一种美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法

摘要

本发明涉及一种美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法，属于鱼类繁殖技术领域。其包括以下孵化步骤：包括亲鱼运输、暂养等准备过程及激素2次注射的人工催产过程；两人配合完成人工授精过程；孵化水温在16－22℃下，采用流水，无死角的孵化装置的孵化过程；鱼苗出膜2～3天即投饵的及时开口。本发明采取了合理、科学的方法，优化了人工授精工艺，制作了流水、无死角的孵化装置，操作方便可靠，能确保苗种的稳定生产，较好地解决美洲鲥苗种的规模化生产难题，受精卵孵化率达80％以上。

说明书

技术领域

本发明涉及一种美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法，属于鱼类繁殖技术领域。

背景技术

美洲鲥，学名Alosa sapidissima，英文名American shad，又名美国鲥鱼，隶属鲱形总目鲱科西鲱属。它同濒临灭绝的中国鲥(Tenualosa reevesii)一样，鲜、肥、美，均是有很高经济价值的溯河产卵洄游性鱼类。

由于美洲鲥在我国极高的市场前景，2003年开始国内掀起了引种美洲鲥受精卵孵化、养殖的高潮，目前，已在广东、浙江、江苏、上海、湖北、湖南等十几个省市进行美国鲥鱼规模化养殖；但由于引种受精卵的难度不断加大、受精卵孵化率的低下加上养殖技术不是非常成熟，养殖规模受到一定的限制。因此，突破池塘养殖条件下的人工繁殖技术，解决苗种供应不稳定的问题成为美洲鲥规模化养殖和产业化的技术瓶颈。

美洲鲥是一种溯河产卵鱼类，每年春季开始，经过水温、水流等外部因子的刺激，洄游中性腺逐渐发育成熟，在出生地产卵；且目前在San Joaquin河上游的Millerton湖中已发现陆封型美洲鲥。本研究小组采用营养强化、激素投喂、流水刺激等措施成功进行美洲鲥的池塘人工繁殖；虽然刘青华等采用集约化生态型繁殖方法进行了美洲鲥的繁殖，但未涉及具体的人工催产、授精及受精卵孵化具体工艺步骤。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能克服现有美洲鲥人工催产、受精及受精卵孵化方法的鱼苗产量低、质量差的缺陷；通过特殊处理人工催产，避免美洲鲥的鳞片脱落，优化人工受精步骤，提高受精率，不仅能降低劳动强度，且可显著提高孵化率的美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法。

按照本发明提供的技术方案，本发明一种美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法，采用以下工艺步骤：

1、人工催产过程

(1)、准备过程在养殖池中捕捞、挑选成熟度较好的美洲鲥，经5‰盐度深井水运输至面积20m²，水深0.8-1m水泥池中暂养；并配好催产针及一块薄毛巾。

(2)、人工催产采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A₂)和鱼类催产助剂配伍对亲鱼进行催产；背鳍基部两次注射：第一次，雌美洲鲥注射剂量为：60μg LRH-A₂+10mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼不注射，20-24h后第二次注射：雌美洲鲥注射剂量为：160μg LRH-A₂+30mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼为雌鱼的一半；注射操作由2人共同完成，一人用准备好的薄毛巾顺势裹住亲鱼，随水而动，另一人则隔着毛巾针朝头部45°角进行激素注射，带水采用2ml规格一次性无菌注射器操作。

2、人工授精过程

催产激素注射结束后效应时间为10h-15h，进行干法人工授精；盛放精、卵的用具应干燥、洁净；取卵操作由2人配合完成，左侧者以拇指和食指在卵巢上部由上往下轻挤卵巢直至卵粒不能自然流出为止；右侧者立即挤入精液搅匀，精液量以充满卵子间隙为宜，随后先滴加约为精卵体积的1/5-1/3的池水激活精子，增加其结合受精机率，然后用洁净深井水水洗2～4遍，清除多余精液和污物。

3、受精卵孵化过程

(1)、孵化装置 孵化装置采用的孵化桶用塑料制成；

(2)、孵化温度 孵化温度控制在16-22℃；

(3)、孵化水质管理 孵化用水为净水，孵化期间确保水质清新，水流通畅，流速控制在0.3-0.5m/s，及时清除卵膜；鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速，可控制为0.1-0.2m/s，以防止鱼苗体力过分消耗。

(4)饵料在16-22℃下，鱼苗出膜2天，口器、肠管形成，应及时投喂用150目筛绢过滤的单细胞绿藻、轮虫(投喂后水体中单细胞绿藻、轮虫量达5～8个/ml)或下塘进行夏花培育。

所述孵化桶用塑料制成，容水量500-700kg左右为宜，放卵密度2.0×10⁴-2.5×10⁴粒/桶。所述孵化桶由孵化桶体1、溢水管2、出水套管3、增氧管4、进水管5、微孔增氧管6、冲水口7及阀门控制出水管8等组成。在孵化桶体1内分别设置有溢水管2、增氧管4、进水管5；所述溢水管2内设置出水套管3，溢水管2未端穿过孵化桶体1桶底与阀门控制出水管8连接；所述溢水管2上设有小孔2-1，并外套筛绢2-2。所述进水管5一端外接供水设备，另一端为冲水口7；所述增氧管4一端外接增氧机，另一端接微孔增氧管6，并紧贴孵化桶体1桶底。

所述净水为深井水与经曝气后的自来水或经浮游生物过滤网过滤的长江水，深井水与经曝气后的自来水或经浮游生物过滤网过滤的长江水体积比为1∶1。所述滤网为80目。

本发明与已有技术相比具有以下优点：

1、在人工催产、授精和孵化过程中采用了合理、科学的方法，其中，隔毛巾注射法减小了对美洲鲥的损伤，改进的规范化人工授精操作有效地提高了受精率，孵化装置的控温设计、流水、无死角设计，可靠便捷，大幅度提高了受精卵的孵化率。

2、根据生态学原理和美洲鲥早期生长发育特性相结合的方法，在出膜后第2天即投喂饵料的方式，避免了卵黄囊消失后才开始投饵的误区，保证了鱼苗的成活率；也为鲱形目鱼类的开发提高了借鉴。

3、整套技术在室内全人工控制条件下进行，不受外界环境因素影响，操作方便可靠，能确保苗种的稳定生产，较好地解决美洲鲥苗种的规模化生产难题，本发明技术的受精卵孵化率达80％以上。

附图说明

图1为本发明孵化装置整体结构示意图。

图2为本发明孵化装置的微孔增氧示意图。

图3为本发明孵化装置的溢水管结构示意图。

具体实施方式

下面本发明将结合附图中的实施例作进一步描述：

实施例1：本发明一种美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法，采用以下孵化步骤：

地点：长江珍稀鱼类保护研究中心基地

1、人工催产过程

①准备过程 在8亩养殖池中捕捞、挑选成熟度较好的美洲鲥，经5‰盐度深井水运输至面积20m²，水深0.8m水泥池中暂养；并配好催产针及一块0.4×0.2m的薄毛巾。

②人工催产 采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A₂)和鱼类催产助剂(宁波市激素制品有限公司)配伍对亲鱼进行催产。背鳍基部两次注射：第一次，雌美洲鲥注射剂量为：60μg LRH-A₂+10mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼不注射，24h后第二次注射：雌美洲鲥注射剂量为：160μg LRH-A₂+30mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼为雌鱼的一半。注射操作由2人共同完成，一人用准备好的薄毛巾顺势裹住亲鱼，随水而动，另一人则隔着毛巾针朝头部45°角进行激素注射，带水采用2ml规格一次性无菌注射器(常州悦康医疗器材有限公司生产)操作。

2、人工授精过程

注射第2针催产激素后效应时间为15h，进行干法人工授精。盛放精、卵的用具应干燥、洁净。取卵操作由2人配合完成，左侧者以拇指和食指在卵巢上部由上往下轻挤卵巢直至卵粒不能自然流出为止；右侧者立即挤入精液搅匀，精液量以充满卵子间隙为宜，随后先滴加约为精卵体积的1/5的池水激活精子，增加其结合受精机率，然后用洁净深井水水洗2遍，清除多余精液和污物。

3、受精卵孵化过程

①孵化装置 所述孵化桶用塑料制成，容水量500kg左右为宜，放卵密度2×10⁴粒/桶。所述孵化桶由孵化桶体1、溢水管2、出水套管3、增氧管4、进水管5、微孔增氧管6、冲水口7及阀门控制出水管8等组成。在孵化桶体1内分别设置有溢水管2、增氧管4、进水管5；所述溢水管2内设置出水套管3，溢水管2未端穿过孵化桶体1桶底与阀门控制出水管8连接；所述溢水管2上设有小孔2-1，并外套80目筛绢2-2。所述进水管5一端外接供水设备，另一端为冲水口7；所述增氧管4一端外接增氧机，另一端接微孔增氧管6，并紧贴孵化桶体1桶底。进水管5固定于溢水管2外壁并紧贴桶底壁，呈45°，微孔增氧管6亦紧贴桶底为微孔增氧，无死角设计。

②孵化温度 孵化温度控制在16℃。

③孵化水质管理 孵化用水为深井水与经曝气后的自来水或经浮游生物过滤网过滤的长江水(体积比为1∶1)组成的净水。孵化期间确保水质清新，水流通畅，流速控制在0.3m/s，及时清除卵膜；鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速，可控制为0.1m/s，以防止鱼苗体力过分消耗。

④饵料 在16℃下，鱼苗出膜3天，口器、肠管形成，应及时投喂用150目筛绢过滤的单细胞绿藻、轮虫(投喂后水体中单细胞绿藻、轮虫量达5个/ml)或下塘进行夏花培育。

2008年4月15日至4月25日按上述实施步骤及要求催产2批，催产种鱼12组，平均催产率70％；受精卵孵化率85％。

实施例2：本发明一种美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法，采用以下孵化步骤：

地点：江阴市申港三鲜养殖有限公司

1、人工催产过程

①准备过程在8亩养殖池中捕捞、挑选成熟度较好的美洲鲥，经5‰盐度深井水运输至面积20m²，水深0.9m水泥池中暂养；并配好催产针及一块0.4×0.2m的薄毛巾。

②人工催产采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A₂)和鱼类催产助剂(宁波市激素制品有限公司)配伍对亲鱼进行催产。背鳍基部两次注射：第一次，雌美洲鲥注射剂量为：60μg LRH-A₂+10mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼不注射，22h后第二次注射：雌美洲鲥注射剂量为：160μg LRH-A₂+30mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼为雌鱼的一半。注射操作由2人共同完成，一人用准备好的薄毛巾顺势裹住亲鱼，随水而动，另一人则隔着毛巾针朝头部45°进行激素注射，带水采用2ml规格一次性无菌注射器(常州悦康医疗器材有限公司生产)操作。

2、人工授精过程

注射第2针催产激素后效应时间为13h，进行干法人工授精。盛放精、卵的用具应干燥、洁净。取卵操作由2人配合完成，左侧者以拇指和食指在卵巢上部由上往下轻挤卵巢直至卵粒不能自然流出为止；右侧者立即挤入精液搅匀，精液量以充满卵子间隙为宜，随后先滴加约为精卵体积的1/4的池水激活精子，增加其结合受精机率，然后用洁净深井水水洗3遍，清除多余精液和污物。

3、受精卵孵化过程

①孵化装置 孵化装置采用的孵化桶用塑料制成，整体为锥底圆柱桶形，为塑料材料，在桶锥形底的中央设有出水口，出水口向下连接有带阀门的排放接管，桶底中央上还设有垂直贯通桶底凹槽的钻孔溢水管，内侧套不带孔套管，外壁则紧裹80目筛绢；外接进水管固定于溢水管外壁并紧贴桶底壁，呈45°，外接增氧管亦紧贴桶底为微孔增氧，无死角设计。

①孵化装置 所述孵化桶用塑料制成，容水量600kg左右为宜，放卵密度2.3×10⁴粒/桶。结构与实施例一相同。

②孵化温度 孵化温度控制在19℃。

③孵化水质管理 孵化用水为深井水与经曝气后的自来水或经浮游生物过滤网过滤的长江水(体积比为1∶1)组成的净水。孵化期间确保水质清新，水流通畅，水流速控制在0.4m/s，及时清除卵膜；鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速，可控制为0.15m/s，以防止鱼苗体力过分消耗。

④饵料 在19℃下，鱼苗出膜2天，口器、肠管形成，应及时投喂用150目筛绢过滤的单细胞绿藻、轮虫(投喂后水体中单细胞绿藻、轮虫量达6个/ml)或下塘进行夏花培育。

2008年4月25日至5月5日按上述实施步骤及要求催产3批，催产种鱼15组，平均催产率75％；受精卵孵化率88％。

实施例3：本发明一种美洲鲥人工催产、授精及受精卵孵化方法，采用以下孵化步骤：

地点：江阴市水产指导站基地

1、人工催产过程

①准备过程 在8亩养殖池中捕捞、挑选成熟度较好的美洲鲥，经5‰盐度深井水运输至面积20m²，水深1.0m水泥池中暂养；并配好催产针及一块0.4×0.2m的薄毛巾。

②人工催产 采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A₂)和鱼类催产助剂(宁波市激素制品有限公司)配伍对亲鱼进行催产。背鳍基部两次注射：第一次，雌美洲鲥注射剂量为：60μg LRH-A₂+10mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼不注射，20h后第二次注射：雌美洲鲥注射剂量为：160μg LRH-A₂+30mg鱼类催产助剂/Kg，雄鱼为雌鱼的一半。注射操作由2人共同完成，一人用准备好的薄毛巾顺势裹住亲鱼，随水而动，另一人则隔着毛巾针朝头部45°角进行激素注射，带水采用2ml规格一次性无菌注射器(常州悦康医疗器材有限公司生产)操作。

2、人工授精过程

注射第2针催产激素后效应时间为10h，进行干法人工授精。盛放精、卵的用具应干燥、洁净。取卵操作由2人配合完成，左侧者以拇指和食指在卵巢上部由上往下轻挤卵巢直至卵粒不能自然流出为止；右侧者立即挤入精液搅匀，精液量以充满卵子间隙为宜，随后先滴加约为精卵体积的1/3的池水激活精子，增加其结合受精机率，然后用洁净深井水水洗4遍，清除多余精液和污物。

3、受精卵孵化过程

①孵化装置 所述孵化桶用塑料制成，容水量700kg左右为宜，放卵密度2.5×10⁴粒/桶。结构与实施例一相同。

②孵化温度 孵化温度控制在22℃。

③孵化水质管理 孵化用水为深井水与经曝气后的自来水或经浮游生物过滤网过滤的长江水(体积比为1∶1)组成的净水。孵化期间确保水质清新，水流通畅，水流速控制在0.5m/s，及时清除卵膜；鱼苗出膜后要降低孵化桶中水流速，可控制为0.2m/s，以防止鱼苗体力过分消耗。

④饵料 在22℃下，鱼苗出膜2天，口器、肠管形成，应及时投喂用150目筛绢过滤的单细胞绿藻、轮虫(投喂后水体中单细胞绿藻、轮虫量达8个/ml)或下塘进行夏花培育。

2008年5月6日至5月15日按上述实施步骤及要求催产3批，催产种鱼15组，平均催产率70％；受精卵孵化率80％。