早幼粒细胞白血病PML蛋白单克隆抗体的制备及应用

摘要

本发明公开一种可特异性识别人早幼粒细胞白血病蛋白(PML蛋白)的单克隆抗体的制备方法，属于生物基因工程和医学领域。本发明选择了PML蛋白锌指结构域中“ring finger”结构区的一段氨基酸序列，通过分子克隆的方法将其在大肠杆菌中表达。涉及：从人粒细胞白血病细胞系(HL60)中，通过RT-PCR方法获得一段PML基因，将其克隆入pET32a载体中，在大肠杆菌中表达PML蛋白，将此重组蛋白经酶切和纯化后免疫BALB/c小鼠，通过细胞融合技术获得杂交瘤细胞株，将杂交瘤细胞接种至小鼠腹腔，制备腹水，从腹水中提纯抗人PML单克隆抗体。该单克隆抗体可特异性识别人PML蛋白，可用于检测PML-RARα融合蛋白，为急性早幼粒细胞白血病的诊断提供帮助，并能指导其临床预后判断和治疗方案的选择。