公开/公告号CN101929927A
专利类型发明专利
公开/公告日2010-12-29
原文格式PDF
申请/专利权人 莱卡生物系统努斯洛赫有限责任公司;
申请/专利号CN201010220984.6
申请日2010-06-21
分类号G01N1/28(20060101);
代理机构72001 中国专利代理(香港)有限公司;
代理人李进;刘健
地址 德国努斯洛赫
入库时间 2023-12-18 01:35:13
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2018-07-24
专利权的转移 IPC(主分类):G01N1/28 登记生效日:20180704 变更前: 变更后: 申请日:20100621
专利申请权、专利权的转移
2015-11-25
授权
授权
2012-11-21
专利申请权的转移 IPC(主分类):G01N1/28 变更前: 变更后: 登记生效日:20121023 申请日:20100621
专利申请权、专利权的转移
2012-06-06
实质审查的生效 IPC(主分类):G01N1/28 申请日:20100621
实质审查的生效
2010-12-29
公开
公开
技术领域
本发明涉及在组织处理器中自动处理组织样品的方法。将组织样品置于组织处理器的曲颈甑内。在曲颈甑内,将组织样品暴露至固定试剂。此后,将组织样品暴露至脱水试剂。在组织样品脱水之后,用媒介物清洁曲颈甑以除去脱水试剂。最后,用载体材料处理组织样品。
背景技术
在人类医学和兽医医学领域中经常需要生物学组织样品,尤其是组织学组织样品,尤其作为用于细胞及其环境评估的显微镜检查样品。为了显微镜研究,必须制备组织样品的薄切片,由专家在显微镜下用反射光或透射光评估。为了例如借助于显微镜用薄片切片机制备薄切片,组织样品必须具有一定的稳定性,以便借助于刀,可以制备具有微米范围厚度的透明薄切片。为了该目的,组织样品首先必须经过处理过程,其中用固定试剂固定,用脱水试剂脱水,用媒介物清洁,然后用载体材料优选熔化的石蜡浸润。这些过程经常在一个单一装置,即所谓的组织处理器中依次进行,为了该目的,该组织处理器具有可关闭的处理室,称为曲颈甑,该曲颈甑容纳不同的试剂用于在合适的温度和压力下进行各处理步骤。
在该关系中,重要的处理步骤是用载体材料浸润组织样品以便使样品稳定和硬化。在该浸润处理步骤之前,进行清洁步骤,其中除去先前脱水步骤仍然存在的残余醇。作为用于该清洁步骤的化学溶液,使用二甲苯或类似的试剂。在下面的浸润步骤中,其中将组织样品暴露至载体材料,主要为熔化的石蜡,仍然存在的二甲苯组分被液体载体材料冲洗并吸收,结果载体材料在曲颈甑中被污染。
从DE 102005057191A1知道一种组织处理器,该组织处理器用于用不同试剂处理组织学样品。在该组织处理器中,有不同的试剂容器,这些容器通过导管系统连接到组织处理器的曲颈甑。将组织学样品置于曲颈甑内,并依次用不同的试剂处理。
从WO 2006/089365A1知道用于组织处理的方法和装置,其中液体石蜡用于组织样品的浸润。
本发明的目的是详细说明用于在组织处理器中自动处理组织样品的方法,该方法对于组织处理器周围区域的人具有尽可能小的不良健康影响和/或有助于高质量的样品。
发明内容
权利要求1的特征解决了该目的。在从属权利要求中描述了有利的实施方案。
本发明的特征在于在用媒介物清洁和用载体材料处理组织样品之间,曲颈甑用载体材料保护试剂清洁。载体材料保护试剂具有以下特性:媒介物和载体材料可以混入该载体材料保护试剂中。在该关系中,″可以混入″的意思是定性描述:当试剂中的至少两种混合时,这些试剂完全混合在一起,同时形成单一的均匀相。用载体材料保护试剂清洁曲颈甑导致在填充载体材料之前,媒介物从曲颈甑大致完全地除去。结果,载体材料不会被残余的媒介物污染。一方面,这有助于成品样品不被残余的媒介物污染的事实,这提高了成品样品的质量,并有利于样品切割成薄切片用于显微镜观察。另一方面,这有助于没有残余的媒介物从加热的载体材料蒸发的事实,这有助于室内健康气氛,因为蒸发的媒介物经常包含对人类有害的物质。
在有利的实施方案中,使用载体材料保护试剂,该载体材料保护试剂可以按不受限制的方式混入媒介物和/或载体材料中。这表示它们可以按任何浓度混合。
作为载体材料保护试剂,可以使用例如媒介物替代试剂。此外,作为媒介物替代试剂,可以使用媒介物和其他试剂的混合物和/或载体材料和其他试剂的混合物。作为媒介物,优选使用二甲苯。作为媒介物替代试剂或作为其他试剂,选自萜类化合物、石蜡油或烃,尤其是长链或短链烃的物质是合适的。作为媒介物替代试剂,尤其是可以使用异链烷烃。
下面参考示意图来更详细地解释本发明的实施方案。
附图说明
图1显示用于在组织处理器中自动处理组织样品的方法流程图。
具体实施方式
在步骤S1中,开始该方法,例如在已经将组织样品置于组织处理器的曲颈甑中之后开始。
在步骤S2中,在曲颈甑中用固定试剂FIX,通常用福尔马林处理组织样品。
在步骤S3中,用脱水试剂ALK,例如乙醇处理样品。脱水试剂ALK从组织样品萃取液体。
为了除去脱水试剂,在步骤S4中用媒介物INT将曲颈甑清洁。作为媒介物INT,使用二甲苯。或者,类似的可以使用异丙醇作为媒介物INT。
为了没有残余的媒介物INT,尤其是二甲苯进入载体材料CAR并通过载体材料CAR进入成品组织样品,在步骤S5中用载体材料保护试剂CARPRO将曲颈甑清洁。载体材料保护试剂CARPRO可以按不受限制的方式混入媒介物和载体材料CAR中。优选,将媒介物替代试剂,尤其是二甲苯替代物,或二甲苯替代物和媒介物INT的混合物或二甲苯替代物和载体材料CAR的混合物用作载体材料保护试剂CARPRO。特别是,不同的萜类化合物、石蜡油和烃适合作为二甲苯替代物。其中,尤其是异链烷烃以及短链和长链烃是合适的。
用载体材料保护试剂CARPRO的清洁操作持续例如十分钟。清洁操作可以加速,因为载体材料保护试剂CARPRO在曲颈甑中加热。在将载体材料保护试剂CARPRO泵出曲颈甑之前,可以再将其冷却以便又防止清除出的媒介物残余物蒸发。载体材料保护试剂CARPRO可以贮存和再使用,直至贮存的载体材料保护试剂CARPRO中的媒介物INT浓度超过预定的阈值。
此后,在步骤S6中用载体材料CAR填充曲颈甑,以便组织样品暴露至载体材料CAR。作为载体材料CAR,优选使用石蜡或蜡。为了用载体材料CAR处理组织样品,将载体材料CAR熔化,通常保持在65℃的温度。因为媒介物INT在步骤S5中已经从组织样品和曲颈甑除去,所以在步骤S6中没有残余的媒介物INT可以蒸发、不引起异臭且不以对健康有害的方式污染组织处理器周围的空气。
在步骤S7中,该方法可以通过例如从组织处理器的曲颈甑除去组织样品来结束。成品组织样品具有特别高的纯度,因为残余的媒介物INT在步骤S6中大致完全的从组织样品除去。可以例如在显微镜用薄片切片机的帮助下,将此类纯组织样品特别容易和精确地切成薄切片。
载体材料保护试剂CARPRO可以混入媒介物INT和载体材料CAR中的事实尤其表示:在组织处理器操作正常的条件下给出该不受限制的可混和性。例如,在曲颈甑中,温度为0°-100°,绝对压力为20kPa-170kPa。
本发明不限于所描述的实施方案。例如,各步骤S2-S6可以进一步分成子步骤。尤其是,组织样品可以不同,尤其是递增的纯度,用相应的试剂,在步骤S2-S6中的一个或多个内处理。
参考标记列表
S1-S7 步骤1-7
START 开始
FIX 固定试剂
ALK 脱水试剂
INT 媒介物
CARPRO 载体材料保护试剂
CAR 载体材料
END 结束
机译: 在组织处理器中自动处理组织样品的方法
机译: 组织处理装置中组织样品的自动处理方法
机译: 在组织处理器中自动处理组织样本的方法