一种融合基因GAD-GLP-1和糖尿病食疗型黄瓜的培育方法

摘要

一种融合基因GAD-GLP-1和糖尿病食疗型黄瓜的培育方法。本发明提供的融合基因GAD-GLP-1如序列表所示，包含一段谷氨酸脱羧酶基因GAD和一段胰高血糖素样肽-1基因GLP-1，两个基因之间通过EcoRV位点进行连接，在EcoRV位点的两侧分别添加了两个赖氨酸，这四个氨基酸同时起到连接肽的作用。本发明将克隆载体pMD-GAD-GLP-1中的融合基因用BamHI和SalI酶切回收后连入Marker-free植物表达载体pX6中，构建得到无选择性标记的植物表达载体pX6-GAD-GLP-1，并转化到农杆菌LBA4404中构建成工程菌株。本发明通过农杆菌介导法，将GAD-GLP-1融合基因成功地转化到黄瓜自交系2M1，并获得了稳定表达GAD-GLP-1融合蛋白的转基因植株。糖尿病模型大鼠灌胃本发明提供的转基因黄瓜后，可以降低其血糖水平并改善其糖尿病症状。