一种头孢西酮钠药物粉针剂以及头孢西酮钠原料药的合成方法

摘要

本发明提供一种头孢西酮粉针剂，该粉针剂由100％头孢西酮钠组成。其中头孢西酮钠由如下方法制备：(1)在脱水剂的作用下，7－ACA与3，5－二氯吡啶酮乙酸进行反应，反应后的混合物经后处理得到中间体I；(2)中间体I与2－巯基－5－甲基－1，3，4－噻二唑在温度为50－90℃、氮气保护的条件下进行反应，反应后的混合经提纯处理后得到水溶液中加入无机酸调节pH＝1－3，在水溶液中析出沉淀，所得沉淀经处理后即得到头孢西酮；(3)头孢西酮与碳酸氢钠在水中进行反应，经后处理得到头孢西酮钠固体。所得粉针的组分单一，溶解性能好，其原料药的合成路线短，中间体或最终产物后处理简单，整个反应过程收率高，纯度高。

说明书

技术领域

本发明涉及一种头孢菌素类抗生素粉针以及其原料药的合成方法，具体的，涉及一种头孢西酮钠粉针剂，以及头孢西酮钠的合成方法。

背景技术

头孢西酮钠(cefazedone sodium)于20世纪70年代末，由E Merck，Darmstadt实验室开发研制，为第一代头孢菌素类抗生素。1979年，由E默克公司率先在德国上市，其后，在周边国家及韩国、罗马尼亚、台湾等国家和地区上市。头孢西酮钠为半合成头孢菌素类抗生素主要通过干扰和阻止细菌细胞壁的合成，达成抑制和杀菌的目的。对临床常见的革兰阳性和部分革兰阴性菌、部分厌氧菌均有较好的抗菌活性，可用于呼吸系统、泌尿系统、胃肠道感染及妇科、腹膜、皮肤、软组织和整形外科等敏感均引起感染的治疗。

头孢西酮钠的化学名称为：(6R，7R)-3-(5-甲基-1，3，4-噻二唑基-2-巯甲基)-7-(3，5-二氯-4-吡啶酮-1-乙酰基胺基)-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸

钠盐。其结构式为：

分子式为C₁₈H₂₅Cl₂N₅O₅S₃。头孢西酮钠在水中极易溶解，在乙醇中微溶，在丙酮、三氯甲烷或乙醚中不溶解。

现有技术合成头孢西酮钠的制备方法有多种途径，在美国专利US5945414中公开了头孢西酮的合成方法，先由戊二酰基7-ACA为原料与硫醇在水溶液中在温度为90℃反应2-10小时，生成的化合物经过去酰化得到目标产物。还有文献报道，采用以7-苯基乙酰基-3-氯代甲基-3-头孢烯-4-羧酸酯衍生物为起始原料与1-甲基四唑-5-硫醇反应，经水解、脱苯乙酰基，再与3，5-二氯吡啶酮乙酸得头孢西酮。反应路线如下：

上述头孢西酮的合成路线的步骤较长，反应过程复杂，最终产品的收率低，使得整个合成过程的成本较高。

另外，以7-ACA为原料合成头孢西酮也有报道，首先7-ACA与1-甲基四唑-5-硫醇反应，再与3，5-二氯吡啶酮乙酸得头孢西酮。具体合成路线如下：

该合成路线相对变短，但是最终的头孢西酮的产率偏低，其合成成本就会相应提高，不适合工业化大规模生产。

鉴于现有技术合成头孢西酮的合成路线长、所用原料比较贵或收率低等缺陷，本发明提供一种合成路线短、反应容易控制以及产品的收率、纯度高的合成头孢西酮的方法，以及所得的头孢西酮钠经无菌处理得到了一种头孢西酮钠粉针。

发明内容

本发明的一个发明目的提供一种头孢西酮钠药物粉针剂，该粉针的组分简单，色泽均匀等优点。

本发明的另一发明目的提供一种头孢西酮钠原料药的合成方法，该方法合成步骤简单，反应条件温和，最终产品的收率高、纯度高，适合工业化生产。

为实现本发明的第一个发明目的，一种头孢西酮钠药物粉针剂，该粉针剂由100％头孢西酮钠组成。

所述的头孢西酮钠的粒度为10-50μm，其优选20-35μm。

所述的头孢西酮钠粉针剂分装时，每瓶含有头孢西酮钠的质量为350-2000mg，其优选500mg、1000mg二种规格。

头孢西酮钠虽然能够溶于水，但是作为注射用粉针，更希望活性药物短时间内溶解在注射用溶液中，从溶解速度和生产效率上考虑，本发明的头孢西酮钠的粒度控制在10-50μm。

为实现本发明的另一个目的，提供一种头孢西酮钠原料药的制备方法，采用如下技术方案：

(1)制备中间体I

在脱水剂的作用下，7-氨基-3-[(乙酰氧)甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4，2，0]-2-烯-2羧酸(7-ACA)与3，5-二氯吡啶酮乙酸在有机溶剂中进行反应，反应后的混合物经后处理得到中间体I；

(2)制备头孢西酮

步骤(1)得到的中间体I与2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑在温度为50-90℃、氮气保护的条件下进行反应，反应后的混合经提纯处理后得到水溶液，在水溶液中加入无机酸调节PH＝1-3，在水溶液中析出沉淀，所得沉淀经处理后即得到头孢西酮；

(3)制备头孢西酮钠

将步骤(2)得到的头孢西酮与碳酸氢钠在水中进行反应，经后处理得到头孢西酮钠固体。

反应过程如下：

步骤(1)中的7-ACA与3，5-二氯吡啶酮乙酸在有机溶剂中反应之前，先在7-ACA有机溶液中加入三乙胺。加入三乙胺的物质的量与7-ACA的物质的量的比为1∶1-1.2。

步骤(1)所述的脱水剂为二环己基碳二亚胺(DCC)，加入DCC物质的量与7-ACA的物质的量的比为1∶1-1.5，其优选1∶1.1-1.35。

步骤(1)所述的有机溶剂包括四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺中的一种或两种以上的混合。

所述的7-ACA与3，5-二氯吡啶酮乙酸的物质的量的比为1∶1-2.5，其优选1∶1-1.8，更优选1∶1-1.5。

在该步反应中在先将7-ACA溶于有机溶剂中，加入三乙胺，在脱水剂的作用下使的3，5二氯吡啶酮乙酸的羧基容易与7-ACA的氨基进行酰胺反应。在比较温和的反应条件下即可，本发明的7-ACA与3，5-二氯吡啶酮乙酸反应的温度控制在20-40℃，其优选20-25℃。

所述的中间体I的合成方法：将7-ACA溶于有机溶剂中，再加入三乙胺、DCC，将上述混合物降温至-10-0℃，然后加入3，5-二氯吡啶酮乙酸，在温度为20-40℃的条件下搅拌30-90分钟，反应后的混合物经后处理得到中间体I。

其中，在加入3，5-二氯吡啶酮乙酸时，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/20？1/5，其优选1/15？1/8。

在步骤(1)中要对滴加3，5-二氯吡啶酮乙酸的速度的进行控制，DCC作为酰胺化反应的缩合剂，先活化羧酸生成中间体O-酰基异硫脲，O-酰基异硫脲再与氨基结合为酰胺，同时有不溶物N，N-二环己基脲生成。该反应速度很快，如果3，5-二氯吡啶酮乙酸一次性加入到含有DCC的溶液中，迅速形成大量的不溶物，且反应温度变化比较大，导致反应条件不容易控制，且瞬间大量不溶物的出现，影响酰胺化反应程度，导致中间体I的收率降低，本发明对于每1千克的3，5-二氯吡啶酮乙酸，加入速度为每分钟滴加50-200g，整个滴加过程中，反应体系的温度变化很少，温度容易控制，随着3，5-二氯吡啶酮乙酸的不断加入，DCC将羧酸充分活化后与氨基反应生成中间体I，副反应程度小，所以中间体I的收率高。但是如果滴加速度太慢，工业生产耗时，且长时间的保持低温状态，耗费能量，即生产成本高。

步骤(1)所述后处理包括将反应后的混合物先进行过滤，蒸发所得滤液中的溶剂得到粘稠状的物质，然后粘稠状的物质用乙醚重结晶，过滤后的滤饼再真空干燥，即得中间体I。

本发明步骤(1)的酰化过程中，副反应少，所得滤液不需要经过硅胶柱吸附杂质，将滤液直接蒸发溶剂后，再用乙醚重结晶，即得到纯度较高的中间体I，由于少了硅胶柱除杂的过程，中间体I不会因此有所损失，所以最终中间体I的收率高，质量收率达到90％以上。

步骤(2)所述中间体I与2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑在pH 6.3的溶液中反应。

所述的中间体I与2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑的物质的量比为1∶1-1.5，其优选1∶1-1.2。

步骤(2)所述的头孢西酮的合成方法：将中间体I溶于碳酸氢钠溶液中，调节溶液的pH在6.0-7.0之间，在氮气保护下加入溶有2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑的有机溶剂，上述混合溶液在温度为50-90℃的条件下反应1.5-4小时。

步骤(2)所述的有机溶剂包括丙酮、乙酸乙酯。

步骤(2)所述的提纯处理包括先经过减压蒸发将有机溶剂除去，剩余的水溶液使用乙酸乙酯萃取，取其水层。

步骤(2)所述的无机酸包括盐酸、稀硫酸、稀硝酸等，其优选盐酸。

步骤(2)所述的后处理包括将含有沉淀物的水溶液过滤，所得滤饼再用丙酮重结晶，经过滤、真空干燥后得到头孢西酮固体。

步骤(3)所述的头孢西酮与碳酸氢钠的物质的量的比为1∶1-1.2，其优选1∶1-1.05。

步骤(3)所述后处理包括将反应后的混合溶液减压浓缩至原溶液体积的20％-30％，然后用丙酮重结晶，结晶物经过滤、真空干燥后即得头孢西酮钠。

步骤(3)得到的头孢西酮钠固体在室温下溶于水中，经活性炭脱色、过滤后，滤液中加入丙酮析晶，结晶物经过滤、干燥后即得到精制的头孢西酮钠。

所述的活性炭的重量为头孢西酮钠重量的0.03-0.05倍，其优选0.035-0.04倍。活性炭的加入量对头孢西酮钠的收率和纯度均有影响，活性炭加入量太少，不能很好的脱色、除杂，最终头孢西酮钠的纯度偏低，相反，活性炭加入量太多，会吸附目标产物，使得头孢西酮钠的收率降低。

在头孢西酮钠的水溶液中加入丙酮，有头孢西酮钠晶体析出，在析晶过程中溶液的浓度、降温速度会影响析晶的效果，为了在短时间在内得到纯度较高、收率较高的头孢西酮钠晶体。本发明所述的析晶过程中，加入丙酮之后，溶液的温度降低的速度在前5-7分钟内控制在每分钟2-3℃，继续降温，然后控制在温度0℃-5℃缓慢析出头孢西酮钠晶体。

在头孢西酮钠析晶过程中，在开始将其温度下降速度控制在每分钟2-3℃，使头孢西酮钠比较快的析出，但同时不会析出的杂质很少，随着头孢西酮钠晶体的析出，降温速度降低，可以析出较大而纯度较高的晶体。本发明得到的头孢西酮钠纯度比较高，经检测，纯度可达到99.4％。

本发明提供的头孢西酮钠粉针剂的组分单一，溶解性能好，稳定性好。其活性成分头孢西酮钠的合成路线短，整个过程反应条件比较温和，容易控制，以7-氨基-3[(乙酰氧)甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4，2，0]-2-烯-2-羧酸为原料，通过对反应过程3，5-二氯吡啶酮乙酸滴加速度的控制，以及反应物之间反应比例的选用等，使得副反应程度大大减少，在中间体或最终产物的提纯过程也有很大的简化，提高了整个反应过程中产物的收率，总收率达到67.7％，并且纯度也相应提高，即降低了生产成本，适合工业化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明技术方案进一步详细的介绍，但非限制本发明。

实施例1

中间体I的合成：

将7-ACA 20g(0.0735mol)投入烧瓶中，投加四氢呋喃200ml、三乙胺7.5g，加入二环己基碳二亚胺(DCC)17.2g(0.085mol)，投加二氯甲烷/DMF＝1/1(v/v)溶液200ml，冰浴降温至0℃，加入3，5-二氯吡啶酮乙酸17.6g(0.0793mol)，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/20加入完毕，20℃搅拌反应0.5小时。过滤，滤液50℃减压蒸干溶剂，乙醚重结晶，冷藏结晶8小时以上，过滤，50℃真空干燥得中间体I 33.1g，收率94.5％。得到中间体I的红外特征吸收峰为：3400cm^-1，1654.48cm^-1，1600cm^-1，1400cm^-1。

实施例2

中间体I的合成：

将7-ACA 20g(0.0735mol)投入烧瓶中，投加二氯甲烷200ml、三乙胺7.5g，加入二环己基碳二亚胺(DCC)19.68g(0.0955mol)，投加二氯甲烷溶液200ml，冰浴降温至-5℃，加入3，5-二氯吡啶酮乙酸19.6g(0.0882mol)，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/10加入完毕，25℃搅拌反应0.5小时。过滤，滤液50℃减压蒸干溶剂，乙醚重结晶，冷藏结晶8小时以上，过滤，50℃真空干燥得中间体I 33.7g，收率96.4％。得到中间体I的红外特征吸收峰为：3400cm^-1，1654.48cm^-1，1600cm^-1，1400cm^-1。

实施例3

中间体I的合成：

将7-ACA 20g(0.0735mol)投入烧瓶中，投加N，N-二甲基甲酰胺200ml、三乙胺7.5g，加入二环己基碳二亚胺(DCC)15.2g(0.0735mol)，投加二氯甲烷/DMF＝1/1(v/v)溶液200ml，冰浴降温至0℃，加入3，5-二氯吡啶酮乙酸24.47g(0.11mol)，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/15加入完毕，35℃搅拌反应0.5小时。过滤，滤液50℃减压蒸干溶剂，乙醚重结晶，冷藏结晶8小时以上，过滤，50℃真空干燥得中间体I 31.7g，收率90.6％。得到中间体I的红外特征吸收峰为：3400cm^-1，1654.48cm^-1，1600cm^-1，1400cm^-1。

实施例4

中间体I的合成：

将7-ACA 20g(0.0735mol)投入烧瓶中，投加四氢呋喃200ml、三乙胺7.5g，加入二环己基碳二亚胺(DCC)22.7g(0.11mol)，投加二氯甲烷/DMF＝1/1(v/v)溶液200ml，冰浴降温至0℃，加入3，5-二氯吡啶酮乙酸29.4g(0.132mol)，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/5加入完毕，20℃搅拌反应0.5小时。过滤，滤液50℃减压蒸干溶剂，乙醚重结晶，冷藏结晶8小时以上，过滤，50℃真空干燥得中间体I 32.7g，收率93.56％。得到中间体I的红外特征吸收峰为：1780cm^-1，1654.4cm^-1，1600cm^-1，1400cm^-1。

实验例5

制备头孢西酮

将20g(0.042mol)中间体I溶于饱和的碳酸氢钠溶液中，调PH在略小于7，通氮气，加入60ml含有5.6g(0.042mol)2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑的丙酮溶液，加热至80℃搅拌反应2小时，保持PH＝6.3。反应完后，50℃减压蒸出丙酮，乙酸乙酯萃取两次，每次用150ml，取水层，加入浓盐酸调PH＝2，析出大量沉淀，过滤，水洗，抽干，用丙酮240ml重结晶，过滤，50℃真空干燥得头孢西酮20.47g，收率89.0％。

实验例6

制备头孢西酮

将20g(0.042mol)中间体I溶于饱和碳酸氢钠溶液中，调PH在6.2，通氮气，加入60ml含有6.65g(0.0504mol)2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑的乙酸乙酯溶液，加热至80℃搅拌反应2小时，保持PH＝6.3。反应完后，50℃减压蒸出丙酮，乙酸乙酯萃取两次，每次用150ml，取水层，加入稀硫酸调PH＝2，析出大量沉淀，过滤，水洗，抽干，用丙酮240ml重结晶，过滤，50℃真空干燥得头孢西酮19.8g，收率86.2％。

实施例7

将头孢西酮15g(0.0274mol)溶于水中，加入碳酸氢钠2.45g使固体溶解，加入活性炭0.65g搅拌20分钟。过滤，滤液50℃减压浓缩至剩约25ml，搅拌下加入200ml丙酮，在前7分钟内，以2.5℃/min的速度降温析晶，继续降温，然后在4℃缓慢将头孢西酮钠晶体析出，之后过滤，滤饼用丙酮洗涤，抽干，50℃真空干燥，得13.25g头孢西酮钠，收率84.9％，其纯度99.2％。

实施例8

将头孢西酮15g(0.0274mol)溶于水中，加入碳酸氢钠2.3g使固体溶解，加入活性炭0.5g搅拌20分钟。过滤，滤液50℃减压浓缩至剩约25ml，搅拌下加入200ml丙酮，在前5分钟内，以3℃/min的速度降温析晶，继续降温，然后在0℃缓慢将头孢西酮钠晶体析出，之后过滤，滤饼用丙酮洗涤，抽干，50℃真空干燥，得13.54g头孢西酮钠，收率86.7％，其纯度99.4％。

实施例9

将7-ACA 20g投入烧瓶中，投加四氢呋喃200ml、三乙胺7.5g，加入二环己基碳二亚胺(DCC)17.2g，投加二氯甲烷/DMF＝1/1(v/v)溶液200ml，冰浴降温至0℃，加入3，5-二氯吡啶酮乙酸17.6g，5分钟加入完毕，20℃搅拌反应0.5小时。过滤，滤液50℃减压蒸干溶剂，乙醚重结晶，冷藏结晶8小时以上，过滤，50℃真空干燥得中间体I 32.8g。

将得到的32.8g中间体I溶于饱和的碳酸氢钠溶液中，调PH略小于7，通氮气，加入60ml含有11.8g 2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑的丙酮溶液，加热至80℃搅拌反应2小时，保持PH＝6.3。反应完后，50℃减压蒸出丙酮，乙酸乙酯萃取两次，每次用150ml，取水层，加入浓盐酸调PH＝2，析出大量沉淀，过滤，水洗，抽干，用丙酮重结晶，过滤，50℃真空干燥得头孢西酮31.98g。

上述得到的头孢西酮溶于水中，加入碳酸氢钠4.9g使固体溶解，加入活性炭0.97g搅拌20分钟，过滤，滤液50℃减压浓缩至剩约25ml，搅拌下加入200ml丙酮析晶，冷藏。过滤，丙酮洗涤，抽干，50℃真空干燥，得头孢西酮钠29.3g，总收率69.8％，最终产品纯度98.9％。

实施例10

将7-ACA 20g溶于300ml二氯甲烷、7.5g三乙胺中，加入二环己基碳二亚胺(DCC)18.4g，再加入DMF溶液150ml，冰浴降温至-10℃，加入3，5-二氯吡啶酮乙酸19.2g，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/8加入完毕，25℃搅拌反应0.5小时。过滤，滤液50℃减压蒸干溶剂，乙醚重结晶，冷藏结晶8小时以上，过滤，50℃真空干燥得中间体I32.47g。

将32.47g中间体I溶于饱和的碳酸氢钠溶液中，调PH＝6.2，通氮气，加入60ml含有10.5g 2-巯基-5-甲基-1，3，4-噻二唑的丙酮溶液，加热至80℃搅拌反应2小时，保持PH＝6.3。反应完后，50℃减压蒸出丙酮，乙酸乙酯萃取两次，取水层，加入稀硫酸调PH＝2，析出大量沉淀，过滤，水洗，抽干，用丙酮重结晶，过滤，50℃真空干燥得头孢西酮32.1g。

将上述得到的头孢西酮溶于水中，加入碳酸氢钠5.03g使固体溶解，加入活性炭0.98g搅拌20分钟。过滤，滤液50℃减压浓缩至剩约25ml，搅拌下加入200ml丙酮，在前6分钟内，以3℃/min的速度降温析晶，继续降温，然后在0℃缓慢将头孢西酮钠晶体析出，之后过滤，滤饼用丙酮洗涤，抽干，50℃真空干燥，得28.57g头孢西酮钠，收率68.2％，其纯度99.2％。

实施例11

头孢西酮钠固体经粉碎，筛选出粒径为10-50μm的固体粉末，然后分装每瓶含有头孢西酮钠的质量为500mg。

实施例12

头孢西酮钠固体经粉碎，筛选出粒径为20-30μm的固体粉末，然后分装每瓶含有头孢西酮钠的质量为1000mg。

实验例1

本实验例是实施例1得到的头孢西酮钠进行不同程度的粉碎，对不同粒度的头孢西酮钠粉针溶解性能进行研究，分别取1g不同粒度的头孢西酮钠粉针各5份，溶于5mL注射用水中，每种粒度的头孢西酮钠完全溶解的平均时间详见表1：

表1不同粒度头孢西酮钠溶解情况

从表中数据分析得出，头孢西酮钠的粒度控制在10-50μm时，其溶解速度比较方便使用，粒度太小时，工业生产比较费时，且溶解速度几乎没有能够再提高。

实验例2

本实验例对头孢西酮钠合成过程中，步骤(1)在加入3，5-二氯吡啶酮乙酸速度对产品中间体I收率的影响进行研究，其他合成头孢西酮钠的参数参考实施例1，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/n，具体数据见表2：

表2加入3，5-二氯吡啶酮乙酸的速度对产品中间体I收率的影响

  滴加速度(g/min·g)  1/2  1/3  1/5  1/7  1/8  1/15  1/20  1/30  收率(％)  89.7  91.2  95.4  95.7  96.8  97.8  97.1  98.4

从表2的实验结果分析，3，5-二氯吡啶酮乙酸的加入速度对中间体I的收率是有影响的，加入速度为每分钟加入3，5-二氯吡啶酮乙酸总量的1/20？1/5，是本发明的最佳加入速度。

实验例3

本实验例是对头孢西酮钠合成过程中的步骤(3)，通过重结晶的方法精制头孢西酮钠，在结晶过程中降温速度对头孢西酮钠纯度的影响，表3是在室温下经活性炭吸附后的头孢西酮钠在前5-7分钟内降温至0℃-5℃得到的头孢西酮钠的纯度，其他合成头孢西酮钠的参数参考事实施例2，具体实验数据见表3：

表3头孢西酮钠结晶过程中温度对其纯度的影响

  降温速度(℃/min)  2  2.5  3  4  2  1.5  3.5  3  时间(min)  5  5  5  6  6  7  7  7  纯度(％)  99.3  99.6  99.4  97.6  99.2  99.5  98.1  99.6

从表3实验结果分析，在5-7分钟内控制在每分钟2-3℃，最终析出的头孢西酮钠的纯度高。

实验例4

本实验例为实施例11的头孢西酮钠与注射用水的配伍实验，取20瓶注射用头孢西酮钠(规格为0.5g)溶于注射用水50ml中，分别于0、4、8、12、24小时时检查其性状、pH值、澄清度、有关物质、聚合物、含量等。其中含量以峰面积计，0小时时为100％。结果见下表4：

表4与注射用水配伍试验结果

  时间(h)  0  1  2  3  4  性状  微黄色澄明液体  微黄色澄明液体  微黄色澄明液体  微黄色澄明液体  微黄色澄明液体  pH值  5.35  5.51  5.50  5.53  5.57  浊度  ＜1号  ＜1号  ＜1号  ＜1号  ＜1号  澄明度  符合规定  符合规定  符合规定  符合规定  符合规定  最大杂质(％)  0.405  0.412  0.409  0.412  0.415  总杂质(％)  1.492  1.495  1.502  1.499  1.507  含量(％)  100.00  100.56  100.07  99.94  99.56。