测定卷烟及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分含量的方法

摘要

一种测定卷烟及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分含量的方法，涉及补骨脂有效成分的测定方法。依次包括以下步骤：(1)根据卷烟的平均质量和平均吸阻挑选烟支；(2)卷烟烟丝中补骨脂主要有效成分的提取；(3)卷烟主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分的提取；(4)对所卷烟烟丝及卷烟主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分进行超高效液相色谱-串联质谱分析。本发明的有益效果是：能够有效地将卷烟烟丝及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分完全提取，然后经过超高效液相色谱分离，串联质谱的特定扫描模式分析，从而实现补骨脂主要有效成分的快速、准确定量分析。

说明书

技术领域

本发明涉及补骨脂有效成分的测定方法，特别是测定卷烟及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分含量的方法。

背景技术

随着全球性控烟运动的不断推进，社会公众对于吸烟与健康问题日益关注。补骨脂为双子叶植物药豆科植物补骨脂的果实，含挥发油、树脂、香豆素及黄酮类化合物，具有抗肿瘤、止血、脱敏等作用。目前，部分卷烟已添加了补骨脂提取物来降低吸烟引起的危害，而中药补骨脂功效与其主要的有效成分密切相关，而这些有效成分的含量很低，尤其是在燃烧之后，这些有效成分可能经热裂解、化学反应等产生变化，卷烟主流烟气中的含量更低。目前补骨脂主要有效成分的分析方法主要有薄层扫描法和高效液相色谱法。薄层色谱法不能实现准确定量，尤其是针对烟气粒相物中含量很低的成分时；液相色谱法可实现两种有效成分的基线分离，但灵敏度低、自身抗干扰能力弱，在分析低含量样品时，易出现定量不准确或无法定量。

发明内容

本发明的目的正是针对现有技术中存在的不足之处，提供一种测定卷烟及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分含量的方法。该方法能实现卷烟及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分的快速、准确定量分析。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种测定卷烟及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分含量的方法，依次包括以下步骤：

(1)对于卷烟，将其在22℃±1℃、相对湿度60％±2％的条件下平衡48小时后，测定50支经过平衡卷烟的平均质量和平均吸阻，按照平均质量±0.01g和平均吸阻±49Pa挑选烟支。

(2)卷烟烟丝中补骨脂主要有效成分的提取：取5-20支的卷烟烟丝于玻璃容器中，加入50mL-150mL的醇作为提取溶剂，对整个容器称重后提取补骨脂的主要有效成分，用醇溶剂补足重量后过滤，稀释5-10倍后即可得待分析样品1。

(3)卷烟主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分的提取：在吸烟机上，使用92mm的玻璃纤维滤片，捕集10-20支卷烟主流烟气的粒相物，放置3-5min后取出滤片，将滤片置于玻璃容器中，加入50-150mL的醇作为提取溶剂，称重，经超声波振荡后即可提取出补骨脂的主要有效成分，补足重量，过滤后即可得待分析样品2。

(4)对所得待分析样品1和待分析样品2进行超高效液相色谱-串联质谱分析：色谱条件：分析柱：Waters Acquity UPLC BEH C₈(1.7μm，2.1×100mm)；流动相：A相为0.1％-0.3％有机酸I的乙腈溶液，B相为去离子水，等度洗脱9min，洗脱比例：A∶B＝70％∶30％；流速：0.25mL/min；柱温30℃。

质谱条件：选择串联质谱的特定扫描模式进行分析，具体参数如下：气帘气：25mL/min；碰撞气：中；离子源气1：60mL/min；离子源气2：55mL/min；接口加热器：开；温度：550℃；离子喷雾电压：2100V。

本发明中，所述提取过程可为超声波提取，也可为震荡提取，或浸泡提取。

所述提取溶剂中的醇可为包括一个、二个或三个碳原子的一元醇或多元醇；

所述色谱条件中流动相所用的有机酸I可为包括一个、二个或三个碳原子的一元有机酸或多元有机酸；所述的质谱条件中特定扫描模式可为全扫描模式、中性丢失扫描模式、多反应监测扫描模式。

本发明的有益效果是：能够有效地将卷烟烟丝及主流烟气粒相物中补骨脂主要有效成分完全提取，然后经过超高效液相色谱分离，串联质谱的特定扫描模式分析，从而实现补骨脂主要有效成分的快速、准确定量分析。本发明的方法不仅可以测定诸如卷烟烟丝及主流烟气粒相物这样的复杂体系中补骨脂主要有效成分含量，而且灵敏度高、选择性强、准确性好、操作简便快速。

具体实施方式

本发明以下将结合实施例作进一步描述，但并不限定本发明的实施范围。

实施例1

a、对于卷烟，将其在22℃、相对湿度60％的条件下平衡48小时后，测定50支经过平衡卷烟的平均质量和平均吸阻，按照平均质量±0.01g和平均吸阻±49Pa挑选烟支。

b、卷烟烟丝样品的处理：取10支卷烟的烟丝于250mL的具塞锥形瓶中，用移液管准确加入100mL甲醇，称重，在常温下，在超声功率350W和超声波频率为70KHz下超声30min，静置5min，补足重量，过滤。准确移取1mL滤液于10mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，即可得待分析样品。

c、对所得待分析样品进行超高效液相色谱-串联质谱分析：

采用多反应监测扫描模式进行定量分析，各化合物的特征母离子-子离子对如下表所示：

表1补骨脂2种有效成分的碎片信息

注：＊碎片离子为定量离子，其余碎片离子为定性离子。

实施例2

a、将卷烟在23℃、相对湿度62％的条件下平衡48小时后，测定50支经过平衡卷烟的平均质量和平均吸阻，按照平均质量±0.01g和平均吸阻±49Pa挑选烟支。

b、卷烟主流烟气粒相物的捕集与处理：使用一张92毫米玻璃纤维滤片，在温度23℃、相对湿度62％条件下，用RM200二十孔道转盘式吸烟机捕集20支卷烟主流烟气。抽吸结束后，空吸2口，取出捕集器，放置3分钟后取出滤片，移至250mL锥形瓶中，用移液管准确加入100mL甲醇溶液，称重，超声萃取30min，静置2min，补足重量，得待分析样品。

c、对所得待分析样品进行超高效液相色谱-串联质谱分析。

采用多反应监测扫描模式进行定量分析。

实施例3

a、对于卷烟，将其在21℃、相对湿度58％的条件下平衡48小时后，测定50支经过平衡卷烟的平均质量和平均吸阻，按照平均质量±0.01g和平均吸阻±49Pa挑选烟支。

b、卷烟烟丝样品的处理：取20支卷烟的烟丝于250mL的具塞锥形瓶中，用移液管准确加入150mL甲醇，称重，常温下，在转速150r/min下震荡30min，静置5min，补足重量，过滤。准确移取1mL滤液于10mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，得待分析样品。

c、对所得待分析样品进行超高效液相色谱-串联质谱分析：

采用中性丢失扫描模式进行定量分析。

实施例4

a、对于卷烟，将其在22℃、相对湿度60％的条件下平衡48小时后，测定50支经过平衡卷烟的平均质量和平均吸阻，按照平均质量±0.01g和平均吸阻±49Pa挑选烟支。

b、卷烟烟丝样品的处理：取5支卷烟的烟丝于250mL的具塞锥形瓶中，用移液管准确加入50mL甲醇，称重，常温下，浸泡1.5h，补足重量，过滤。准确移取1mL滤液于10mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，得待分析样品。

c、对所得待分析样品进行超高效液相色谱-串联质谱分析：

采用全扫描模式进行定量分析。