含有四羟反式芪和维生素A类化合物的化妆品组合物

摘要

本发明提供一种皮肤用化妆品的组合物，其缓解视黄醇对皮肤的刺激等不良作用，增强视黄醇的皮肤护理效果。本发明的主要方面，是大幅度改善皮肤适合性的含维生素A类化合物的皮肤调节用组合物，其含有如下物质：(a)选自由视黄醇、视黄酯类化合物、视黄醛、视黄酸、视黄酸盐、这些物质的衍生物或类似物、以及与这些物质中的任一种配合成的物质构成的组中的单一一种维生素A，该维生素A的浓度为约0.001重量％～约5重量％；(b)四羟反式芪、其皮肤学上可接受的盐类化合物、酯类化合物、酰胺类化合物、它们的前药、类似物、以及与这些物质中的任一种配合成的物质，其浓度为约0.0001重量％～约10重量％；(c)作为化妆品可接受的介质。

说明书

技术领域

本发明涉及一种含有维生素A类化合物(retinoids)和四羟反式芪(piceatannol)及其衍生物的化妆品组合物，该组合物对于无刺激地实现改善胶原蛋白合成的皮肤护理是有用的。

背景技术

视黄醇(维生素A)是天然地存在于人体中的内源性物质，是上皮细胞分化所必需的物质。天然及合成的维生素A衍生物作为具有抗皱作用的物质，已众所周知，其可以有效地减轻皱纹、凹凸不平、多孔质、粗糙、干燥、暗斑(色素过度沉着)等皮下老化作用(请参阅Kingman的专利文献1、2)。已经明确知道，维生素A类化合物具有减轻引起表皮肥厚(棘皮症、皮肤肥厚症)的炎症和引起表皮剥离的局部细胞内水肿的作用。

当将含有维生素A类化合物的制剂的组成进行处方化时，需要注意该处方中各成分的配合，以便一方面释放出维生素A而以最适宜浓度保持在角质层上，另一方面，使进入体循环中的吸收减少到最小限度。而且，使用者长期使用时的对策也很重要。但是，现有的含有维生素A类化合物的制品会引起干燥和刺激，导致皮肤的过度剥离。在使用这样的组合物时，使用者也许不得不中止使用维生素A类化合物配合制品，使得不能达到该制品的最大限度体现效果所必要的使用次数及足够量。

专利文献1：美国专利第4,603,146号

专利文献2：美国专利第4,877,805号

发明内容

本发明的一部分根据是以前不曾预想到的见解，即将天然的或合成的维生素A类化合物和作为抗炎症药剂的四羟反式芪配合，可以较好地抑制肌肤的干燥和/或对皮肤的刺激，且在有效利用维生素A类化合物的优点的同时，使该维生素A类化合物成分释放在皮肤上。这些组合物改善了使用者的接受度，由此在全面改善皮肤调理效果的同时，促进使用者对该组合物的更好的利用性。

四羟反式芪(3，4，3’，5’-tearahydroxy-trans-stilbene，反式-3，4，3’，5’-四羟基二苯乙烯)是在很多的植物中所确认的成分，同时也确认了作为类似构造物质的白藜芦醇(resveratrol，反式-4，3’，5’-三羟基二苯乙烯)。

两种成分是由于对真菌和其他的环境应激产生反应而在植物中合成的。其分类属于植物抗毒素(植物补体)。四羟反式芪也被确定为学名是Melaleuca leucadendron(白千层)的有效作用物质。文献是Tsuruga，T.Chun，Y.T.Ebizawa，Y.& Sankawa，U.(1991)“Melaleucaleucadendron的生物学的有效组成成分：来源于大白鼠肥大细胞的诱发组胺释放阻碍物质”Chem.Pharm.Bull.(Tokyo)39：3276-3278。

另外，四羟反式芪也被确定为Cassia garretiana(Asian legume)的有效作用物质。文献是Inamori，Y.Kato，Y.Kubo，M.Yasuda，M.Baba，K.& Kozawa，M.(1984)“从Cassia garretiana(CRAIB)的芯材分离的3，3’，4，5’-四羟基芪的生理作用”Chem.Pharm.Bull.(Tokyo)32：213-3218。

另外，四羟反式芪也被确定为Rheum undulatum(朝鲜大黄)的有效成分。文献为Ko，S.K.lee，S.M.& Whang，W.K.(1999)“从朝鲜大黄中得到的二苯乙烯衍生物的抗血小板凝聚作用”Arch.Pharm.Res.22：401-403，及Matsuda，H.Kageura，T.Toguchida，I.Harima，S.& Yoshikawa，M.(2000)“从大黄得到的芪成分对在酯多糖类化合物中活化后的就巨噬细胞中的一氧化氮的作用”Bioorg.Med.Chem.Lett.10：323-327。这些物质用于传统的中药。

另外，四羟反式芪也被确定为Euphobia lagascar(大戟属植物)的种子的抗白血病成分，在民间用于治疗癌、肿瘤、和瘤子。文献为Ferrigni，N.R.McLaughin，J.L.Powell，R.G.& Smith，C.R.(1984)“做为大戟属植物的种子的抗白血病作用因子的四羟反式芪的分离和作用检测用的马铃薯及淡水虾生物鉴定使用”J.Nat.Prod.47：347-352。

Teguo等检测出了Vitis venifera(葡萄酒用葡萄的一种)的细胞悬浊培养液中的四羟反式芪。文献为Teguo，P.W.Decendit.S.Krisa，S.Deffieux，G.Vercauteren，J.& Merillon，J.M.(2001)“Vitisvenifera的细胞悬浮培养液中的芪甙的积累”J.Nat.Prod.59：1189-1191。

含有白藜芦醇的化妆品配方已经被记载。例如，Pezzuto等(美国专利序号第6,414,037号)公开了利用含有白藜芦醇的组合物实现对皮肤不适的预防或处理的方法，Pillai等(美国专利第6,358,517号)公开了通过将白藜芦醇和被选择的维生素A类化合物配合实现的皮肤护理化妆品的配方。将四羟反式芪作为有效成分而使用的化妆品组合物尚未记载。已通过科学的证据证实，不能根据三羟反式芪(白藜芦醇)或将将羟基加到三羟反式芪上而简单地推测出四羟反式芪的特殊性。

例如请参阅Ashikawa等的J.Immunol.2002 Dec 1；169(11)：6490-7。由于四羟反式芪及其衍生物是苯酚成分，所以作为高强度抗氧化剂起作用。

本发明的主要方面在于提供一种能大幅度改善皮肤适合性的含维生素A类化合物的皮肤调理用组合物，其含有如下物质：(a)选自由视黄醇、视黄酯类化合物、视黄醛、视黄酸、视黄酸盐、这些物质的衍生物或类似物、以及与这些物质中的任一种配合成的物质构成的组中的单一一种的维生素A，该维生素A的浓度为约0.001重量％～约5重量％；(b)四羟反式芪、其皮肤学上可接受的盐类化合物、酯类化合物、酰胺类化合物、它们的前药、类似物、或与这些物质中的任一种配合成的物质，其浓度为约0.0001重量％～约10重量％；(c)作为化妆品可接受的介质。

在说明书中使用的用语“调理”的意思是指对干燥皮肤、光伤害皮肤、皱纹的出现、老年斑、老年性皮肤、粉刺、浅色肌肤、干癣、过敏性皮肤病进行预防和治疗，以及增加角质层的柔软性、抑制皮质分泌、或一般性地改善皮肤质量。本发明的组合物可以使用于皮肤脱屑和细胞增殖的改善。

由于本发明组合物中存在四羟反式芪，所以可以实质性地改善视黄醇或视黄酯的作用。即四羟反式芪确实提高了视黄醇或视黄酯对于细胞增殖的能力。在哺乳类动物中，四羟反式芪(虽然分子水平的靶点还不明确)发挥出了对细胞因子的产生和机能进行干涉的抗氧化作用以及抗炎症作用。

可是，皮肤效果的实质性的改善，是在将四羟反式芪和视黄醇或视黄酯配合的情况下实现的。即，本发明至少一部分是根据如下发现而完成的：视黄醇或视黄酯和四羟反式芪之间的协同的相互作用。

根据本发明，通过向含有视黄醇或视黄酯的组合物中，添加有效量的四羟反式芪，实质性地改善该组合物的作用力。

本发明还包括对干燥皮肤、光伤害皮肤、皱纹的出现、老年斑、老年性皮肤、粉刺、浅色肌肤、干癣、过敏性皮肤病进行预防和治疗的方法，以及增加角质层的柔软性、抑制皮质分泌、以及一般性地提高皮肤质量等的改善或预防皮肤不适的方法。在该方法中还包含将该发明的组合物向皮肤涂敷的方法。

虽然本发明组合物的目的在于向已经干燥而且干透了的、具有皱纹的、老年性的、被光伤害了的哺乳类皮肤进行局部涂敷，但是，为了防止或减轻健康皮肤的退化性的变化，也可以将该发明的组合物进行预防性的涂敷。

而且，本发明也包括抑制可能由维生素A类化合物引起的皮肤刺激、干燥感或炎症的化妆方法。在这方面，该发明还包括含有四羟反式芪和维生素A类化合物的配合的化妆品组合物。

“四羟反式芪”用语的意思是指四羟反式芪的顺式异构体或四羟反式芪的反式异构体、或两种异构体的混合物中的任何一个。该用语的意思还指天然的有效成分和在研究室内化学合成的化合物。而且，在说明书中称为四羟反式芪时，包含皮肤学上可以接受的四羟反式芪的盐类化合物、酯类化合物、酰胺类化合物、前药、和类似物。

所谓“皮肤不适的处理”等中的“处理”(treat)这一用语，包含下列情况：(1)皮肤不适的防止，即预防不适的某种临床症状；(2)不适的抑制，即阻止临床症状的发展或恶化，及/或(3)不适的缓和，即临床症状的好转。

所谓“皮肤学上可以接受”是在生物学上或其以外的领域都适用的物质的意思。即，这种物质可以和被选择的有效成分一起施用，且不会引起任何不良的生物学作用，或与包含该物质的药品的组合物中的任何成分之间也不会引起不良的相互作用。同样，在说明书中所谓有效成分的“皮肤学上可以接受”的盐、或“皮肤学上可以接受”的酯，是在生物学上或其以外的领域都适用的盐或酯。

所谓“选择的”或“选择性地”是指发生和不发生后述情况均可的意思。因此，包括某种情况发生的事例和不发生的事例两个方面。例如，被记载为处方中的添加物为“选择性地存在”时，包括含有该添加物的处方和不含有该添加物的处方两个种情况。

处理皮肤所用的有效成分

如上所述，本发明包括为预防或处理伴随使用维生素A类化合物产生的皮肤不适的四羟反式芪的利用。

四羟反式芪可以使用天然的、即从葡萄皮、葡萄酒或其他来源于植物的成分中分离得到的物质。也可以使用在研究室中化学合成的，或市售的，例如可以购买Biomol Research Laboratories，Inc.(位于美国宾夕法尼亚州的Plymouth Meeting市)的产品。从天然资源得到四羟反式芪的优选的方法是从云衫属的树皮中提取该成分。

该有效成分也可以使用皮肤学上可接受的盐、酯、酰胺、前药或类似物或者将这些物质配合的物质。四羟反式芪的盐类化合物、酯类化合物、酰胺类化合物、前药或类似物，可以由有机合成化学或药品制剂领域的技术人员用公知的标准工序制造。酯类化合物的制造包括该药物的分子结构中所存在的羟基的功能化。酯类化合物是游离醇基的典型的酰基取代衍生物。

即，是化学式为RCOOH(R是烷基，更优选低分子的烷基)的羧酸衍生物的一部分。根据需要，通过通常的氢化分解或加水分解将酯类化合物再转换为游离酸类化合物。酰胺类化合物和前药的制造也可以用类似的方法。有效成分的其他衍生物和类似物的制造，可以由有机合成化学领域的技术人员，按公知的标准工序制造，或参照文献推测制造。

四羟反式芪的顺式体和反式体的优选衍生物，该四羟反式芪中的1个或1个以上的羟基例如3-羟基，与单糖或二糖、一般情况下与单糖的1位内聚的产物。作为可以与四羟反式芪分子内聚的糖类化合物的例子，是葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、蔗糖，但不限定于此。特别优选顺式-四羟反式芪糖苷及反式-四羟反式芪糖苷(アストリンジン，收敛剂)。

在优选的制剂实施例中，将有效成分加入到含有适合局部用的载体和公知物质的局部用组合物配方中。作为局部用载体，选择该组合物可以以优选的形态提供的物质。

例如是软膏、乳液、霜、微乳剂、凝胶、油、溶液等，也可以含有来自天然的物质或合成物质的任何一种。其必须满足的条件是被选择的载体不能对有效成分和该局部用组合物中的其他成分产生不良影响。

作为局部适用载体妥当的是水、醇类·甘醇类化合物、和其他的无毒性有机溶剂、甘油、矿物油、硅酮、凡士林、无水羊毛脂、脂肪酸、植物油、蜡等。

特别优选的局部用载体是无色无臭的溶液、乳液、霜、微乳剂和凝胶。

本领域技术人员公知的各种添加物可以包含在该发明的局部用处方中。作为该添加物的例子是下列物质：助溶剂、皮肤浸透性增强剂、乳白剂、保存剂(例如抗氧化剂)、凝胶化剂、缓冲剂、表面活性剂(特别是非离子类两性表面活性剂)、乳化剂、皮肤软化剂、增稠剂、稳定剂、湿润剂、着色剂、香料等，但不限定于此。特别优选将助溶剂和/或皮肤浸透强化剂与乳化剂、皮肤软化剂和保存剂一起加入。

皮肤浸透性增强剂使有效成分的治疗浓度可以容易地通过非损伤皮肤的相当大的范围。合适的增强剂在该技术领域已公知，例如含有异丙醇或二甲基异山犁醇。

作为助溶剂的例子，例如可以举出以下物质，但不限定于这些物质。例如1，3-丁二醇、一缩二丙二醇。

在处方中也可以含有其他有效成分。即：其他的抗炎症剂、镇痛剂、抗菌剂、抗真菌剂、抗生素、维生素类化合物、抗氧化剂、和防晒剂。作为在防晒剂中通常使用的成分有：二氧化钛、氧化锌、氨茴酸盐、二苯甲酮(特别是二苯甲酮-3)、樟脑衍生物、桂皮酸盐(例如辛基甲氧基桂皮酸盐)、二苯甲酰基甲烷(例如丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷)、对乙酰氧基苯甲酸(PABA)及它们的衍生物、以及水杨酸盐(例如辛基水杨酸盐)。

在本发明优选的局部用配方中，有效成分在配方中的含量为约0.005重量％～10重量％，优选为约0.01重量％～5重量％，更优选为约0.1重量％～5重量％，特别优选为约0.1重量％～2重量％。

本发明的组合物是一种用于得到主要对人的皮肤局部适用的化妆品、特别是实现皮肤的调理、保湿、平滑、以及皱纹和老年性皮肤的预防和抑制的制品。

如上所述，为得到所希望的结果，本发明的组合物制品可以在有效的用量范围内作为软膏、乳液、霜、微乳剂、凝胶、溶液等对皮肤局部施用。有效成分的优选一次施用量为1～100ml的范围。通常，其施用计划包括最低1日1次的局部施用。

在本发明中，与具体的剂形名一起进行了记载，但上述的例子和后述的例子仅是为了证明发明的目的而给出的，应理解为并不限定于此。其他特征、优点及改良对于本领域的技术人员而言，是不言而喻的。

全部的专利、专利资料及本申请中引用的文献直接作为参考文献记载于本申请中。

具体实施方式

(实施例1)

为了使本技术领域的技术人员掌握根据本发明的组合物制品的配制方法，下面举出实施例，但这并不意味着本发明受实施例的限定。对于数字(例如重量、温度)而言，尽可能地努力确保其准确性，但可能稍有偏差及误差。

只要没有特别的说明，比例是根据重量得到的比率，温度是摄氏温度，气压是常压。所有的溶剂、试剂、添加物是药用级别的物质。

该实施例证实四羟反式芪溶液抑制维生素A类化合物诱发的刺激，并改善皮肤外观。

用表1所示的成分调制实施例1及比较例1和2的组合物。

【表1】

  成分  实施例1  (重量％)  比较例1  (重量％)  比较例2  (重量％)  二甲基异山梨醇  25.0  25.0  25.0  一缩二丙二醇  74.4  74.6  74.8  d-α生育酚  0.2  0.2  0.2  棕榈酸视黄酯(1.7m.IU/g)  0.2  0.2  0  反式-四羟反式芪  0.2  0  0

以如下的方式调配上述组合物：将d-α生育酚、棕榈酸视黄酯(1.7m.IU/g)及反式-四羟反式芪在30℃下溶解于二甲基异山梨醇中，在得到透明的溶液的时刻，在相同的30℃下添加一缩二丙二醇。操作在氮环境下实施，所有溶液在氮环境下保存。

用人4-h粘贴试验(Basketter D.A.等，Food Chem Toxicl 1997，：35：845-852)的类似方法研究实施例1及比较例1和2的组合物作为化妆品的刺激强度。试验中，将带纤维网垫(pad，Hilltop公司出品，位于美国俄亥俄州西西那提市)的25mm的Hilltop Chamber上的0.2ml的被测溶液应用于16名志愿者的上肢外腕皮肤。在被测者的两个腕均匀且任意地粘贴贴片。

24小时后将贴片除去，在被测部位用标记笔画上标记。每经过24、48、72小时，在除去贴片后，用4评分法(表2)分别观察被测部位判断是否有刺激。

【表2】

反应评价

  评分  反应程度  0  无反应  +  弱阳性反应  (通常的特征是：轻度红斑或在涂敷部位的大部分有干燥现象)  ++  中度阳性反应  (通常，明显的红斑超过涂敷部位而扩散)  +++  重度阳性反应  (严重的、屡屡伴随浮肿的大范围的红斑)

结果示于表3。

【表3】

实施例1及比较例1和2的组合物的皮肤刺激度

  组合物  实施例1  比较例1  比较例2  评分(16人的平均)  0  +  0

在添加了四羟反式芪的情况下，明显地抑制了棕榈酸视黄酯的刺激。

通过计算机化的激光测面仪测定实施例1及比较例1和2的组合物作为化妆品改善皮肤皱纹的效果。试验在16名30岁以上女性中进行，将实施例1及比较例1和2的组合物1日1次，每次0.05g涂敷在被测者的脸(面积2×2cm²)上，持续进行九周。

其次，使用硅胶精细化合物制成皮肤皱纹的复制物(复制品)。利用视觉皮肤测定器(德国，Couage & Khazaka electronic GmbH公司制造的Skin Visiometer)检测出该复制品的皮肤皱纹的变化。用CCD照相机分析复制的三维图象。根据如下的数学方程式1，将皮肤皱纹改善效果作为皱纹的平均粗糙度(Rz)算出：

Rz＝(R₁+R₂+………+R_n-1+R_n)/皱纹数量(n)      (1)

在该数学方程式中，R_n表示各皱纹的粗糙度，n表示皱纹的数量。

结果示于下述的表4中。

【表4】

皮肤皱纹的改善效果(9周)

皱纹的平均粗糙度(Rz，微米单位)

从上表可以得知，皱纹的高度(粗糙度)在施用实施例1的组合物的情况下，施用9周后减少70％(p＜0.01)，在施用比较例1的组合物的情况下，在施用9周后减少56％(p＜0.01)。这意味着，与安慰剂(比较例2)相比，在实施例1及比较例1中，皮肤皱纹的粗糙度显著地改善。该结果也表明四羟反式芪实际增强了视黄醇(维生素A)对皱纹改善的作用。该结果还表明了本发明的作为化妆品的组合物在短期内发挥明显的皱纹改善效果。

(实施例3)

在该例中证实反式-(3，5，3’，4’-四羟基二苯乙烯)-3-0-β-d-葡萄糖苷(反式-收敛剂)在溶液型配制品中抑制维生素A类化合物诱发的刺激，并改善皮肤外观。

使用表5所示的成分调制实施例2的组合物。

【表5】

  成分名  实施例2(重量％)  二甲基异山梨醇  25.0  一缩二丙二醇  74.4  d-α生育酚  0.2  棕榈酸视黄酯(1.7m.IU/g)  0.2  反式-收敛剂  0.2

根据实施例1的操作对该组合物进行调配。

用与实施例1中记载的试验方法相同的方法，对实施例2的组合物的皮肤刺激的强度和比较例1及2的强度进行比较研究。

结果示于表6。

【表6】

实施例2及比较例1和2的组合物的皮肤刺激度

  组合物  实施例2  比较例1  比较例2  评分(16人的平均)  0  +  0

通过添加四羟反式芪葡糖甙(收敛剂)，抑制了棕榈酸视黄酯的刺激。

用与实施例1中记载的方法相同的方法，研究了实施例2的组合物对皮肤皱纹改善的效果。结果示于表7。

【表7】

皮肤皱纹的改善效果(9周)

皱纹的平均粗糙度(Rz，单位：微米)

从上表可以得知，在施用实施例2的组合物的情况中，施用9周后皱纹高度(粗糙度)减少67％(p＜0.01)，这意味着，与安慰剂(比较例2)相比，在施用实施例1及比较例1的情况中，皮肤皱纹的粗糙度显著地改善。该结果也表明收敛剂实际增强了视黄醇(维生素A)对皱纹改善的作用。该结果还表明了本发明的作为化妆品的组合物在短期内发挥明显的皱纹改善效果。

实施例4

在该例中证实四羟反式芪在乳剂(乳液)型处方品中，抑制维生素A类化合物诱发的刺激，并改善皮肤外观。

使用表8所示的成分调制实施例3及比较例3和4的组合物。

【表8】

  成分名  实施例3  (重量％)  比较例3  (重量％)  比较例4  (重量％)  流动石蜡  3.20  3.20  3.20  3-甲基葡糖倍半便脂酸酯  1.20  1.20  1.20  PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯  1.80  1.80  1.80  硬脂酸甘油酯(及)PEG-100硬脂酸盐  1.80  1.80  1.80  硬脂酸  1.60  1.60  1.60  鲸蜡醇  1.20  1.20  1.20  环二甲基硅酮  2.40  2.40  2.40  水(纯水)  76.53  76.73  76.93  羧基乙烯基聚合物  0.30  0.30  0.30  甘油  2.40  2.40  2.40  丙二醇  3.00  3.00  3.00  二甲基硅油/二甲基硅氧烷醇  1.60  1.60  1.60  氢氧化钠(18％)  1.97  1.97  1.97  保存剂  0.40  0.40  0.40  d-α生育酚  0.20  0.20  0.20  棕榈酸视黄酯  0.20  0.20  0.00  四羟反式芪  0.20  0.00  0.00

通过化妆用乳液的标准操作调制该乳液。

用与实施例1中记载的试验方法相同的方法，将实施例3的组合物的皮肤刺激强度与比较例3及4的强度进行比较研究。

结果示于表9。

【表9】

实施例3及比较例3和4的组合物的皮肤刺激度

  组合物  实施例3  比较例3  比较例4  评分(16人的平均)  0  +  0

通过添加四羟反式芪，乳液中的棕榈酸视黄酯的刺激被明显抑制。

用与实施例1中记载的方法相同的方法，研究了实施例3的组合物对皮肤皱纹改善的效果。结果示于表10。

【表10】

皮肤皱纹的改善效果(9周)

皱纹的平均相糙度(Rz.微米单位)

从上表可以得知，在施用实施例3的组合物的情况中，施用9周后皱纹高度(粗糙度)减少55％(p＜0.01)，在施用比较例3的组合物的情况中，施用9周后减少31％(p＜0.01)。

这意味着，与安慰剂(比较例4)相比，在实施例3及比较例3中，皮肤皱纹的粗糙度明显地改善。该结果也表明四羟反式芪实际增强了视黄醇(维生素A)对皱纹改善的作用。

该结果还表明了本发明的作为化妆品的组合物在短期内发挥明显的皱纹改善效果。

(实施例5)

在该例中证实四羟反式芪葡糖甙(收敛剂)在乳剂(乳液)型处方品中抑制维生素A类化合物诱发的刺激，并改善皮肤外观。

使用表11所示的成分调制实施例4的组合物。

【表11】

  成分名  实施例4(重量％)  流动石蜡  3.20  3-甲基葡糖倍半硬脂酸酯  1.20  PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯  1.80  硬脂酸甘油酯(及)PEG-100硬脂酸盐  1.80  硬脂酸  1.60  鲸蜡醇  1.20  环二甲基硅酮  2.40  水(纯水)  76.53  羧基乙烯基聚合物  0.30  甘油  2.40  丙二醇  3.00  二甲基硅油/二甲基硅氧烷醇  1.60  氢氧化钠(18％)  1.97  保存剂  0.40  d-α生育酚  0.20  棕榈酸视黄酯  0.20  收敛剂  0.20

通过化妆用乳液的标准操作调制该乳液。

用与实施例1中记载的试验方法相同的方法，研究实施例4的组合物的皮肤刺激强度。结果示于表12。

【表12】

实施例4及比较例3和4的组合物的皮肤刺激度

  组合物  实施例4  比较例3  比较例4  评分(16人的平均)  0  +  0

通过添加收敛剂，乳液中的棕榈酸视黄酯的刺激被明显抑制。

用与实施例1中记载的方法相同的方法，研究实施例4的组合物对皮肤皱纹改善的效果。结果示于表13。

【表13】

皮肤皱纹的改善效果(9周)

皱纹的平均粗糙度(Rz，单位：微米)

从上表可以得知，在施用实施例4的组合物的情况中，施用9周后皱纹高度(粗糙度)减少65％(p＜0.01)，这意味着，与安慰剂(比较例4)相比，在施用实施例4的情况中，皮肤皱纹的粗糙度显著地改善。

该结果也表明收敛剂实际增强了视黄醇(维生素A)对皱纹改善的作用、及收敛剂在乳剂型化妆品中比四羟反式芪更有效。

该结果还表明了本发明的作为化妆品的组合物在短期内发挥明显的皱纹改善效果。