一种异咯嗪核糖醇的衍生物的纯化方法

摘要

本发明提供了一种异咯嗪核糖醇的衍生物的纯化方法。该方法采用异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂作为重结晶溶剂对式(I)所述的化合物进行纯化，减少了因使用柱分离导致的生产成本的增加。

说明书

技术领域

本发明涉及一种化合物的纯化方法，尤其是一种异咯嗪核糖醇的衍生物的纯化方法。

背景技术

核黄素是一种异咯嗪核糖醇的衍生物，人体新陈代谢的一个重要组成部分，是人体所需的重要的水溶性维生素。近年来研究表明，核黄素不仅可以治疗维生素B缺乏症，也可用于癌症、高血压及其并发症、冠心病、关节炎、烧伤、顽固性口腔溃疡以及白血病行骨髓移植、肿瘤化疗放疗所引起的消化道粘膜炎的治疗。核黄素半衰期短，易从汗液及尿液中排出体外，生物利用度低，长期以来，对改善核黄素地生物利用度的缺陷进行的大量的研究发现很多核黄素酯类衍生物可以作为药物前体，在体内缓缓释放出核黄素，达到一次用药较长时间在体内贮留并发挥药效的目的。研究表明，核黄素酯类衍生物可以增加核黄素在体内贮留，增加其吸收、延缓排泄，提高生物利度。US3458497公开了核黄素脂肪酸四酯的合成方法，同时公开了通过重结晶获得核黄素脂肪酸四酯纯品的方法。US3189598公开了核黄素衍生物包括核黄素四棕榈酸酯、四丁酯、四葵酸酯及四丙酸酯的制备方法。

专利WO2004013142公开了一种异咯嗪核糖醇的衍生物及其制备方法，该化合物在治疗核黄素缺乏症、肿瘤辅助治疗的应用中具有良好的效果。该化合物的结构如下：是核黄素的5’-羟基与月桂酸酯化的产物。

专利WO2004013142，制备上述化合物产生的杂质较多，同时含有单酯、双酯、三酯和四酯。为了获得纯度较高的单酯(如上述结构所示的化合物)，专利方法通过柱分离的方法纯化，操作方法复杂。而且在实际的工业生产中，柱分离需要建立填料分离塔，工艺操作难度大，所需的洗脱液用量大，生产成本高。

发明内容

本发明的目的是提供纯化一种异咯嗪核糖醇的衍生物的新方法，该方法采用异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂为主要的纯化溶剂，避免使用柱分离，降低了生产成本。本发明所述的异咯嗪核糖醇的衍生物是具有如下结构的化合物(式(I))：

本发明纯化该异咯嗪核糖醇的衍生物的方法是：

1)将如式(I)所示的化合物的粗品置于异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂中，加热溶解；

2)在操作1)所得的溶液中边搅拌边加入水或有机溶剂；

3)将操作2)所得的混合物在低于或等于室温的条件下，固液分离获得式(I)所示的化合物。

本发明所述的“如式(I)所示的化合物的粗品”是指通过专利WO2004013142方法制备获得的粗品。

上述方法操作1)中所述的加热是指本领域的普通技术人员熟知的加热方法，如：水浴、油浴等；加热温度为：60-95℃。后若仍有不溶物，所述的不溶物用过滤或离心等固液分离方法除去。

本发明所述的“异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂”可以是：DMF、DMA(N，N-二甲基乙酰胺)、NMP(N-甲基吡咯烷酮)、DMSO(二甲亚砜)或吡啶。优选DMF。所述的DMF是N，N-二甲基甲酰胺。

上述方法中所述的异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂的体积用量是式(I)所示的化合物的粗品重量的4-14倍。

上述方法操作2)中，有机溶剂的体积用量是异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂体积用量的0-6倍，优选4倍用量。

当水或有机溶剂的体积用量为0时，即不使用有机溶剂，则式(I)所示的化合物的纯化采用本领域普通技术人员熟知的热溶解冷结晶方法，该方法为：1)将式(I)所示的化合物的粗品溶解在加热的异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂中，若加热一段时间后仍有不溶物，所述的不溶物为杂质，采用热分离的方法除去；2)所得的溶液析出式(I)所示的化合物。也可以先将滤液进行搅拌，加快析晶速度。所述的纯化方法可进行1-6次。

将上述操作所得的式(I)所示的化合物也可按照如下步骤进行再纯化：1)将式(I)所示的化合物的粗品置于异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂中，加热溶解；

2)在操作1)所得的溶液中边搅拌边加入有机溶剂；

3)将操作2)所得的混合物在室温或冷却的条件下，固液分离获得式(I)所示的化合物。

再纯化方法的各技术术语或操作条件同下述“当有机溶剂的用量不为0时”的纯化操作方法对应的各技术术语或操作条件含义相同。

当水或有机溶剂的用量不为0时，则操作2)通过加入其它的水或有机溶剂将式(I)所示的化合物的纯品从异咯嗪核糖醇的衍生物的可溶性溶剂溶液中析出来。操作1)获得的滤液冷却至室温后再加入有机溶剂可以避免产生凝胶状物质，利于过滤。

上述方法中所述的有机溶剂可以是：乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、乙腈、四氢呋喃或上述有机溶剂的任意混合溶剂。所述的“上述有机溶剂的任意混合溶剂”是指上述两种或两种以上溶剂的混合溶剂，如：乙酸乙酯+丙酮、丙酮+乙醇、乙腈+甲醇+四氢呋喃、或乙酸乙酯+乙醇+甲醇+四氢呋喃等。优选乙酸乙酯。

上述方法操作3)中，混合物放置至产品基本完全析出，固液分离，得到的所述的式(I)所示的化合物可以再用少量的乙酸乙酯洗涤，获得的式(I)所示的化合物可以通过真空干燥等干燥方式进行干燥。所述的“固液分离”是本领域技术人员熟知的固液分离的方法，如过滤、离心等。

当有机溶剂的用量不为0时，本发明上述纯化方法操作过程中操作1)和操作2)和操作3)重复进行1-6次。实验过程中发现，多次纯化有利于式(I)所示的化合物的纯度提高，但是当单个操作的操作次数多于6次，会导致纯品的产率下降。多次纯化时，上述方法操作1)中每次使用的DMF的用量可以相同也可以不同；操作2)中每次使用的有机溶剂的用量可以相同也可以不同

本发明提供的式(I)所示的化合物的纯化方法，简化了操作过程，在整个纯化过程中都不会涉及柱分离，节约设备的费用和时间，避免了新建车间的工作，大大降低了生产成本。

具体实施例

实施例1

称取10g式(I)所示的化合物的粗品，加入40ml的DMF，在90-95℃的恒温水浴中加热溶解，热滤除去不溶物。然后将此溶液冷却至近室温后继续放置在冰箱中冷却30min使产品充分析出。抽滤并用相当于2倍DMF体积的乙酸乙酯洗涤滤饼。收率85％(柱分离对照产率为31％)。HPLC结果显示t＝5-22min的杂质峰约为15％，t＞30min的杂质峰基本消失，目标产品峰(出峰时间22-23min)百分比约为75％(柱分离对照的纯度约90％)。

实施例2

称取10g式(I)所示的化合物的粗品，加入140mlDMF并在60-80℃的恒温水浴中加热溶解，热滤除去不溶物。然后将此溶液冷却至近室温后，边搅拌边缓慢加入560ml乙酸乙酯，溶液中逐渐出现黄色沉淀。加完乙酸乙酯后静置1小时，待产品析出充分后抽滤，依次用少量的乙酸乙酯和乙醚洗涤，抽滤至干后静置在真空干燥器中干燥即可。产率78％(柱分离对照产率为31％)。HPLC结果显示t＝5-22min的杂质峰约为10％，t＞30min的杂质峰基本消失，目标产品峰(出峰时间22-23min)百分比约为90％(柱分离对照的纯度约90％)。

实施例3

称取10g式(I)所示的化合物的粗品，加入40ml的DMF，在90-95℃的恒温水浴中加热溶解，热滤除去不溶物。然后将此溶液冷却至近室温后继续放置在冰箱中冷却30min使产品充分析出。抽滤并用相当于2倍DMF体积的乙酸乙酯洗涤滤饼，抽滤至干后放置在真空干燥箱中干燥备用。按照上述方法重复4-6次，得到6g式(I)所示的化合物半纯品。

称取上述方法获得的式(I)所示的化合物半纯品6g，加入60ml的DMF并在80-85℃的恒温水浴中加热溶解，热滤除去不溶物。然后将此溶液冷却至近室温后，边搅拌边缓慢加入240ml乙酸乙酯，溶液中逐渐出现黄色沉淀。加完乙酸乙酯后静置1小时，待产品析出充分后抽滤，依次用少量的乙酸乙酯和乙醚洗涤，抽滤至干后静置在真空干燥器中干燥即可。按照该方法重复5次。

获得的纯品收率30％(柱分离对照产率为31％)。HPLC结果显示t＝5-22min的杂质峰小于4％，t＞30min的杂质峰基本消失，目标产品峰(出峰时间22-23min)百分比大于96％。

实施例4

称取10g式(I)所示的化合物的粗品，加入40ml的DMF，在90-95℃的恒温水浴中加热溶解，热滤除去不溶物。然后将此溶液冷却至近室温后继续放置在冰箱中冷却30min使产品充分析出。抽滤并用相当于2倍DMF体积的乙酸乙酯洗涤滤饼，抽滤至干后放置在真空干燥箱中干燥备用。按照上述方法重复4-6次，得到5.5g式(I)所示的化合物半纯品。

称取上述方法获得的式(I)所示的化合物半纯品5.5g，加入60ml的DMF并在80-85℃的恒温水浴中加热溶解，热滤除去不溶物。然后将此溶液冷却至近室温后，边搅拌边缓慢加入180ml水，溶液中逐渐出现黄色沉淀。加完水后静置1小时，待产品析出充分后抽滤，依次用少量的乙酸乙酯和乙醚洗涤，抽滤至干后静置在真空干燥器中干燥即可。按照该方法重复5次。

获得的纯品收率28.5％(柱分离对照产率为31％)。HPLC结果显示t＝5-22min的杂质峰小于4％，t＞30min的杂质峰基本消失，目标产品峰(出峰时间22-23min)百分比约95％。