺炎的药物。

说明书

发明领域

本发明涉及一种清热解毒软胶囊的新用途，具体涉及清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用，属医药技术领域。

背景技术

病毒性肺炎是由病毒感染引起的肺部炎症。引起肺炎的病毒以流行性感冒病毒为常见,其他为副流感病毒,巨细胞病毒,腺病毒,鼻病毒,冠状病毒和某些肠道病毒,如柯萨奇,埃可病毒等,婴幼儿还常由呼吸道合胞病毒感染产生肺炎。病毒性肺炎多发生於冬春季节,可散发流行或暴发， 需住院治疗的获得性肺炎约8%为病毒性肺炎。婴幼儿、老年人、妊娠妇女、免疫力差者易发病，病情较重, 甚至导致死亡。

应对病毒感染的主要方式是疫苗和药物治疗。疫苗不能治疗已经发生的病毒感染，再加上疫苗的特异性，因此疫苗的作用就非常有限。目前用于治疗病毒性肺炎的抗病毒药物有金刚烷胺类、利巴韦林、扎那米韦、奥司他韦等，但大多存在较严重的毒副作用和耐药性，临床应用出现神经系统、消化系统和造血系统的不良反应，限制了药物的临床使用。

中药为我国的传统医学瑰宝，特别是中药的不良反应通常比化学药低，在抗病毒方面具有得天独厚的优势。因此，寻找抗病毒感染的中药方剂具有重大现实意义。

清热解毒软胶囊由石药集团欧意药业有限公司生产，为国家中药保护品种，由于其疗效确切、服用方便，深受广大患者好评。清热解毒软胶囊由石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、黄芩、龙胆、板蓝根、知母和麦冬等十二味药组成的清热解毒药，用于治疗热毒壅盛所致的发热面赤、烦躁口渴、咽喉肿痛等症，流感、上呼吸道感染见上述证候者，疗效确切。

发明内容

本发明的目的在于提供清热解毒软胶囊的一种新用途，具体地说是在制备治疗病毒性肺炎药物中的应用，其特点是具有预防和治疗病毒引起的急性下呼吸道感染，特别是病毒性肺炎的作用。

本发明所述问题是由以下技术方案解决的：

一种清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用，其中，所述清热解毒软胶囊的活性成分由以下重量份的原料制成：

石膏 670、金银花 134 、玄参 107 、地黄 80 、连翘 67 、栀子 67 、甜地丁67、黄芩 67、龙胆 67、板蓝根 67 、知母 54、麦冬54。

上述清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用，所述清热解毒软胶囊的活性成分由下述步骤制得：取石膏、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、龙胆、板蓝根、知母、麦冬十味药材加水温浸1小时，煎煮二次，第一次1小时，待煮沸后，稍放冷再加入金银花和黄芩，第二次40分钟，滤过，滤液合并，浓缩至相对密度约为1.17，加入乙醇使含醇量达65%-70%，搅匀，冷藏48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度约为1.00-1.60，即得。

上述清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用，所述病毒性肺炎为呼吸道合胞病毒引起的病毒性肺炎。

上述清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用，所述病毒性肺炎为流感病毒引起的病毒性肺炎。

上述清热解毒软胶囊在制备用于治疗病毒性肺炎药物中的应用，所述流感病毒为甲型HINI流感病毒、甲型H2N2、甲型H5N1或乙型流感病毒。

本发明的清热解毒软胶囊在体内动物试验时发现，能够降低肺指数，具有显著地抑制病毒性肺炎的活性，且呈量-效关系，高剂量组肺指数与正常对照组无显著差异性，体内肺指数抑制率大于40%。中、低剂量组的肺指数与正常对照组有显著差异性（p<0.05），肺指数抑制率均大于10，表明清热解毒软胶囊对病毒感染引起的小鼠病毒性肺炎有显著抑制作用，可以用于病毒性肺炎的治疗，从而使清热解毒软胶囊成为新的治疗病毒性肺炎的药物。

本发明所述的流感病毒为甲型HINI流感病毒、甲型H2N2、甲型H5N1或乙型流感病毒。

具体实施方式

实施例1：清热解毒软胶囊的制备

1、处方：石膏 3350g ，金银花 670g ，玄参 535g ， 地黄 400g ，

连翘 335g ， 栀子 335g ，  甜地丁335g ，黄芩 335g ，

龙胆 335g ， 板蓝根335g ， 知母  270g ，麦冬  270g。

2、活性成分提取：以上十二味，除金银花、黄芩外，其余石膏等十味用水温浸1小时后，煎煮二次，第一次1小时，待煮沸后，稍放冷再加入金银花和黄芩，第二次40分钟，滤过，滤液合并，浓缩至相对密度约为1.17（80℃），加入乙醇使含醇量达70%，搅匀，冷藏48小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度约为1.05-1.47，即得。

3、软胶囊的制备

取2中活性成分提取量、卵磷脂37.4g、蜂蜡9.4g、棕榈油56g、硅胶18.7g，用大豆油补至1260g加热并混合均匀，得内容物备用；

取明胶100g、甘油50g、焦糖色素4g、赤藓红0.268g、日落黄0.3g、亮蓝0.2g、钛白粉0.5g加入纯化水84g中，65℃保温使溶化，得软质囊材备用；

将内容物物及软质囊材分别装入软胶囊压丸机，压制得清热解毒软胶囊1000粒，规格为1.2g/粒清热解毒软胶囊

同上法，可制备成0.6g/粒、0.8g/粒、1.0g/粒的清热解毒软胶囊。

实施例2：清热解毒软胶囊抗甲型 H1N1 流感病毒性肺炎药效学试验

一、实验材料

病毒  甲型 H1N1 流感病毒。使用前接种于健康受精鸡卵尿囊腔内和小鼠体内扩增增殖，-80℃保存备用。

动物  BALB/ c小鼠，5～7周，雌雄各半，体重为12±1 g，SPF级。

药物  清热解毒软胶囊由石药集团欧意药业有限公司制备。

二、实验方法

2.1 清热解毒软胶囊对小鼠的毒性作用和药物剂量的选择

将1.2g/粒清热解毒软胶囊内容物用双蒸水配制成浓度为150 mg·mL-1的药液，经连续5天给小鼠灌胃，每天1次，每次0.2 ml，设置正常对照组，观察20天。小鼠精神状态无明显异常，体重呈平稳增长趋势，与正常组比较，无明显差异。故将清热解毒软胶囊用于治疗甲型 H1N1 流感病毒所致病毒性肺炎小鼠的高、中、低剂量定为：150 mg·mL-1，75 mg·mL-1，37.5 mg·mL-1；每只动物给药量为0.2 ml,每天1次。

2.2病毒LD50测定

将上述增殖的肺组织低温离心上清，用血清培养基作10倍系列稀释100，10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6共7个滴度，每个滴度8只小鼠，分别经鼻腔接种小鼠体内，每只50 μl，设置正常动物组，15日内观察小鼠症状体重变化及死亡率。感染甲型 H1N1 流感病毒的小鼠，第3天开始出现发病症状，表现为寒颤、耸毛、皮毛无光泽、蜷缩、厌食、行动迟缓，食量明显减少，体重持续下降，第5～6天为死亡高峰期。 Reed-muench氏法计算病毒LD50滴度为10-5.2。

2.3 清热解毒软胶囊对小鼠病毒性肺炎的作用

将小鼠随机分为5组，每组7只，⑴药物高剂量作用组；⑵药物中剂量作用组；⑶药物低剂量作用组；                                                病毒模型对照组：给与同药物组相同体积的双蒸水灌胃；正常小鼠对照组：正常小鼠肺组织上清滴鼻，也仅给与同药物组相同体积的双蒸水灌胃。

用无血清培养基将增殖的肺组织上清液的病毒滴度稀释为 1.4LD50，小鼠经乙醚轻度麻醉后，经鼻腔接种于小鼠体内，每只50 μl，禁水禁食6～8 h,灌胃给药，每只0.2 ml，每天1次，正常给水喂食。连续灌胃给药治疗5 d，每次灌胃前禁水禁食6 h。。最后一次给药后，小鼠禁食8 h，称重，摘除眼球放血脱颈椎处死动物，打开胸腔摘取全肺，生理盐水洗涤2次，称重，逐个计算肺指数和肺指数抑制率。

2.4  统计方法数据处理运用SPSS17.0软件完成，组间比较采用t 检验，X2检验。

三、 实验结果

清热解毒软胶囊高、中、低三个剂量组肺指数分别为0.91、1.19和1.30，其中高剂量组肺指数与正常对照组无显著差异性，体内病毒抑制率高达43.5%；中、低剂量组的肺指数与正常对照组有显著差异性（p<0.05），病毒抑制率分别为26.1%和19.3%，均大于10%，表明对小鼠体内的甲型 H1N1 流感病毒有抑制作用，但效果没有高剂量组佳。由表1可知：清热解毒软胶囊对小鼠体内的甲型 H1N1 流感病毒有抑制作用，呈量-效关系，高剂量组病毒抑制率大于40%。

研究结果表明清热解毒软胶囊对甲型H1N1流感病毒感染引起的小鼠病毒性肺炎有显著治疗作用。

实施例3：清热解毒软胶囊抗甲型 H2N2流感病毒性肺炎药效学试验

一、实验材料

甲型H2N2流感病毒，使用前接种于健康受精鸡卵尿囊腔内和小鼠体内扩增增殖，-80℃保存备用。BALB/ c小鼠，5～7周，雌雄各半，体重为12±1 g，SPF级。清热解毒软胶囊由石药集团欧意药业有限公司制备。

二、实验方法

2.1清热解毒软胶囊对小鼠的毒性作用

将1.2g/粒清热解毒软胶囊内容物用双蒸水配制成浓度为150 mg·mL-1的药液，经连续5天给小鼠灌胃，每天1次，每次0.2 ml，设置正常对照组，观察20天。小鼠未见明显异常及死亡，与正常组无明显差异。故将清热解毒软胶囊用于治疗甲型 H2N2 流感病毒所致病毒性肺炎小鼠的高、中、低剂量定为：150mg·mL-1，75 mg·mL-1，37.5mg·mL-1；每只动物给药量为0.2 ml,每天1次。

2.2病毒LD50测定

将上述增殖的肺组织低温离心上清，用血清培养基作10倍系列稀释100，10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6共7个滴度，每个滴度8只小鼠，分别经鼻腔接种小鼠体内，每只50 μl，每天观察小鼠症状体重变化，于15日内观察死亡率，设置正常动物组。感染甲型 H2N2 流感病毒的小鼠，第3天开始出现发病症状，表现为寒颤、耸毛、皮毛无光泽、蜷缩、厌食、行动迟缓，食量明显减少，体重持续下降，第5～6天为死亡高峰期。Reed-muench氏法计算甲型 H2N2 流感病毒LD50滴度为10-4.6。

2.3 清热解毒软胶囊对小鼠病毒性肺炎的作用

将小鼠随机分为5组，每组7只，⑴药物高剂量作用组；⑵药物中剂量作用组；⑶药物低剂量作用组；病毒模型对照组：给与同药物组相同体积的双蒸水灌胃；正常小鼠对照组：正常小鼠肺组织上清滴鼻，也仅给与同药物组相同体积的双蒸水灌胃。

用无血清培养基将增殖的肺组织上清液的病毒滴度稀释为 15LD50，小鼠经乙醚轻度麻醉后，经鼻腔接种于小鼠体内，每只50 μl，禁水禁食6～8 h,灌胃给药，每只0.2 ml，每天1次，正常给水喂食。连续灌胃给药治疗5 d，每次灌胃前禁水禁食6 h。。最后一次给药后，小鼠禁食8 h，称重，摘除眼球放血脱颈椎处死动物，打开胸腔摘取全肺，生理盐水洗涤2次，称重，逐个计算肺指数和肺指数抑制率。

三、 实验结果

清热解毒软胶囊高、中、低三个剂量组肺指数分别为0.85、1.26和1.35，其中高剂量组肺指数与正常对照组无显著差异性，体内病毒抑制率高达46.2%；中、低剂量组的肺指数与正常对照组有显著差异性（p<0.05），病毒抑制率分别为20.2%和14.6%，均大于10%，表明对小鼠体内的甲型 H2N2流感病毒有抑制作用，但效果没有高剂量组佳。由表2可知：清热解毒软胶囊对小鼠体内的甲型 H2N2流感病毒有抑制作用，呈量-效关系，高剂量组病毒抑制率大于40%。

表2  清热解毒软胶囊对甲型 H2N2流感病毒感染小鼠肺指数的影响

结果表明清热解毒软胶囊对甲型H2N2流感病毒感染引起的小鼠病毒性肺炎有显著治疗作用。

实施例4：清热解毒软胶囊抗乙型流感病毒性肺炎药效学试验

一、实验材料

乙型流感病毒，使用前接种于健康受精鸡卵尿囊腔内和小鼠体内扩增增殖，-80℃保存备用。BALB/ c小鼠，5～7周，雌雄各半，体重为12±1 g，SPF级。清热解毒软胶囊由石药集团欧意药业有限公司制备。

二、实验方法

1、清热解毒软胶囊对小鼠的毒性作用

将0.6g/粒清热解毒软胶囊内容物用双蒸水配成浓度为150ml·mL-1的药液，经连续5天给小鼠灌胃，每天1次，每次0.2 ml，设置正常对照组，观察20天，小鼠未见明显异常及死亡，与正常组无明显差异。故将清热解毒软胶囊用于治疗乙型流感病毒所致病毒性肺炎小鼠的高、中、低剂量定为：150ml ·mL-1，75ml ·mL-1，37.5ml ·mL-1；每只动物给药量为0.2 ml,每天1次。

2、病毒LD50测定

将上述增殖的肺组织低温离心上清，用血清培养基作10倍系列稀释100，10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6共7个滴度，每个滴度8只小鼠，分别经鼻腔接种小鼠体内，每只50 μl，每天观察小鼠症状体重变化。于15日内观察死亡率，设置正常动物组。感染乙型流感病毒的小鼠，第3天开始出现发病症状，表现为寒颤、耸毛、皮毛无光泽、蜷缩、厌食、行动迟缓，食量明显减少，体重持续下降，第4～5天为死亡高峰期。Reed-muench氏法计算乙型流感病毒LD50滴度为10-2.6。

3、清热解毒软胶囊对小鼠病毒性肺炎的作用

将小鼠随机分为5组，每组7只，⑴药物高剂量作用组；⑵药物中剂量作用组；⑶药物低剂量作用组；病毒模型对照组：给与同药物组相同体积的双蒸水灌胃；正常小鼠对照组：正常小鼠肺组织上清滴鼻，也仅给与同药物组相同体积的双蒸水灌胃。