具有构象限制结构的手性番荔枝内酯化合物、合成方法及其用途

摘要

本发明涉及一种构象限制结构的手性番荔枝内酯化合物、合成方法及其用途。该化合物具有如上结构式的光学活性化合物，本发明的化合物具有高的抗癌活性和选择性，对人体乳腺管癌的IC50(μM)达到＜0.04，且对癌细胞的抑制活性是正常细胞的100倍左右，具有较好的选择性。可用于抗癌药物。而且制备方法简易，是一种适于工业化生产的方法。

说明书

技术领域

本发明涉及一种内酯化合物，具体地说是一种手性番荔枝内酯类似物及其合成方法及用途。

背景技术

当前，癌症已经成为人类健康的最大威胁，并且它的发病率呈逐年上升的趋势。每年有超过20％的死亡是由癌症造成的，这个数字超过因艾滋病，肺结核和疟疾死亡人数的总和。传统治疗癌症的方法，如手术切除、放射疗法和化学疗法等，都有一定的缺陷，不是治疗不彻底就是毒副作用大。随着现代有机分离鉴定和合成技术的发展，许多化学家致力于从天然产物中分离和鉴定具有高度抗肿瘤活性并具选择性的天然化合物，并通过有机合成的手段来获取这种天然含量较低的化合物，然后再以天然化合物为先导化合物进行结构的简化与修饰来获得更多结构多样生物活性优异的化合物。

番荔枝内酯(Annonaceous acetogenin)是从番荔枝科植物中分离得到的一类天然产物。由于它们普遍具有强的抗肿瘤活性，引起的人们广泛的关注(A.Cave等，Progress in the Chemistry of Organic Natural Products：Acetogenins fromAnnonaceae.New York，Springer-Verlag，1997，70，81-288)，吴毓林、姚祝军等人曾经报道了具有抗癌活性的番荔枝内酯类似物(CN97106368.0)，具有如下分子式：

其中R1、R2、R3、R4为H或手性OH；L＝1-6；m＝8-12；n＝0-5；o＝3-12。并提供了该类化合物的制备方法及用途。该类化合物系由手性羟基酸原料合成含有经取代或重排的γ-丁内酯的环氧中间体，以聚乙二醇类化合物与环氧中间体经偶联、催化氢化、消除反应得到产物番荔枝内酯类似物但该方法没有获得手性产物。这类化合物对癌细胞的半致死量LC₅₀为3-6E-05。随后吴毓林、姚祝军等人又报道了一类手性番荔枝内酯类似物(CN99125750.2)，具有如下分子式：

其中Y＝C_6-20的烷基，n＝1-3，m＝7-19。该化合物系由手性卤代烷与手性二羟基烷基羧酸酯发生偶联以及羟基保护的产物酯化合物与手性醛反应得到羟醛缩合产物，再经酸性内酯环化、消除水解得到。这类化合物较前一类化合物具有更好的生物活性对癌细胞的半致死量EC₅₀为0.03-0.09μgmL^-1。在此发明人期望利用新的合成方法和途径，在番荔枝内酯类化合物的柔性分子结构中引入构象限制的刚性结构，进一步提高化合物的抗癌活性，与此同时使其在正常细胞和癌细胞之间还能有一定的选择性，并为最终开发成一类新的抗癌药物做准备。

发明内容

本发明要解决的问题是提供一种手性番荔枝内酯类似物，是具有光学活性及构象限制刚性结构的。

本发明还要解决的问题提供一种上述化合物的制备方法。

本发明还要解决的问题是提供上述化合物的用途。

本发明的手性番荔枝内酯类似物是具有如下分子式的光学活性化合物：

换言之，该化合物是：

尤其是指

尤其是指

尤其是指

或

尤其是指

或

等化合物，其中，X＝O，S，n＝0-5，m＝7-19，Y＝C_6-20的烷基，R¹，R²为(CH₂)_LR³，其中L＝0-5，R³为H、OR4，SR⁴或NR⁴R⁵，当n＝0或1时，R¹和R²为(CH₂)_LR³或相连形成环状结构的杂环化合物，环状结构可以是五、六或七元环；R¹，R²是相同或不同的基团；

并且当X为O且L为0时，R³仅为OR⁴，SR⁴或NR⁴R⁵；R⁵，R⁴为H，烷基，酰基或杂环化合物，R⁵，R⁴是相同或不同的基团；推荐R⁵，R⁴为H，C₁～C₁₀的烷基，C₁～C₁₀的酰基或含N、O、S的五到七元饱和或芳香杂环化合物。

本发明的手性番荔枝内酯化合物可以用分子式为

或的手性炔化合物

和分子式为环氧不饱和内酯化合物，在正丁基锂和三氟化硼乙醚存在下发生偶联反应；再用甲磺酰基保护羟基；然后用氮原子上有孤对电子的有机胺化合物处理获得含双键和三键化合物；继而以对甲苯磺酰肼还原双键和三键，酸催化脱除保护基团。可以用下述反应式表示：

其中，X＝O或S，n＝0-5，m＝7-19，Y＝C_6-20的烷基，R¹，R²为(CH₂)_LR³，其中L＝0-5，R³为H、OR⁴，SR⁴或NR⁴R⁵(R⁵，R⁴为H，烷基，酰基或杂环化合物，R⁵，R⁴是相同或不同的基团)，当n＝0或1时，R¹和R²为(CH₂)_LR³或相连形成含氧、硫或氮原子的环状结构，环状结构可以是五、六或七元环。R¹，R²是相同或不同的基团；

除非另外说明，本发明所述的烷基、酰基推荐为C₁～C₁₀的，所述的杂环化合物推荐为含N、O、S的五到七元环饱和或芳香环。

本发明的合成方法的反应条件进一步推荐为包括如下步骤中一步或多步：

上述的手性炔、环氧不饱和内酯、正丁基锂和三氟化硼乙醚摩尔比为1-3∶1∶1-3∶1-3，在极性溶剂中和室温至-78℃反应0.5-3h。

化合物5、甲烷磺酰氯和三乙胺摩尔比为1∶1-3∶2-6时，在极性溶剂中和0℃至室温下反应15-45min后，获得手性化合物4。

化合物4与氮原子上含有孤对电子的有机胺摩尔比为1∶1-5时，在室温下反应1-10h，获得手性化合物3。所述的氮原子上含孤对电子的有机胺月桂胺、二甲胺、1.8-二氮-双环[5，4，0]十一烷-7-烯(DBU)等，但以DBU为最佳。

手性化合物3、对甲苯磺酰肼与醋酸钠摩尔比为1∶100-200∶100-200在一种或多种极性溶剂中，在室温至回流下反应1-10h，获得手性化合物2。

在极性溶剂中和0℃至室温下，手性化合物2用无机酸催化脱保护继承最终产物1。

所述的极性溶剂可以是CH₂Cl₂，CH₃OH，四氢呋喃(THF)、乙二醇二甲醚和水等。

分子式为的手性炔的制备方法，可以是由分子式为的化合物与在氢化钠条件下发生取代反应；然后在相转移催化剂作用下与手性环氧氯丙烷发生偶联；然后与三甲基硅炔在三氟化硼乙醚丁基锂条件下偶联；再与氯甲基甲醚作用保护新生羟基，最后在四丁基氟化铵作用下脱除硅基保护，其中X，Y R₁，R₂，n如前所述，P＝MOM或TBS，MOM＝甲氧基甲基，TBS＝二甲基叔丁基硅基。可以用下述反应式表示：

手性炔的合成方法可进一步描述为：化合物7、化合物8和氢化钠摩尔比为1∶1-5∶1-5，在0℃至室温至100℃和极性溶剂中反应4-10小时，获得化合物9。

化合物9、环氧氯丙烷和相转移催化剂摩尔比为1∶1-5∶0.1-0.5，在0℃至室温和50％NaOH溶液中反应1-10小时，获得化合物10。所述的相转移催化剂为四丁基硫酸氢铵。

化合物10、三甲基硅炔、正丁基锂和三氟化硼乙醚摩尔比为1∶1-5∶1-5∶1-5，在-78℃和极性溶剂中反应1-4小时，获得化合物11。

化合物11、氯甲基甲醚、二异丙基乙基胺摩尔比1∶5-10∶10-15，在0℃至室温和极性溶剂中反应2-10小时，获得化合物12。

化合物12与四丁基氟化铵摩尔比1∶1-2，在0℃至室温和极性溶剂中反应15-60min，获得化合物6。

本发明提供了一种新的合成中间体，分子式为：

推荐为

其中X，Y，R₁，R₂，m，n如前所述，P＝MOM或TBS，MOM＝甲氧基甲基，TBS＝二甲基叔丁基硅基。

本发明的化合物具有高的抗癌活性和选择性，以实例9的数据为例，对人体乳腺管癌(MDA-MB-468)的IC₅₀(μM)达到＜0.04，且对癌细胞(BEL-7404，MDA-MB-468)的抑制活性是正常细胞(Chang，LO2)的100倍左右，具有较好的选择性。可用于抗癌药物。而且制备方法简易，是一种适于工业化生产的方法。

具体实施方式

通过下述实施例将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。

实施例1

将4.76mmol 60％氢化钠溶于10mL DMF中，冷却至0℃慢慢滴入原料4.76mmol二醇的15mL DMF溶液，在此温度下搅拌30分钟后，慢慢滴入原料2.38mmol 14的15mL DMF溶液，滴毕反应液慢慢升温至80℃，反应15小时。冷却至室温，饱和氯化铵淬灭，体系用150mL乙酸乙酯稀释，分离有机相依次用水、饱和氯化铵及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得到淡黄色液体16(0.53g，82％)。

[α]_D²⁵＝+3.6(c 3.1，CHCl₃)；

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.23(16H，m)，1.52(2H，m)，3.37(3H，s)，3.38(3H，s)，3.39(3H，s)，3.53-3.78(8H，m)，3.87(1H，dd，J＝5.5，10.0Hz)，4.64(5H，m)，4.75(1H，d，J＝6.8Hz)ppm；

¹³C NMR(100MHz，CDCl₃)δ：97.0，96.8，96.0，79.7，77.0，73.7，70.8，69.0，67.1，55.5，55.47，55.43，32.1，32.0，29.8，29.7，29.4，25.5，22.7，14.1 ppm；IR(film)：3479，2925，2854，1464，1378，1213，1152，1111，1038，918cm^-1；MS(ESI，m/z)：461(M⁺+Na)；

HRMS(ESI)，C₂₂H₄₆O₈Na计算值461.3084，实测值461.3095.

实施例2

向原料4.8mmol 16和9.6mmol环氧氯丙烷的40mL环己烷溶液中加入相转移催化剂0.21g四丁基硫酸氢铵，搅拌均匀后冷却至0℃，缓慢滴加10mL 50％NaOH水溶液，室温下搅拌10小时后，体系用100mL乙醚稀释，分离有机相，依次用水和饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到无色液体17(1.42g，60％)。

[α]_D²⁵＝-15.5(c 2.1，CHCl₃)；

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26(16H，m)，1.55(2H，m)，2.60(1H，m)，2.77(1H，dd，J＝4.2，5.0Hz)，3.15(1H，m)，3.36(6H，m)，3.37(3H，s)，3.54-3.76(10H，m)，3.84(1H，m)，4.63(5H，m)，4.77(1H，d，J＝6.7Hz)ppm；

¹³C NMR(100MHz，CDCl₃)δ：96.7，96.6，95.9，79.38，79.32，76.4，73.8，72.2，72.0，67.1，66.8，55.3，55.2，50.8，44.2，32.0，31.8，29.6，29.5，29.2，25.3，22.5，13.9ppm；IR(film)：2926，2855，1458，1214，1152，1111，1039，918cm^-1；

MS(ESI，m/z)：517(M⁺+Na)；

HRMS(ESI)，C₂₅H₅₀O₉Na计算值517.3347，实测值517.3365.

实施例3

-78℃以及氮气保护下，向4.38mmol三甲基硅乙炔的5mL无水四氢呋喃中缓慢滴加4.38mmol n-BuLi(1.6M in hexane)，搅拌30分钟后，加入4.38mmolBF₃·Et₂O，继续搅拌30分钟后，缓慢滴入化合物1.46mmol 17的15mL无水四氢呋喃溶液，反应2小时后，饱和氯化铵淬灭，体系用50mL乙醚稀释，分离有机相依次用饱和碳酸氢钠及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到中间体溶于10mL无水二氯甲烷中，室温下加入21.9mmol二异丙基乙基胺，冷却至0℃，缓慢注入14.6mmol MOMCl，室温下反应5小时，饱和碳酸氢钠淬灭，体系用50mL二氯甲烷稀释，分离有机相依次用1N HCI、饱和碳酸氢钠及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥浓缩得到粗产品溶解于10mL四氢呋喃中，冰水浴冷却下加入1.6mmol TBAF(1M in THF)，反应30分钟后，体系以50mL乙醚稀释，分离有机相依次用饱和氯化铵及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到无色液体18(0.86g，88％)。

[α]_D²⁵＝-18.1(c 2.95，CHCl₃)；

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26(14H，m)，1.40(2H，m)，1.55(2H，m)，1.99(1H，dd，J＝2.6，2.6 Hz)，2.52(2H，m)，3.36(6H，s)，3.37(3H，s)，3.39(3H，s)，3.55-3.76(9H，m)，3.79(1H，m)，3.85(1H，m)，4.62(5H，m)，4.74(3H，m)ppm；

IR(film)：3274，2928，2858，2824，1467，1214，1153，1110，1039，919cm^-1；

MS(ESI，m/z)：587(M⁺+Na)；

元素分析C₂₉H₅₆O₁₀(％)：计算值C，61.68；H，9.99.实测值C，61.85；H，10.25.

实施例4

-78℃以及氮气保护下，向化合物181-4mmol的无水四氢呋喃5mL中缓慢滴加n-BuLi 1-4mmol，搅拌30分钟后，加入BF₃·Et₂O 1-4mmol，继续搅拌30分钟后，缓慢滴入化合物19 1.44mmol的无水四氢呋喃5mL溶液，反应2小时后，饱和氯化铵淬灭，体系用乙醚(50mL)稀释，分离有机相依次用饱和碳酸氢钠及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到淡黄色液体20(0.60g，58％)。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26(24H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.54(6H，m)，2.26(2H，t，J＝7.3Hz)，2.47(4H，m)，3.36(6H，s)，3.37(3H，s)，3.38(3H，s)，3.37(1H，m)，3.56-3.85(12H，m)，4.62(4H，s)，4.63(1H，d，J＝6.7Hz)，4.72(2H，s)，4.76(1H，d，J＝6.8Hz)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.7Hz)，6.99(1H，d，J＝1.0Hz)ppm；

IR(film)：3487，2926，2856，2249，1757，1465，1320，1314，1152，1111，1038，919，733cm^-1；

MS(ESI，m/z)：825(M⁺+Na)；

HRMS(ESI)，C₄₃H₇₈O₁₃Na计算值825.5334，实测值825.5362.

实施例5

将化合物20 0.31mmol的无水二氯甲烷5mL冷却至0℃，加入三乙胺0.5-1.5mmol，慢慢滴加入甲基磺酰氯0.4-1.0mmol，室温下反应30分钟后，向体系中加入DBU 0.5-1.5mmol，继续反应4小时后，饱和氯化铵淬灭，反应体系以二氯甲烷(50mL)稀释，分离有机相依次用1N HCl、饱和碳酸氢钠及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到淡黄色液体21(0.15g，62％)。

实施例6

将化合物21 0.153mmol及对甲苯磺酰肼10-20mmol溶于乙二醇二甲醚25mL中，加热回流，将醋酸钠15-25mmol的30mL水溶液5小时内缓缓注入反应液，同时搅拌回流，混合物冷至室温，减压旋出溶剂，并以乙酸乙酯(30mLx3)萃取剩余水相，合并有机相依次以水、饱和碳酸氢钠及饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到粗产品。将其溶于甲醇2.0mL中，冰水浴冷却下滴加浓盐酸0.5mL，室温下搅拌24小时，饱和碳酸氢钠中和，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，包和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到产物22(43mg，46％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26-1.50(38H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.54(2H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.18(4OH，brs)，3.44(2H，m)，3.65(6H，m)，3.79(4H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.6，6.8Hz)，6.99(1H，d，J＝1.5Hz)ppm；

IR(film)：3353，2925，2851，1749，1471，1326，1201，1144，1113，1033，880，720cm^-1；

MS(ESI，m/z)：637(M⁺+Na)；

实施例7

采用结构式为的手性醇，操作同实施1、2、3、4、5和6，结果分别获得

化合物23，

化合物24，

化合物25，

化合物26，

化合物27。

化合物23

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26-1.50(38H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.54(2H，m)，2.26(2H，t，J＝8.0Hz)，3.39(2H，m)，3.44(4OH，brs)，3.75(10H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.6，6.8Hz)，6.99(1H，d，J＝1.5Hz)ppm；

IR(film)：3356，2920，2851，1753，1469，1321，1084，1029，889，721cm^-1；

MS(ESI，m/z)：637(M⁺+Na)；

化合物24

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(32H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.44(6H，m)，1.54(2H，m)，2.26(2H+2OH，m)，3.31(2H，m)，3.52(2H，m)，3.73(2H，m)，3.79(2H，m)，3.94(2H，m)，3.99(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.6，6.8Hz)，6.99(1H，J＝1.5Hz)ppm；

IR(filrm)：3500，2919，2850，1747，1467，1323，1138，1122，1079，1027，880，722cm^-1；

MS(ESI，m/z)：619(M⁺+Na)；

化合物25

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(32H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.44(6H，m)，1.54(2H，m)，2.26(2H，t，J＝7.7Hz)，2.30(2OH，brs)，3.33(2H，m)，3.51(2H，m)，3.77(4H，m)，3.94(2H，m)，3.99(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，6.99(1H，J＝1.2Hz)ppm；

IR(film)：3500，2920，2851，1743，1467，1325，1147，1074，1031，953，727 cm^-1；MS(ESI，m/z)：619(M⁺+Na)；

化合物26

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26-1.56(40H，m)，1.41(3H，d，J＝6.8Hz)，2.26(2H，t，J＝7.9Hz)，2.47(2OH，brs)，2.84(2H，m)，3.00(2H，m)，3.36(2H，dd，J＝7.9，9.4Hz)，3.53(2H，dd，J＝2.8，9.6Hz)，3.74(2H，m)，4.08(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.4，6.6Hz)，6.99(1H，d，J＝1.4Hz)ppm；

IR(film)：3498，2926，2850，1745，1468，1324，1166，1121，1029，953，863，721cm^-1；

MS(ESI，m/z)：635(M⁺+Na)；

化合物27

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.0Hz)，1.26-1.56(40H，m)，1.41(3H，d，J＝6.8Hz)，2.26(2H，t，J＝7.7Hz)，2.83(2H，m)，2.99(1H，d，J＝3.4Hz)，3.02(1H，d，J＝3.6Hz)，3.33(2H，dd，J＝8.5，8.5Hz)，3.59(2H，dd，J＝2.9，9.5Hz)，3.74(2H，m)，4.09(2H，m)，4.99(1H，q，J＝6.6Hz)，6.99(1H，s)ppm；

IR(film)：3463，2924，2851，1750，1467，1320，1175，1087，1027，948，869，722cm^-1；

MS(ESI，m/z)：635(M⁺+Na)；

实施例8

采用结构式为和分别与结构式为的二醇反应，操作如实施例1、2和3，再分别与结构式为和结构式为的化合物反应，操作如实施4、5和6。

结果分别获得

化合物28，

化合物29，

化合物30，

化合物31，

化合物32，

化合物33。

化合物28

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(18H，m)，1.41(3H，d，J＝6.8Hz)，1.44(6H，m)，1.55(2H，m)，2.26(2H，t，J＝7.7Hz)，2.30(2OH，brs)，3.33(2H，m)，3.51(2H，m)，3.77(4H，m)，3.94(2H，m)，3.99(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，6.99(1H，J＝1.2Hz)ppm；

IR(film)：3498，2921，2850，1742，1466，1324，1146，1073，1030，952，726cm^-1；

MS(ESI，m/z)：521(M⁺+Na)；

化合物29

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(40H，m)，1.41(3H，d，J＝6.8Hz)，1.46(6H，m)，1.54(2H，m)，2.26(2H，t，J＝7.7Hz)，2.33(2OH，brs)，3.34(2H，m)，3.52(2H，m)，3.78(4H，m)，3.95(2H，m)，3.99(2H，m)，4.98(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，6.98(1H，J＝1.2Hz)ppm；

IR(film)：3500，2920，2851，1743，1467，1325，1147，1074，1031，953，727cm^-1；

MS(ESI，rm/z)：675(M⁺+Na)；

化合物30

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.89(3H，t，J＝7.1Hz)，1.28(30H，m)，1.41(3H，d，J＝6.8Hz)，1.45(6H，m)，1.56(2H，m)，2.27(2H，t，J＝7.7Hz)，2.40(2OH，brs)，3.34(2H，m)，3.53(2H，m)，3.79(4H，m)，3.96(2H，m)，4.00(2H，m)，5.00(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，7.00(1H，J＝1.2Hz)ppm；

IR(film)：3499，2920，2849，1742，1466，1324，1146，1072，1030，952，726cm^-1；

MS(ESI，m/z)：633(M⁺+Na)；

化合物31

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.25(58H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.45(6H，m)，1.55(2H，m)，2.27(2H，t，J＝7.7Hz)，2.30(2OH，brs)，3.32(2H，m)，3.50(2H，m)，3.76(4H，m)，3.93(2H，m)，3.98(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，6.99(1H，J＝1.2Hz)ppm；

IR(film)：3501，2922，2853，1743，1467，1325，1147，1074，1031，953，725cm^-1；

MS(ESI，m/z)：801(M⁺+Na)；

化合物32

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(42H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.44(6H，m)，1.54(2H，m)，2.26(2H，t，J＝7.7Hz)，2.30(2OH，brs)，3.33(2H，m)，3.51(2H，m)，3.77(4H，m)，3.94(2H，m)，3.99(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，6.99(1H，J＝1.2Hz)ppm；

IR(film)：3500，2920，2851，1743，1467，1325，1147，1074，1031，953，727 cm^-1；

MS(ESI，m/z)：689(M⁺+Na)；

化合物33

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ：0.88(3H，t，J＝7.1Hz)，1.24(66H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，1.46(6H，m)，1.56(2H，m)，2.28(2H，t，J＝7.7Hz)，2.38(2OH，brs)，3.34(2H，m)，3.53(2H，m)，3.78(4H，m)，3.95(2H，m)，3.99(2H，m)，4.99(1H，dq，J＝1.5，6.8Hz)，6.99(1H，J＝1.2Hz)ppm；

IR(film)：3499，2919，2850，1743，1467，1325，1147，1074，1031，953cm^-1；

MS(ESI，m/z)：857(M⁺+Na).

实施例9生物活性实验

化合物22、23、24、25、26、27按照MTT方法对BEL-7404，SK-Hep 1，MDA-MB-468，HCT116的癌细胞以及Chang，LO2的正常细胞的半致死量测定列于下表中

Compound    IC₅₀(μM)    MDA-MB    -435S   HCT116  BEL-7404 SK-Hepl Chang  LO2    22    23    24    ＜0.04    ＜0.04    ＜0.04    3.79    5.09    ～10    0.063    0.051    0.12    0.687    0.72    1.17  ＞10  4.02  3.58  4.05  2.67  2.24

    25    26    27    0.07    0.046    0.059    ＞10    0.605    ＞10  0.091  0.049  0.13  0.987  ＞2.6  1.76  ＞8  5.8  ＞15    ＞12    ＞10    3.98