一种可用于检测猪圆环病毒2型抗体的Cap抗原的制备方法

摘要

一种制备可用于检测猪圆环病毒2型抗体的Cap抗原的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)PCR克隆PCV2 ORF2的编码基因；(2)构建重组表达载体rCap；(3)在改良的LB液体培养基中，依次37℃诱导和低温长时间诱导rCap表达；(4)纯化rCap蛋白；其中所述改良的LB液体培养基包含6-9g/L蛋白胨、6-9g/L氯化钠以及2-4g/L酵母提取物；诱导rCap表达所使用的诱导剂为IPTG，其最终浓度为0.05-0.2mol/L；诱导rCap表达的第一诱导温度为37℃，第二诱导温度为16-20℃；诱导rCap表达的第一诱导时间为3-6小时，第二诱导时间为12-20小时。该方法促进了rCap在大肠杆菌中表达产生可溶性rCap蛋白，减少了包涵体的形成，避免了复杂的变性、复性过程，同时分离纯化所得可溶性rCap蛋白的生物学活性接近于PCV2病毒天然蛋白。