治疗和生产原料用甲型H1N1流感病毒灭活抗体血浆制备工艺

摘要

一种治疗和生产原料用甲型H1N1流感病毒灭活抗体血浆制备工艺，主要是利用物理学方法，采用连续三次压力循环血浆病毒灭活技术和低温冷冻，能有效地灭活血浆中可能存在的包括变异株在内的HiV、HBV、HCV、CMV诸病毒，并能较好地保持血浆活性成分和抗体蛋白，病毒灭活效果确切，安全性高，还能有效地杀灭可能残留血浆中的活性淋巴细胞，可保证输血安全，防止输血不良反应的发生。同时，压力循环血浆病毒灭活工艺可以与血浆采集工艺无缝隙连接，既能简化操作，节省耗材，减少能耗，降低成本，又经济适用，便于推广。若作为原料血浆的病毒灭活处理，可以简化后续生产工艺，缩短生产周期，降低生产成本。

说明书

技术领域

本发明涉及一种灭活抗体血浆的制备工艺，特别是治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆制备工艺。

背景技术

甲型H₁N₁流感病毒抗体血浆是在甲型H₁N₁流感重危病人救治中特异性免疫治疗用血浆制品和备战贮备品。该血浆由检测合格的甲型H₁N₁流感康复者或甲型H₁N₁流感疫苗接种者采集而获得，目前，采供血浆机构现行制备甲型H₁N₁流感病毒抗体血浆的操作规程中，缺少对所述血浆病毒灭活的工艺步骤，而是将采集来的未经病毒灭活处理的甲型H₁N₁流感病毒抗体血浆直接输注使用，这样，就无法避免有可能存在着HiV、HBV、HCV等“窗口期”病毒感染的潜在风险和安全隐患。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆制备工艺，它能够克服已有技术的不足，采用物理学方法，不添加任何化学成分，可有效地灭活血浆中可能存在的包括变异株在内的HiV、HBV、HCV、CMV等病毒，并能较好地保持血浆活性成分和抗体蛋白，病毒灭活效果确切；还能有效地杀灭可能残留血浆中的活性淋巴细胞，可保证输血安全，防止输血的不良反应发生。

其解决方案是：利用物理学方法，采用压力循环技术由等静超高水压350-400MPa与常压之间的巨大压力反差，造成如HiV、HBV、HCV等包膜病毒的包膜结构内部非共价结合破坏，膜衣壳蛋白亚单位之间解体，膜结构转换，生物活性改变，抑转录酶被抑制，病毒颗粒丧失感染性而被灭活，该灭活工艺包括如下步骤：

(1)、采集检测合格的甲型H₁N₁流感康复者或甲型H₁N₁流感疫苗接种者的血浆，制成单袋甲型H₁N₁流感病毒抗体血浆，待用；

(2)、将所述待用甲型H₁N₁流感病毒抗体血浆装入置物袋，放入专用的压力循环血浆病毒灭活机的压力仓内，在该压力仓内加入液体介质，调整所述介质液位后，封闭压力仓；所述的液体介质为蒸馏水或75％乙醇；

(3)、设定压力循环血浆病毒灭活机的压力及保压时间，启动所述血浆病毒灭活机的升压开关，升压至400MPa，在5℃^±2的温度下保压5min后，卸压归零，使压力恢复到初始状态，完成一次压力循环血浆病毒灭活工序，在卸压归零1min后，所述血浆病毒灭活机自动启动升压，重复上述压力循环血浆病毒灭活工序两次，从而连续三次完成压力循环血浆病毒灭活；

(4)、打开所述血浆病毒灭活机的压力仓，取出置物袋及其内的单袋血浆，该单袋血浆即为治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆；

(5)、将上述治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆置于低温冷柜内，在-20℃的温度下冷冻贮存，备用，作为输注血浆，用37℃水浴融浆，即可使用，作为原料血浆，在后续生产工艺中直接与巴氏灭菌工艺联合。

同时，采用上述制备工艺制成的治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆，或其它特异性和非特异性灭活抗体血浆，均可以作为原料血浆，用于生产甲型H₁N₁流感抗体球蛋白制剂或其它抗体球蛋白制剂。

本发明采用上述技术方案，由于利用物理学方法，不添加任何化学成分，采用连续三次压力循环血浆病毒灭活及低温冷存，能有效地灭活血浆中可能存在的包括变异株在内的HiV、HBV、HCV、CMV诸病毒，并能较好地保持血浆活性成分和抗体蛋白，病毒灭活效果确切，安全性高。由于制备成的甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆在-20℃的温度下进行冷冻贮存，能有效地杀灭可能残留血浆中的活性淋巴细胞，可保证输血安全，防止输血不良反应的发生。又由于所采用的压力循环血浆病毒灭活工艺，可以与血浆采集工艺无缝隙连接，在血浆采集完成后，对采集的合格血浆可直接放入所述血浆病毒灭活机的压力仓内进行血浆病毒灭活处理，既能简化操作，又能节省耗材，减少能耗，降低成本，还经济适用，便于推广。若作为原料血浆的病毒灭活处理，可以简化后续生产工艺，缩短生产周期，降低生产成本。

具体实施方式

下面详细描述本发明的具体实施方式。

本发明治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆制备工艺包括如下步骤：

(1)、采用机器采集或手工采集检测合格的甲型H₁N₁流感康复者或甲型H₁N₁流感疫苗接种者的血浆，制成200-600mL/每袋的单袋甲型H₁N₁流感病毒抗体血浆，待用；

(2)、将待用的所述单袋血浆装入置物网袋内，而后放入配置在血浆采集现场的压力循环血浆病毒灭活机的压力仓内，在该压力仓内装入蒸馏水或75％乙醇作为介质，调整所述介质液位至规定的合适位置，封闭压力仓；

(3)、设定所述血浆病毒灭活机的压力为400MPa，保压时间为5min。而后，人工启动该血浆病毒灭活机的升压开关，开始加压，当压力升至设定的压力400MPa后，开始保压计时，保压时间达到设定的5min后，卸压归零，使压力恢复到初始状态，完成一次由升压→保压→卸压的压力循环血浆病毒灭活工序，当卸压归零1min后，所述血浆病毒灭活机自动启动升压，并重复上述压力循环血浆病毒灭活工序两次，从而连续三次完成压力循环血浆病毒灭活；

(4)、打开所述血浆病毒灭活机的压力仓，取出置物网袋及其内的单袋血浆，该单袋血浆即成治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆；

(5)、将上述治疗和生产原料用甲型H₁N₁流感病毒灭活抗体血浆置于低温冷柜内，在-20℃的温度下冷冻存放，备用。当作为输注血浆，用37℃水浴融浆后，即可使用；作为原料血浆，在后续生产工艺中可直接与巴氏灭菌工艺联合。

同时，该所述冷冻存放血浆，还可以作为生产甲型H1N1流感抗体球蛋白制剂或其它抗体球蛋白制剂的原料血浆，用于生产甲型H₁N₁流感抗体球蛋白制剂，或其它抗体球蛋白制剂。