一种单增李斯特菌溶血素O的原核表达及纯化方法

摘要

本发明公开了一种单增李斯特菌溶血素O的原核表达及纯化方法，包括以下步骤：1)根据NCBI上登录的单增李斯特菌的基因序列，以及所要连接的载体PMD18-T的多克隆位点设计引物，进行PCR扩增、电泳和回收，并对该PCR回收物进行DNA连接反应；2)大肠杆菌感受态细胞的制备和转化；3)碱法小量制备质粒DNA；4)表达质粒的重组构建、重组菌的诱导表达；5)表达蛋白Ni-NTA亲和层析纯化。本发明通过制备单增李斯特菌溶血素O蛋白进而获得抗体制作胶体金免疫层析试纸条，以便在食品检测中快速、准确的检测出单增李斯特菌。