以逆转录酶抑制剂和美度铵为基础的药物组合物

摘要

本发明公开了一种新的药物组合物，所述药物组合物含有一种逆转录酶抑制剂，即治疗有效量的叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定，和美度铵，以及药学上应用的赋形剂。已经证实，含有美度铵的这些药物组合物基本降低了逆转录酶抑制剂对心脏和神经的毒性。

说明书

技术领域

本发明涉及美度铵(Meldonium)新的治疗用途，以及降低逆转 录酶抑制剂类的药物引起的毒性的药物组合物。

背景技术

已经知道，人类免疫缺陷病毒的感染是最经常发生的高危险性 感染，在2004年感染了37.7百万成人和2.2百万小孩。 BROCKLEHURST，P，等人：Antiretrovirals for Reducing the Risk of Mother-to-Child Transmission of HIV Infection；Cochrane Database SystRev.2002，no.2。

在HIV/AIDS治疗中，抑制聚合酶的叠氮胸苷(AZT)、司他伏定 和拉米夫定，以及用于HIV-1线粒体脱氧核糖核酸(mtDNA)复制的 酵素是最常使用的。由于叠氮胸苷和司他伏定和拉米夫定阻止了新 的线粒体的形成，从而引起其它的副作用。

美度铵，化学表达为3-(2，2，2-三甲基肼)丙酸酯，在1982年7 月8日的美国专利4481218(INST ORGANICHESKOGO SINTEZA AK(SU)) 中公开。

美度铵作为药物广泛用于抗缺血和应激保护的药物中，用于治 疗不同的心血管疾病和涉及缺血性的其它疾病。

叠氮胸苷，化学表达为：3’-叠氮-3’-脱氧胸苷；叠氮胸苷；或 AZT为逆转录酶抑制剂。在1985年9月17日的美国专利4724232 (BURROUGHS WELLCOME CO(US))中公开了叠氮胸苷和相关化合物及 其制剂的治疗用途。

叠氮胸苷可以从商业上购买，如100mg的胶囊、300mg的药片、 一次性使用的20ml药瓶中的10mg/ml叠氮胸苷和240ml糖浆中的 50mg/5ml叠氮胸苷。

拉米夫定，化学表达为(2R-顺)-4-氨基-1-[2-(羟甲基)-1，3- 氧硫杂环戊烷-5-基]-2(1H)-嘧啶酮；(-)-2’-去氧-3’-硫杂胞啶； (-)-1-[(2R，5S)-2-(羟甲基)-1，3-氧硫杂环戊烷-5-基]胞核嘧啶； 或3TC为逆转录酶抑制剂。拉米夫定、相关化合物及其制剂的治疗 用途在1991年05月02日的WO 9117159(IAF BIOCHEM INT(CA)) 中公开。

拉米夫定可以从商业上购买，如100mg、150mg和300mg的药片； 240ml口服溶液中的10mg/ml拉米夫定。

司他伏定，化学表达为2’，3’-二脱氢-3’-脱氧胸苷；1-(2，3-二 去氧-β-甘油基-戊-2-enofuranosyl)胸腺嘧啶；或3’-脱氧-2’-胸 苷为逆转录酶抑制剂。在1991年4月29日的美国专利US 5130421 (BRISTOL MYERS CO(US))中公开了司他伏定和相关化合物及其制剂 的治疗用途。

司他伏定可以从商业上购买，如15mg、20mg、30mg和40mg的 胶囊；以及200ml口服溶液中的1mg/ml司他伏定。

已经有几种方法用于限制叠氮胸苷、司他伏定和拉米夫定的毒 性引起的几种副反应。不过，它们都不能同时对心肌细胞和神经细 胞的机能产生影响。

为了降低线粒体的受损，在一些文献中推荐使用抗氧化剂，如 高剂量的维生素C和维生素E；具体的文献包括BROCKLEHURST，P等 人Antiretrovirals for Reducing the Risk of Mother-to-Child Transmission of HIV Infection.Cochrane Database SystRev，. 2002，no.2.；FICHTENBAUM，CJ.Coronary Heart Disease Risk， Dyslipidemia，and Management in HIV-infected Persons.HIV Clin Trials.2004 Nov-Dec，vol.5，no.6，p.416-433。

鼠的试验证实，维生素C的日常剂量1250mg/kg和维生素E的 日常剂量75mg/kg防止线粒体氧化，以及降低天冬氨酸酯转移酶 (AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性，并限制线粒体超微结构的受损。 类似的，肌酸激酶(CK)活性得到了减弱，而在叠氮胸苷的应用中得 到了加强。PETERS，B.S.等人，Mitochondrial Myopathy Associated with Chronic Zidovudine Therapy in AIDS，Q J Med， 1993 Jan，vol.86，no.1，p.5-15。

辅酶Q10可以作为另一种能够能够施加积极效果的物质，通过 激活呼吸链中的电子转移排除叠氮胸苷的副反应；公认核黄素、生 育酚、琥珀酸酯、抗坏血酸、甲萘醌和烟碱抑制呼吸链阻塞。LARSSON， N.G.等人，Mitochondrial Myopathies..Acta Physiol Scand.2001， no.171，p.225-233。

1996年7月19日的WO 9705864(SIGMA TAU IND FARMACEUTI(IT)； MENDES SRL(IT)；MORETTI SONIA(IT))提供了关于L-肉碱、其衍 生物及其药学上可接受的盐与抗逆转录酶病毒药物一起降低神经酰 胺浓度、增强所述抗逆转录酶病毒药物的活性的新的应用，从而治 疗HIV感染和AIDS，以及通过这些药物增强免疫系统。

1993年3月9日的EP0560275A(SIGMA TAU IND FARMACEUTI(IT)) 公开了L-肉碱及其药学上可接受的盐的新的治疗应用，即治疗 camitine-depleted HIV-seropositive患者。

发明内容

技术问题

在AIDS治疗中，叠氮胸苷(AZT)、司他伏定和拉米夫定在抑制 聚合酶-γ(引起HIV-1线粒体脱氧核糖核酸(mtDNA)复制的酶)中 广泛得到应用。因此，叠氮胸苷、司他伏定和拉米夫定阻碍了新的 线粒体的形成。

不过，含有AZT、司他伏定和拉米夫定的药物剂型和组合物有个 缺点，即其应用受到AZT、司他伏定和拉米夫定毒性的副作用的限制 (LEWIS，W.等人，AZT Induces Molecular，Biochemical，and Ultrastructural Changes in Rat Skeletal Muscle mitochondrion， Journal of CHn Invest.1992 Apr，vol.89，no.4，p.1354-1210； SZABADOS，E.等人，Role of Reactive Oxygen Species and Poly-ADP-ribose Polymerase in the Develpoment of AZT-induced Cardiomyopathy in Rat.Free Radio Biol Med.1999 Feb，vol.14， no.3-4，p.189-197；BLANCO，F.等人，First-line Therapy and Mitochondrial Damage：Different Nucleosides，Different Findings，HIV Clin Trials，2003 Jan-Feb，vol.4，no.1，p.11-19； BISHOP，J.B.等人，Mitochondrial Damage Revealed by Morphometric and Semiquantitative Analysis of Mouse Pup Cardiomyocytes Following in Utero and Postnatal Exposure to Zidovudine and Lamivudine，Toxicol Sci 2004，vol.8l，no.2， p.512-517)。

AZT毒性主要和线粒体的结合能力相关(NUSBAUM，NJ.，AZT Incorporation into Mitochondria：Study in Human Myeloid Cell Line，DNA Cell Biol，1996，no.15，p.363-366)，从而使得其中 的mtDNA和细胞色素C(CYC)减少。同时观察到氧化磷酸酶的活性降 低。AZT毒性使得线粒体产生的三磷酸腺苷(ATP)的水平降低，活 性氧物质(ROS)累积，从而细胞的厌氧作用加强，生成乳酸。

叠氮胸苷和拉米夫定的毒性效应临床表现为由HIV本身的感染 导致的线粒体病理学引起的肌细胞的肌病(PETERS，B.S.等人， Myopathy Associated with Chronic Zidovudine Therapy in AIDS. Q J Med，1993 Jan，vol.86，no.1，p.5-15；BAKKER，H.D.等人， Vitamin-Responsive Complex-1 Deficiency in a Myopathic Patient with Increased Activity of the Terminal Respiratory Chain and Lactic Acidosis，J Inherit Metab Dis.1994，no.17， p.196-204；SULKOWSKI，M.S.等人，Hepatic Steatosis and Antiretroviral Drug Use Among Adults Co-infected with HIV and Hepatitis C Virus，AIDS，2005 Mar 24，vol.19，no.6，p.585-592； LICHTERFELD，M.等人，Fatty Liver and increased Serum Lactate in a Woman with HIV，Dtsch Med Wochenschr，2003 Jan 17，vol.98， no.3，p.81-84；DE LA ASUNCION，J.G.等人，AZT Induces Oxidative Damage to Cardiac Mitochondria：Protective Effect of Vitamins C and E，Life Sci，2004 Nov 19，vol.76，no.1，p.29-56；BISHOP， J.B.等人，Mitochondrial Damage Revealed by Morphometric and Semiquantitative Analysis of Mouse Pup Cardiomyocytes Following in Utero and Postnatal Exposure to Zidovudine and Lamivudine，Toxicol Sci 2004，vol.81，no.2，p.512-517)。

线粒体受损通常主要影响肌细胞的功能，这是因为肌细胞功能 的特点是高能量消耗。LARSSON，N.G.等人，Mitochondrial Myopathies，Acta Physiol Scand，2001，no.171，p.225-233。

肌病严重影响心肌。SZABADOS，E.等人，Role of Reactive Oxygen Species and Poly-ADP-ribose Polymerase in the Develpoment of AZT-induced Cardiomyopathy in Rat，Free Radio Biol Med，1999 Feb，no.14，p.3-4和189-197；BISHOP，J.B.等 人，Mitochondrial Damage Revealed by Morphometric and Semiquantitative Analysis of Mouse Pup Cardiomyocytes Following in Utero and Postnatal Exposure to Zidovudine and Lamivudine，Toxicol Sci，2004，vol.81，no.2，p.512-517； GERSCHENSON，M.等人，Fetal Mitochondrial Heart and Skeletal Muscle Damage in Erythrocebus Patas Monkeys Exposed in Utero to 3’-azido-3’-deoxythymidine，AIDS Res Hum Retroviruses， 2000 May 1，vol.16，no.7，p.635-626。

叠氮胸苷和其它核苷逆转录酶抑制剂(NRTIs)(拉米夫定和司 他伏定)常常也引起感官神经病，即导致患者的生活质量变差 (Cherry等人，J Clin Virol 2003，26：195-207)。

现在主要的问题是寻找降低逆转录酶抑制剂类型药物的毒性的 试剂。这些试剂能够使得有效量的逆转录酶抑制剂具有较低的副作 用。

技术方案

本发明的方案是提供极低毒性的用于治疗逆转录酶病毒感染的 药物组合物，本发明意外发现足够剂量的含有美度铵[3-(2，2，2-三 甲基肼)丙酸酯二水合物]的临床药物(一种用于治疗心机能不全的 药物)联合给药、或在药物组合物中和叠氮胸苷、拉米夫定或司他 伏定或一些其它公知的临床应用的逆转录酶抑制剂一起施用能够有 效的防止肌细胞的损害，特别是包括叠氮胸苷、拉米夫定和司他伏 定在内的逆转录酶抑制剂引起的心肌细胞的损害。

有很多物质用于降低逆转录酶抑制剂的毒性。

因此，公知用于降低肉碱水平和肉碱棕榈酰转移酶活性 (DAMBROVA，M等人，Mildronate：Cardioprotective Action through Camitine-Lowering Effect，Trends Cardiovasc Med，2002， no.9，p155-159)的美度铵具有心脏保护的效果是意外和令人惊异 的。

含有逆转录酶抑制剂和肉碱的药物组合物以及逆转录酶抑制剂 和肉碱的联合施用是现有技术。

肉碱和美度铵的结构很接近。不过，一般认为美度铵的药学效 果抵消了肉碱的效果。因此，显而易见的，本领域的普通技术人员 不会一起使用逆转录酶抑制剂和美度铵。

美度铵的意外效果也不能由其它活性解释。因为美度铵没有在 恒温动物和人体的组织内被氧化，不能将美度铵认为是直接作用的 氧化剂，从而基本将美度铵从降低维生素或代谢物中区分开来，进 而用于排除叠氮胸苷、拉米夫定和司他伏定的副作用。

现有文献没有公开美度铵可以作为分子在线粒体呼吸作用的链 中参与电子输送。因而美度铵基本也可以和辅酶Q10、烟碱和具有类 似作用机理的物质区别开。同样的，现有文献中缺乏美度铵具有任 何抗病毒性能的数据。

因此，为了基本上抑制这些抗病毒药物的副作用，我们发现美 度铵单独或和含有逆转录酶抑制剂(如叠氮胸苷、拉米夫定、司他 伏定和美度铵或其药物上可接受的盐)的药物组合物特别是在心肌 症和神经毒素作用中的意外效果没有降低其抗病毒活性，这在现有 技术中是不曾公开的，并且基本和现有的含有逆转录酶抑制剂的组 合物不同。

美度铵作为药物活性成分具有极低的毒性的特点是公知的(鼠 致死量高于25,000mg/kg)，美度铵既不会产生胎儿畸形、胚胎中 毒，也不会致癌，几乎不对人类组织产生副作用。

我们发现，美度铵也是化学惰性物质，甚至可以和一些复杂和 灵敏的化学物质(如包括叠氮胸苷、拉米夫定和司他伏定的核苷类 似物)一起用于制剂。

我们发现在药物组合物中，美度铵和逆转录酶抑制剂之间的比 例可以为1∶100到100∶1。例如，在含有叠氮胸苷、拉米夫定或司 他伏定和美度铵的组合物的试验中，美度铵与叠氮胸苷、拉米夫定 或司他伏定之间的比例可以在1∶5到5∶1之间变化，优选的比例 为1∶2到2∶1。

药物组合物也可以美度铵和其它逆转录酶抑制剂为基础制备； 美度铵或其药学上可接受的盐与叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定的 组合物不胜枚举。

在口服剂型中，每个药片、胶囊、囊片或其它合适剂型中的叠 氮胸苷、拉米夫定或司他伏定的含量为5-500mg。

含有叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定与美度铵的药物组合物可 以配制成口服或肠胃外用剂型。在具体的实例中，也可以配制成经 由皮肤的剂型。

对于口服的胶囊、药片、囊片、药丸、粉末、糖浆，以及其它 含有叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定与美度铵、适于口服的合适剂 型，除了叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定与美度铵外，可以包括药 学上接受的赋形剂。

叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定与美度铵的量，以及叠氮胸苷、 拉米夫定或司他伏定与美度铵的组合物的日常剂量应该提供人体组 织足够浓度的叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定，对于人体一般为1-15 mg/kg，鼠为10-150mg/kg。在这种情况下，所述组合物的逆转录酶 抑制剂为叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定，叠氮胸苷、拉米夫定或 司他伏定与美度铵的组合物的药片、胶囊、囊片或其它合适的口服 剂型含有10-30mg的叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定，以及5-1000mg 的美度铵。对于肠胃外剂型，叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定的浓 度推荐为10-30mg/ml，美度铵的浓度推荐为50-400mg/ml。

药物组合物的配制以美度铵和其它逆转录酶抑制剂为基础，这 些逆转录酶抑制剂包括但不限于叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定， 在司他伏定，叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定与美度铵或其药学上 可接受的盐的药物组合物中，逆转录酶抑制剂的比例和美度铵的比 例一样。

本发明的特点通过下述实施例阐述，但不限于下述实施例。

在为期2周的时间内，通过向雄鼠施用初始量为15.69±1.56g 的叠氮胸苷和美度铵药物组合物，从而对心脏中毒作用进行了考察。 在试验期间，这些动物的标准试验温度为22±0.5℃，进行12小 时的日光/黑暗循环，并用标准的实验室动物食物进行喂养。对于控 制组(n＝6)，每日用0.9％NaCl水溶液通过腹膜注射(第1组和第12 组)。

在系列试验中，对于试验组的动物(包括每6只鼠)，每日通 过腹膜施用下述溶液。

第1系列试验：

第1组-对照组；

第2组-0.9％NaCl溶液中含有100mg/kg的美度铵；

第3组-0.9％NaCl溶液中含有50mg/kg的叠氮胸苷；

第4组-含有质量比为1∶2的叠氮胸苷和美度铵的150mg/Kg的 药物组合物溶于0.9％NaCl溶液中；

第5组-100mg/kg的美度铵溶于0.9％NaCl溶液中，50mg/kg的 叠氮胸苷溶于0.9％NaCl溶液中；

第2系列试验：

第6组-50mg/kg的司他伏定溶于0.9％NaCl溶液中；

第7组-50mg/kg的拉米夫定溶于0.9％NaCl溶液中；

第8组-含有质量比为1∶2的司他伏定和美度铵的150mg/Kg的 药物组合物溶于0.9％NaCl溶液中；

第9组-含有质量比为1∶2的拉米夫定和美度铵的150mg/Kg的 药物组合物溶于0.9％NaCl溶液中；

第10组-100mg/kg的美度铵溶于0.9％NaCl溶液中；

第11组-100mg/kg的美度铵溶于0.9％NaCl溶液中，50mg/kg 的司他伏定溶于0.9％NaCl溶液中；

第12组-100mg/kg的美度铵溶于0.9％NaCl溶液中，50mg/kg 的拉米夫定溶于0.9％NaCl溶液中；

第13组-对照组。

在试验的第15天，将动物斩首，取出心脏，放在10％的福尔马 林溶液中。对于免疫组织化学学研究，根据使用DAKO LSAB试剂盒 的抗生素蛋白-生物素免疫-组织化学方法，器官固定于石蜡中，切 成4um厚的浅色标本。除去标本中的脂肪，用试剂阻断过氧化酶(过 氧化氢和叠氮化钠0.015mol/l)固定10分钟，在等渗缓冲液(pH 7.6)中清洗，然后在潮湿箱中用野兔多克隆NF-kBp65抗体(Abeam， Ltd)(1∶200)在4℃下培育12小时。

在室温下用生物素化抗羊lgG将标本培养30分钟。然后用酶标 记的链霉亲和素培养。免疫过氧化酶的颜色反通过二氨基联苯胺的 培养进一步进行。在着色过程中，肺组织(肺泡巨噬细胞)一般作 为阳性对照，而没有用初级抗体预处理的组织作为阴性对照。 NF-kBp65阳性细胞的数量(细胞质和细胞核染色中的)用盲估计方 法计算。图像分析软件Motic Image，Motic和Image ProPlus，Leica， 4000B用于数量估计。所有的细胞计数用每1mm²的细胞表达。在心 脏中，NF-kBp65阳性心肌细胞核在高功率域(×400)计数，记录下 它们的总数。

结果表示成平均±SEM。对于分析的统计可靠性，我们用 unpaired t-test(Mann Whitney U test)进行置信度分析，P＜0.05。

和对照组相比，我们发现，AZT、司他伏定或拉米夫定诱导血管 周水肿、心肌脂肪组织恶化和导致心肌细胞坏死的白细胞渗透。和 AZT、司他伏定或拉米夫定一起服用的美度铵、以及例如比例为2∶1 的美度铵/AZT、美度铵/司他伏定或美度铵/拉米夫定药物组合物大 大减少了血管周和基质水肿，防止了心肌细胞坏死、心肌脂肪组织 恶化和白血病渗透。

图1：心脏组织中NF-kB阳性细胞的总数。其中所述的代码含义：

Control-对照组，Mildr-美度铵组，AZT-AZT组，AZT+Mildr -美度铵/AZT药物组合物。相对于对照组，统计可靠性的计算值*P ＜0.05；相对于AZT组，#P＜0.05。

                表1

  鼠心脏组织中的NF-kBp65，mm2   对照   美度铵   AZT   美度铵&AZT   平均   22.7   27.9   88.1   36.8

图1和表1显示的结果证实AZT诱导的总的(定位于细胞核和 细胞溶质)NF-kBp65活化是统计可靠的(P＜0.05)，和AZT组相比， 美度铵/AZT药物组合物破坏的心肌极少，这被美度铵/AZT组合物情 况下NF-kB活性显著降低(P＜0.05)的事实所证实。相同的结果从美 度铵和AZT分别服用的组得到。而且，当美度铵和美度铵/AZT组合 物在药物中应用时，NF-kBp65活性和对照的动物组的参数区别不大。

图2：心脏组织中NF-kB阳性细胞的总数。其中所述的代码含义：

Control-对照组，Meldonium-美度铵组，Stavudine-司他伏 定组，Lamivudine-拉米夫定组，Stavudine & Meldonium-司他伏定 /美度铵药物组合物组，Lamivudine& Meldonium-拉米夫定/美度铵 药物组合物组。相对于对照组，统计可靠性的计算值*P＜0.05；相 对于司他伏定组，#P＜0.05；相对于拉米夫定组，$＜0.05。

                                  表2

  鼠心脏组织中的NF-kBp65，mm2   对照   美度   铵   司他伏   定   拉米夫   定   司他伏定/美   度铵   拉米夫定/美   度铵   平   均   34.7   38.8   92.5   100.1   36.6   64.3

图2和表2显示的结果证实司他伏定和拉米夫定诱导的总的(定 位于细胞核和细胞溶质)NF-kBp65活化是统计可靠的(P＜0.05)，和 司他伏定和拉米夫定组相比，美度铵/司他伏定药物组合物或美度铵 /拉米夫定药物组合物破坏的心肌极少，这被司他伏定/美度铵组合 物或拉米夫定/美度铵组合物情况下的NF-kB活性显著降低(P＜0.05) 的事实所证实。相同的结果从美度铵和拉米夫定或司他伏定分别服 用的组得到。而且，当应用本发明的组合物时，NF-kBp65活性和对 照的动物组的参数区别不大。

图3：鼠心肌组织中的NF-kB阳性心肌细胞。相对于AZT组计算 统计可靠性*P＜0.05。

             表3

  坏死区域，％   AZT   AZT&美度铵   平均   11.7   5

定位于心肌细胞核中的NF-kBp65的活化(图3和表3)仅仅在 AZT和AZT+美度铵组中观察到。也即，在美度铵和AZT药物组合物 的应用中，NF-kB活性水平相对于AZT组(P＜0.05)的参数是相对很低 的。相同的结果从美度铵和AZT分别服用的组得到。

图4：鼠心肌组织中的NF-kB阳性心肌细胞。相对于司他伏定组 计算统计可靠性*P＜0.05。相对于拉米夫定组计算统计可靠性 #P＜0.05。

                       表4

  坏死区域，％   司他伏定   拉米夫定   司他伏定&   美度铵   拉米夫定&   美度铵   平均   3.3   6.6   2.0   4.4

定位于心肌细胞核中的NF-kBp65的活化(图4和表4)仅仅在 司他伏定和拉米夫定和美度铵/司他伏定或美度铵/拉米夫定药物组 合物中观察到。也即，在美度铵/司他伏定和美度铵/拉米夫定药物 组合物的应用中，NF-kB活性水平相对于司他伏定和拉米夫定组 (P＜0.05)的参数是相对很低的。相同的结果从美度铵和AZT分别服 用的组得到。

研究表明，AZT增加了心脏组织中NF-kBp65阳性细胞总数和心 肌细胞核中NF-kBp65的总数。相反的，所述相应的美度铵和AZT、 司他伏定或拉米夫定的施用，以及美度铵和AZT、美度铵和司他伏定 或美度铵和拉米夫定的药物组合物降低了心脏组织中NF-kBp65阳性 细胞总数和心肌细胞核中NF-kBp65的总数。

证实结果其它比例的美度铵/AZT、美度铵/司他伏定或美度铵/ 拉米夫定药物组合物中观察到，美度铵/AZT、美度铵/司他伏定或美 度铵/拉米夫定的比例在5∶1到1∶2之间的副作用最小。

口服时美度铵的生物利用度非常高，因此美度铵/AZT、美度铵/ 司他伏定或美度铵/拉米夫定药物组合物的毒性大大低于肠胃外和 肠道给药的AZT、拉米夫定或司他伏定剂型。

因此，结果显示，美度铵和AZT、拉米夫定或司他伏定联合给药、 以及施用含有美度铵/AZT、美度铵/司他伏定或美度铵/拉米夫定药 物组合物对心肌和神经细胞的毒副作用和AZT、拉米夫定或司他伏定 完全不同。AZT、拉米夫定或司他伏定引起心肌的脂肪恶化、心脏组 织中的NF-kBp65活化，而没有统计疏浚表明类似剂量的AZT、拉米 夫定或司他伏定和美度铵平行使用或和美度铵一起在药物组合物中 使用对心肌有损害。

进一步做试验以证实，和AZT、拉米夫定或司他伏定使用时的 NRTI毒害神经作用相比，平行使用美度铵或AZT/美度铵组合物、拉 米夫定/美度铵药物组合物或司他伏定/美度铵药物组合物具有很多 优点。在类似的试验中，两周后对试验动物的神经反应进行了评价。 在该评价中，进行了尾部压缩模型中潜在疼痛的常规测试和脑皮层 神经元退化的评价(分子和外部粒层)。

试验表明，和对照组相比，AZT、拉米夫定或司他伏定刺激了极 大的感觉过敏，同时引起大脑皮层神经元的退化三倍。同时，和对 照试验相比，美度铵和AZT、拉米夫定或司他伏定的联合给药或AZT/ 美度铵、拉米夫定/美度铵或司他伏定/美度铵药物组合物的施用没 有造成大脑皮层中神经元数量的退化，这表明所述的组合物和AZT、 拉米夫定或司他伏定相比具有优点。

因此，在14天的使用中，AZT/美度铵、拉米夫定/美度铵或司 他伏定/美度铵药物组合物或美度铵和AZT、拉米夫定或司他伏定的 联合给药和AZT、拉米夫定或司他伏定不同，所述的组合物对心脏或 脑组织没有毒副作用。因此，AZT/美度铵、拉米夫定/美度铵或司他 伏定/美度铵药物组合物或美度铵和AZT、拉米夫定或司他伏定的联 合给药在临床应用中具有高度的安全性。

美度铵/AZT、拉米夫定/美度铵或司他伏定/美度铵药物组合物 可以配制成口服、肠胃外给药和局部给药的剂型。

对于肠胃外给药的剂型，美度铵/AZT、拉米夫定/美度铵或司他 伏定/美度铵药物组合物可以配制成干的灭菌粉末用于注射，注射时 可以和或不和药物上合适的赋形剂或溶液一起使用。对于注射的溶 液形式，包括相应浓度的美度铵和AZT、美度铵/司他伏定或美度铵/ 拉米夫定水溶液、0.9％NaCl溶液、葡萄糖溶液或药学上和其活性相 容的合适的缓冲溶液。美度铵在注射剂型中的浓度可以达到40％， 而AZT、拉米夫定或司他伏定的最大浓度取决于AZT、拉米夫定或司 他伏定在相应溶剂中的溶解度。

美度铵/AZT、拉米夫定/美度铵或司他伏定/美度铵药物组合物 的口服剂型(有或没有包衣的片剂、胶囊、囊片、糖衣丸、药丸、 药粒、粉末或溶液)和类似剂型用口服剂型常用的制备方法制备， 化学上和AZT、拉米夫定或司他伏定和美度铵相容的、药学上可接受 的赋形剂(添加剂)可以选择使用。AZT、拉米夫定或司他伏定在没 中口服剂型的量为5-500mg，优选为15-40mg或100-300mg，而美度 铵的量为5-4500mg，优选为20-600mg。

本发明的口服药物组合物实例包括但不限于下述片剂产品：

  实例1   实例2   实例3   实例4   实例5   AZT   100mg   300mg   300mg   0   0   拉米夫定   0   0   0   100mg   150mg   美度铵   250mg   600mg   60mg   200mg   300mg   淀粉   20mg   40mg   20mg   20mg   25mg   滑石   10mg   20mg   10mg   10mg   15mg   硬脂酸钙   1mg   2mg   1mg   1mg   1mg

 实例6   实例7   实例8  实例9   实例10   拉米夫定  300mg   0   0  0   0   司他伏定  0   15mg   20mg  30mg   40mg   美度铵  60或600mg   5或30mg   4或100mg  60mg   80mg   淀粉  20mg   20mg   20mg  20mg   20mg   滑石  10mg   10mg   10mg  10mg   10mg   硬脂酸钙  1mg   1mg   1mg  1mg   1mg

本发明的口服药物组合物实例包括但不限于下述胶囊产品：

  实例11   实例12   实例13   实例14   实例15   AZT   100mg   0   0   0   0   拉米夫定   0   100mg   0   司他伏定   0   0   15或   20mg   30mg   40mg   美度铵   200或   250mg   200或   250mg   30或   40mg   5，15或   60mg   20，40或   80mg   氧相二氧   化硅   5mg   5mg   5mg   5mg   5mg   乳糖   66mg   66mg   66mg   66mg   66mg   滑石   7mg   7mg   7mg   7mg   7mg   硬脂酸钙   3mg   3mg   3mg   3mg   3mg

本发明的口服药物组合物实例包括但不限于下述溶液或/和糖 浆产品：

  实例16   实例17   实例18   AZT   10mg/mL   20mg/mL   50mg/mL   美度铵   5mg/mL或20mg   5mg/mL或40mg   10mg/mL或100

  /mL   /mL   mg/mL   甲基-p-羟基   安息香酸酯   0.20-0.60g   0.20-0.60g   0.20-0.60g   丙基-p-羟基   安息香酸酯   0.01-0.1g   0.01-0.1g   0.01-0.1g   丙二醇   6.15-8.30g   6.15-8.30g   6.15-8.30g   山梨醇   120.00-150.50g   120.00-150.50g   120.00-150.50g   甘油   10.00-15.00g   10.00-15.00g   10.00-15.00g   纯净水   150ml   150ml   150ml

  实例19   实例20   逆转录酶抑制剂   拉米夫定   10mg/mL   司他伏定   1mg/mL   美度铵   5mg/mL或20mg/mL   1mg/mL或5mg/mL或   40mg/mL   甲基-p-羟基安息香   酸酯   0.20-0.60g   0.20-0.60g   丙基-p-羟基安息香   酸酯   0.01-0.1g   0.01-0.1g   丙二醇   6.15-8.30g   6.15-8.30g   山梨醇   120.00-150.50g   120.00-150.50g   甘油   10.00-15.00g   10.00-15.00g   纯净水   150ml   150ml

工业应用性

治疗逆转录酶病毒感染的药物组合物含有一种临床有效量的逆 转录酶抑制剂，即叠氮胸苷、拉米夫定或司他伏定，以及美度铵或 其药学上可接受的盐，以及其它药学上可接受的赋形剂。该药物组 合物可以在标准的药物生产企业中生产。