4'－羟基－4,6’－二甲氧基二氢查耳酮及其合成方法

摘要

本发明公开了一种4’－羟基－4，6’－二甲氧基二氢查耳酮及其合成方法。本发明以4－苄氧基－2－羟基苯乙酮为原料，在碱液和有机溶剂两相存在下进行甲基化反应，得到4－苄氧基－2－甲氧基苯乙酮。然后在碱的醇溶液中与4－甲氧基苯甲醛进行羟醛缩合反应，得到的中间体产物4’－苄氧基－4，6’－二甲氧基查耳酮，然后该中间体再在催化剂Pd/C存在下加氢还原并脱保护基团，最终得到本发明目标产物4’－羟基－4，6’－二甲氧基二氢查耳酮。本发明方法操作安全简便，所得产品纯度高，动物急性毒性试验安全性好，具有良好的抑制血小板聚集的活性。

说明书

技术领域

本发明涉及一种4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮及其合成方法，属二氢查耳酮的有机化学合成工艺技术领域。

背景技术

4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮是一种二氢查耳酮。经过Scifinder检索，证实其为新化合物。二氢查耳酮是一类非常重要的活性成分，具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病、抗菌以及雌激素样作用。现通过体外活性实验，已经证明它具有活血化淤及抑制血小板凝聚的作用。该产品的用途广阔，有很好的市场前景。

其结构式如下：

经检索，与上述合成类似母体结构化合物的相关文献如下：

Richard P.Duffley et al.J.C.S.PerkinI(1976)，802-804，用碘甲烷作为甲氧基化试剂，反应72小时，耗时长。

V K Sharma，S R Gupta，Indi an Journal of Chemistry(1984)，23B，780-781，将原料用丙酮溶解，加入无水碳酸钾，回流24小时，耗时长。

Asit K.Chakraborti et al.J.Org.Chem(2002)，67，6406-6414，将2，4-二甲氧基苯乙酮与PhSH反应，在碳酸钾存在下，回流30分钟。后处理方法采用硅胶柱分离，得到4-羟基-2-甲氧基苯乙酮。但由于使用柱分离，耗时长、操作繁琐。

Hans Achenbach et al.Phytochemistry(1988)，27(6)，1835-1841，室温进行羟醛缩合反应24小时，反应后，用色谱柱分离进行纯化。用Zn作为还原的催化剂生成二氢查耳酮，耗时长。

上述各方法，反应时间长，得到的产物需用柱分离，耗时，操作繁琐。用Zn作为催化剂，后处理麻烦。

国内外尚未见新化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮合成方法的报道。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种新化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮。

本发明的目的之二在于提供该化合物的合成方法。

本发明的目的之三在于提供该化合物在制备抑制血小板凝聚的药物中的应用。

为达到上述目的，本发明采用如下反应机理：

根据上述反应机理，本发明采用如下技术方案：

一种4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮，其特征在于该化合物具有如下结构：

该化合物的各项理化数据如下：

熔点：134.2-134.6℃，

外观：无色晶体

紫外光谱数据：UVλmax(MeOH)  201nm(logε4.08)，226nm(logε3.98)，270nm(logε3.77)，303nm(logε3.61)

红外光谱数据：IR σ/cm^-1，max(KBr)3166，3012，2937，2833，1636，1596，1574，1510，1473，1369，1295，1245，1189，1155，836，814cm^-1

核磁：¹H NMR(500MHZ，CDCl3)δ：7.73(H，d，J＝6.5，H-2’)，7.14(2H，d，J＝8.5Hz，H-2，H-6)，6.82(H，d，J＝8.5，H-3 H-5)，6.45(H，d，J＝6.5，H-3’)，6.43(1H，s，H-5’)，6.19(H，s，OH)，3.83(3H，s，6’-OMe)，3.78(3H，s，4-OMe)，3.24(2H，m，H-α)，2.94(2H，m，H-β)。

核磁：¹³C NMR(500MHz，CDCl3)δ200.35(C＝O)，161.48(C-4’)，161.28(C-6’)，157.75(C-4)，133.91(C-1)，132.97(C-2’)，129.36(C-2 and C-6)，120.50(C-3and C-5)，113.81(C-1’)，107.93(C-3’)，98.99(C-5’)，55.47(6’-OMe)，55.28(4-OMe)，45.52(C-α)，29.82(C-β)。

质谱：MS m/z：286(26)，151(100)，134(33)，121(27)。

上述的4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮的制备方法，其特征在于具有以下的过程和步骤：

a.以4-苄氧基-2-羟基苯乙酮为原料，在一定温度条件下，在氢氧化钠和溶剂甲苯两相存在条件下以及相转移催化剂苄基三乙基氯化铵存在下，用硫酸二甲酯进行甲基化，得到4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮；原料4-苄氧基-2-羟基苯乙酮与甲基化试剂硫酸二甲酯的质量体积比为1∶1~1∶2，即按每1克原料用1~2毫升硫酸二甲酯的比例来配制；相转移催化剂苄基三乙基氯化铵的用量依据原料数量决定，即原料与相转移催化剂苄基三乙基氯化铵的用量的质量比为1∶0.05~1∶0.2；有机溶剂甲苯的用量依据原料数量决定，即原料与有机溶剂甲苯的质量体积比为1∶10~1∶20；甲基化反应的最适宜温度为25~40℃，反应时间为3~6小时；

b.将上述所得的产物4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮在氮气保护下和在碱的醇溶液中与4-甲氧基苯甲醛进行羟醛缩合反应，得到4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮；所述的碱的醇溶液，碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾中的任一种；醇类溶剂为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇中的任一种；碱与醇的质量体积比为1∶8~1∶20，即按每1克碱用8~20毫升的醇的比例来配制碱的醇溶液；

4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮与4-甲氧基苯甲醛反应，所用两种物质的质量比为1∶1~1∶1.5；羟醛缩合反应的最适宜温度为60~100℃，反应时间为3~16小时；

c.将上述羟醛缩合反应所得的中间体4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮，在碱的醇溶液中并在催化剂Pd/C存在下及加氢条件下还原并脱保护基团，还原反应的温度为20~60℃，反应时间为1~8小时；反应结束，经过滤，得粗产物；再经乙醇重结晶，即得目标产物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮。

上述的催化加氢还原反应中，所用的催化剂Pd/C的组成配比为2％、5％或10％中的任一种；加氢还原反应中催化剂Pd/C的用量与4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮质量比为1∶0.5~1∶1.5；所用的加氢条件为通入氢气的压力保持为5~15mmHg。

本发明中所使用的原料4-苄氧基-2-羟基苯乙酮是参照文献Christopher J.Bennett et al.Biorganic & Medicinal Chemistry(2004)，12，2079-2098中报道的方法合成的。

本发明的新化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮具有良好的抑制血小板凝聚的活性，且动物急性毒性试验结果表明，该化合物对动物无毒性。本发明方法操作安全简单，所得产品纯度好。

具体实施方法

现将本发明的实施例具体叙述于后。

实施例1

在250ml三口瓶中加入2g 2-羟基-4-苄基-苯乙酮(0.008mol)，甲苯溶解。加入0.2g相转移催化剂苄基三乙基氯化铵，2mL硫酸二甲酯。室温机械搅拌，同时缓慢滴加40％NaOH，控制反应体系的pH值为8-9。用TLC跟踪反应，3小时原料点消失。蒸干有机相甲苯。得固体0.72g，即为4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮。用乙酸乙酯重结晶，得到0.6g棕黄色晶体。熔点64.8-65.6℃。用高效液相色谱法检测纯度为98.5％，得率29.3％。

在N₂保护的三口瓶中，加入2.8g(0.011mol)4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮，1.5g(0.011mol)4-甲氧基苯甲醛，在搅拌下加入由100mL乙醇和11.2g(0.2mol)KOH配成的溶液。完成后加热回流，进行羟醛缩合反应，用TLC跟踪反应，3.5小时原料点消失。反应过程中逐渐析出大量黄色固体物质，反应结束后滤出该黄色固体，即为4’-苄氧基-2’，4-二甲氧基查耳酮，烘干得3.45g，用50mL乙醇重结晶得到黄色针状晶体3.3g。用高效液相色谱法检测纯度为99％，收率：80％。

在三口瓶(带汞封)中加入1.2g(3.21mmol)4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮，150mL乙醇溶解，加入11.88mL 1mol/L KOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。室温下磁力搅拌，用氢气袋通入氢气。密封体系，控制进气阀，使汞柱保持5mm Hg。当汞封中的汞柱保持30min不再变时，停止反应，过滤去除催化剂。旋转蒸发溶剂，得粗品4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮0.83g，用10mL乙醇重结晶。得到无色晶体0.8g。用高效液相色谱法检测纯度为99.2％，收率：87.2％。

实施例2

在250ml三口瓶中加入2g 2-羟基-4-苄基-苯乙酮(0.008mol)，甲苯溶解。加入0.3g相转移催化剂苄基三乙基氯化铵，2.5mL硫酸二甲酯。室温机械搅拌，同时缓慢滴加30％NaOH，控制反应体系的pH值为8-9。用TLC跟踪反应，3.5小时原料点消失。蒸干有机相甲苯。得固体0.79g，即为4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮，用乙酸乙酯重结晶，得到0.7g棕黄色晶体。熔点64.4-65.2℃。用高效液相色谱法检测纯度为98.5％，得率34.2％。

在N₂保护的三口瓶中，加入2.8g(0.011mol)4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮，2g(0.015mol)4-甲氧基苯甲醛，在搅拌下加入由150mL乙醇和8.4g(0.15mol)KOH配成的溶液。完成后加热回流进行羟醛缩合反应，用TLC跟踪反应，3小时原料点消失。反应过程中逐渐析出大量黄色固体物质，反应结束后滤出该黄色固体，即为4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮，烘干得3.61g，用50mL乙醇重结晶得到黄色针状晶体3.46g。用高效液相色谱法检测纯度为99％，收率：84.1％。

在三口瓶(带汞封)中加入1.2g(3.21mmol)4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮，175mL乙醇溶解，加入11.88mL 1mol/L NaOH溶液，2.4g 5％Pd/C催化剂。室温下磁力搅拌，用氢气袋通入氢气。密封体系，控制进气阀，使汞柱保持10mmHg。当汞封中的汞柱保持30min不再变时，停止反应，过滤去除催化剂。旋转蒸发溶剂，得粗品4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮0.79g，用5mL乙醇重结晶。得到无色晶体0.73g。用高效液相色谱法检测纯度为99.4％，收率：80.2％。

实施例3

在250ml三口瓶中加入2g 2-羟基-4-苄基-苯乙酮(0.008mol)，甲苯溶解。加入0.1g相转移催化剂苄基三乙基氯化铵，3ml硫酸二甲酯。室温机械搅拌，同时缓慢滴加20％NaOH，控制反应体系的PH值为8-10。用TLC跟踪反应，5小时原料点消失。蒸干有机相甲苯。得固体0.8g，即为4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮。用乙酸乙酯重结晶，得到0.75g棕黄色晶体。熔点64.2-64.9℃。用高效液相色谱法检测纯度为99.5％，得率36.63％。

在N₂保护的三口瓶中，加入2.8g(0.011mol)  4-苄氧基-2-甲氧基苯乙酮，1.89g(0.014mol)4-甲氧基苯甲醛，在搅拌下加入由200mL乙醇和11.2g(0.2mol)KOH配成的溶液。完成后加热至60℃回流进行羟醛缩合反应，用TLC跟踪反应，7小时原料点消失。反应过程中逐渐析出大量黄色固体物质，反应结束后滤出该黄色固体，即为4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮，烘干得3.8g，用50mL乙醇重结晶得到黄色针状晶体3.67g。用高效液相色谱法检测纯度为99.1％，收率：89.2％。

在三口瓶(带汞封)中加入1.2g(3.21mmol)4’-苄氧基-4，6’-二甲氧基查耳酮，100mL乙醇溶解，加入11.88mL 1mol/L NaOH溶液，1.0g 10％Pd/C催化剂。室温下磁力搅拌，用氢气袋通入氢气。密封体系，控制进气阀，使汞柱保持10mmHg。当汞封中的汞柱保持30min不再变时，停止反应，过滤去除催化剂。旋转蒸发溶剂，得粗品4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮0.9g，用10mL乙醇重结晶。得到浅黄色晶体0.83g。用高效液相色谱法检测纯度为99.2％，收率：90.4％。

实施例4

按《药理实验方法学》要求进行新化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮的急性毒性试验。取正常昆明小鼠40只，雌雄各半，各分出空白对照组。禁食8h，试验组按5g/kg动物体重的药量，经口灌胃给予化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮水匀浆溶液，浓度为500mg/ml。第一天灌胃一次，连续观察14d，记录动物中毒表现和死亡情况以及体重变化，14d后，处死，进行尸检，并取心、脾、肾、肝、肺、胰腺、胃，称重计算各脏器占体重比例，观察动物对该化合物的耐受量，从而对其安全性作出评估，试验结果见表1。

表1  急毒小鼠脏器占体重的比例均值(％)

  心  肾    胃    脾    肝    肺体重(g)  空白♂  新化合物♂  空白♂  新化合物♂    0.46    0.44    0.45    0.50    1.52    1.53    1.48    1.51    2.06    1.91    1.99    2.02    0.37    0.31    0.35    0.36    6.41    6.45    5.91    5.79    0.53    0.63    0.57    0.58    30.5    33.0    35.2    37.4

急毒实验结果表明20只小鼠给药后活动自如，呼吸、摄食等未见明显异常现象。14天内无小鼠死亡，解剖肉眼观察小鼠脏器无异常，各脏器比例正常，且与正常小鼠情况一致。这说明新化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮具有良好的安全性。

实施例5

血小板数量减少、粘附、聚集或释放能力降低可导致出血；血小板数量过多，聚集功能过强可增强血液的凝固性，形成血栓，从而引起很多其他心血管疾病，因此血小板的粘附、聚集和释放是血小板生理条件下活血止血功能的基本条件，也是血小板病理情况下形成血栓以及其他相关疾病的主要因素。本实施例采取比浊法测定新化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮抗血小板聚集的作用。设立血液中未加任何抗血小板聚集抑制剂的阴性对照组，传统抗血小板聚集的阿司匹林阳性对照组，以及新化合物实验组，血样为健康志愿者(一周内未服用过任何抗血小板聚集药物)的静脉血，由上海瑞金医院提供。

计算被测样品抑制血小板聚集的百分率。公式如下：

试验结果表明，新化合物4’-羟基-4，6’-二甲氧基二氢查耳酮抗血小板聚集的作用强于同浓度的阿司匹林阳性对照组，见表2。

表2  抑制血小板凝聚率均值(n＝5)

组别浓度(ug/ml)最大聚集率(％)抑制聚集率均值(％)阴性对照阿司匹林本发明化合物--2003002003006046402117    --    23    33    65    72