化合物(E)-5-6-羟基-5-(3-甲基-1-丁烯基)-2-苯并呋喃基苯-1,3-二醇在制备胰脂肪酶抑制剂中的用途

摘要

本发明属医药技术领域，涉及式(I)结构化合物的用途，具体涉及所述化合物(E)-5-[6-羟基-5-(3-甲基-1-丁烯基)-2-苯并呋喃基]苯-1，3-二醇在制备胰脂肪酶抑制剂中的用途。该化合物从光叶桂木中分离得到。实验证实，该化合物对胰脂肪酶具有很强的抑制活性，可作为研制新的预防或治疗肥胖症及相关代谢性疾病药物的先导化合物，也可用于制备预防或治疗临床常见多发的肥胖症及相关代谢性疾病的药物。

说明书

技术领域

本发明属医药技术领域，涉及一种从光叶桂木中分离得到的天然化合物的用途。具体涉及化合物(E)-5-[6-羟基-5-(3-甲基-1-丁烯基)-2-苯并呋喃基]苯-1，3-二醇在制备胰脂肪酶抑制剂中的用途。

背景技术

在近20年中，全世界尤其是发达国家的肥胖症发病率日益增多。由于经济的快速发展和生活水平的不断提高，现代人生活方式中始终存在运动不足和摄食能量相对过剩的问题，这导致了众多现代人机体能量的摄入超过了能量消耗，过剩的能量中会有一部分作为脂肪贮存在脂肪组织中，由于它的积累会导致肥胖以及相关疾病，如糖尿病、癌症、心脏病、高脂血症和脂肪肝等的发生。

目前，肥胖症的治疗主要在于开发增加能量消耗的药物或减少能量摄取的药物。其中，减少能量摄取的主要方法就是减小身体消化和吸收食品，尤其是脂肪。胰脂肪酶是肠道中脂肪消化吸收所必需的酶，食物中的脂肪在胰脂肪酶作用下被水解为单酰甘油和游离脂肪酸，在肠道被重新吸收后，在体内再次合成脂肪，引起脂肪堆积，最终导致肥胖以及相伴的高脂血症、糖尿病等代谢性疾病的发生。胰脂肪酶抑制剂可有效抑制肠道中胰脂肪酶对脂肪的分解催化作用，达到减少脂肪吸收和治疗肥胖的目的，因而开发和应用有效的胰脂肪酶抑制剂受到人们的普遍关注。目前市场畅销的胰脂肪酶抑制剂是赛尼可，赛尼可具有活性强，稳定性好等特点，但同时具有难以控制的肠道症状、油便和呕吐腹涨等缺点。因此寻找新的胰脂肪酶抑制剂对肥胖以及糖尿病等代谢性疾病的防治具有重要的意义。

有文献报道，Trinh Phuong Lien等从波罗蜜属植物胭脂中分离得到结构如式(I)所示的化合物artotonkin(Pharmazie，1998，53(5)：353)。未见该化合物的生物活性研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供结构如下式(I)的化合物的用途，具体涉及化合物(E)-5-[6-羟基-5-(3-甲基-1-丁烯基)-2-苯并呋喃基]苯-1，3-二醇在制备胰脂肪酶抑制剂中的用途。

本发明所述的式(I)结构的化合物是从光叶桂木中提取得到的天然化合物，

其对胰脂肪酶具有很强的抑制活性，可作为研制新的预防或治疗肥胖症及相关代谢性疾病药物的先导化合物，也可用于制备预防或治疗临床常见多发的肥胖症及相关代谢性疾病的药物。

具体而言，本发明是通过以下技术方案实现的：

将光叶桂木Artocarpus nitidus Tréc.的茎枝粉碎后，用有机溶剂或/和水提取制备得到总提取物，所用的有机溶剂可采用醇类，如乙醇，甲醇等，其中优选95％(体积比)乙醇。将总提取物溶于水后，分别以石油醚、卤代烃类溶剂萃取，取卤代烃类溶剂萃取相，回收溶剂后干燥即得到卤代烃类提取物，所用的卤代烃类溶剂可以用氯仿或二氯甲烷，其中优选氯仿。

将卤代烃类提取物进行硅胶柱层析，用石油醚-丙酮梯度洗脱；其中石油醚-丙酮4∶1洗脱部分进行硅胶柱层析，以石油醚-异丙醇梯度洗脱；其中石油醚-异丙醇7∶1洗脱部分进行PR-C₁₈反相柱层析，经65％甲醇洗脱后得到化合物(E)-5-[6-羟基-5-(3-甲基-1-丁烯基)-2-苯并呋喃基]苯-1，3-二醇，用波谱方法鉴定其结构，如式(I)所示。

本发明的化合物(I)进行了胰脂肪酶活性测试，结果表明，所述化合物(I)具有很强的胰脂肪酶抑制作用，可作为研制新的预防或治疗肥胖症及相关代谢性疾病药物的先导化合物，也可用于制备预防或治疗临床常见多发的肥胖症及相关代谢性疾病的药物。

具体实施方式

下面结合具体实施实例对本发明作进一步阐述，但不限制本发明。

实施例1从光叶桂木中提取本发明化合物

(1)提取：光叶桂木干燥茎枝20公斤粉粹后，用95％含水乙醇100升浸泡12h后渗漉，收集渗漉液400升，浓缩干燥，得到浸膏1.5公斤。将此浸膏溶于水后用氯仿萃取，回收溶剂浓缩至干，得氯仿提取物50克。

(2)分离：将氯仿提取物10克进行硅胶柱层析，用石油醚-丙酮(10∶1→7∶1→4∶1→2∶1)梯度洗脱，每个梯度用量1500毫升，收集流份；其中石油醚-丙酮4∶1流份进行硅胶柱层析，以石油醚-异丙醇(20∶1→10∶1→7∶1→4∶1)梯度洗脱，每个梯度用量500毫升；其中石油醚-异丙醇7∶1流份经PR-C₁₈反相柱层析，65％甲醇洗脱后得到化合物(E)-5-[6-羟基-5-(3-甲基-1-丁烯基)-2-苯并呋喃基]苯-1，3-二醇15毫克(I)。

化合物(I)的理化性质及光谱数据如下：分子式为C₁₉H₁₈O₄；其性状为黄色无定形粉末；电子轰击质谱(质荷比)：310[M]⁺；核磁共振氢谱(400MHz)数据(化学位移：ppm，偶合常数：Hz，溶剂：氘代丙酮)：δ8.69(1H，s，OH-6)，8.44(2H，s，OH-12，14)，7.62(1H，s，H-4)，7.03(1H，br s，H-3)，7.01(1H，br s，H-7)，6.85(2H，d，J＝1.9Hz，H-11，15)，6.77(1H，d，J＝16.0Hz，H-16)，6.37(1H，d，J＝1.9Hz，H-13)，6.21(1H，dd，J＝7.0，16.0Hz，H-17)，2.48(1H，m，H-18)，1.10(6H，d，J＝6.7Hz，H₃-19，20)；核磁共振碳谱(100MHz)数据(化学位移：ppm，溶剂：氘代丙酮)：159.7(C-12，14)，155.6(C-2，8)，153.7(C-6)，137.3(C-17)，133.2(C-9)，123.3(C-5)，122.9(C-16)，122.8(C-10)，118.3(C-4)，103.7(C-11，15)，103.5(C-13)，102.3(C-3)，98.2(C-7)，32.6(C-18)，23.0(C-19，20)。

实施例2本发明化合物(I)对胰脂肪酶的抑制活性测定

首先底物p-Nitrophenyl acetate(sigma公司)用磷酸缓冲液(PBS，pH 7.4)配成1.35M；猪胰脂肪酶(sigma公司)用磷酸缓冲液配成10mg/ml；化合物(I)用磷酸缓冲液配制成不同浓度的溶液。然后在96孔板中依次加入50μl稀释20倍后的酶溶液、40μl稀释1000倍后的底物溶液以及10μl不同浓度的受试样品，混匀。25℃下反应20分钟，每隔2分钟在405nm下检测每孔的吸光度。

根据在405nm下的吸光度计算受试样品对胰脂肪酶的抑制率(％)，以蒸馏水为对照。将酶活性抑制率(％)达到50％时抑制剂的浓度测定为IC50值。抑制率(％)可以根据下式进行：

抑制率(％)＝[(A-B)-(C-D)]/(A-B)×100

上式中，A表示反应后空白孔在405nm下的吸光度，

B表示反应前空白孔在405nm下的吸光度，

C表示反应后样品孔在405nm下的吸光度，

D表示反应前样品孔在405nm下的吸光度。

测试结构式(I)化合物对胰脂肪酶活性抑制作用结果，IC₅₀为3.65±0.139(μM)，表明化合物(I)对胰脂肪酶具有很强的抑制作用。

脂肪摄入过多可能导致肥胖以及与肥胖相关的糖尿病、高脂血症、脂肪肝等代谢失调性疾病，抑制胰脂肪酶可以抑制脂肪在小肠的分解，从而抑制脂肪的吸收。所以作为胰脂肪酶抑制剂，化合物(I)可用于预防或治疗肥胖症等疾病。