具有减毒日本脑炎病毒基因作为主链的减毒嵌合黄病毒

摘要

包含编码日本脑炎病毒的衣壳蛋白、前膜蛋白和非结构蛋白的核苷酸序列，和编码第二个黄病毒的包膜蛋白的核苷酸序列的核酸分子，其中编码日本脑炎病毒的前膜蛋白和/或非结构蛋白的核苷酸序列具有产生至少一个能减毒病毒的氨基酸突变的核苷酸突变。

说明书

技术领域

本发明涉及具有减毒日本脑炎病毒基因作为主链的减毒嵌合黄病毒，其作为用于预防黄病毒感染的减毒的活疫苗是有用的。

背景技术

目前，已知超过大约60种属于黄病毒科(Flaviviridae)的病毒(以下简称黄病毒)，包括日本脑炎病毒、西尼罗病毒、登革1-4病毒、黄热病毒、圣路易脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、库宁病毒(Kunjin virus)、中欧脑炎病毒、贾萨努尔森林病毒、墨累山谷脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、玻瓦散病毒、俄罗斯春夏季脑炎病毒、Yokose病毒、Apoi病毒和Aroa病毒。

这些黄病毒具有单链(+)RNA的基因组，并在基因结构方面互相类似。黄病毒基因组的可读框(ORF)由其5′末端开始编码三个结构蛋白(衣壳(C)蛋白、前膜(prM)蛋白，其为膜(M)蛋白的前体、和包膜(E)蛋白)和随后的七个非结构(NS)蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5)。

黄病毒的这些结构蛋白和非结构蛋白被翻译成单个多蛋白；翻译的多蛋白然后被蛋白酶和具有宿主细胞和病毒的蛋白酶活性的NS3蛋白加工，从而导致形成包含上面所述的三种结构蛋白的成熟病毒体。

众所周知许多上面所述的黄病毒经由昆虫例如蚊子和蜱来感染哺乳动物，包括人类和鸟类，并引起脑炎和/或发热症状。起初，这些黄病毒物种的每一种都固有于特定的区域；因此，限制了感染的地方范围。但是，近年来，由于交通/分配的发展、气候变化等，各种黄病毒感染已经扩展到病原黄病毒的最初生境以外的地方，从而引起了公共卫生的重要的问题。

在防止病毒感染的扩展中，用疫苗来预防是有效的。然而，尽管如上所述已经识别了属于黄病毒科的很多病毒，但是在实际应用中仅仅将用于黄热病毒和日本脑炎病毒感染的减毒活疫苗和用于日本脑炎病毒和蜱传脑炎病毒感染的灭活疫苗作为用于黄病毒感染的疫苗。尤其是，减毒活疫苗作为廉价的疫苗是有用的并诱导长期免疫性，但是除了如上所述的那些疫苗以外还没有批准活疫苗。

在这些情况下，作为快速开发新的用于各种黄病毒感染的减毒活疫苗的方法，最近一种应用由基因工程技术制备的嵌合黄病毒的策略已经引起大家的注意。

例如，ChimeriVax^TM-JE是通过将编码黄热病毒疫苗17D毒株的两个结构蛋白(prM-E)的基因替换为日本脑炎病毒疫苗SA14-14-2毒株的相应基因来制备的嵌合黄病毒(参见，例如，国际专利公开号No.98/37911的小册子和国际专利公开号No.01/39802的小册子)。通过存在于与日本脑炎病毒疫苗SA14-14-2毒株的E蛋白相应的病毒多蛋白中的来自野生型的大量氨基酸突变，将ChimeriVax^TM-JE减毒到允许其用作疫苗的程度(参见，例如，Arroyo等人，J.Virol.75：934-942，2001)。

此外，基于这个ChimeriVax^TM-JE的技术，也已经开发了登革1-4病毒的嵌合黄病毒(ChimeriVax^TM-DEN(1-4))(参见，例如，国际专利公开号No.98/37911的小册子和国际专利公开号No.01/39802的小册子)，以及西尼罗病毒的嵌合黄病毒(ChimeriVax^TM-West Nile)(参见，例如，国际专利公开号No.2004/045529的小册子)，其具有黄热病毒疫苗17D毒株的基因作为主链。

还将这些嵌合黄病毒减毒到允许其用作疫苗的程度，所述减毒主要由存在于与prM-E蛋白相应的病毒多蛋白中的来自野生型的氨基酸取代所导致。

但是，已经报道了ChimeriVax^TM-DEN1的减毒主要由在用于疫苗生产的细胞中的该嵌合黄病毒的传代中发生的E蛋白的氨基酸突变导致(参见，例如，Guirakhoo等人，J.Virol.78：9998-10008，2004)。此外，因为不同血清型的登革病毒的再感染可能是登革出血热发作的原因，所以没有发现该疫苗的实际应用。

同样，已经通过在来源于野生型高毒性的西尼罗病毒NY-99毒株的E蛋白中人工导入氨基酸突变来促进ChimeriVax^TM-West Nile减毒(参见，例如，国际专利公开号No.2004/045529的小册子)。

作为使用除黄热病毒(YF-17D)以外的基因主链的嵌合黄病毒，已经报道了通过将编码登革-4病毒prM-E蛋白的基因替换为西尼罗病毒NY99毒株的相应基因来制备的嵌合黄病毒(WN/DEN4嵌合病毒)(参见，例如，Pletnev等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99：3036-3041，2002)。

虽然WN/DEN4嵌合病毒与其亲本毒株(即：西尼罗病毒和登革4病毒)相比是减毒的，但是减毒的机理还没有被充分地阐明，并且没有发现该病毒作为疫苗的实际应用。

发明内容

当按照如上所述的常规方法来开发用于各种黄病毒感染的减毒活嵌合黄病毒疫苗时，必须研究安全性，即，对黄病毒物种的每一组合构建的嵌合病毒的脑神经毒性、从外周向中枢神经系统的感染性(脑神经侵袭力)、防止感染的作用、中和抗体产生等，并且这可能是延长减毒活疫苗实际应用时间段的主要原因。

此外，活疫苗当为了安全性进行减毒时还引起了抗体生产力降低的问题。这是因为通过如上所述修饰E蛋白来进行的病毒的减毒可能降低了其作为疫苗的免疫诱导潜力(抗体生产力)，因为诱导中和抗体的抗原决定簇存在于E蛋白中。

因此，本发明的目标是提供在除E蛋白以外的部分具有减毒突变的减毒嵌合黄病毒。

本发明人进行坚持不懈地研究来解决以上所述的问题，发现用于猪的日本脑炎病毒疫苗ML-17毒株具有在除E蛋白以外的prM和NS蛋白中大量的对于ML-17毒株固有的氨基酸突变，并且获得了这些氨基酸突变可能涉及ML-17毒株减毒的暗示。根据这个发现，本发明人被启发来构建具有包含对于ML-17毒株固有的一个或多个氨基酸突变的日本脑炎病毒的除E蛋白以外的结构蛋白和非结构蛋白(即：C蛋白、prM蛋白和NS蛋白)的嵌合黄病毒，进行进一步的研究，并开发了本发明。

因此，该本发明提供了：

[1]包含编码日本脑炎病毒的衣壳蛋白、前膜蛋白和非结构蛋白的核苷酸序列，和编码第二个黄病毒的包膜蛋白的核苷酸序列的核酸分子，其中编码日本脑炎病毒的前膜蛋白和/或非结构蛋白的核苷酸序列包含产生一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的核苷酸突变。

[2]在[1]中所述的核酸分子，其中所述日本脑炎病毒是ML-17毒株。

[3]在[1]或[2]中所述的核酸分子，其中所述第二个黄病毒选自西尼罗病毒、登革1-4病毒、黄热病毒、圣路易脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、库宁病毒、中欧脑炎病毒、贾萨努尔森林病毒、墨累山谷脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、玻瓦散病毒、俄罗斯春夏季脑炎病毒、Yokose病毒、Apoi病毒和Aroa病毒。

[4]由在[1]到[3]任何一项中所述核酸分子编码的减毒嵌合黄病毒。

[5]包含在[4]中所述的减毒嵌合黄病毒的减毒活疫苗。

[6]制备在[1]中所述核酸分子的方法，其包含下列步骤：

将在包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子中编码包膜蛋白的核苷酸序列替换为编码第二个黄病毒的包膜蛋白的核苷酸序列的步骤；和

将产生一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的核苷酸突变导入编码日本脑炎病毒的前膜蛋白和/或非结构蛋白的核苷酸序列中的步骤。

[7]制备在[1]中所述核酸分子的方法，其包含下列步骤：

将在包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子中编码包膜蛋白的核苷酸序列替换为编码第二个黄病毒的包膜蛋白的核苷酸序列的步骤，所述日本脑炎病毒在前膜蛋白和/或非结构蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变。

[8]制备减毒嵌合黄病毒的方法，其包含从在[1]到[3]任何一项中所述核酸分子表达嵌合黄病毒蛋白的步骤。

[9]包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子，所述日本脑炎病毒在前膜蛋白和/或非结构蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变。

[10]包含在[9]中所述核酸分子的载体。

[11]由在[9]中所述核酸分子编码的减毒日本脑炎病毒。

[12]制备在[9]中所述核酸分子的方法，其包含将产生一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的核苷酸突变导入在包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子中编码前膜蛋白和/或非结构蛋白的核苷酸序列中的步骤。

[13]制备减毒日本脑炎病毒的方法，其包含从在[9]中所述核酸分子表达日本脑炎病毒蛋白的步骤。

根据本发明，提供了在除E蛋白以外的部分具有减毒突变的减毒嵌合黄病毒。因为可以不修饰E蛋白来实现本发明的嵌合黄病毒的减毒，所以用于各种黄病毒感染的减毒活疫苗可以短时间内达到实际应用，而不会降低免疫诱导潜力。

附图简述

图1显示了在日本脑炎病毒L-17毒株和JaOH0566毒株之间的基因组cDNA核苷酸序列和多蛋白氨基酸序列的差异。Nt表示核苷酸；AA表示氨基酸。氨基酸位置用数字显示，从紧挨着多蛋白的起始甲硫氨酸的氨基酸开始计数。

图2显示了在日本脑炎病毒ML-17毒株的多蛋白中从亲本毒株(JaOH0566毒株)突变的氨基酸(用黑体字母标示)与在JaOH0566毒株、JaOArS982毒株、JaGAr01毒株、Nakayama毒株、Beijing毒株、SA14毒株和SA14-14-2毒株的多蛋白中相应的氨基酸相比较的结果。氨基酸位置用数字显示，从紧挨着多蛋白的起始甲硫氨酸的氨基酸开始计数。^*表示在标示的位置上的氨基酸与ML-17毒株的氨基酸相同。

图3显示了用长-PCR方法制备重组日本脑炎病毒MS-14毒株和MS-15毒株的全长cDNA的方法的概述。

图4显示了用长-PCR方法制备ML-17/WN(E基因)嵌合黄病毒的cDNA的方法的概述。

实施本发明的最佳方式

本发明提供了包含编码日本脑炎病毒(第一黄病毒)的C蛋白、prM蛋白和NS蛋白的核苷酸序列，和编码第二个黄病毒的E蛋白的核苷酸序列的核酸分子。优选地，本发明提供了包含日本脑炎病毒的5′非翻译区的核苷酸序列，编码C蛋白、prM蛋白和NS蛋白的核苷酸序列，和3′未翻译区的核苷酸序列，以及编码第二个黄病毒的E蛋白的核苷酸序列的核酸分子。此外，该核酸分子在编码日本脑炎病毒的prM蛋白和/或NS蛋白的核苷酸序列中，包含产生一个或多个如下所述能减毒病毒的氨基酸突变的核苷酸突变。

本发明也提供了由这样的核酸分子编码的嵌合黄病毒。

在本说明书中，“核酸分子”表示单链或双链DNA或RNA。

在本说明书中，除非另作说明，“核苷酸序列”表示脱氧核糖核苷酸序列(用A、G、C和T显示)或核糖核苷酸序列(用A、G、C和U显示)。

在本说明书中，除非另作说明，对于单链核苷酸序列来说，左侧末端表示5′末端，且右侧末端表示3′末端；对于氨基酸序列来说，左侧末端表示N末端(氨基末端)，且右侧末端表示C末端(羧基末端)。

在本说明书中，除非另作说明，对于氨基酸来说，用标准指示系统中的单字母缩写或三字母缩写来表示氨基酸。

在本说明书中，“减毒”表示病毒是低毒力的(低毒性)，从而该病毒能作为疫苗安全地用于动物受试者来接种疫苗(例如，人和非人哺乳动物(例如，猴、马、牛、羊、猪、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等)和鸟等)。

在本说明书中，“病毒能被作为疫苗(安全地)使用”表示在疫苗接种的部位观察到病毒的生长，但是最终没有明显的严重症状，而且给予了预防由在随后的用抗疫苗接种的个体的病毒进行的攻击试验中接种的高毒力病毒所引起的疾病发作的特异性免疫。

使用日本脑炎病毒作为第一黄病毒来制备本发明的嵌合黄病毒，所述日本脑炎病毒不受限制，只要本发明的嵌合黄病毒的prM蛋白和/或NS蛋白最终包含如下所述减毒病毒的一个或多个氨基酸突变。

因此，可使用日本脑炎病毒的各种毒株(例如，ML-17毒株、JaOH0566毒株、JaOArS982毒株、JaGAr01毒株、Nakayama毒株、Beijing毒株、SA14毒株、SA14-14-2毒株等)的任何毒株。

已经克隆了各种日本脑炎病毒毒株的基因组，并测定了其完整的或部分的核苷酸序列。参见，例如，对于JaOArS982毒株，Sumiyoshi等人，Virology161：497-510，1987；对于Nakayama毒株，McAda等人，Virology 158：348-360，1987；对于Beijing毒株，Hashimoto等人，Virus Genes 1：305-317，1988；对于SA14毒株和SA14-14-2毒株，Nitayaphan等人，Virology 177：541-552，1990。

关于各种日本脑炎病毒的基因组序列的信息还可以从公众可访问的基因数据库例如GenBank中获得。参见，例如，对于JaOArS982毒株，GenBank登录号：M18370；对于JaGAr01毒株，GenBank登录号：AF069076；对于Beijing-1毒株，GenBank登录号：L48961；对于SA14毒株，GenBank登录号：M55506；对于SA14-14-2毒株，GenBank登录号：AF315119。

为了制备包含编码本发明的嵌合病毒的核苷酸序列的核酸分子，制备了包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子，且其可被用作嵌合黄病毒的基因主链。作为包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子的例子，可提及基因组RNA、cDNA、合成RNA、合成DNA等。

另外，为了制备包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子，可以使用包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子的任何片段(例如，PCR扩增的DNA片段等)。

可以用一般已知的方法从用日本脑炎病毒感染的细胞(例如，MMC-LK2细胞、HeLa细胞、N2a细胞、PS细胞、BSC-1细胞、HL-CZ细胞、LLC-MK2细胞、Vero细胞、BHK细胞、来源于蚊的C6/36细胞、来源于小鼠或仓鼠的脑内细胞)、生长中的鸡蛋等中制备日本脑炎病毒的基因组RNA。用于制备基因组RNA的日本脑炎病毒毒株不受限制；例如，可使用如上所列的毒株。

可以根据一般的已知方法(例如，在Sumiyoshi等人，Virology 161：497-510，1987中所述的方法)由基因组RNA构建日本脑炎病毒的cDNA。

另外，也可以根据日本脑炎病毒的基因组序列信息，用一般的已知方法来化学合成日本脑炎病毒的基因组RNA或cDNA或其任意片段。

可以用聚合酶链反应(缩写为“PCR方法”)，反转录酶-聚合酶链反应(缩写为“RT-PCR方法”)；长聚合酶链反应(缩写为“长-PCR方法”)；和/或长-反转录酶-聚合酶链反应(缩写为“长-RT-PCR方法”)以基因组RNA或cDNA作为模板来扩增日本脑炎病毒的基因组RNA或cDNA或其任意片段。

另外，还可以将日本脑炎病毒的基因组RNA或cDNA或其任意片段插入到载体中，并克隆。

作为使用的载体的例子，可以提及质粒例如pBR322、pBR325、pBR327、pBR328、pUC7、pUC8、pUC9、pCU18、pUC19、pHSG298、pHSG299、pSC101、pGBM5和pCRII。作为克隆载体，还可以使用噬菌体、粘粒、噬菌粒等。这些克隆载体是从，例如，日本基因有限公司(NIPPON GENE CO.，LTD.)等在商业上可购买到的。

作为用于本发明的第二个黄病毒，可以提及除日本脑炎病毒以外的黄病毒，例如，西尼罗病毒、登革1-4病毒、黄热病毒、圣路易脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、库宁病毒、中欧脑炎病毒、贾萨努尔森林病毒、墨累山谷脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、玻瓦散病毒、俄罗斯春夏季脑炎病毒、Yokose病毒、Apoi病毒、Aroa病毒等。对于这些黄病毒物种，也可使用其各种突变毒株的任意毒株。

编码如上所述的各种黄病毒的E蛋白的核苷酸序列和氨基酸序列是通常已知的，而且，对于许多这些黄病毒物种来说，已经报道了其基因组的整个核苷酸序列。参见，例如，以下：西尼罗病毒(例如，Wengler等人，Virology147：264-274，1985)；登革-1病毒(例如，Mason等人，Virology 161：262-267，1987)；登革-2病毒(例如，Deubel等人，Virology 155：365-377，1986；Gruenberg等人，J.Gen.Virol.69：1391-1398，1988；Hahn等人，Virology 162：167-180，1988)；登革-3病毒(例如，Osatomi等人，Virus Genes 2：99-108，1988)；登革-4病毒(例如，Mackow等人，Virology 159：217-228，1987；Zhao等人，Virology 155：77-88，1986)；黄热病毒(例如，Rice等人，Science 229：726-733，1985)；圣路易脑炎病毒(例如，Trent等人，Virology 156：293-304，1987)；蜱传脑炎病毒(例如，Mandl等人，Virology 166：197-205，1988)；库宁病毒(例如，Coia等人，J.Gen.Virol.69(Pt1)：1-21，1988)；贾萨努尔森林病毒(例如，Venugopal等人，Journal of General Virology 75：227-232，1994；Kuno等人，Journal of Virology72：73-83，1998)；墨累山谷脑炎病毒(例如，Dalgarno等人，J.Mol.Biol.187：309-323，1986)；鄂木斯克出血热病毒(例如，Lin等人，Virology 313：81-90，2003；Li等人，Journal ofGeneral Virology 85：1619-1624，2004；Gritsun等人，Journal of General Virology 74：287-291，1993)；玻瓦散病毒(例如，Kuno等人，Am.J.Trop.Med.Hyg.65：671-676，2001；Mandl等人，Virology 194：173-184，1993)；俄罗斯春夏季脑炎病毒(例如，Kuno等人，Journal of Virology 72：73-83，1998)；Apoi病毒(例如，Billoir等人，Journal of General Virology 81：781-790，2000)；Aroa病毒(例如，Gaunt等人，Journal of General Virology 82：1867-1976，2001)。

关于各种黄病毒基因组的核苷酸序列的信息还可以从公众可访问的基因数据库例如GenBank中获得。参见，例如，以下：西尼罗病毒(例如，GenBank登录号：M12294；NC_001563)；登革-1病毒(例如，GenBank登录号：M23027)；登革-2病毒(例如，GenBank登录号：M19197；NC_001474)；登革-3病毒(例如，GenBank登录号：M93130)；登革-4病毒(例如，GenBank登录号：M14931)；黄热病毒(例如，GenBank登录号：X03700；NC_002031)；圣路易脑炎病毒(例如，GenBank登录号：M16614)；蜱传脑炎病毒(例如，GenBank登录号：U27495；NC_001672)；库宁病毒(例如，GenBank登录号：AY274504；AY274505)；贾萨努尔森林病毒(例如，GenBank登录号：X74111)；墨累山谷脑炎病毒(例如，GenBank登录号：AF161266；NC_000943)；鄂木斯克出血热病毒(例如，GenBank登录号：AY193805；AY438626；X66694；NC_005062)；玻瓦散病毒(例如，GenBank登录号：AF310922；AF310920；AF310912；L06436；NC_003687)；Yokose病毒(例如，GenBank登录号：AB114858；NC_005039)；Apoi病毒(例如，GenBank登录号：AF160193；NC_003676)；Aroa病毒(例如，GenBank登录号：AF372413)。

为了制备包含编码本发明的嵌合病毒的核苷酸序列的核酸分子，制备了包含编码第二个黄病毒的核苷酸序列的核酸分子，并可使用编码其E蛋白的区域。作为包含编码第二个黄病毒的核苷酸序列的核酸分子的例子，可提及基因组RNA、cDNA、合成RNA、合成DNA等。

另外，为了制备包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子，可以使用包含编码第二个黄病毒的核苷酸序列的核酸分子的任何片段(例如，PCR扩增的DNA片段等)。

第二个黄病毒的基因组RNA可以通过与日本脑炎病毒相同的方法来制备。

第二个黄病毒的cDNA还可以可以通过与日本脑炎病毒相同的技术由基因组RNA来构建。

另外，第二个黄病毒的基因组RNA或cDNA或其任意片段还可以基于通常已知的关于用作第二个黄病毒的病毒的基因组序列信息用通常已知的方法来化学合成。

可以如在日本脑炎病毒中那样，用PCR方法、RT-PCR方法、长-PCR方法和/或长-RT-PCR方法，以基因组RNA或cDNA为模板，来扩增第二个黄病毒的基因组RNA或cDNA或其任意片段。

另外，如在日本脑炎病毒中那样，第二个黄病毒的基因组RNA或cDNA或其任意片段还可以插入到如上所列的适当的载体中，并克隆。

通过将编码E蛋白的核苷酸序列替换为编码第二个黄病毒的包膜蛋白的核苷酸序列，来制备包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子(DNA或RNA)，所述的编码E蛋白的核苷酸序列是在包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子中的。

可以通过通常已知的重组技术来进行在包含编码日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子中的编码E蛋白的区域的置换(例如，利用Morita等人，Virology287：417-426，2001等所描述的长-PCR的方法)。

另外，包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子(DNA或RNA)还可以通过化学合成来制备，其通过基于有关日本脑炎病毒和第二个黄病毒的基因组序列信息，设计编码本发明的嵌合黄病毒的整个核苷酸序列来实现。

当以DNA的形式制备了包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子时，将用于体外转录的启动子序列导入DNA的5′末端。在表达嵌合黄病毒蛋白之前的任意阶段，将编码本发明的嵌合黄病毒的DNA用与导入的启动子相应的RNA聚合酶转录为RNA。作为使用的启动子序列的例子，可以提及T7 RNA聚合酶启动子、SP6 RNA聚合酶启动子等。

用本领域通常已知的基因导入技术，例如转染、电穿孔或显微注射，将编码本发明的嵌合黄病毒的RNA导入适于蛋白表达的细胞中(例如，C6/36细胞、Vero细胞、BHK细胞、MMC-LK2细胞、HeLa细胞、N2a细胞、PS细胞等)，并在这些细胞中表达嵌合黄病毒蛋白。

另外，对于本发明的嵌合黄病毒，可以通过利用不使用细胞体系的蛋白质生产方法来获得嵌合黄病毒蛋白，其中通过向细胞匀浆物或提取液中加入底物、酶等来在试管中提供生物的遗传信息翻译系统(也称为无细胞体系表达；参见，例如，US专利号：5,478,730；Madin等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA97：559-564，2000；Sawasaki等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99：14652-14657，2002)。

包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子在该核酸分子中编码来源于日本脑炎病毒的prM蛋白和/或NS蛋白的核苷酸序列中包含产生一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的核苷酸突变。

详细来说，当用日本脑炎病毒JaOArS982毒株的单独的结构蛋白和非结构蛋白的氨基酸序列表达(参见H.Sumiyoshi等人，Virology 161：497-510，1987)作为对照时，减毒病毒的氨基酸突变是下列氨基酸的取代：prM蛋白的第1个甲硫氨酸被异亮氨酸取代；prM蛋白的第148个(M蛋白的第56个)天冬酰胺被苏氨酸取代；NS2A蛋白的第4个丙氨酸被丝氨酸取代；NS4B蛋白的第51个天冬酰胺被赖氨酸取代；NS4B蛋白的第52个缬氨酸被异亮氨酸取代；NS4B蛋白的第68个苏氨酸被丝氨酸取代；NS5蛋白的第126个亮氨酸被甲硫氨酸取代；和/或NS5蛋白的第854个丝氨酸被天冬酰胺取代。

另外，还可以利用对于在各自氨基酸位置导入的氨基酸的保守氨基酸来进行以上所述的氨基酸取代。

在本说明书中，“保守氨基酸”表示在物理化学的性质方面彼此相类似的氨基酸；其例子包括分类在相同组中的氨基酸，例如芳香族氨基酸(Phe、Trp、Tyr)，脂族氨基酸(Ala、Leu、Ile、Val)，极性氨基酸(Gln、Asn)，碱性氨基酸(Lys、Arg、His)，酸性氨基酸(Glu、Asp)，具有羟基的氨基酸(Ser、Thr)和具有小侧链的氨基酸(Gly、Ala、Ser、Thr、Met)。

优选地，在所述的氨基酸取代中，本发明的嵌合黄病毒至少包含prM蛋白的第1个甲硫氨酸被异亮氨酸所取代和/或prM蛋白的第148个(M蛋白的第56个)天冬酰胺被苏氨酸所取代。

可以在任一步骤中将以上所述的氨基酸突变导入，来制备包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子。

可以利用，例如Morita等人，Virology 287：417-426，2001所描述的利用长-PCR方法的定点诱变方法，或通过将通常已知的例如Kunkel法或带缺口的双链体法的方法或利用这些方法的诱变试剂盒(可以从例如，Takara Bio Inc.处获得)等应用到克隆到质粒的cDNA，来导入以上所述的氨基酸突变。

另外，可以通过使用包含编码在prM蛋白和/或NS蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子，来制备包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子，来将这些突变导入本发明的嵌合黄病毒中。

使用上述的通常已知的定点诱变方法，可以通过向不包含这些突变的日本脑炎病毒毒株(例如，JaOH0566毒株、JaOArS982毒株、JaGAr01毒株、Nakayama毒株、Beijing毒株、SA14毒株SA14-14-2毒株等)的基因组RNA或cDNA中人工导入这些突变，来制备包含编码在prM蛋白和/或NS蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子。

可以通过从包含编码在prM蛋白和/或NS蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子表达病毒蛋白，来制备重组日本脑炎病毒，所述核酸分子是通过如上所述通常已知的方法人工制备的。

通过用该重组日本脑炎病毒感染如上所述的适当细胞，并培养该细胞，可以从培养细胞中制备大量的基因组RNA。

此外，该重组日本脑炎病毒本身是减毒的日本脑炎病毒，并可以是日本脑炎减毒活疫苗的有希望的候选物。

还可以通过获得来自天然包含一个或多个这样的氨基酸突变的日本脑炎病毒突变毒株的基因组RNA或cDNA，来制备包含编码在prM蛋白和/或NS蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子。

作为在prM蛋白和/或NS蛋白中天然包含一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的日本脑炎病毒突变毒株的例子，可以提及日本脑炎病毒ML-17毒株。ML-17毒株是猪的日本脑炎病毒疫苗毒株(参见，例如，Yoshida等人，BIKENJOURNAL 24：47-67，1981)，并由The Research Foundation for Microbial Diseasesof Osaka University(在Osaka University建立，3-1，Yamadaoka，Suita-shi，Osaka)得到。

另外，可通过通常已知的方法，从细胞等中的传代得到日本脑炎病毒突变毒株之中选择在prM蛋白和/或NS蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的毒株，并且其基因组RNA或cDNA还可以用来制备本发明的嵌合黄病毒。

这样制备的包含编码在prM蛋白和/或NS蛋白中具有一个或多个减毒病毒的氨基酸突变的日本脑炎病毒的核苷酸序列的核酸分子(基因组RNA或者cDNA)，可在进行所需断裂之后插入到如上所述的克隆载体中。例如，利用这样的重组载体，可以安全而方便地制备本发明的嵌合黄病毒。

可以通过例如，获得来自制备的嵌合病毒的基因，确定其碱基序列的全部或部分或相应的氨基酸序列(例如，已经导入突变的部分、两个病毒的连接处等)，并确认该序列与预期的序列相配，来确认本发明的嵌合黄病毒的构建。

本发明也提供了包含本发明的嵌合黄病毒的减毒活疫苗(在下文中也称为本发明的疫苗)。因为病毒的E蛋白包含诱导中和抗体的抗原决定簇，所以本发明的嵌合黄病毒作为疫苗来接种导致产生抗用作E蛋白的第二个黄病毒物种的抗体。

为了防止各种黄病毒感染，本发明的疫苗可以接种到，例如，动物，例如人和非人哺乳动物(例如：猴、马、牛、羊、猪、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等)，以及鸟类。

本发明的疫苗可以以悬浮液或冻干制剂的形式生产。除了本发明的嵌合黄病毒之外，本发明的疫苗可以包含，药学上可接受的稳定剂(例如，蔗糖、乳糖、葡萄糖、明胶、明胶水解产物、L-谷氨酸钠、血清白蛋白等)、安抚剂(例如，葡萄糖等)等共同用于疫苗制剂中。

在接种后，本发明的疫苗一般可以溶解或悬浮在药学上可接受的载体中。作为载体的例子，可以提及液体载体，例如水、盐水(包括生理盐水)和缓冲溶液(例如，磷酸盐缓冲液)。

本发明的疫苗代表性地开处方为每0.1到1.0ml剂量包含10²到10⁶ PFU的本发明的嵌合黄病毒的无菌水溶液，而且可以通过例如皮下、皮内、肌内等进行接种。

另外，因为已知一些黄病毒经由粘膜感染，所以本发明的疫苗可根据选择的第二个黄病毒物种经口或经鼻施用。

此外，包含编码本发明的嵌合黄病毒的核苷酸序列的核酸分子(RNA或DNA)本身还可以用作核酸疫苗制剂。

构造的嵌合病毒的功效和安全性可以用本领域通常已知的评价方法，通过例如，评价在动物(例如，小鼠、猴等)中的脑神经毒性、从外周向中枢神经系统的感染性(脑神经侵袭力)、防止感染的作用、病毒血症(viremia)的存在或不存在、中和抗体产生等证实。

在下文中通过以下实施例更详细地描述本发明，但是其仅仅用于说明的目的，而不限制本发明的范围。

实施例

(实施例1)

(日本脑炎病毒疫苗ML-17毒株减毒突变位点的确定)

为了确定日本脑炎病毒疫苗ML-17毒株的减毒突变位点，首先，比较在ML-17毒株和其亲本毒株，即，野生型毒性的日本脑炎病毒JaOH0566毒株之间的全长基因组cDNA的核苷酸序列和多蛋白的氨基酸序列。

根据Sumiyoshi等人，Virology 161：497-510，1987公开的方法，确定ML-17毒株的全长基因组cDNA的核苷酸序列(获得自The Research Foundation forMicrobial Diseases of Osaka University)(SEQ ID NO：1)和JaOH0566毒株的全长基因组cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：3)。对于两个毒株，使用表1A所示的PCR引物来构建cDNA，并使用表1B所示的测序引物来确定构建的cDNA的核苷酸序列。此外，ML-17毒株的多蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：2)和JaOH0566毒株的多蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：4)是由各自的全长基因组cDNA的核苷酸序列所推导出来的。

(表1A)

日本脑炎病毒(JEV)的PCR引物

引物名称 在基因组上相 应的核苷酸 位置^*核苷酸序列JEV1-34FJEV2851-2817RJEV2707-2741FJEV5554-5520RJEV5414-5449FJEV8257-8223RJEV8119-8153FJEV 10976-10943R 1-34-F  2851-2817-R  2707-2741-F  5554-5520-R  5414-5449-F  8257-8223-R  8119-8153-F  10976-10943-RAGAAGTTTATCTGTGTGAACTTCTTGGCTTAGTA(SEQ ID NO：5)GCAAAGAGAATGCTTTTTCCCCATGCTTTCCAGCC(SEQ ID NO：6)TCCTGCTCAAAGAGAATGCAGTGGACCTCAGTGTG(SEQ ID NO：7)GTCATGAAGATGGCTGCTGCCTCCCCTAATTCCAC(SEQ ID NO：8)ACTGATGTCACCGAACAGAGTGCCCAACTACAACCT(SEQ ID NO：9)TTTTCTATAACCTTGGGCATGTAAGGGCAGAGAAC(SEQ ID NO：10)GGGAATCCTCTCCAAGTCCAGAAGTAGAAGAACAA(SEQ ID NO：11)AGATCCTGTGTTCTTCCTCACCACCAGCTACATA(SEQ ID NO：12)

(表1B)

用于日本脑炎病毒(JEV)测序的引物

引物名称 在基因组上相 应的核苷酸 位置^*核苷酸序列JEV1-20F 1-20-FAGAAGTTTATCTGTGTGAAC(SEQ ID NO：13)JEV421-440F 421-440-FAAGGCTCAATCATGTGGCTC(SEQ ID NO：14)JEV821-840F 821-840-FGAAAGCCACACGGTATCTCA(SEQ ID NO：15)

 JEV 1174-1193F 1174-1193-F CTGACATCTCGACGGTGGCT (SEQ ID NO：16) JEV 1559-1578F 1559-1578-F TGGACTGAACACTGAAGCGT (SEQ ID NO：17) JEV 1942-1961F 1942-1961-F TTGTCATTGAACTATCCTAC (SEQ ID NO：18) JEV 2326-2345F 2326-2345-F GAACACTCTTTGGGGGAATG (SEQ ID NO：19) JEV 2520-2539F 2520-2539-F TGTGGAAGTGGCATCTTTGT (SEQ ID NO：20) JEV 2746-2765F 2746-2765-F TGAACAAGCCCGTGGGAAGA (SEQ ID NO：21) JEV 3147-3166F 3147-3166-F ACTTGGCCAGAGACACACAC (SEQ ID NO：22) JEV 3538-3557F 3538-3557-F ATGGTGAAATGGTTGACCCT (SEQ ID NO：23) JEV 3935-3954F 3935-3954-F AGCATGGATGATTGTCCGAG (SEQ ID NO：24) JEV 4111-4130F 4111-4130-F AGAAAGGAGCTGTACTCTTG (SEQ ID NO：25) JEV 4339-4358F 4339-4358-F CCTACGTGGTGTCAGGAAAA (SEQ ID NO：26) JEV 4741-4760F 4741-4760-F TTTTCCACACACTATGGCAC (SEQ ID NO：27) JEV 5112-5131F 5112-5131-F GACCGTCAGGAGGAACCAGT (SEQ ID NO：28) JEV 5517-5535F 5517-5535-F AAGGTGGAATTAGGGGAGG (SEQ ID NO：29) JEV 5914-5932F 5914-5932-F AAGAGGGAGAAGGCAGAGT (SEQ ID NO：30) JEV 6319-6338F 6319-6338-F ATGCCATACTGGAGGACAAC (SEQ ID NO：31) JEV 6685-6704F 6685-6704-F GAAAGGGTATAGGGAAGATG (SEQ ID NO：32) JEV 7106-7125F 7106-7125-F CACCACATCGCTAGCCTCAA (SEQ ID NO：33) JEV 7508-7527F 7508-7527-F GGTATTGGTGACGGCGGCTA (SEQ ID NO：34) JEV 7920-7939F 7920-7939-F TGTGGGCGTGGAGGATGGAG (SEQ ID NO：35) JEV 8292-8311F 8292-8311-F CTAGTGCGTCTCCCCCTGTC (SEQ ID NO：36) JEV 8713-8732F 8713-8732-F CTGACACCACCCCTTTTGGA (SEQ ID No：37) JEV 9144-9162F 9144-9162-F GCTTTGGGGTTCCTGAATG (SEQ ID NO：38) JEV 9470-9488F 9470-9488-F AGAAGATCAAAGGGGGAGT (SEQ ID NO：39) JEV 9870-9889F 9870-9889-F CCGTGCAGAGGACAGGATGA (SEQ ID NO：40) JEV10281-10281-10298-F TATGCGGCGATAAACCAG

10298F(SEQ ID NO：41)JEV10662-10679F 10662-10679-FGCGCAGCCCCAGGAGGAC(SEQ ID NO：42)JEV375-356R 375-356-RCGTCAATGAGTGTTCCAAGT(SEQ ID NO：43)JEV3084-3065R 3084-3065-RCAATCCAGTACGACAAGTCA(SEQ ID NO：44)JEV5757-5738R 5757-5738-RTGACCTTTTTCCCCGCTCTT(SEQ ID NO：45)JEV8518-8499R 8518-8499-RTTCTTGATTTTCTCCTGATT(SEQ ID NO：46)JEV10976-0955R 10976-10955-RAGATCCTGTGTTCTTCCTCACC(SEQ ID NO：47)

^*：F表示正向引物；R表示反向引物。

作为基因组cDNA的核苷酸序列比较的结果，发现如图1所示，ML-17毒株具有25个核苷酸取代，由于10个这些核苷酸取代而在自紧挨着多蛋白的起始甲硫氨酸的氨基酸开始计数的第127位、第274位、第1209位、第2462位、第2463位、第2479位、第2652位、第2751位、第2896位和第3380位产生了10个氨基酸取代。

此外，将在ML-17毒株的多蛋白中的如上所述的氨基酸突变与其它野生型毒性的日本脑炎病毒JaOArS982毒株、JaGAr01毒株、Nakayama毒株、Beijing毒株和SA14毒株，以及另一日本脑炎病毒疫苗SA14-14-2毒株的多蛋白相应位点的氨基酸序列相比较。

以下毒株的多蛋白的推定的氨基酸序列获得自GenBank，并用于这个实施例：JaOArS982毒株的多蛋白的氨基酸序列(GenBank登录号：M18370)；JaGAr01毒株的多蛋白的氨基酸序列(GenBank登录号：AF069076)；Beijing-1毒株的多蛋白的氨基酸序列(GenBank登录号：L48961)；SA14毒株的多蛋白的氨基酸序列(GenBank登录号：M55506)；SA14-14-2毒株的多蛋白的氨基酸序列(GenBank登录号：AF315119)。

对于Nakayama毒株的多蛋白的氨基酸序列，比较所需的区域的氨基酸序列获得自GenBank登录号：AF112297；McAda等人，Virology.158(2)：348-60，1987等所描述的基因和/或氨基酸部分序列的信息，并用于这个实施例。

如图2所示，作为多蛋白的氨基酸序列比较的结果，发现在如上所述的在ML-17毒株和JaOH0566毒株之间的10个氨基酸取代之中，在自紧挨着多蛋白的起始甲硫氨酸的氨基酸开始计数的第127位、第274位、第1209位、第2462位、第2463位、第2479位、第2652位和第3380位的总共八个氨基酸取代是ML-17毒株固有的氨基酸突变。

通过与在Sumiyoshi等人，Virology 161：497-510，1987所描述的日本脑炎病毒(JaOArS982毒株)的多蛋白中的单独的结构蛋白和非结构蛋白的位置进行比较，发现在多蛋白中这八个氨基酸取代的位置分别对应于prM蛋白的第1位和第148位氨基酸(M蛋白的第56位)；NS2A蛋白的第4位氨基酸；NS4B蛋白的第51位、第52位和第68位氨基酸；NS5蛋白的第126位和第854位氨基酸。

(实施例2)

(重组日本脑炎病毒MS-14毒株和MS-15毒株的制备)

为了证实ML-17毒株固有的氨基酸突变对于病毒减毒的作用，根据Morita等人，Virology 287：417-426，2001所描述的利用长-PCR法进行定点诱变的方法，使用野生型毒性的日本脑炎病毒JaOArS982毒株基因作为主链，制备了MS-14毒株和MS-15毒株，其中MS-14毒株为整合了产生prM蛋白的第1位甲硫氨酸被异亮氨酸取代(在基因组的479位上G被A所取代)的核苷酸突变的重组日本脑炎病毒，而MS-15毒株为整合了产生prM蛋白的第148位(M蛋白的第56位)天冬酰胺被苏氨酸取代(在基因组的919位上A被C所取代)的核苷酸突变的重组日本脑炎病毒。

(MS-14毒株的制备)

如图3所示，以日本脑炎病毒(JaOArS982毒株)的基因RNA为模板，使用一组引物1和引物2、一组引物3和引物4以及一组引物5和引物6，通过长-RT-PCR法，制备了对应于各自的引物组的日本脑炎病毒基因片段(片段1、2和3)。

此外，在用琼脂糖电泳将每个片段纯化之后，首先，以片段1和片段2为模板，使用一组引物1和引物4，再一次通过长-PCR法，制备基因片段4。以相同的方式纯化该基因片段；然后，以基因片段3和片段4为模板，使用一组引物1和引物6，进行长-PCR法来制备在其5′末端具有T7启动子序列的全长日本脑炎病毒cDNA(片段5)。

以该全长的日本脑炎病毒cDNA(片段5)作为模板，进行体外RNA合成反应来制备人造的全长日本脑炎病毒基因RNA。将该RNA用电穿孔法导入蚊子细胞(C6/36细胞)中，并将细胞培养5天，之后回收在培养物上清液中出现的重组病毒(MS-14毒株)。

(MS-15毒株的制备)

对于MS-15毒株，根据如上所述的方法回收重组病毒，只是除了使用引物7代替引物2，并用引物8代替引物3来制备重组病毒。

此外，对于对照，使用引物9代替引物2，并用引物10代替引物3来获得无突变的病毒。

用于该实施例的引物如表2所示。

在上表中，S表示有义序列；R表示互补序列。下划线表示T7启动子序列；双下划线表示核苷酸突变。

(实施例3)

(重组日本脑炎病毒MS-14毒株和MS-15毒株在BHK细胞中的生长潜力的评价)

评价了在实施例2中制备的重组日本脑炎病毒MS-14毒株和MS-15毒株在BHK细胞中的生长潜力。对于对照，使用了野生型毒性的日本脑炎病毒JaOArS982毒株。

用每个MS-14毒株、MS-15毒株和JaOArS982毒株感染BHK细胞；在感染后24、48和72小时，收集细胞培养物的上清液，并检查病毒的出现。每次通过噬斑法来测定在培养物的上清液中的病毒含量。对于所有毒株，证实了其在BHK细胞中的生长。

(实施例4)

(重组日本脑炎病毒MS-14毒株和MS-15毒株在正常成熟小鼠中的神经毒性的评价)

使用实施例2所制备的重组日本脑炎病毒MS-14毒株和MS-15毒株，通过腹膜内接种的方法来评价每个毒株在正常成熟小鼠中的神经毒性。对于毒性对照，使用了野生型毒性的日本脑炎病毒JaOArS982毒株；对于减毒对照，使用了日本脑炎病毒疫苗ML-17毒株。

通过脑内接种，将10¹到10⁶蚀斑形成单位的MS-14毒株、MS-15毒株、ML-17毒株或JaOArS982毒株给给予十只小鼠(4周龄雄性和雌性ICR小鼠，每组5只)，并持续3周每日观察一次，并通过Read-Muench法计算LD₅₀。该试验的结果如表3所示。

(表3)

    病毒毒株    特点    LD₅₀(ffu)    JaOH0566    ML-17    野生型    疫苗毒株    6.3×10¹    ＞1.0×10⁶    JaOArS982    MS-14     MS-15     MS-14 rev^*    野生型    重组突变体：    127M→I(prM)    重组突变体：    274N→T(M)    野生型(回复体)    1.6×10¹    ＞1.0×10⁶     1.0×10³     3.2×10¹

^*：MS-14rev表示使用基于长-PCR的定点诱变，由MS-14制备的MS-14的回复体。

如表3所示，MS-14毒株和MS-15毒株与毒性的JaOArS982毒株相比明显减毒。尤其是，MS-14毒株具有与作为日本脑炎病毒疫苗毒株的ML-17毒株相似的毒力。

这证明可以通过在prM蛋白中的氨基酸取代来减少在小鼠中的神经毒性。

从以上的结果，说明导入重组日本脑炎病毒MS-14毒株和MS-15毒株的氨基酸突变可能对制备日本脑炎活疫苗有用。此外，因为在高剂量接种中MS-14显示出程度低的致病性，说明在NS中的突变也可能是减毒所必需的。

(实施例5)

(日本脑炎病毒和西尼罗病毒的嵌合黄病毒(ML-17/WN(E基因))的cDNA的构建)

为了制备其中日本脑炎病毒疫苗ML-17毒株的E蛋白被西尼罗病毒的E蛋白所取代的嵌合黄病毒ML-17/WN(E基因)，根据在Morita等人，Virology287：417-426，2001所描述的利用长-PCR法制备重组日本脑炎病毒的方法来构建ML-17/WN(E基因)的cDNA。

如图4所示，以日本脑炎病毒活疫苗毒株(ML-17毒株)的基因RNA作为模板，使用一组引物1A和引物2A和一组引物5A和引物6A，通过长-RT-PCR法，制备对应于各自引物组的日本脑炎病毒基因片段(片段1A和3A)。

同样，以西尼罗病毒(NY99-35262-11毒株)的基因RNA作为模板，使用一组引物3A和引物4A，通过长-RT-PCR法，制备西尼罗病毒基因片段2A。

在通过琼脂糖电泳纯化每个片段之后，首先，以片段1A和2A作为模板，使用一组引物1A和引物4A，再一次通过长-RT-PCR法，制备基因片段4A。

以同样方式纯化该基因片段；然后，以基因片段3A和4A作为模板，使用一组引物1A和引物6A，进行长-RT-PCR法来制备ML-17/WN(E基因)的嵌合病毒cDNA(片段5A)，所述cDNA在其5′末端具有T7启动子序列，并具有西尼罗病毒E蛋白基因。

用于该实施例的引物如表4所示。

  引物名称 在基因组上相 应的核苷酸 位置^* 核苷酸序列^*  引物5A JE2478-2513 WN2431-N GGAGGAGTTCTGCTCTTCCTCTCCGTGAACGTGCAC GCTGACACTGGATGTGCCATTGACATCACAAGAAAA GAG(SEQ ID NO：62)  引物4A JE2478-2513 WN2433-R CTCTTTTCTTGTGATGTCAATGGCACATCCAGTGTC AGCGTGCACGTTCACGGAGAGGAAGAGCAGAACTCC T(SEQ ID NO：61)  引物6A JE-NR AGATCCTGTGTTCTTCCTCACCACCAGCTACATACT TCGG(SEQ ID NO：63)  引物3A ML17 941 WN 967 S CACCATCCTCCTGCTGCTGGTCGCTCCGGCTTACAG TTTCAACTGCCTTGGAATGAGCAACAGAGACTTC(SEQ ID NO：60)  引物2A ML17 945 WN 967 R CCAAGAAGTCTCTGTTGCTCATTCCAAGGCAGTTGA AACTGTAAGCCGGAGCGACCAGCAGCAGGAGGAT(SEQ ID NO：59)  引物1A T7启动子 JE1-40 N AAATTTAATACGACTCACTATAAGAAGTTTATCTGT GTGAACTTCTTGGCTTAGTATCGTTG(SEQ ID NO：58)

^*：JE表示日本脑炎病毒JaOAr82毒株；ML17表示日本脑炎病毒ML-17毒株的序列；WN表示西尼罗病毒的序列。S或N表示有义序列；R表示互补序列。下划线表示T7启动子序列。

(实施例6)

(来自ML-17/WN(E基因)的cDNA的嵌合黄病毒的制备)

以在实施例5中构建的日本脑炎病毒和西尼罗病毒的嵌合黄病毒的cDNA(在图4中的片段5A)作为模板，进行体外RNA合成反应来制备人工的全长嵌合病毒基因RNA。通过电穿孔的方法将该RNA导入蚊子细胞(C6/36细胞)中，并将细胞培养5天，之后回收在培养物上清液中出现的嵌合病毒。

(实施例7)

(ML-17/WN(E基因)嵌合黄病毒的生长潜力的评价)

使用的嵌合病毒是在实施例6中获得的ML-17/WN(E基因)。在C6/36细胞和BHK细胞中培养ML-17/WN(E基因)毒株和ML-17毒株，并分配感染的培养液，且在-70℃下储存。对于两种类型的细胞，使用补加有非必需氨基酸，并在根据需要的浓度(2到10％)下添加胎牛血清的Eagle MEM培养液。在培养实验中培养液的感染性效价如表5所示。ML-17/WN(E基因)具有相当于ML-17的生长潜力。

表5在C6/36细胞和BHK细胞中ML-17/WN(E基因)嵌合黄病毒和ML-17的生长

    病毒毒株    效价(ffu/ml)    C6/36    ML-17/WNE基因    2.1×10⁷    ML-17    2.0×10⁷    BHK    ML-17/WNE基因    5.3×10⁶    ML-17    4.0×10⁵

(实施例8)

(ML-17/WN(E基因)嵌合病毒的神经毒性的评价)

使用在实施例6中制备的重组嵌合病毒ML-17/WN(E基因)，通过脑内接种法在正常成熟的小鼠中评价神经毒性。也通过腹膜内施用来检查从外周向中枢神经系统的感染性(脑神经侵袭力)。对于对照，使用了野生型高毒性的毒株日本脑炎病毒JaOH0566毒株、西尼罗病毒NY99-3562-11毒株和减毒毒株日本脑炎病毒疫苗ML-17毒株。

通过脑内接种向出生后4周的C57BL/B6小鼠给予10¹到10⁷的每一病毒，并观察28天。通过Read-Muench法计算LD₅₀。

表6显示从实验中获得的ML-17/WN(E基因)的LD₅₀。与高毒性的JaOH0566毒株相比，ML-17/WN(E基因)明显减毒。尤其是，ML-17/WN(E基因)具有类似于日本脑炎病毒疫苗毒株ML-17毒株的毒力。

表6在C57BL/B6小鼠中ML-17/WN(E基因)的LD₅₀

    病毒毒株    LD₅₀(ffu)    JaOH0566    6.0×10¹    NY99-35262-11    5.0×10⁰    ML-17    ＞1.0×10⁷    ML-17/WN(E基因)    ＞1.0×10⁷

(实施例9)

(ML-17/WN(E基因)嵌合病毒的性质)

研究了ML-17/WN(E基因)嵌合病毒对于蚊子的感染性。用跨膜法使三带喙库蚊(Culex tritaeniorhynchus)OK7能吮吸在兔血(抗体阴性)中的病毒混合物。通过评价PFU(蚀斑形成单位)和在乳鼠中的发病率，来计算感染率。

在将用跨膜法使其能吮吸嵌合病毒的蚊子饲养10天和21天之后，使其乳化，并通过在乳鼠中脑内接种和PFU评价来尝试验证病毒的存在。即使当使每只蚊子吮吸至少10² PFU ML-17/WN(E基因)病毒时，也没有绝对的证据证明病毒的存在。

ML-17/WN(E基因)嵌合病毒不显示出对三带喙库蚊的易感性。

(实施例10)

(包含ML-17/WN(E基因)嵌合病毒的活疫苗的防御效力的评价)

使用2周龄的C57BL/B6和C3H/He小鼠进行免疫实验。

使用两个自交系的小鼠来进行研究。用西尼罗病毒(NY99-35262-11毒株)通过脑内攻击来致死性感染非免疫的对照组，而通过腹膜内接种给予ML-17/WN(E基因)的组显示出对于感染的明显防御。

工业实用性

根据本发明，提供了在除了E蛋白之外的部分具有减毒突变的减毒嵌合黄病毒。因为不修饰E蛋白而实现本发明的嵌合黄病毒的减毒，所以短时间就可以将用于各种黄病毒感染的减毒活疫苗进行实际应用，而不降低免疫诱导的潜力。

本申请是根据在日本递交的专利申请No.2004-374630的，其内容全部引入此处作为参考。

序列表

<110>The Research Foundation for Microbial Diseases of OsakaUniversity

<120>具有减毒日本脑炎病毒基因作为主链的减毒嵌合黄病毒

<130>09839

<150>JP2004-374630

<151>2004-12-24

<160>63

<170>PatentIn version 3.3

<210>1

<211>10976

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<220>

<221>CDS

<222>(96)..(10391)

<400>1

agaagtttat ctgtgtgaac ttcttggctt agtatcgttg agaagaatcg agagattagt     60

gcagtttaaa cagtttttta gaacggaaga taacc atg act aaa aaa cca gga       113

                                       Met Thr Lys Lys Pro Gly

                                       1               5

ggg ccc ggt aaa aac cgg gct atc aat atg ctg aaa cgc ggc cta ccc      161

Gly Pro Gly Lys Asn Arg Ala Ile Asn Met Leu Lys Arg Gly Leu Pro

            10                  15                  20

cgc gta ttc cca cta gtg gga gtg aag agg gta gta atg agc ttg ttg      209

Arg Val Phe Pro Leu Val Gly Val Lys Arg Val Val Met Ser Leu Leu

        25                  30                  35

gac ggc aga ggg cca gta cgt ttc gtg ctg gct ctt atc acg ttc ttc      257

Asp Gly Arg Gly Pro Val Arg Phe Val Leu Ala Leu Ile Thr Phe Phe

    40                  45                  50

aag ttt aca gca tta gcc ccg acc aag gcg ctt tta ggc cga tgg aaa       305

Lys Phe Thr Ala Leu Ala Pro Thr Lys Ala Leu Leu Gly Arg Trp Lys

55                  60                  65                  70

gca gtg gaa aag agt gta gca atg aaa cat ctc act agt ttc aaa cga       353

Ala Val Glu Lys Ser Val Ala Met Lys His Leu Thr Ser Phe Lys Arg

                75                  80                  85

gaa ctt gga aca ctc att gac gcc gtg aac aag cgg ggc aga aag caa       401

Glu Leu Gly Thr Leu Ile Asp Ala Val Asn Lys Arg Gly Arg Lys Gln

            90                  95                  100

aac aaa aga gga gga aat gaa ggc tca atc atg tgg ctt gcg agc ttg       449

Asn Lys Arg Gly Gly Asn Glu Gly Ser Ile Met Trp Leu Ala Ser Leu

        105                 110                 115

gca gtt gtc ata gct tgt gca gga gcc ata aag ttg tca aat ttc cag       497

Ala Val Val Ile Ala Cys Ala Gly Ala Ile Lys Leu Ser Asn Phe Gln

    120                 125                 130

ggg aag ctt ttg atg acc att aac aac acg gac att gca gac gtt atc       545

Gly Lys Leu Leu Met Thr Ile Asn Asn Thr Asp Ile Ala Asp Val Ile

135                 140                 145                 150

gta att ccc acc tca aaa gga gag aac aga tgc tgg gtc cgg gca atc       593

Val Ile Pro Thr Ser Lys Gly Glu Asn Arg Cys Trp Val Arg Ala Ile

                155                 160                 165

gac gtc ggc tac atg tgt gag gac act atc acg tac gaa tgt cct aag       641

Asp Val Gly Tyr Met Cys Glu Asp Thr Ile Thr Tyr Glu Cys Pro Lys

            170                 175                 180

ctt gcc atg ggc aat gat cca gag gat gtg gac tgc tgg tgt gac aac       689

Leu Ala Met Gly Asn Asp Pro Glu Asp Val Asp Cys Trp Cys Asp Asn

        185                 190                 195

caa gaa gtc tac gtc caa tat gga cgg tgc acg cgg acc agg cat tcc       737

Gln Glu Val Tyr Val Gln Tyr Gly Arg Cys Thr Arg Thr Arg His Ser

    200                 205                 210

aag cga agc agg aga tcc gtg tcg gtc caa aca cat ggg gag agt tca       785

Lys Arg Ser Arg Arg Ser Val Ser Val Gln Thr His Gly Glu Ser Ser

215                 220                 225                 230

cta gtg aat aaa aaa gag gct tgg ctg gat tca acg aaa gcc aca cga       833

Leu Val Asn Lys Lys Glu Ala Trp Leu Asp Ser Thr Lys Ala Thr Arg

                235                 240                 245

tat ctc atg aaa act gag aac tgg atc ata agg aat cct ggc tat gct       881

Tyr Leu Met Lys Thr Glu Asn Trp Ile Ile Arg Asn Pro Gly Tyr Ala

            250                 255                 260

ttc ctg gcg gcg gta ctc ggc tgg atg ctt ggc agt acc aac ggt caa       929

Phe Leu Ala Ala Val Leu Gly Trp Met Leu Gly Ser Thr Asn Gly Gln

        265                 270                 275

cgc gtg gta ttc acc atc ctc ctg ctg ctg gtc gct ccg gct tac agt       977

Arg Val Val Phe Thr Ile Leu Leu Leu Leu Val Ala Pro Ala Tyr Ser

    280                 285                 290

ttt aat tgt ctg gga atg ggc aat cgt gac ttc ata gaa gga gcc agt      1025

Phe Asn Cys Leu Gly Met Gly Asn Arg Asp Phe Ile Glu Gly Ala Ser

295                 300                 305                 310

gga gcc act tgg gtg gac ttg gtg cta gaa gga gat agc tgc ttg aca      1073

Gly Ala Thr Trp Val Asp Leu Val Leu Glu Gly Asp Ser Cys Leu Thr

                315                 320                 325

att atg gca aac gac aaa cca aca ttg gac gtc cgc atg atc aac atc      1121

Ile Met Ala Asn Asp Lys Pro Thr Leu Asp Val Arg Met Ile Asn Ile

            330                 335                 340

gaa gct agc caa ctt gcc gag gtt aga agt tac tgt tat cat gct tca      1169

Glu Ala Ser Gln Leu Ala Glu Val Arg Ser Tyr Cys Tyr His Ala Ser

        345                 350                 355

gtc act gac atc tcg acg gtg gct cgg tgc ccc acg act gga gaa gcc      1217

Val Thr AspIle Ser Thr Val Ala Arg Cys Pro Thr Thr Gly Glu Ala

    360                365                 370

cac aac gag aag cga gct gat agt agc tat gtg tgc aaa caa ggc ttc      1265

His Asn Glu Lys Arg Ala Asp Ser Ser Tyr Val Cys Lys Gln Gly Phe

375                 380                 385                 390

act gat cgt ggg tgg ggc aac gga tgt gga ctt ttc ggg aag gga agc      1313

Thr Asp Arg Gly Trp Gly Asn Gly Cys Gly Leu Phe Gly Lys Gly Ser

                395                 400                 405

att gac aca tgt gca aaa ttc tcc tgc acc agc aaa gcg att ggg aga      1361

Ile Asp Thr Cys Ala Lys Phe Ser Cys Thr Ser Lys Ala Ile Gly Arg

            410                 415                 420

aca atc cag cca gaa aac atc aaa tac aaa gtt ggc att ttt gtg cat      1409

Thr Ile Gln Pro Glu Asn Ile Lys Tyr Lys Val Gly Ile Phe Val His

        425                 430                 435

gga gcc act act tcg gaa aac cat ggg aat tat tca gcg caa gtt ggg      1457

Gly Ala Thr Thr Ser Glu Asn His Gly Asn Tyr Ser Ala Gln Val Gly

    440                 445                 450

gcg tcc cag gcg gca aag ttc aca gta aca ccc aat gct cct tcg ata      1505

Ala Ser Gln Ala Ala Lys Phe Thr Val Thr Pro Asn Ala Pro Ser Ile

455                 460                 465                 470

acc ctc aaa ctt ggt gac tac gga gaa gtc aca ctg gac tgt gag cca      1553

Thr Leu Lys Leu Gly Asp Tyr Gly Glu Val Thr Leu Asp Cys Glu Pro

                475                 480                 485

agg agt gga ctg aac act gaa gcg ttt tac gtc atg acc gtg ggg tca      1601

Arg Ser Gly Leu Asn Thr Glu Ala Phe Tyr Val Met Thr Val Gly Ser

            490                 495                 500

aag tca ttt ctg gtc cat agg gaa tgg ttt cat gac ctc gct ctc ccc      1649

Lys Ser Phe Leu Val His Arg Glu Trp Phe His Asp Leu Ala Leu Pro

        505                 510                 515

tgg acg tcc cct tcg agc aca gcg tgg aga aac aga gaa ctc ctc atg      1697

Trp Thr Ser Pro Ser Ser Thr Ala Trp Arg Asn Arg Glu Leu Leu Met

    520                 525                 530

gag ttt gaa gag gcg cac gcc aca aaa cag tcc gtt gtt gct ctt ggg      1745

Glu Phe Glu Glu Ala His Ala Thr Lys Gln Ser Val Val Ala Leu Gly

535                 540                 545                 550

tca cag gaa gga ggc ctc cat cag gcg ttg gca gga gcc atc gtg gtg      1793

Ser Gln Glu Gly Gly Leu His Gln Ala Leu Ala Gly Ala Ile Val Val

                555                 560                 565

gag tac tca agt tca gtg aag tta aca tca ggc cac ctg aaa tgt agg      1841

Glu Tyr Ser Ser Ser Val Lys Leu Thr Ser Gly His Leu Lys Cys Arg

            570                 575                 580

ctg aaa atg gac aaa ctg gct ctg aaa ggc aca acc tat ggc atg tgc      1889

Leu Lys Met Asp Lys Leu Ala Leu Lys Gly Thr Thr Tyr Gly Met Cys

        585                 590                 595

aca gaa aaa ttc tcc ttc gcg aaa aat ccg gcg gac act ggt cac ggg      1937

Thr Glu Lys Phe Ser Phe Ala Lys Asn Pro Ala Asp Thr Gly His Gly

    600                 605                 610

aca gtt gtc att gaa ctc tcc tac tct ggg agt gat ggc ccc tgc aaa      1985

Thr Val Val Ile Glu Leu Ser Tyr Ser Gly Ser Asp Gly Pro Cys Lys

615                 620                 625                 630

att ccg att gtc tcc gtt gcg agc ctc aat gac atg acc ccc gtc ggg      2033

Ile Pro Ile Val Ser Val Ala Ser Leu Asn Asp Met Thr Pro Val Gly

                635                 640                 645

cgg ctg gtg aca gtg aac ccc ttc gtc gcg act tcc agt gcc aat tca      2081

Arg Leu Val Thr Val Asn Pro Phe Val Ala Thr Ser Ser Ala Asn Ser

            650                 655                 660

aag gtg ctg gtc gag atg gaa ccc ccc ttc gga gac tcc tac atc gta      2129

Lys Val Leu Val Glu Met Glu Pro Pro Phe Gly Asp Ser Tyr Ile Val

        665                 670                 675

gtt gga cgg gga gac aag cag atc aac cac cat tgg cat aaa gct gga      2177

Val Gly Arg Gly Asp Lys Gln Ile Asn His His Trp His Lys Ala Gly

    680                 685                 690

agc acg ctg ggc aaa gcc ttt tca aca act ttg aag gga gct cag aga      2225

Ser Thr Leu Gly Lys Ala Phe Ser Thr Thr Leu Lys Gly Ala Gln Arg

695                 700                 705                 710

ctg gca gcg ctg ggt gac aca gcc tgg gac ttt ggc tcc att gga ggg      2273

Leu Ala Ala Leu Gly Asp Thr Ala Trp Asp Phe Gly Ser Ile Gly Gly

                715                 720                 725

gtc ttc aac tcc ata gga aaa gcc gtt cac caa gtg ttt ggt ggt gcc      2321

Val Phe Asn Ser Ile Gly Lys Ala Val His Gln Val Phe Gly Gly Ala

            730                 735                 740

ttc aga aca ctc ttc ggg gga atg tct tgg atc aca caa ggg cta atg      2369

Phe Arg Thr Leu Phe Gly Gly Met Ser Trp Ile Thr Gln Gly Leu Met

        745                 750                 755

ggt gcc cta cta ctc tgg atg ggc gtc aac gca cga gac cga tca att      2417

Gly Ala Leu Leu Leu Trp Met Gly Val Asn Ala Arg Asp Arg Ser Ile

    760                 765                 770

gct ttg gcc ttc tta gcc aca gga ggt gtg ctc gtg ttt tta gcg acc      2465

Ala Leu Ala Phe Leu Ala Thr Gly Gly Val Leu Val Phe Leu Ala Thr

775                 780                 785                 790

aat gtg cat gct gac act gga tgt gcc att gac atc aca aga aaa gag      2513

Asn Val His Ala Asp Thr Gly Cys Ala Ile Asp Ile Thr Arg Lys Glu

                795                 800                 805

atg agg tgt gga agt ggc atc ttc gtg cac aac gac gtg gaa gcc tgg      2561

Met Arg Cys Gly Ser Gly Ile Phe Val His Asn Asp Val Glu Ala Trp

            810                 815                 820

gtg gat agg tat aaa tat ttg cca gaa acg ccc aga tcc cta gca aag      2609

Val Asp Arg Tyr Lys Tyr Leu Pro Glu Thr Pro Arg Ser Leu Ala Lys

        825                 830                 835

atc gtc cac aaa gcg cac aag gaa ggc gtg tgc gga gtc aga tct gtc      2657

Ile Val His Lys Ala His Lys Glu Gly Val Cys Gly Val Arg Ser Val

    840                 845                 850

act aga ctg gag cat caa atg tgg gaa gcc gta cgg gat gaa ttg aac      2705

Thr Arg Leu Glu His Gln Met Trp Glu Ala Val Arg Asp Glu Leu Asn

855                 860                 865                 870

gtc ctg ctc aaa gag aat gca gtg gac ctc agt gtg gtt gtg aac aag      2753

Val Leu Leu Lys Glu Asn Ala Val Asp Leu Ser Val Val Val Asn Lys

                875                 880                 885

ccc gtg ggg aga tat cgc tca gcc cct aaa cgc ctg tcc atg acg caa      2801

Pro Val Gly Arg Tyr Arg Ser Ala Pro Lys Arg Leu Ser Met Thr Gln

            890                 895                 900

gag aag ttt gaa atg ggc tgg aaa gca tgg gga aaa agc att ctc ttt      2849

Glu Lys Phe Glu Met Gly Trp Lys Ala Trp Gly Lys Ser Ile Leu Phe

        905                 910                 915

gcc ccg gaa ttg gcc aac tcc aca ttt gtc gta gat gga cct gag aca      2897

Ala Pro Glu Leu Ala Asn Ser Thr Phe Val Val Asp Gly Pro Glu Thr

    920                 925                 930

aag gaa tgc cct gat gag cac aga gct tgg aac agc atg caa atc gaa      2945

Lys Glu Cys Pro Asp Glu His Arg Ala Trp Asn Ser Met Gln Ile Glu

935                 940                 945                 950

gac ttc ggc ttt ggc atc aca tca acc cgt gtg tgg ctg aag att aga      2993

Asp Phe Gly Phe Gly Ile Thr Ser Thr Arg Val Trp Leu Lys Ile Arg

                955                 960                 965

gag gag agc act gac gag tgt gat gga gcg atc ata ggt acg gct gtc      3041

Glu Glu Ser Thr Asp Glu Cys Asp Gly Ala Ile Ile Gly Thr Ala Val

            970                 975                 980

aaa gga cat gtg gca gtc cat agt gac ttg tcg tac tgg att gag agt      3089

Lys Gly His Val Ala Val His Ser Asp Leu Ser Tyr Trp Ile Glu Ser

        985                 990                 995

cgc tac  aac gac aca tgg aaa  ctt gag agg gca gtc  ttt gga gaa       3134

Arg Tyr  Asn Asp Thr Trp Lys  Leu Glu Arg Ala Val  Phe Gly Glu

    1000                1005                1010

gtt aaa  tcc tgc act tgg cca  gag aca cac acc cta  tgg gga gat       3179

Val Lys  Ser Cys Thr Trp Pro  Glu Thr His Thr Leu  Trp Gly Asp

    1015                1020                1025

ggt gtt  gag gaa agt gaa ctc  atc atc ccg cac acc  ata gcc gga       3224

Gly Val  Glu Glu Ser Glu Leu  Ile Ile Pro His Thr  Ile Ala Gly

    1030                1035                1040

cca aaa  agc aag cat aat cgg  agg gaa gga tat aag  aca caa aac       3269

Pro Lys  Ser Lys His Asn Arg  Arg Glu Gly Tyr Lys  Thr Gln Asn

    1045                1050                1055

cag gga  cct tgg gac gag aat  ggc ata gtc ttg gac  ttt gac tat       3314

Gln Gly  Pro Trp Asp Glu Asn  Gly Ile Val Leu Asp  Phe Asp Tyr

    1060                1065                1070

tgc cca  ggg aca aaa gtc acc  att aca gag gat tgt  ggc aag aga       3359

Cys Pro  Gly Thr Lys Val Thr  Ile Thr Glu Asp Cys  Gly Lys Arg

    1075                1080                1085

ggc cct  tcg gtc aga acc act  act gac agt gga aag  ttg atc act       3404

Gly Pro  Ser Val Arg Thr Thr  Thr Asp Ser Gly Lys  Leu Ile Thr

    1090                1095                1100

gac tgg tgc tgt cgc agt tgc tcc ctt ccg ccc cta cga ttc cgg          3449

Asp Trp Cys Cys Arg Ser Cys Ser Leu Pro Pro Leu Arg Phe Arg

    1105                1110                1115

aca gaa aat ggc tgc tgg tac gga atg gaa atc aga cct gtc agg          3494

Thr Glu Asn Gly Cys Trp Tyr Gly Met Glu Ile Arg Pro Val Arg

    1120                1125                1130

cat gat gaa aca aca ctc gtc aga tcg cag gtt gat gct ttt aat          3539

His Asp Glu Thr Thr Leu Val Arg Ser Gln Val Asp Ala Phe Asn

    1135                1140                1145

ggt gaa atg gtt gac cct ttt cag ctg ggc ctt ctg gtg atg ttt          3584

Gly Glu Met Val Asp Pro Phe Gln Leu Gly Leu Leu Val Met Phe

    1150                1155                1160

ctg gcc acc cag gag gtc ctt cgc aag agg tgg acg gcc aga ttg          3629

Leu Ala Thr Gln Glu Val Leu Arg Lys Arg Trp Thr Ala Arg Leu

    1165                1170                1175

acc att cct gcg gtt ttg ggg gcc cta ctt gtg ctg atg ctt ggg          3674

Thr Ile Pro Ala Val Leu Gly Ala Leu Leu Val Leu Met Leu Gly

    1180                1185                1190

ggc atc act tac act gat ttg gcg agg tat gtg gtg cta gtc gct          3719

Gly Ile Thr Tyr Thr Asp Leu Ala Arg Tyr Val Val Leu Val Ala

    1195                1200                1205

gcc tct ttc gca gag gcc aac agt gga gga gat gtc ctg cac ctt          3764

Ala Ser Phe Ala Glu Ala Asn Ser Gly Gly Asp Val Leu His Leu

    1210                1215                1220

gct ttg att gcc gtt ttc aag atc caa cca gca ttt tta gtg atg          3809

Ala Leu Ile Ala Val Phe Lys Ile Gln Pro Ala Phe Leu Val Met

    1225                1230                1235

aac atg ctt agc acg aga tgg acg aac caa gaa aac gtg gtt ctg          3854

Asn Met Leu Ser Thr Arg Trp Thr Asn Gln Glu Asn Val Val Leu

    1240                1245                1250

gtc cta ggg gct gcc ttt ttc caa ttg gcc tca gta gat ctg caa          3899

Val Leu Gly Ala Ala Phe Phe Gln Leu Ala Ser Val Asp Leu Gln

    1255                1260                1265

ata gga gtt cac gga atc ctg aat gcc gcc gct ata gca tgg atg          3944

Ile Gly Val His Gly Ile Leu Asn Ala Ala Ala Ile Ala Trp Met

    1270                1275                1280

att gtc cgg gcg atc acc ttc ccc aca acc tcc tcc gtc acc atg          3989

Ile Val Arg Ala Ile Thr Phe Pro Thr Thr Ser Ser Val Thr Met

    1285                1290                1295

cca gtc tta gcg ctt cta act ccg gga atg agg gct cta tac cta          4034

Pro Val Leu Ala Leu Leu Thr Pro Gly Met Arg Ala Leu Tyr Leu

    1300                1305                1310

gat act tac aga atc atc ctc ctc gtc ata ggg att tgc tct ctg          4079

Asp Thr Tyr Arg Ile Ile Leu Leu Val Ile Gly Ile Cys Ser Leu

    1315                1320                1325

ctg caa gag agg aaa aag acc atg gca aaa aag aaa gga gct gta          4124

Leu Gln Glu Arg Lys Lys Thr Met Ala Lys Lys Lys Gly Ala Val

    1330                1335                1340

ctc ttg ggc tta gcg ctc aca tcc act gga tgg ttt tcg ccc acc          4169

Leu Leu Gly Leu Ala Leu Thr Ser Thr Gly Trp Phe Ser Pro Thr

    1345                1350                1355

act ata gct gcc gga cta atg gtc tgc aac cca aac aag aag aga          4214

Thr Ile Ala Ala Gly Leu Met Val Cys Asn Pro Asn Lys Lys Arg

    1360                1365                1370

ggg tgg cca gct act gag ttt ttg tcg gca gtt gga ttg atg ttt          4259

Gly Trp Pro Ala Thr Glu Phe Leu Ser Ala Val Gly Leu Met Phe

    1375                1380                1385

gcc atc gta ggt ggt ttg gcg gag ttg gat att gaa tcc atg tca          4304

Ala Ile Val Gly Gly Leu Ala Glu Leu Asp Ile Glu Ser Met Ser

    1390                1395                1400

ata ccc ttc atg ctg gca ggt ctc atg gca gtg tcc tac gtg gtg          4349

Ile Pro Phe Met Leu Ala Gly Leu Met Ala Val Ser Tyr Val Val

    1405                1410                1415

tca gga aaa gca aca gat atg tgg ctt gaa cgg gct gcc gac atc          4394

Ser Gly Lys Ala Thr Asp Met Trp Leu Glu Arg Ala Ala Asp Ile

    1420                1425                1430

agc tgg gag atg gat gct gca atc aca gga agc agt cgg agg ctg          4439

Ser Trp Glu Met Asp Ala Ala Ile Thr Gly Ser Ser Arg Arg Leu

    1435                1440                1445

gat gtg aag cta gat gat gac gga gat ttt cac ttg att gac gat          4484

Asp Val Lys Leu Asp Asp Asp Gly Asp Phe His Leu Ile Asp Asp

    1450                1455                1460

ccc ggt gtt cca tgg aag gtc tgg gtc ctg cgc atg tct tgc att          4529

Pro Gly Val Pro Trp Lys Val Trp Val Leu Arg Met Ser Cys Ile

    1465                1470                1475

ggg tta gcc gcc ctc acg cct tgg gcc att gtt ccc gcc gct ttt          4574

Gly Leu Ala Ala Leu Thr Pro Trp Ala Ile Val Pro Ala Ala Phe

    1480                1485                1490

ggt tat tgg ctc act tta aaa aca aca aaa aga ggg ggc gtg ttt          4619

Gly Tyr Trp Leu Thr Leu Lys Thr Thr Lys Arg Gly Gly Val Phe

    1495                1500                1505

tgg gac acg cca tcc cca aaa cct tgc tca aaa gga gac acc act          4664

Trp Asp Thr Pro Ser Pro Lys Pro Cys Ser Lys Gly Asp Thr Thr

    1510                1515                1520

aca gga gtt tac cgc att atg gct aga ggg att ctt ggc act tac          4709

Thr Gly Val Tyr Arg Ile Met Ala Arg Gly Ile Leu Gly Thr Tyr

    1525                1530                1535

cag gcc ggc gtc gga gtc atg tac gag aat gtt ttc cac aca cta          4754

Gln Ala Gly Val Gly Val Met Tyr Glu Asn Val Phe His Thr Leu

    1540                1545                1550

tgg cac aca act aga gga gca gct att atg agt gga gaa gga aaa          4799

Trp His Thr Thr Arg Gly Ala Ala Ile Met Ser Gly Glu Gly Lys

    1555                1560                1565

ttg acg cca tac tgg ggt agt gtg aaa gaa gac cgc ata gct tac          4844

Leu Thr Pro Tyr Trp Gly Ser Val Lys Glu Asp Arg Ile Ala Tyr

    1570                1575                1580

gga ggc cca tgg agg ttt gat cga aaa tgg aat gga act gat gac          4889

Gly Gly Pro Trp Arg Phe Asp Arg Lys Trp Asn Gly Thr Asp Asp

    1585                1590                1595

gtg caa gtg atc gtg gta gaa ccg ggg aag gct gca gta aac atc          4934

Val Gln Val Ile Val Val Glu Pro Gly Lys Ala Ala Val Asn Ile

    1600                1605                1610

cag aca aaa cca gga gtg ttt cgg act ccc ttc ggg gag gtt ggg          4979

Gln Thr Lys Pro Gly Val Phe Arg Thr Pro Phe Gly Glu Val Gly

    1615                1620                1625

gct gtt agt ctg gat tat ccg cga gga aca tcc ggc tca ccc att          5024

Ala Val Ser Leu Asp Tyr Pro Arg Gly Thr Ser Gly Ser Pro Ile

    1630                1635                1640

ctg gat tcc aat gga gac atc ata ggc ctg tac ggc aat gga gtt          5069

Leu Asp Ser Asn Gly Asp Ile Ile Gly Leu Tyr Gly Asn Gly Val

    1645                1650                1655

gag ctt ggc gat ggc tca tac gtc agc gcc atc gtg cag ggt gac          5114

Glu Leu Gly Asp Gly Ser Tyr Val Ser Ala Ile Val Gln Gly Asp

    1660                1665                1670

cgt cag gag gaa cca gtc cca gaa gct tac acc cca aac atg ttg          5159

Arg Gln Glu Glu Pro Val Pro Glu Ala Tyr Thr Pro Asn Met Leu

    1675                1680                1685

aga aag aga cag atg acc gta cta gat ttg cac cct ggt tca ggg          5204

Arg Lys Arg Gln Met Thr Val Leu Asp Leu His Pro Gly Ser Gly

    1690                1695                1700

aaa acc aag aaa att ctg cca caa ata att aag gac gct att cag          5249

Lys Thr Lys Lys Ile Leu Pro Gln Ile Ile Lys Asp Ala Ile Gln

    1705                1710                1715

cag cgc cta aga aca gct gtg ttg gca ccg acg cgg gtg gta gca          5294

Gln Arg Leu Arg Thr Ala Val Leu Ala Pro Thr Arg Val Val Ala

    1720                1725                1730

gca gaa atg gca gaa gct ttg aga ggg ctc cca gta cga tat caa          5339

Ala Glu Met Ala Glu Ala Leu Arg Gly Leu Pro Val Arg Tyr Gln

    1735                1740                1745

act tca gca gtg cag aga gag cac caa ggg aat gaa ata gtg gat          5384

Thr Ser Ala Val Gln Arg Glu His Gln Gly Asn Glu Ile Val Asp

    1750                1755                1760

gtg atg tgc cac gcc act ctg acc cat aga ctg atg tca ccg aac         5429

Val Met Cys His Ala Thr Leu Thr His Arg Leu Met Ser Pro Asn

    1765                1770                1775

aga gtg ccc aac tac aac cta ttt gtc atg gat gaa gct cat ttc         5474

Arg Val Pro Asn Tyr Asn Leu Phe Val Met Asp Glu Ala His Phe

    1780                1785                1790

acc gac cca gcc agt ata gcc gca cga gga tac att gct acc aag         5519

Thr Asp Pro Ala Ser Ile Ala Ala Arg Gly Tyr Ile Ala Thr Lys

    1795                1800                1805

gtg gaa tta ggg gag gca gca gcc atc ttt atg aca gcg acc ccg           5564

Val Glu Leu Gly Glu Ala Ala Ala Ile Phe Met Thr Ala Thr Pro

    1810                1815                1820

cct gga acc acg gat cct ttt cct gac tca aat gcc cca atc cat           5609

Pro Gly Thr Thr Asp Pro Phe Pro Asp Ser Asn Ala Pro Ile His

    1825                1830                1835

gat ttg caa gat gag ata cca gac agg gcg tgg agc agt gga tac           5654

Asp Leu Gln Asp Glu Ile Pro Asp Arg Ala Trp Ser Ser Gly Tyr

    1840                1845                1850

gaa tgg atc aca gaa tat gcg gga aaa acc gtg tgg ttt gtg gca           5699

Glu Trp Ile Thr Glu Tyr Ala Gly Lys Thr Val Trp Phe Val Ala

    1855                1860                1865

agc gtg aaa atg ggg aac gag att gca atg tgc ctc caa aga gcg           5744

Ser Val Lys Met Gly Asn Glu Ile Ala Met Cys Leu Gln Arg Ala

    1870                1875                1880

ggg aaa aag gtc atc caa ctc aac cgc aag tcc tat gac aca gaa           5789

Gly Lys Lys Val Ile Gln Leu Asn Arg Lys Ser Tyr Asp Thr Glu

    1885                1890                1895

tac cca aaa tgt aag aat gga gac tgg gat ttt gtc atc acc act          5834

Tyr Pro Lys Cys Lys Asn Gly Asp Trp Asp Phe Val Ile Thr Thr

    1900                1905                1910

gac att tct gaa atg ggg gcc aac ttc ggt gcg agc agg gtc atc          5879

Asp Ile Ser Glu Met Gly Ala Asn Phe Gly Ala Ser Arg Val Ile

    1915                1920                1925

gac tgt aga aag agc gtg aag ccc acc atc tta gaa gag gga gaa          5924

Asp Cys Arg Lys Ser Val Lys Pro Thr Ile Leu Glu Glu Gly Glu

    1930                1935                1940

ggc aga gtc atc ctc gga aac cca tcg ccc ata acc agt gca agc          5969

Gly Arg Val Ile Leu Gly Asn Pro Ser Pro Ile Thr Ser Ala Ser

    1945                1950                1955

gca gct caa cgg agg ggc aga gta ggc aga aac cct aac cag gtt          6014

Ala Ala Gln Arg Arg Gly Arg Val Gly Arg Asn Pro Asn Gln Val

    1960                1965                1970

gga gat gaa tac cac tat ggg ggg gcc acc agt gaa gat gac agt          6059

Gly Asp Glu Tyr His Tyr Gly Gly Ala Thr Ser Glu Asp Asp Ser

    1975                1980                1985

aac cta gcc cat tgg aca gag gca aag atc atg tta gat aac ata          6104

Asn Leu Ala His Trp Thr Glu Ala Lys Ile Met Leu Asp Asn Ile

    1990                1995                2000

cac atg ccc aat gga ctg gtg gcc cag ctc tat gga cca gag agg          6149

His Met Pro Asn Gly Leu Val Ala Gln Leu Tyr Gly Pro Glu Arg

    2005                2010                2015

gaa aag gcc ttc aca atg gat ggc gaa tac cgt ctc aga ggt gaa          6194

Glu Lys Ala Phe Thr Met Asp Gly Glu Tyr Arg Leu Arg Gly Glu

    2020                2025                2030

gaa aag aaa aac ttc tta gag ctg ctt agg acg gct gac ctc ccg          6239

Glu Lys Lys Asn Phe Leu Glu Leu Leu Arg Thr Ala Asp Leu Pro

    2035                2040                2045

gtg tgg ctg gcc tac aag gtg gcg tcc aat ggc atc cag tac acc          6284

Val Trp Leu Ala Tyr Lys Val Ala Ser Asn Gly Ile Gln Tyr Thr

    2050                2055                2060

gat aga aag tgg tgt ttt gat ggg ccg cgt acg aat gcc ata ctg          6329

Asp Arg Lys Trp Cys Phe Asp Gly Pro Arg Thr Asn Ala Ile Leu

    2065                2070                2075

gag gac aac acc gag gta gag ata gtc acc cgg atg ggt gag agg          6374

Glu Asp Asn Thr Glu Val Glu Ile Val Thr Arg Met Gly Glu Arg

    2080                2085                2090

aaa atc ctc aag ccg aga tgg ctt gat gca aga gtt tat gca gat          6419

Lys Ile Leu Lys Pro Arg Trp Leu Asp Ala Arg Val Tyr Ala Asp

    2095                2100                2105

cac caa gct ctc aag tgg ttc aaa gac ttc gca gca gga aag aga          6464

His Gln Ala Leu Lys Trp Phe Lys Asp Phe Ala Ala Gly Lys Arg

    2110                2115                2120

tca gcc gtt agc ttc ata gag gtg ctc ggt cgt atg cct gag cat          6509

Ser Ala Val Ser Phe Ile Glu Val Leu Gly Arg Met Pro Glu His

    2125                2130                2135

ttc atg gga aag acg cgg gaa gct tta gac acc atg tac ttg gtt          6554

Phe Met Gly Lys Thr Arg Glu Ala Leu Asp Thr Met Tyr Leu Val

    2140                2145                2150

gca acg gct gag aaa ggt ggg aaa gca cac cga atg gct ctc gaa          6599

Ala Thr Ala Glu Lys Gly Gly Lys Ala His Arg Met Ala Leu Glu

    2155                2160                2165

gag ctg cca gat gca ctg gaa acc att aca ctt att gtt gct atc          6644

Glu Leu Pro Asp Ala Leu Glu Thr Ile Thr Leu Ile Val Ala Ile

    2170                2175                2180

act gtg atg aca gga gga ttc ttt cta ctc atg atg cag cga aag          6689

Thr Val Met Thr Gly Gly Phe Phe Leu Leu Met Met Gln Arg Lys

    2185                2190                2195

ggt ata ggg aag atg ggt ctt gga gct cta gtg ctc acg cta gct          6734

Gly Ile Gly Lys Met Gly Leu Gly Ala Leu Val Leu Thr Leu Ala

    2200                2205                2210

acc ttc ttc ctg tgg gcg gca gag gtt ccc gga aca aaa ata gca          6779

Thr Phe Phe Leu Trp Ala Ala Glu Val Pro Gly Thr Lys Ile Ala

    2215                2220                2225

ggg acc ctg ctg atc gcc ctg ctg ctt atg gtg gtt ctc atc cca          6824

Gly Thr Leu Leu Ile Ala Leu Leu Leu Met Val Val Leu Ile Pro

    2230                2235                2240

gaa ccg gaa aag cag agg tca caa aca gat aat caa ctg gcg gtg          6869

Glu Pro Glu Lys Gln Arg Ser Gln Thr Asp Asn Gln Leu Ala Val

    2245                2250                2255

ttt ctc atc tgt gtc ttg acc gtg gtt gga gtg gtg gca gca aac          6914

Phe Leu Ile Cys Val Leu Thr Val Val Gly Val Val Ala Ala Asn

    2260                2265                2270

gag tac ggg atg cta gaa aaa acc aaa gca gac ctc aag agc atg          6959

Glu Tyr Gly Met Leu Glu Lys Thr Lys Ala Asp Leu Lys Ser Met

    2275                2280                2285

ttt ggc gga aag acg cag gca tca gga ctg act gga tta cca agc          7004

Phe Gly Gly Lys Thr Gln Ala Ser Gly Leu Thr Gly Leu Pro Ser

    2290                2295                2300

atg gca ctg gac ctg cgt cca gcc aca gct tgg gca ctg tat ggg          7049

Met Ala Leu Asp Leu Arg Pro Ala Thr Ala Trp Ala Leu Tyr Gly

    2305                2310                2315

ggg agc aca gtc gtg cta acc cct ctt ctg aag cac ctg atc acg          7094

Gly Ser Thr Val Val Leu Thr Pro Leu Leu Lys His Leu Ile Thr

    2320                2325                2330

tcg gaa tac gtc acc aca tcg cta gcc tca att aac tca caa gct          7139

Ser Glu Tyr Val Thr Thr Ser Leu Ala Ser Ile Asn Ser Gln Ala

    2335                2340                2345

ggc tca tta ttt gtc ttg cca cga ggc gtg cct ttt acc gac cta          7184

Gly Ser Leu Phe Val Leu Pro Arg Gly Val Pro Phe Thr Asp Leu

    2350                2355                2360

gac ttg acc gtt ggc ctc gtc ttc ctt ggc tgt tgg ggt caa atc          7229

Asp Leu Thr Val Gly Leu Val Phe Leu Gly Cys Trp Gly Gln Ile

    2365                2370                2375

acc ctc aca acg ttt ttg aca gcc atg gtt ctg gcg aca ctt cac          7274

Thr Leu Thr Thr Phe Leu Thr Ala Met Val Leu Ala Thr Leu His

    2380                2385                2390

tat ggg tac atg ctc cct gga tgg caa gca gaa gca ctc agg gct          7319

Tyr Gly Tyr Met Leu Pro Gly Trp Gln Ala Glu Ala Leu Arg Ala

    2395                2400                2405

gcc cag aga agg aca gcg gct gga ata atg aag aat gcc gtt gtt          7364

Ala Gln Arg Arg Thr Ala Ala Gly Ile Met Lys Asn Ala Val Val

    2410                2415                2420

gac gga atg gtc gcc act gat gtg cct gaa ctg gaa agg acc act          7409

Asp Gly Met Val Ala Thr Asp Val Pro Glu Leu Glu Arg Thr Thr

    2425                2430                2435

cct ctg atg caa aag aaa gtc gga cag gtg ctc ctc ata ggg gta          7454

Pro Leu Met Gln Lys Lys Val Gly Gln Val Leu Leu Ile Gly Val

    2440                2445                2450

agc gtg gca gcg ttc ctc gtc aac ccc aaa atc acc act gtg aga          7499

Ser Val Ala Ala Phe Leu Val Asn Pro Lys Ile Thr Thr Val Arg

    2455                2460                2465

gaa gca ggg gtg ttg gtg aca gcg gct acg ctc tct ttg tgg gac          7544

Glu Ala Gly Val Leu Val Thr Ala Ala Thr Leu Ser Leu Trp Asp

    2470                2475                2480

aac gga gcc agt gcc gtt tgg aat tcc acc act gcc acg gga ctc          7589

Asn Gly Ala Ser Ala Val Trp Asn Ser Thr Thr Ala Thr Gly Leu

    2485                2490                2495

tgc cat gta atg cga ggt agc tac ctg gct gga ggc tcc att gct          7634

Cys His Val Met Arg Gly Ser Tyr Leu Ala Gly Gly Ser Ile Ala

    2500                2505                2510

tgg act ctc atc aag aac gct gac aag ccc tcc tta aaa agg gga          7679

Trp Thr Leu Ile Lys Asn Ala Asp Lys Pro Ser Leu Lys Arg Gly

    2515                2520                2525

agg cct ggg ggc agg acg cta ggg gag cag tgg aag gaa aaa cta          7724

Arg Pro Gly Gly Arg Thr Leu Gly Glu Gln Trp Lys Glu Lys Leu

2530                2535                2540

aat gcc atg agc aga gaa gag ttt ttt aaa tac cgg aga gag gcc          7769

Asn Ala Met Ser Arg Glu Glu Phe Phe Lys Tyr Arg Arg Glu Ala

    2545                2550                2555

ata atc gag gtg gac cgc act gaa gca cgc agg gct aga cgt gaa          7814

Ile Ile Glu Val Asp Arg Thr Glu Ala Arg Arg Ala Arg Arg Glu

    2560                2565                2570

aat aac ata gtg gga gga cat ccg gtt tcg cga ggc tca gca aaa          7859

Asn Asn Ile Val Gly Gly His Pro Val Ser Arg Gly Ser Ala Lys

    2575                2580                2585

ctc cgt tgg ctc gta gag aaa gga ttt gtc tcg cca ata gga aaa          7904

Leu Arg Trp Leu Val Glu Lys Gly Phe Val Ser Pro Ile Gly Lys

    2590                2595                2600

gtc att gat cta ggg tgt ggg cgt gga gga tgg agc tac tac gca          7949

Val Ile Asp Leu Gly Cys Gly Arg Gly Gly Trp Ser Tyr Tyr Ala

    2605                2610                2615

gca acc ctg aag aag gtc cag gaa gtc aga gga tac acg aaa ggt          7994

Ala Thr Leu Lys Lys Val Gln Glu Val Arg Gly Tyr Thr Lys Gly

    2620                2625                2630

ggg gcg gga cat gaa gaa ccg atg ctc atg cag agc tac ggc tgg          8039

Gly Ala Gly His Glu Glu Pro Met Leu Met Gln Ser Tyr Gly Trp

    2635                2640                2645

aac ctg gtc tcc atg aag agt gga gtg gac gtg ttt tac aaa cct          8084

Asn Leu Val Ser Met Lys Ser Gly Val Asp Val Phe Tyr Lys Pro

    2650                2655                2660

tca gag ccc agt gac act ctg ttc tgc gac ata ggg gaa tcc tcc          8129

Ser Glu Pro Ser Asp Thr Leu Phe Cys Asp Ile Gly Glu Ser Ser

    2665                2670                2675

ccg agt cca gaa gta gaa gaa caa cgc aca cta cgc gtc cta gag          8174

Pro Ser Pro Glu Val Glu Glu Gln Arg Thr Leu Arg Val Leu Glu

    2680                2685                2690

atg aca tct gac tgg ttg cac cga gga cct aga gag ttc tgt ata          8219

Met Thr Ser Asp Trp Leu His Arg Gly Pro Arg Glu Phe Cys Ile

    2695                2700                2705

aaa gtt ctt tgc ccc tac atg ccc aag gtt ata gaa aaa atg gaa          8264

Lys Val Leu Cys Pro Tyr Met Pro Lys Val Ile Glu Lys Met Glu

    2710                2715                2720

gtc ctg caa cgc cgc ttc gga ggt ggg cta gtg cgt ctt ccc ctg          8309

Val Leu Gln Arg Arg Phe Gly Gly Gly Leu Val Arg Leu Pro Leu

    2725                2730                2735

tcc cgc aac tcc aat cac gag atg tac tgg gtt agt gga gcc gct          8354

Ser Arg Asn Ser Asn His Glu Met Tyr Trp Val Ser Gly Ala Ala

    2740                2745                2750

ggc aat gtg gtg cac gct gtg aac atg acc agc cag gta cta ctg          8399

Gly Asn Val Val His Ala Val Asn Met Thr Ser Gln Val Leu Leu

    2755                2760                2765

ggg cga atg gat cgc aca gtg tgg aga ggg cca aag tat gag gaa          8444

Gly Arg Met Asp Arg Thr Val Trp Arg Gly Pro Lys Tyr Glu Glu

    2770                2775                2780

gat gtc aac tta ggg agc gga aca aga gcc gtg gga aag gga gaa          8489

Asp Val Asn Leu Gly Ser Gly Thr Arg Ala Val Gly Lys Gly Glu

    2785                2790                2795

gtc cat agc aat cag gag aaa atc aag aag aga atc cag aag ctt          8534

Val His Ser Asn Gln Glu Lys Ile Lys Lys Arg Ile Gln Lys Leu

    2800                2805                2810

aaa gaa gaa ttc gcc aca acg tgg cac aaa gac cct gag cat cca          8579

Lys Glu Glu Phe Ala Thr Thr Trp His Lys Asp Pro Glu His Pro

    2815                2820                2825

tac cgc act tgg aca tac cac gga agc tat gaa gtg aag gct act          8624

Tyr Arg Thr Trp Thr Tyr His Gly Ser Tyr Glu Val Lys Ala Thr

    2830                2835                2840

ggc tca gct agt tct ctc gtc aac gga gtg gtg aag ctc atg agc          8669

Gly Ser Ala Ser Ser Leu Val Asn Gly Val Val Lys Leu Met Ser

    2845                2850                2855

aaa cct tgg gac gcc att gcc aac gtc acc acc atg gcc atg act          8714

Lys Pro Trp Asp Ala Ile Ala Asn Val Thr Thr Met Ala Met Thr

    2860                2865                2870

gac acc acc cct ttt gga cag caa aga gtt ttc aag gag aaa gtt          8759

Asp Thr Thr Pro Phe Gly Gln Gln Arg Val Phe Lys Glu Lys Val

    2875                2880                2885

gac acg aag gct cct gag cca cca gct gga gct aag gaa gtg ctc          8804

Asp Thr Lys Ala Pro Glu Pro Pro Ala Gly Ala Lys Glu Val Leu

    2890                2895                2900

aac gag acc acc aac tgg ctg tgg gcc tac ttg tca cgg gaa aaa          8849

Asn Glu Thr Thr Asn Trp Leu Trp Ala Tyr Leu Ser Arg Glu Lys

    2905                2910                2915

aga ccc cgc ttg tgc acc aag gaa gaa ttc ata aag aaa gtc aat          8894

Arg Pro Arg Leu Cys Thr Lys Glu Glu Phe Ile Lys Lys Val Asn

    2920                2925                2930

agc aac gcg gct ctt gga gca gtg ttc gct gaa cag aat caa tgg          8939

Ser Asn Ala Ala Leu Gly Ala Val Phe Ala Glu Gln Asn Gln Trp

    2935                2940                2945

agc acg gcg cgt gag gct gtg gat gac ccg cgg ttt tgg gag atg          8984

Ser Thr Ala Arg Glu Ala Val Asp Asp Pro Arg Phe Trp Glu Met

    2950                2955                2960

gtt gat gaa gag agg gaa aac cat ctg cga gga gag tgt cac aca          9029

Val Asp Glu Glu Arg Glu Asn His Leu Arg Gly Glu Cys His Thr

    2965                2970                2975

tgt atc tat aac atg atg gga aaa aga gag aag aag cct gga gag          9074

Cys Ile Tyr Asn Met Met Gly Lys Arg Glu Lys Lys Pro Gly Glu

    2980                2985                2990

ttt gga aaa gct aaa gga agc agg gcc att tgg ttc atg tgg ctt          9119

Phe Gly Lys Ala Lys Gly Ser Arg Ala Ile Trp Phe Met Trp Leu

    2995                3000                3005

gga gca cgg tat cta gag ttt gaa gct ttg ggg ttc ctg aat gaa          9164

Gly Ala Arg Tyr Leu Glu Phe Glu Ala Leu Gly Phe Leu Asn Glu

    3010                3015                3020

gat cat tgg ctg agc cga gag aat tca gga ggt gga gtg gaa ggc          9209

Asp His Trp Leu Ser Arg Glu Asn Ser Gly Gly Gly Val Glu Gly

    3025                3030                3035

tca ggc gtc caa aag ctg gga tac atc ctc cgt gat ata gca gga          9254

Ser Gly Val Gln Lys Leu Gly Tyr Ile Leu Arg Asp Ile Ala Gly

    3040                3045                3050

aag caa gga gga aaa atg tac gct gat gat acc gcc ggg tgg gac          9299

Lys Gln Gly Gly Lys Met Tyr Ala Asp Asp Thr Ala Gly Trp Asp

    3055                3060                3065

act aga att acc aga act gat tta gaa aat gaa gcc aag gtg ctg          9344

Thr Arg Ile Thr Arg Thr Asp Leu Glu Asn Glu Ala Lys Val Leu

    3070                3075                3080

gag ctt cta gac ggt gaa cac cgc atg ctc gcc cga gcc ata att          9389

Glu Leu Leu Asp Gly Glu His Arg Met Leu Ala Arg Ala Ile Ile

    3085                3090                3095

gaa ttg act tac agg cac aaa gtg gtc aag gtc atg aga cct gca          9434

Glu Leu Thr Tyr Arg His Lys Val Val Lys Val Met Arg Pro Ala

    3100                3105                3110

gca gaa gga aag acc gtg atg gac gtg ata tca agg gag gat caa          9479

Ala Glu Gly Lys Thr Val Met Asp Val Ile Ser Arg Glu Asp Gln

    3115                3120                3125

agg ggg agt gga cag gtg gtc act tat gct ctt aac act ttc acg          9524

Arg Gly Ser Gly Gln Val Val Thr Tyr Ala Leu Asn Thr Phe Thr

    3130                3135                3140

aac atc gct gtc cag ctc gtc agg ctg atg gag gct gag ggg gtc          9569

Asn Ile Ala Val Gln Leu Val Arg Leu Met Glu Ala Glu Gly Val

    3145                3150                3155

att gga cca caa cac ttg gaa cag cta cct aga aaa aac aag ata          9614

Ile Gly Pro Gln His Leu Glu Gln Leu Pro Arg Lys Asn LysIle

    3160                3165                3170

gct gtc agg acc tgg ctc ttt gag aat gga gag gag aga gtg tcc          9659

Ala Val Arg Thr Trp Leu Phe Glu Asn Gly Glu Glu Arg Val Ser

    3175                3180                3185

agg atg gct atc agc gga gac gac tgt gtc gtc aag ccg ctg gac          9704

Arg Met Ala Ile Ser Gly Asp Asp Cys Val Val Lys Pro Leu Asp

    3190                3195                3200

gac aga ttc gcc acg gcc ctc cac ttc ctc aac gca atg tca aag          9749

Asp Arg Phe Ala Thr Ala Leu His Phe Leu Asn Ala Met Ser Lys

    3205                3210                3215

gtc aga aaa gac atc cag gaa tgg aag cct tca cat ggc tgg cac          9794

Val Arg Lys Asp Ile Gln Glu Trp Lys Pro Ser His Gly Trp His

    3220                3225                3230

gat tgg cag caa gtt ccc ttc tgc tct aac cat ttt cag gag att          9839

Asp Trp Gln Gln Val Pro Phe Cys Ser Asn His Phe Gln Glu Ile

    3235                3240                3245

gtg atg aaa gat gga agg agt ata gtt gtc ccg tgc aga gga cag          9884

Val Met Lys Asp Gly Arg Ser Ile Val Val Pro Cys Arg Gly Gln

    3250                3255                3260

gat gag ctg ata ggc agg gct cgc atc tcc cca gga gct gga tgg          9929

Asp Glu Leu Ile Gly Arg Ala Arg Ile Ser Pro Gly Ala Gly Trp

    3265                3270                3275

aat gtg aag gac aca gct tgt ctg gcc aaa gca tat gca cag atg          9974

Asn Val Lys Asp Thr Ala Cys Leu Ala Lys Ala Tyr Ala Gln Met

    3280                3285                3290

tgg cta ctc cta tac ttc cat cgt agg gac ttg cgt ctc atg gca         10019

Trp Leu Leu Leu Tyr Phe His Arg Arg Asp Leu Arg Leu Met Ala

    3295                3300                3305

aat gcg att tgc tca gca gtg cca gtg gat tgg gtg ccc acg ggc         10064

Asn Ala Ile Cys Ser Ala Val Pro Val Asp Trp Val Pro Thr Gly

    3310                3315                3320

agg aca tcc tgg tcg ata cac tcg aaa gga gag tgg atg acc aca         10109

Arg Thr Ser Trp Ser Ile His Ser Lys Gly Glu Trp Met Thr Thr

    3325                3330                3335

gaa gac atg ctg cag gtc tgg aac aga gtc tgg att gaa gaa aat         10154

Glu Asp Met Leu Gln Val Trp Asn Arg Val Trp Ile Glu Glu Asn

    3340                3345                3350

gaa tgg atg gtg gac aag act cca ata aca agc tgg aca gac gtt         10199

Glu Trp Met Val Asp Lys Thr Pro Ile Thr Ser Trp Thr Asp Val

    3355                3360                3365

ccg tat gtg gga aag cgg gag gac atc tgg tgt ggc aac ctc atc         10244

Pro Tyr Val Gly Lys Arg Glu Asp Ile Trp Cys Gly Asn Leu Ile

    3370                3375                3380

gga acg cga tcc aga gca acc tgg gct gag aac atc tac gcg gcg         10289

Gly Thr Arg Ser Arg Ala Thr Trp Ala Glu Asn Ile Tyr Ala Ala

    3385                3390                3395

ata aac cag gtt aga gct gtc att ggg aaa gaa aat tat gtt gac         10334

Ile Asn Gln Val Arg Ala Val Ile Gly Lys Glu Asn Tyr Val Asp

    3400                3405                3410

tac atg acc tca ctc agg aga tac gaa gat gtc ttg atc cag gaa          10379

Tyr Met Thr Ser Leu Arg Arg Tyr Glu Asp Val Leu Ile Gln Glu

    3415                3420                3425

gac agg gtc atc tagtgtgatt taaggtggaa aagcagatta tgtaaataat          10431

Asp Arg Val Ile

    3430

gtaaatgaga aaatgcatgc atatggagtc aggccagcaa aagctgccac cggatactgg    10491

gtagacggtg ctgtctgcgt cccagtccca ggaggactgg gttaacaaat ctgacaacag    10551

aaagtgagaa aaccctcaga accgtctcgg aagcaggtcc ctgctcactg gaagttgaag    10611

gaccaacgtc aggccacaaa tttgtgccac tccgctgagg agtgcggcct gcgcagcccc    10671

aggaggactg ggttaccaaa gccgttgagc ccccacggcc caagcctcgt ctaggatgca    10731

atagacgagg tgtaaggact agaggttaga ggagaccccg tggaaacaac aacatgcggc    10791

ccaagccccc tccaagctgt agaggaggtg gaaggactag aggttagagg agaccccgca    10851

tttgcatcaa acagcatatt gacacctggg aatagactgg gagatcttct gctctatctc    10911

aacatcagct actaggcaca gagcgccgaa gtatgtagct ggtggtgagg aagaacacag    10971

gatct                                                                10976

<210>2

<211>3432

<212>PRT

<213>日本脑炎病毒

<400>2

Met Thr Lys Lys Pro Gly Gly Pro Gly Lys Asn Arg Ala Ile Asn Met

1               5                   10                  15

Leu Lys Arg Gly Leu Pro Arg Val Phe Pro Leu Val Gly Val Lys Arg

            20                  25                  30

Val Val Met Ser Leu Leu Asp Gly Arg Gly Pro Val Arg Phe Val Leu

        35                  40                  45

Ala Leu Ile Thr Phe Phe Lys Phe Thr Ala Leu Ala Pro Thr Lys Ala

    50                  55                  60

Leu Leu Gly Arg Trp Lys Ala Val Glu Lys Ser Val Ala Met Lys His

65                  70                  75                  80

Leu Thr Ser Phe Lys Arg Glu Leu Gly Thr Leu Ile Asp Ala Val Asn

                85                  90                  95

Lys Arg Gly Arg Lys Gln Asn Lys Arg Gly Gly Asn Glu Gly Ser Ile

            100                 105                 110

Met Trp Leu Ala Ser Leu Ala Val Val Ile Ala Cys Ala Gly Ala Ile

        115                 120                 125

Lys Leu Ser Asn Phe Gln Gly Lys Leu Leu Met Thr Ile Asn Asn Thr

    130                 135                 140

Asp Ile Ala Asp Val Ile Val Ile Pro Thr Ser Lys Gly Glu Asn Arg

145                 150                 155                 160

Cys Trp Val Arg Ala Ile Asp Val Gly Tyr Met Cys Glu Asp Thr Ile

                165                 170                 175

Thr Tyr Glu Cys Pro Lys Leu Ala Met Gly Asn Asp Pro Glu Asp Val

            180                 185                 190

Asp Cys Trp Cys Asp Asn Gln Glu Val Tyr Val Gln Tyr Gly Arg Cys

        195                 200                 205

Thr Arg Thr Arg His Ser Lys Arg Ser Arg Arg Ser Val Ser Val Gln

    210                 215                 220

Thr His Gly Glu Ser Ser Leu Val Asn Lys Lys Glu Ala Trp Leu Asp

225                 230                 235                 240

Ser Thr Lys Ala Thr Arg Tyr Leu Met Lys Thr Glu Asn Trp Ile Ile

                245                 250                 255

Arg Asn Pro Gly Tyr Ala Phe Leu Ala Ala Val Leu Gly Trp Met Leu

            260                 265                 270

Gly Ser Thr Asn Gly Gln Arg Val Val Phe Thr Ile Leu Leu Leu Leu

        275                 280                 285

Val Ala Pro Ala Tyr Ser Phe Asn Cys Leu Gly Met Gly Asn Arg Asp

    290                 295                 300

Phe Ile Glu Gly Ala Ser Gly Ala Thr Trp Val Asp Leu Val Leu Glu

305                 310                 315                 320

Gly Asp Ser Cys Leu Thr Ile Met Ala Asn Asp Lys Pro Thr Leu Asp

                325                 330                 335

Val Arg Met Ile Asn Ile Glu Ala Ser Gln Leu Ala Glu Val Arg Ser

            340                 345                 350

Tyr Cys Tyr His Ala Ser Val Thr Asp Ile Ser Thr Val Ala Arg Cys

        355                 360                 365

Pro Thr Thr Gly Glu Ala His Asn Glu Lys Arg Ala Asp Ser Ser Tyr

    370                 375                 380

Val Cys Lys Gln Gly Phe Thr Asp Arg Gly Trp Gly Asn Gly Cys Gly

385                 390                 395                 400

Leu Phe Gly Lys Gly Ser Ile Asp Thr Cys Ala Lys Phe Ser Cys Thr

                405                 410                 415

Ser Lys Ala Ile Gly Arg Thr Ile Gln Pro Glu Asn Ile Lys Tyr Lys

            420                 425                 430

Val Gly Ile Phe Val His Gly Ala Thr Thr Ser Glu Asn His Gly Asn

        435                 440                 445

Tyr Ser Ala Gln Val Gly Ala Ser Gln Ala Ala Lys Phe Thr Val Thr

    450                 455                 460

Pro Asn Ala Pro Ser Ile Thr Leu Lys Leu Gly Asp Tyr Gly Glu Val

465                 470                 475                 480

Thr Leu Asp Cys Glu Pro Arg Ser Gly Leu Asn Thr Glu Ala Phe Tyr

                485                 490                 495

Val Met Thr Val Gly Ser Lys Ser Phe Leu Val His Arg Glu Trp Phe

            500                 505                 510

His Asp Leu Ala Leu Pro Trp Thr Ser Pro Ser Ser Thr Ala Trp Arg

        515                 520                 525

Asn Arg Glu Leu Leu Met Glu Phe Glu Glu Ala His Ala Thr Lys Gln

    530                 535                 540

Ser Val Val Ala Leu Gly Ser Gln Glu Gly Gly Leu His Gln Ala Leu

545                 550                 555                 560

Ala Gly Ala Ile Val Val Glu Tyr Ser Ser Ser Val Lys Leu Thr Ser

                565                 570                 575

Gly His Leu Lys Cys Arg Leu Lys Met Asp Lys Leu Ala Leu Lys Gly

            580                 585                 590

Thr Thr Tyr Gly Met Cys Thr Glu Lys Phe Ser Phe Ala Lys Asn Pro

        595                 600                 605

Ala Asp Thr Gly His Gly Thr Val Val Ile Glu Leu Ser Tyr Ser Gly

    610                 615                 620

Ser Asp Gly Pro Cys Lys Ile Pro Ile Val Ser Val Ala Ser Leu Asn

625                 630                 635                 640

Asp Met Thr Pro Val Gly Arg Leu Val Thr Val Asn Pro Phe Val Ala

                645                 650                 655

Thr Ser Ser Ala Asn Ser Lys Val Leu Val Glu Met Glu Pro Pro Phe

            660                 665                 670

Gly Asp Ser Tyr Ile Val Val Gly Arg Gly Asp Lys Gln Ile Asn His

        675                 680                 685

His Trp His Lys Ala Gly Ser Thr Leu Gly Lys Ala Phe Ser Thr Thr

    690                 695                 700

Leu Lys Gly Ala Gln Arg Leu Ala Ala Leu Gly Asp Thr Ala Trp Asp

705                 710                 715                 720

Phe Gly Ser Ile Gly Gly Val Phe Asn Ser Ile Gly Lys Ala Val His

                725                 730                 735

Gln Val Phe Gly Gly Ala Phe Arg Thr Leu Phe Gly Gly Met Ser Trp

            740                 745                 750

Ile Thr Gln Gly Leu Met Gly Ala Leu Leu Leu Trp Met Gly Val Asn

        755                 760                 765

Ala Arg Asp Arg Ser Ile Ala Leu Ala Phe Leu Ala Thr Gly Gly Val

    770                 775                 780

Leu Val Phe Leu Ala Thr Asn Val His Ala Asp Thr Gly Cys Ala Ile

785                 790                 795                 800

Asp Ile Thr Arg Lys Glu Met Arg Cys Gly Ser Gly Ile Phe Val His

                805                 810                 815

Asn Asp Val Glu Ala Trp Val Asp Arg Tyr Lys Tyr Leu Pro Glu Thr

            820                 825                 830

Pro Arg Ser Leu Ala Lys Ile Val His Lys Ala His Lys Glu Gly Val

        835                 840                 845

Cys Gly Val Arg Ser Val Thr Arg Leu Glu His Gln Met Trp Glu Ala

    850                 855                 860

Val Arg Asp Glu Leu Asn Val Leu Leu Lys Glu Asn Ala Val Asp Leu

865                 870                 875                 880

Ser Val Val Val Asn Lys Pro Val Gly Arg Tyr Arg Ser Ala Pro Lys

                885                 890                 895

Arg Leu Ser Met Thr Gln Glu Lys Phe Glu Met Gly Trp Lys Ala Trp

            900                 905                 910

Gly Lys Ser Ile Leu Phe Ala Pro Glu Leu Ala Asn Ser Thr Phe Val

        915                 920                 925

Val Asp Gly Pro Glu Thr Lys Glu Cys Pro Asp Glu His Arg Ala Trp

    930                 935                 940

Asn Ser Met Gln Ile Glu Asp Phe Gly Phe Gly Ile Thr Ser Thr Arg

945                 950                 955                 960

Val Trp Leu Lys Ile Arg Glu Glu Ser Thr Asp Glu Cys Asp Gly Ala

                965                 970                 975

Ile Ile Gly Thr Ala Val Lys Gly His Val Ala Val His Ser Asp Leu

            980                 985                 990

Ser Tyr Trp Ile Glu Ser Arg Tyr Asn Asp Thr Trp Lys Leu Glu Arg

        995                 1000                1005

Ala Val Phe Gly Glu Val Lys Ser Cys Thr Trp Pro Glu Thr His

    1010                1015                1020

Thr Leu Trp Gly Asp Gly Val Glu Glu Ser Glu Leu Ile Ile Pro

    1025                1030                1035

His Thr Ile Ala Gly Pro Lys Ser Lys His Asn Arg Arg Glu Gly

    1040                1045                1050

Tyr Lys Thr Gln Asn Gln Gly Pro Trp Asp Glu Asn Gly Ile Val

    1055                1060                1065

Leu Asp Phe Asp Tyr Cys Pro Gly Thr Lys Val Thr Ile Thr Glu

    1070                1075                1080

Asp Cys Gly Lys Arg Gly Pro Ser Val Arg Thr Thr Thr Asp Ser

    1085                1090                1095

Gly Lys Leu Ile Thr Asp Trp Cys Cys Arg Ser Cys Ser Leu Pro

    1100                1105                1110

Pro Leu Arg Phe Arg Thr Glu Asn Gly Cys Trp Tyr Gly Met Glu

    1115                1120                1125

Ile Arg Pro Val Arg His Asp Glu Thr Thr Leu Val Arg Ser Gln

    1130                1135                1140

Val Asp Ala Phe Asn Gly Glu Met Val Asp Pro Phe Gln Leu Gly

    1145                1150                1155

Leu Leu Val Met Phe Leu Ala Thr Gln Glu Val Leu Arg Lys Arg

    1160                1165                1170

Trp Thr Ala Arg Leu Thr Ile Pro Ala Val Leu Gly Ala Leu Leu

    1175                1180                1185

Val Leu Met Leu Gly Gly Ile Thr Tyr Thr Asp Leu Ala Arg Tyr

    1190                1195                1200

Val Val Leu Val Ala Ala Ser Phe Ala Glu Ala Asn Ser Gly Gly

    1205                1210                1215

Asp Val Leu His Leu Ala Leu Ile Ala Val Phe Lys Ile Gln Pro

    1220                1225                1230

Ala Phe Leu Val Met Asn Met Leu Ser Thr Arg Trp Thr Asn Gln

    1235                1240                1245

Glu Asn Val Val Leu Val Leu Gly Ala Ala Phe Phe Gln Leu Ala

    1250                1255                1260

Ser Val Asp Leu Gln Ile Gly Val His Gly Ile Leu Asn Ala Ala

    1265                1270                1275

Ala Ile Ala Trp Met Ile Val Arg Ala Ile Thr Phe Pro Thr Thr

    1280                1285                1290

Ser Ser Val Thr Met Pro Val Leu Ala Leu Leu Thr Pro Gly Met

    1295                1300                1305

Arg Ala Leu Tyr Leu Asp Thr Tyr Arg Ile Ile Leu Leu Val Ile

    1310                1315                1320

Gly Ile Cys Ser Leu Leu Gln Glu Arg Lys Lys Thr Met Ala Lys

    1325                1330                1335

Lys Lys Gly Ala Val Leu Leu Gly Leu Ala Leu Thr Ser Thr Gly

    1340                1345                1350

Trp Phe Ser Pro Thr Thr Ile Ala Ala Gly Leu Met Val Cys Asn

    1355                1360                1365

 Pro Asn Lys Lys Arg Gly Trp Pro Ala Thr Glu Phe Leu Ser Ala

    1370                1375                1380

Val Gly Leu Met Phe Ala Ile Val Gly Gly Leu Ala Glu Leu Asp

    1385                1390                1395

Ile Glu Ser Met Ser Ile Pro Phe Met Leu Ala Gly Leu Met Ala

    1400                1405                1410

Val Ser Tyr Val Val Ser Gly Lys Ala Thr Asp Met Trp Leu Glu

    1415                1420                1425

Arg Ala Ala Asp Ile Ser Trp Glu Met Asp Ala Ala Ile Thr Gly

    1430                1435                1440

Ser Ser Arg Arg Leu Asp Val Lys Leu Asp Asp Asp Gly Asp Phe

    1445                1450                1455

His Leu Ile Asp Asp Pro Gly Val Pro Trp Lys Val Trp Val Leu

    1460                1465                1470

Arg Met Ser Cys Ile Gly Leu Ala Ala Leu Thr Pro Trp Ala Ile

    1475                1480                1485

Val Pro Ala Ala Phe Gly Tyr Trp Leu Thr Leu Lys Thr Thr Lys

    1490                1495                1500

Arg Gly Gly Val Phe Trp Asp Thr Pro Ser Pro Lys Pro Cys Ser

    1505                1510                1515

Lys Gly Asp Thr Thr Thr Gly Val Tyr Arg Ile Met Ala Arg Gly

    1520                1525                1530

Ile Leu Gly Thr Tyr Gln Ala Gly Val Gly Val Met Tyr Glu Asn

    1535                1540                1545

Val Phe His Thr Leu Trp His Thr Thr Arg Gly Ala Ala Ile Met

    1550                1555                1560

Ser Gly Glu Gly Lys Leu Thr Pro Tyr Trp Gly Ser Val Lys Glu

    1565                1570                1575

Asp Arg Ile Ala Tyr Gly Gly Pro Trp Arg Phe Asp Arg Lys Trp

    1580                1585                1590

Asn Gly Thr Asp Asp Val Gln Val Ile Val Val Glu Pro Gly Lys

    1595                1600                1605

Ala Ala Val Asn Ile Gln Thr Lys Pro Gly Val Phe Arg Thr Pro

    1610                1615                1620

Phe Gly Glu Val Gly Ala Val Ser Leu Asp Tyr Pro Arg Gly Thr

    1625                1630                1635

Ser Gly Ser Pro Ile Leu Asp Ser Asn Gly Asp Ile Ile Gly Leu

    1640                1645                1650

Tyr Gly Asn Gly Val Glu Leu Gly Asp Gly Ser Tyr Val Ser Ala

    1655                1660                1665

Ile Val Gln Gly Asp Arg Gln Glu Glu Pro Val Pro Glu Ala Tyr

    1670                1675                1680

Thr Pro Asn Met Leu Arg Lys Arg Gln Met Thr Val Leu Asp Leu

    1685                1690                1695

His Pro Gly Ser Gly Lys Thr Lys Lys Ile Leu Pro Gln Ile Ile

    1700                1705                1710

Lys Asp Ala Ile Gln Gln Arg Leu Arg Thr Ala Val Leu Ala Pro

    1715                1720                1725

Thr Arg Val Val Ala Ala Glu Met Ala Glu Ala Leu Arg Gly Leu

    1730                1735                1740

Pro Val Arg Tyr Gln Thr Ser Ala Val Gln Arg Glu His Gln Gly

    1745                1750                1755

Asn Glu Ile Val Asp Val Met Cys His Ala Thr Leu Thr His Arg

    1760                1765                1770

Leu Met Ser Pro Asn Arg Val Pro Asn Tyr Asn Leu Phe Val Met

    1775                1780                1785

Asp Glu Ala His Phe Thr Asp Pro Ala Ser Ile Ala Ala Arg Gly

    1790                1795                1800

Tyr Ile Ala Thr Lys Val Glu Leu Gly Glu Ala Ala Ala Ile Phe

    1805                1810                1815

Met Thr Ala Thr Pro Pro Gly Thr Thr Asp Pro Phe Pro Asp Ser

    1820                1825                1830

Asn Ala Pro Ile His Asp Leu Gln Asp Glu Ile Pro Asp Arg Ala

    1835                1840                1845

Trp Ser Ser Gly Tyr Glu Trp Ile Thr Glu Tyr Ala Gly Lys Thr

    1850                1855                1860

Val Trp Phe Val Ala Ser Val Lys Met Gly Asn Glu Ile Ala Met

    1865                1870                1875

Cys Leu Gln Arg Ala Gly Lys Lys Val Ile Gln Leu Asn Arg Lys

    1880                1885                1890

Ser Tyr Asp Thr Glu Tyr Pro Lys Cys Lys Asn Gly Asp Trp Asp

    1895                1900                1905

Phe Val Ile Thr Thr Asp Ile Ser Glu Met Gly Ala Asn Phe Gly

    1910                1915                1920

Ala Ser Arg Val Ile Asp Cys Arg Lys Ser Val Lys Pro Thr Ile

    1925                1930                1935

Leu Glu Glu Gly Glu Gly Arg Val Ile Leu Gly Asn Pro Ser Pro

    1940                1945                1950

Ile Thr Ser Ala Ser Ala Ala Gln Arg Arg Gly Arg Val Gly Arg

    1955                1960                1965

Asn Pro Asn Gln Val Gly Asp Glu Tyr His Tyr Gly Gly Ala Thr

    1970                1975                1980

Ser Glu Asp Asp Ser Asn Leu Ala His Trp Thr Glu Ala Lys Ile

    1985                1990                1995

Met Leu Asp Asn Ile His Met Pro Asn Gly Leu Val Ala Gln Leu

    2000                2005                2010

Tyr Gly Pro Glu Arg Glu Lys Ala Phe Thr Met Asp Gly Glu Tyr

    2015                2020                2025

Arg Leu Arg Gly Glu Glu Lys Lys Asn Phe Leu Glu Leu Leu Arg

    2030                2035                2040

Thr Ala Asp Leu Pro Val Trp Leu Ala Tyr Lys Val Ala Ser Asn

    2045                2050                2055

Gly Ile Gln Tyr Thr Asp Arg Lys Trp Cys Phe Asp Gly Pro Arg

    2060                2065                2070

Thr Asn Ala Ile Leu Glu Asp Asn Thr Glu Val Glu Ile Val Thr

    2075                2080                2085

Arg Met Gly Glu Arg Lys Ile Leu Lys Pro Arg Trp Leu Asp Ala

    2090                2095                2100

Arg Val Tyr Ala Asp His Gln Ala Leu Lys Trp Phe Lys Asp Phe

    2105                2110                2115

Ala Ala Gly Lys Arg Ser Ala Val Ser Phe Ile Glu Val Leu Gly

    2120                2125                2130

Arg Met Pro Glu His Phe Met Gly Lys Thr Arg Glu Ala Leu Asp

    2135                2140                2145

Thr Met Tyr Leu Val Ala Thr Ala Glu Lys Gly Gly Lys Ala His

    2150                2155                2160

Arg Met Ala Leu Glu Glu Leu Pro Asp Ala Leu Glu Thr Ile Thr

    2165                2170                2175

Leu Ile Val Ala Ile Thr Val Met Thr Gly Gly Phe Phe Leu Leu

    2180                2185                2190

Met Met Gln Arg Lys Gly Ile Gly Lys Met Gly Leu Gly Ala Leu

    2195                2200                2205

Val Leu Thr Leu Ala Thr Phe Phe Leu Trp Ala Ala Glu Val Pro

    2210                2215                2220

Gly Thr Lys Ile Ala Gly Thr Leu Leu Ile Ala Leu Leu Leu Met

    2225                2230                2235

Val Val Leu Ile Pro Glu Pro Glu Lys Gln Arg Ser Gln Thr Asp

    2240                2245                2250

Asn Gln Leu Ala Val Phe Leu Ile Cys Val Leu Thr Val Val Gly

    2255                2260                2265

Val Val Ala Ala Asn Glu Tyr Gly Met Leu Glu Lys Thr Lys Ala

    2270                2275                2280

Asp Leu Lys Ser Met Phe Gly Gly Lys Thr Gln Ala Ser Gly Leu

    2285                2290                2295

Thr Gly Leu Pro Ser Met Ala Leu Asp Leu Arg Pro Ala Thr Ala

    2300                2305                2310

Trp Ala Leu Tyr Gly Gly Ser Thr Val Val Leu Thr Pro Leu Leu

    2315                2320                2325

Lys His Leu Ile Thr Ser Glu Tyr Val Thr Thr Ser Leu Ala Ser

    2330                2335                2340

Ile Asn Ser Gln Ala Gly Ser Leu Phe Val Leu Pro Arg Gly Val

    2345                2350                2355

Pro Phe Thr Asp Leu Asp Leu Thr Val Gly Leu Val Phe Leu Gly

    2360                2365                2370

Cys Trp Gly Gln Ile Thr Leu Thr Thr Phe Leu Thr Ala Met Val

    2375                2380                2385

Leu Ala Thr Leu His Tyr Gly Tyr Met Leu Pro Gly Trp Gln Ala

    2390                2395                2400

Glu Ala Leu Arg Ala Ala Gln Arg Arg Thr Ala Ala Gly Ile Met

    2405                2410                2415

Lys Asn Ala Val Val Asp Gly Met Val Ala Thr Asp Val Pro Glu

    2420                2425                2430

Leu Glu Arg Thr Thr Pro Leu Met Gln Lys Lys Val Gly Gln Val

    2435                2440                2445

Leu Leu Ile Gly Val Ser Val Ala Ala Phe Leu Val Asn Pro Lys

    2450                2455                2460

Ile Thr Thr Val Arg Glu Ala Gly Val Leu Val Thr Ala Ala Thr

    2465                2470                2475

Leu Ser Leu Trp Asp Asn Gly Ala Ser Ala Val Trp Asn Ser Thr

    2480                2485                2490

Thr Ala Thr Gly Leu Cys His Val Met Arg Gly Ser Tyr Leu Ala

    2495                2500                2505

Gly Gly Ser Ile Ala Trp Thr Leu Ile Lys Asn Ala Asp Lys Pro

    2510                2515                2520

Ser Leu Lys Arg Gly Arg Pro Gly Gly Arg Thr Leu Gly Glu Gln

    2525                2530                2535

Trp Lys Glu Lys Leu Asn Ala Met Ser Arg Glu Glu Phe Phe Lys

    2540                2545                2550

Tyr Arg Arg Glu Ala Ile Ile Glu Val Asp Arg Thr Glu Ala Arg

    2555                2560                2565

Arg Ala Arg Arg Glu Asn Asn Ile Val Gly Gly His Pro Val Ser

    2570                2575                2580

Arg Gly Ser Ala Lys Leu Arg Trp Leu Val Glu Lys Gly Phe Val

    2585                2590                2595

Ser Pro Ile Gly Lys Val Ile Asp Leu Gly Cys Gly Arg Gly Gly

    2600                2605                2610

Trp Ser Tyr Tyr Ala Ala Thr Leu Lys Lys Val Gln Glu Val Arg

    2615                2620                2625

Gly Tyr Thr Lys Gly Gly Ala Gly His Glu Glu Pro Met Leu Met

    2630                2635                2640

Gln Ser Tyr Gly Trp Asn Leu Val Ser Met Lys Ser Gly Val Asp

    2645                2650                2655

Val Phe Tyr Lys Pro Ser Glu Pro Ser Asp Thr Leu Phe Cys Asp

    2660                2665                2670

Ile Gly Glu Ser Ser Pro Ser Pro Glu Val Glu Glu Gln Arg Thr

    2675                2680                2685

Leu Arg Val Leu Glu Met Thr Ser Asp Trp Leu His Arg Gly Pro

    2690                2695                2700

Arg Glu Phe Cys Ile Lys Val Leu Cys Pro Tyr Met Pro Lys Val

    2705                2710                2715

Ile Glu Lys Met Glu Val Leu Gln Arg Arg Phe Gly Gly Gly Leu

    2720                2725                2730

Val Arg Leu Pro Leu Ser Arg Asn Ser Asn His Glu Met Tyr Trp

    2735                2740                2745

Val Ser Gly Ala Ala Gly Asn Val Val Hi s Ala Val Asn Met Thr

    2750                2755                2760

Ser Gln Val Leu Leu Gly Arg Met Asp Arg Thr Val Trp Arg Gly

    2765                2770                2775

Pro Lys Tyr Glu Glu Asp Val Asn Leu Gly Ser Gly Thr Arg Ala

    2780                2785                2790

Val Gly Lys Gly Glu Val His Ser Asn Gln Glu Lys Ile Lys Lys

    2795                2800                2805

Arg Ile Gln Lys Leu Lys Glu Glu Phe Ala Thr Thr Trp His Lys

    2810                2815                2820

Asp Pro Glu His Pro Tyr Arg Thr Trp Thr Tyr His Gly Ser Tyr

    2825                2830                2835

Glu Val Lys Ala Thr Gly Ser Ala Ser Ser Leu Val Asn Gly Val

    2840                2845                2850

Val Lys Leu Met Ser Lys Pro Trp Asp Ala Ile Ala Asn Val Thr

    2855                2860                2865

Thr Met Ala Met Thr Asp Thr Thr Pro Phe Gly Gln Gln Arg Val

    2870                2875                2880

Phe Lys Glu Lys Val Asp Thr Lys Ala Pro Glu Pro Pro Ala Gly

    2885                2890                2895

Ala Lys Glu Val Leu Asn Glu Thr Thr Asn Trp Leu Trp Ala Tyr

    2900                2905                2910

Leu Ser Arg Glu Lys Arg Pro Arg Leu Cys Thr Lys Glu Glu Phe

    2915                2920                2925

Ile Lys Lys Val Asn Ser Asn Ala Ala Leu Gly Ala Val Phe Ala

    2930                2935                2940

Glu Gln Asn Gln Trp Ser Thr Ala Arg Glu Ala Val Asp Asp Pro

    2945                2950                2955

Arg Phe Trp Glu Met Val Asp Glu Glu Arg Glu Asn His Leu Arg

    2960                2965                2970

Gly Glu Cys His Thr Cys Ile Tyr Asn Met Met Gly Lys Arg Glu

    2975                2980                2985

Lys Lys Pro Gly Glu Phe Gly Lys Ala Lys Gly Ser Arg Ala Ile

    2990                2995                3000

Trp Phe Met Trp Leu Gly Ala Arg Tyr Leu Glu Phe Glu Ala Leu

    3005                3010                3015

Gly Phe Leu Asn Glu Asp His Trp Leu Ser Arg Glu Asn Ser Gly

    3020                3025                3030

Gly Gly Val Glu Gly Ser Gly Val Gln Lys Leu Gly Tyr Ile Leu

    3035                3040                3045

Arg Asp Ile Ala Gly Lys Gln Gly Gly Lys Met Tyr Ala Asp Asp

    3050                3055                3060

Thr Ala Gly Trp Asp Thr Arg Ile Thr Arg Thr Asp Leu Glu Asn

    3065                3070                3075

Glu Ala Lys Val Leu Glu Leu Leu Asp Gly Glu His Arg Met Leu

    3080                3085                3090

Ala Arg Ala Ile Ile Glu Leu Thr Tyr Arg His Lys Val Val Lys

    3095                3100                3105

Val Met Arg Pro Ala Ala Glu Gly Lys Thr Val Met Asp Val Ile

    3110                3115                3120

Ser Arg Glu Asp Gln Arg Gly Ser Gly Gln Val Val Thr Tyr Ala

    3125                3130                3135

Leu Asn Thr Phe Thr Asn Ile Ala Val Gln Leu Val Arg Leu Met

    3140                3145                3150

Glu Ala Glu Gly Val Ile Gly Pro Gln His Leu Glu Gln Leu Pro

    3155                3160                3165

Arg Lys Asn Lys Ile Ala Val Arg Thr Trp Leu Phe Glu Asn Gly

    3170                3175                3180

Glu Glu Arg Val Ser Arg Met Ala Ile Ser Gly Asp Asp Cys Val

    3185                3190                3195

Val Lys Pro Leu Asp Asp Arg  Phe Ala Thr Ala Leu His Phe Leu

    3200                3205                3210

Asn Ala Met Ser Lys Val Arg Lys Asp Ile Gln Glu Trp Lys Pro

    3215                3220                3225

Ser His Gly Trp His Asp Trp Gln Gln Val Pro Phe Cys Ser Asn

    3230                3235                3240

His Phe Gln Glu Ile Val Met Lys Asp Gly Arg Ser Ile Val Val

    3245                3250                3255

Pro Cys Arg Gly Gln Asp Glu Leu Ile Gly Arg Ala Arg Ile Ser

    3260                3265                3270

Pro Gly Ala Gly Trp Asn Val Lys Asp Thr Ala Cys Leu Ala Lys

    3275                3280                3285

Ala Tyr Ala Gln Met Trp Leu Leu Leu Tyr Phe His Arg Arg Asp

    3290                3295                3300

Leu Arg Leu Met Ala Asn Ala Ile Cys Ser Ala Val Pro Val Asp

    3305                3310                3315

Trp Val Pro Thr Gly Arg Thr Ser Trp Ser Ile His Ser Lys Gly

    3320                3325                3330

Glu Trp Met Thr Thr Glu Asp Met Leu Gln Val Trp Asn Arg Val

    3335                3340                3345

Trp Ile Glu Glu Asn Glu Trp Met Val Asp Lys Thr Pro Ile Thr

    3350                3355                3360

Ser Trp Thr Asp Val Pro Tyr Val Gly Lys Arg Glu Asp Ile Trp

    3365                3370                3375

Cys Gly Asn Leu Ile Gly Thr Arg Ser Arg Ala Thr Trp Ala Glu

    3380                3385                3390

Asn Ile Tyr Ala Ala Ile Asn Gln Val Arg Ala Val Ile Gly Lys

    3395                3400                3405

Glu Asn Tyr Val Asp Tyr Met Thr Ser Leu Arg Arg Tyr Glu Asp

    3410                3415                3420

Val Leu Ile Gln Glu Asp Arg Val Ile

    3425                3430

<210>3

<211>10976

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<220>

<221>CDS

<222>(96)..(10391)

<400>3

agaagtttat ctgtgtgaac ttcttggctt agtatcgttg agaagaatcg agagattagt      60

gcagtttaaa cagtttttta gaacggaaga taacc atg act aaa aaa cca gga        113

                                       Met Thr Lys Lys Pro Gly

                                       1               5

ggg ccc ggt aaa aac cgg gct atc aat atg ctg aaa cgc ggc cta ccc       161

Gly Pro Gly Lys Asn Arg Ala Ile Asn Met Leu Lys Arg Gly Leu Pro

            10                  15                  20

cgc gta ttc cca cta gtg gga gtg aag agg gta gta atg agc ttg ttg       209

Arg Val Phe Pro Leu Val Gly Val Lys Arg Val Val Met Ser Leu Leu

        25                  30                  35

gac ggc aga ggg cca gta cgt ttc gtg ctg gct ctt atc acg ttc ttc       257

Asp Gly Arg Gly Pro Val Arg Phe Val Leu Ala Leu Ile Thr Phe Phe

    40                  45                  50

aag ttt aca gca tta gcc ccg acc aag gcg ctt tta ggc cga tgg aaa       305

Lys Phe Thr Ala Leu Ala Pro Thr Lys Ala Leu Leu Gly Arg Trp Lys

55                  60                  65                  70

gca gtg gaa aag agt gta gca atg aaa cat ctc act agt ttc aaa cga       353

Ala Val Glu Lys Ser Val Ala Met Lys His Leu Thr Ser Phe Lys Arg

                75                  80                  85

gaa ctt gga aca ctc att gac gcc gtg aac aag cgg ggc aga aag caa       401

Glu Leu Gly Thr Leu Ile Asp Ala Val Asn Lys Arg Gly Arg Lys Gln

            90                  95                  100

aac aaa aga gga gga aat gaa ggc tca atc atg tgg ctt gcg agc ttg       449

Asn Lys Arg Gly Gly Asn Glu Gly Ser Ile Met Trp Leu Ala Ser Leu

        105                 110                 115

gca gtt gtc ata gct tgt gca gga gcc atg aag ttg tca aat ttc cag       497

Ala Val Val Ile Ala Cys Ala Gly Ala Met Lys Leu Ser Asn Phe Gln

    120                 125                 130

ggg aag ctt ttg atg acc att aac aac acg gac att gca gac gtt atc       545

Gly Lys Leu Leu Met Thr Ile Asn Asn Thr Asp Ile Ala Asp Val Ile

135                 140                 145                 150

gta att ccc acc tca aaa gga gag aac aga tgc tgg gtc cgg gca atc       593

Val Ile Pro Thr Ser Lys Gly Glu Asn Arg Cys Trp Val Arg Ala Ile

                155                 160                 165

gac gtc ggc tac atg tgt gag gac act atc acg tac gaa tgt cct aag       641

Asp Val Gly Tyr Met Cys Glu Asp Thr Ile Thr Tyr Glu Cys Pro Lys

            170                 175                 180

ctt gcc atg ggc aat gat cca gag gat gtg gac tgc tgg tgt gac aac       689

Leu Ala Met Gly Asn Asp Pro Glu Asp Val Asp Cys Trp Cys Asp Asn

        185                 190                 195

caa gaa gtc tac gtc caa tat gga cgg tgc acg cgg acc agg cat tcc       737

Gln Glu Val Tyr Val Gln Tyr Gly Arg Cys Thr Arg Thr Arg His Ser

    200                 205                 210

aag cga agc agg aga tcc gtg tcg gtc caa aca cat ggg gag agt tca       785

Lys Arg Ser Arg Arg Ser Val Ser Val Gln Thr His Gly Glu Ser Ser

215                 220                 225                 230

cta gtg aat aaa aaa gag gct tgg ctg gat tca acg aaa gcc aca cga       833

Leu Val Asn Lys Lys Glu Ala Trp Leu Asp Ser Thr Lys Ala Thr Arg

                235                 240                 245

tat ctc atg aaa act gag aac tgg atc ata agg aat cct ggc tat gct       881

Tyr Leu Met Lys Thr Glu Asn Trp Ile Ile Arg Asn Pro Gly Tyr Ala

            250                 255                 260

ttc ctg gcg gcg gta ctc ggc tgg atg ctt ggc agt aac aac ggt caa       929

Phe Leu Ala Ala Val Leu Gly Trp Met Leu Gly Ser Asn Asn Gly Gln

        265                 270                 275

cgc gtg gta ttc acc atc ctc ctg ctg ctg gtc gct ccg gct tac agt       977

Arg Val Val Phe Thr Ile Leu Leu Leu Leu Val Ala Pro Ala Tyr Ser

    280                 285                 290

ttt aat tgt ctg gga atg ggc aat cgt gac ttc ata gaa gga gcc agt      1025

Phe Asn Cys Leu Gly Met Gly Asn Arg Asp Phe Ile Glu Gly Ala Ser

295                 300                 305                 310

gga gcc act tgg gtg gac ttg gtg cta gaa gga gat agc tgc ttg aca      1073

Gly Ala Thr Trp Val Asp Leu Val Leu Glu Gly Asp Ser Cys Leu Thr

                315                 320                 325

att atg gca aac gac aaa cca aca ttg gac gtc cgc atg atc aac atc      1121

Ile Met Ala Asn Asp Lys Pro Thr Leu Asp Val Arg Met Ile Asn Ile

            330                 335                 340

gaa gct agc caa ctt gct gag gtt aga agt tac tgt tat cat gct tca      1169

Glu Ala Ser Gln Leu Ala Glu Val Arg Ser Tyr Cys Tyr His Ala Ser

        345                 350                 355

gtc act gac atc tcg acg gtg gct cgg tgc ccc acg act gga gaa gcc      1217

Val Thr Asp Ile Ser Thr Val Ala Arg Cys Pro Thr Thr Gly Glu Ala

    360                 365                 370

cac aac gag aag cga gct gat agt agc tat gtg tgc aaa caa ggc ttc      1265

His Asn Glu Lys Arg Ala Asp Ser Ser Tyr Val Cys Lys Gln Gly Phe

375                 380                 385                 390

act gat cgt ggg tgg ggc aac gga tgt gga ctt ttc ggg aag gga agc      1313

Thr Asp Arg Gly Trp Gly Asn Gly Cys Gly Leu Phe Gly Lys Gly Ser

                395                 400                 405

att gac aca tgt gca aaa ttc tcc tgc acc agc aaa gcg att ggg aga      1361

Ile Asp Thr Cys Ala Lys Phe Ser Cys Thr Ser Lys Ala Ile Gly Arg

            410                 415                 420

aca atc cag cca gaa aac atc aaa tac aaa gtt ggc att ttt gtg cat      1409

Thr Ile Gln Pro Glu Asn Ile Lys Tyr Lys Val Gly Ile Phe Val His

        425                 430                 435

gga gcc act act tcg gaa aac cat ggg aat tat tca gcg caa gtt ggg      1457

Gly Ala Thr Thr Ser Glu Asn His Gly Asn Tyr Ser Ala Gln Val Gly

    440                 445                 450

gcg tcc cag gcg gca aag ttc aca gta aca ccc aat gct cct tcg ata      1505

Ala Ser Gln Ala Ala Lys Phe Thr Val Thr Pro Asn Ala Pro Ser Ile

455                 460                 465                 470

acc ctc aaa ctt ggt gac tac gga gaa gtc aca ctg gac tgt gag cca      1553

Thr Leu Lys Leu Gly Asp Tyr Gly Glu Val Thr Leu Asp Cys Glu Pro

                475                 480                 485

agg agt gga ctg aac act gaa gcg ttt tac gtc atg acc gtg ggg tca      1601

Arg Ser Gly Leu Asn Thr Glu Ala Phe Tyr Val Met Thr Val Gly Ser

            490                 495                 500

aag tca ttt ctg gtc cat agg gaa tgg ttt cat gac ctc gct ctc ccc      1649

Lys Ser Phe Leu Val His Arg Glu Trp Phe His Asp Leu Ala Leu Pro

        505                 510                 515

tgg acg tcc cct tcg agc aca gcg tgg aga aac aga gaa ctc ctc atg      1697

Trp Thr Ser Pro Ser Ser Thr Ala Trp Arg Asn Arg Glu Leu Leu Met

    520                 525                 530

gag ttt gaa gag gcg cac gcc aca aaa cag tcc gtt gtt gct ctt ggg      1745

Glu Phe Glu Glu Ala His Ala Thr Lys Gln Ser Val Val Ala Leu Gly

535                 540                 545                 550

tca cag gaa gga ggc ctc cat cag gcg ttg gca gga gcc atc gtg gtg      1793

Ser Gln Glu Gly Gly Leu His Gln Ala Leu Ala Gly Ala Ile Val Val

                555                 560                 565

gag tac tca agt tca gtg aag tta aca tca ggc cac ctg aaa tgt agg      1841

Glu Tyr Ser Ser Ser Val Lys Leu Thr Ser Gly His Leu Lys Cys Arg

            570                 575                 580

ctg aaa atg gac aaa ctg gct ctg aaa ggc aca acc tat ggc atg tgc      1889

Leu Lys Met Asp Lys Leu Ala Leu Lys Gly Thr Thr Tyr Gly Met Cys

        585                 590                 595

aca gaa aaa ttc tcc ttc gcg aaa aat ccg gcg gac act ggt cac ggg      1937

Thr Glu Lys Phe Ser Phe Ala Lys Asn Pro Ala Asp Thr Gly His Gly

    600                 605                 610

aca gtt gtc att gaa ctc tcc tac tct ggg agt gat ggc ccc tgc aaa      1985

Thr Val Val Ile Glu Leu Ser Tyr Ser Gly Ser Asp Gly Pro Cys Lys

615                 620                 625                 630

att ccg att gtc tcc gtt gcg agc ctc aat gac atg acc ccc gtc ggg      2033

Ile Pro Ile Val Ser Val Ala Ser Leu Asn Asp Met Thr Pro Val Gly

                635                 640                 645

cgg ctg gtg aca gtg aac ccc ttc gtc gcg act tcc agt gcc aat tca      2081

Arg Leu Val Thr Val Asn Pro Phe Val Ala Thr Ser Ser Ala Asn Ser

            650                 655                 660

aag gtg ctg gtc gag atg gaa ccc ccc ttc gga gac tcc tac atc gta      2129

Lys Val Leu Val Glu Met Glu Pro Pro Phe Gly Asp Ser Tyr Ile Val

        665                 670                 675

gtt gga cgg gga gac aag cag atc aac cac cat tgg cat aaa gct gga      2177

Val Gly Arg Gly Asp Lys Gln Ile Asn His His Trp His Lys Ala Gly

    680                 685                 690

agc acg ctg ggc aaa gcc ttt tca aca act ttg aag gga gct cag aga      2225

Ser Thr Leu Gly Lys Ala Phe Ser Thr Thr Leu Lys Gly Ala Gln Arg

695                 700                 705                 710

ctg gca gcg ttg ggt gac aca gcc tgg gac ttt ggc tcc att gga ggg      2273

Leu Ala Ala Leu Gly Asp Thr Ala Trp Asp Phe Gly Ser Ile Gly Gly

                715                 720                 725

gtc ttc aac tcc ata gga aaa gcc gtt cac caa gtg ttt ggt ggt gcc      2321

Val Phe Asn Ser Ile Gly Lys Ala Val His Gln Val Phe Gly Gly Ala

            730                 735                 740

ttc aga aca ctc ttc ggg gga atg tct tgg atc aca caa ggg cta atg      2369

Phe Arg Thr Leu Phe Gly Gly Met Ser Trp Ile Thr Gln Gly Leu Met

        745                 750                 755

ggt gcc cta cta ctc tgg atg ggc gtc aac gca cga gac cga tca att      2417

Gly Ala Leu Leu Leu Trp Met Gly Val Asn Ala Arg Asp Arg Ser Ile

    760                 765                 770

gct ttg gcc ttc tta gcc aca gga ggt gtg ctc gtg ttc tta gcg acc      2465

Ala Leu Ala Phe Leu Ala Thr Gly Gly Val Leu Val Phe Leu Ala Thr

775                 780                 785                 790

aat gtg cat gct gac act gga tgt gcc att gac atc aca aga aaa gag      2513

Asn Val His Ala Asp Thr Gly Cys Ala Ile Asp Ile Thr Arg Lys Glu

                795                 800                 805

atg agg tgt gga agt ggc atc ttc gtg cac aac gac gtg gaa gcc tgg      2561

Met Arg Cys Gly Ser Gly Ile Phe Val His Asn Asp Val Glu Ala Trp

            810                 815                 820

gtg gat agg tat aaa tat ttg cca gaa acg ccc aga tcc cta gca aag      2609

Val Asp Arg Tyr Lys Tyr Leu Pro Glu Thr Pro Arg Ser Leu Ala Lys

        825                 830                 835

atc gtc cac aaa gcg cac aag gaa ggc gtg tgc gga gtc aga tct gtc      2657

Ile Val His Lys Ala His Lys Glu Gly Val Cys Gly Val Arg Ser Val

    840                 845                 850

act aga ctg gag cat caa atg tgg gaa gcc gta cgg gat gaa ttg aac      2705

Thr Arg Leu Glu His Gln Met Trp Glu Ala Val Arg Asp Glu Leu Asn

855                 860                 865                 870

gtc ctg ctc aaa gag aat gca gtg gac ctc agt gtg gtt gtg aac aag      2753

Val Leu Leu Lys Glu Asn Ala Val Asp Leu Ser Val Val Val Asn Lys

                875                 880                 885

ccc gtg ggg aga tat cgc tca gcc cct aaa cgc ctg tcc atg acg caa      2801

Pro Val Gly Arg Tyr Arg Ser Ala Pro Lys Arg Leu Ser Met Thr Gln

            890                 895                 900

gag aag ttt gaa atg ggc tgg aaa gca tgg gga aaa agc att ctc ttt      2849

Glu Lys Phe Glu Met Gly Trp Lys Ala Trp Gly Lys Ser Ile Leu Phe

        905                 910                 915

gcc ccg gaa ttg gcc aac tcc aca ttt gtc gta gat gga cct gag aca      2897

Ala Pro Glu Leu Ala Asn Ser Thr Phe Val Val Asp Gly Pro Glu Thr

    920                 925                 930

aag gaa tgc cct gat gag cac aga gct tgg aac agc atg caa atc gaa      2945

Lys Glu Cys Pro Asp Glu His Arg Ala Trp Asn Ser Met Gln Ile Glu

935                 940                 945                 950

gac ttc ggc ttt ggc atc aca tca acc cgt gtg tgg ctg aag att aga      2993

Asp Phe Gly Phe Gly Ile Thr Ser Thr Arg Val Trp Leu Lys Ile Arg

                955                 960                 965

gag gag agc act gac gag tgt gat gga gcg atc ata ggt acg gct gtc      3041

Glu Glu Ser Thr Asp Glu Cys Asp Gly Ala Ile Ile Gly Thr Ala Val

            970                 975                 980

aaa gga cat gtg gca gtc cat agt gac ttg tcg tac tgg att gag agt      3089

Lys Gly His Val Ala Val His Ser Asp Leu Ser Tyr Trp Ile Glu Ser

        985                 990                 995

cgc tac aac gac aca tgg aaa ctt gag agg gca gtc ttt gga gaa          3134

Arg Tyr Asn Asp Thr Trp Lys Leu Glu Arg Ala Val Phe Gly Glu

    1000                1005                1010

gtt aaa tcc tgc act tgg cca gag aca cac acc cta tgg gga gat          3179

Val Lys Ser Cys Thr Trp Pro Glu Thr His Thr Leu Trp Gly Asp

    1015                1020                1025

ggt gtt gag gaa agt gaa ctc atc atc ccg cac acc ata gcc gga          3224

Gly Val Glu Glu Ser Glu Leu Ile Ile Pro His Thr Ile Ala Gly

    1030                1035                1040

cca aaa agc aag cat aat cgg agg gaa ggg tat aag aca caa aac          3269

Pro Lys Ser Lys His Asn Arg Arg Glu Gly Tyr Lys Thr Gln Asn

    1045                1050                1055

cag gga cct tgg gac gag aat ggc ata gtc ttg gac ttt gac tat          3314

Gln Gly Pro Trp Asp Glu Asn Gly Ile Val Leu Asp Phe Asp Tyr

    1060                1065                1070

tgc cca ggg aca aaa gtc acc att aca gag gat tgt ggc aag aga          3359

Cys Pro Gly Thr Lys Val Thr Ile Thr Glu Asp Cys Gly Lys Arg

    1075                1080                1085

ggc cct tcg gtc aga acc act act gac agt gga aag ttg atc act          3404

Gly Pro Ser Val Arg Thr Thr Thr Asp Ser Gly Lys Leu Ile Thr

    1090                1095                1100

gac tgg tgc tgt cgc agt tgc tcc ctt ccg ccc cta cga ttc cgg          3449

Asp Trp Cys Cys Arg Ser Cys Ser Leu Pro Pro Leu Arg Phe Arg

    1105                1110                1115

aca gaa aat ggc tgc tgg tac gga atg gaa atc aga cct gtc agg          3494

Thr Glu Asn Gly Cys Trp Tyr Gly Met Glu Ile Arg Pro Val Arg

    1120                1125                1130

cat gat gaa aca aca ctc gtc aga tcg cag gtt gat gct ttt aat          3539

His Asp Glu Thr Thr Leu Val Arg Ser Gln Val Asp Ala Phe Asn

    1135                1140                1145

ggt gaa atg gtt gac cct ttt cag ctg ggc ctt ctg gtg atg ttt          3584

Gly Glu Met Val Asp Pro Phe Gln Leu Gly Leu Leu Val Met Phe

    1150                1155                1160

ctg gcc acc cag gag gtc ctt cgc aag agg tgg acg gcc aga ttg          3629

Leu Ala Thr Gln Glu Val Leu Arg Lys Arg Trp Thr Ala Arg Leu

    1165                1170                1175

acc att cct gcg gtt ttg ggg gcc cta ctt gtg ctg atg ctt ggg          3674

Thr Ile Pro Ala Val Leu Gly Ala Leu Leu Val Leu Met Leu Gly

    1180                1185                1190

ggc atc act tac act gat ttg gcg agg tat gtg gtg cta gtc gct          3719

Gly Ile Thr Tyr Thr Asp Leu Ala Arg Tyr Val Val Leu Val Ala

    1195                1200                1205

gcc gct ttc gca gag gcc aac agt gga gga gat gtc ctg cac ctt          3764

Ala Ala Phe Ala Glu Ala Asn Ser Gly Gly Asp Val Leu His Leu

    1210                1215                1220

gct ttg att gcc gtt ttc aag atc caa cca gca ttt tta gtg atg          3809

Ala Leu Ile Ala Val Phe Lys Ile Gln Pro Ala Phe Leu Val Met

    1225                1230                1235

aac atg ctt agc acg aga tgg acg aac caa gaa aat gtg gtt ctg          3854

Asn Met Leu Ser Thr Arg Trp Thr Asn Gln Glu Asn Val Val Leu

    1240                1245                1250

gtc cta ggg gct gcc ttt ttc caa ttg gcc tca gta gat ctg caa          3899

Val Leu Gly Ala Ala Phe Phe Gln Leu Ala Ser Val Asp Leu Gln

    1255                1260                1265

ata gga gtt cac gga atc ctg aat gcc gcc gct ata gca tgg atg          3944

Ile Gly Val His Gly Ile Leu Asn Ala Ala Ala Ile Ala Trp Met

    1270                1275                1280

att gtc cgg gcg atc acc ttc ccc aca acc tcc tcc gtc acc atg          3989

Ile Val Arg Ala Ile Thr Phe Pro Thr Thr Ser Ser Val Thr Met

    1285                1290                1295

cea gtc tta gcg ctt cta act ccg gga atg agg gct cta tac cta          4034

Pro Val Leu Ala Leu Leu Thr Pro Gly Met Arg Ala Leu Tyr Leu

    1300                1305                1310

gat act tac aga atc atc ctc ctc gtc ata ggg att tgc tct ctg          4079

Asp Thr Tyr Arg Ile Ile Leu Leu Val Ile Gly Ile Cys Ser Leu

    1315                1320                1325

ttg caa gag agg aaa aag acc atg gca aaa aag aaa gga gct gta          4124

Leu Gln Glu Arg Lys Lys Thr Met Ala Lys Lys Lys Gly Ala Val

    1330                1335                1340

ctc ttg ggc tta gcg ctc aca tcc act gga tgg ttt tcg ccc acc          4169

Leu Leu Gly Leu Ala Leu Thr Ser Thr Gly Trp Phe Ser Pro Thr

    1345                1350                1355

act ata gct gcc gga cta atg gtc tgc aac cca aac aag aag aga          4214

Thr Ile Ala Ala Gly Leu Met Val Cys Asn Pro Asn Lys Lys Arg

    1360                1365                1370

ggg tgg cca gct act gag ttt ttg tcg gca gtt gga ttg atg ttt          4259

Gly Trp Pro Ala Thr Glu Phe Leu Ser Ala Val Gly Leu Met Phe

    1375                1380                1385

gcc atc gta ggt ggt ttg gcg gag ttg gat att gaa tcc atg tca          4304

Ala Ile Val Gly Gly Leu Ala Glu Leu Asp Ile Glu Ser Met Ser

    1390                1395                1400

ata ccc ttc atg ctg gca ggt ctc atg gca gtg tcc tac gtg gtg          4349

Ile Pro Phe Met Leu Ala Gly Leu Met Ala Val Ser Tyr Val Val

    1405                1410                1415

tca gga aaa gca aca gat atg tgg ctt gaa cgg gct gcc gac atc          4394

Ser Gly Lys Ala Thr Asp Met Trp Leu Glu Arg Ala Ala Asp Ile

    1420                1425                1430

agc tgg gag atg gat gct gca atc aca gga agc agt cgg agg ctg          4439

Ser Trp Glu Met Asp Ala Ala Ile Thr Gly Ser Ser Arg Arg Leu

    1435                1440                1445

gat gtg aag cta gat gat gac gga gat ttt cac ttg att gac gat          4484

Asp Val Lys Leu Asp Asp Asp Gly Asp Phe His Leu Ile Asp Asp

    1450                1455                1460

ccc ggt gtt cca tgg aag gtc tgg gtc ctg cgc atg tct tgc att          4529

Pro Gly Val Pro Trp Lys Val Trp Val Leu Arg Met Ser Cys Ile

    1465                1470                1475

ggg tta gcc gcc ctc acg cct tgg gcc att gtt ccc gcc gct ttt          4574

Gly Leu Ala Ala Leu Thr Pro Trp Ala Ile Val Pro Ala Ala Phe

    1480                1485                1490

ggt tat tgg ctc act tta aaa aca aca aaa aga ggg ggc gtg ttt          4619

Gly Tyr Trp Leu Thr Leu Lys Thr Thr Lys Arg Gly Gly Val Phe

    1495                1500                1505

tgg gac acg cca tcc cca aaa cct tgc tca aaa gga gac acc act          4664

Trp Asp Thr Pro Ser Pro Lys Pro Cys Ser Lys Gly Asp Thr Thr

    1510                1515                1520

aca gga gtt tac cgc att atg gct aga ggg att ctt ggc act tac          4709

Thr Gly Val Tyr Arg Ile Met Ala Arg Gly Ile Leu Gly Thr Tyr

    1525                1530                1535

cag gcc ggc gtc gga gtc atg tac gag aat gtt ttc cac aca cta          4754

Gln Ala Gly Val Gly Val Met Tyr Glu Asn Val Phe His Thr Leu

    1540                1545                1550

tgg cac aca act aga gga gca gct att atg agt gga gaa gga aaa          4799

Trp His Thr Thr Arg Gly Ala Ala Ile Met Ser Gly Glu Gly Lys

    1555                1560                1565

ttg acg cca tac tgg ggt agt gtg aaa gaa gac cgc ata gct tac          4844

Leu Thr Pro Tyr Trp Gly Ser Val Lys Glu Asp Arg Ile Ala Tyr

    1570                1575                1580

gga ggc cca tgg agg ttt gat cga aaa tgg aat gga act gat gac          4889

Gly Gly Pro Trp Arg Phe Asp Arg Lys Trp Asn Gly Thr Asp Asp

    1585                1590                1595

gtg caa gtg atc gtg gta gaa ccg ggg aag gct gca gta aac atc          4934

Val Gln Val Ile Val Val Glu Pro Gly Lys Ala Ala Val Asn Ile

    1600                1605                1610

cag aca aaa cca gga gtg ttt cgg act ccc ttc ggg gag gtt ggg          4979

Gln Thr Lys Pro Gly Val Phe Arg Thr Pro Phe Gly Glu Val Gly

    1615                1620                1625

gct gtt agt ctg gat tac ccg cga gga aca tcc ggc tca ccc att          5024

Ala Val Ser Leu Asp Tyr Pro Arg Gly Thr Ser Gly Ser Pro Ile

    1630                1635                1640

ctg gat tcc aat gga gac atc ata ggc ctg tac ggc aat gga gtt          5069

Leu Asp Ser Asn Gly Asp Ile Ile Gly Leu Tyr Gly Asn Gly Val

    1645                1650                1655

gag ctt ggc gat ggc tca tac gtc agc gcc atc gtg cag ggt gac          5114

Glu Leu Gly Asp Gly Ser Tyr Val Ser Ala Ile Val Gln Gly Asp

    1660                1665                1670

cgt cag gag gaa cca gtc cca gaa gct tac acc cca aac atg ttg          5159

Arg Gln Glu Glu Pro Val Pro Glu Ala Tyr Thr Pro Asn Met Leu

    1675                1680                1685

aga aag aga cag atg acc gta cta gat ttg cac cct ggt tca ggg          5204

Arg Lys Arg Gln Met Thr Val Leu Asp Leu His Pro Gly Ser Gly

    1690                1695                1700

aaa acc aag aaa att ctg cca caa ata att aag gac gct att cag          5249

Lys Thr Lys Lys Ile Leu Pro Gln Ile Ile Lys Asp Ala Ile Gln

    1705                1710                1715

cag cgc cta aga aca gct gtg ttg gca ccg acg cgg gtg gta gca          5294

Gln Arg Leu Arg Thr Ala Val Leu Ala Pro Thr Arg Val Val Ala

    1720                1725                1730

gca gaa atg gca gaa gct ttg aga ggg ctc cca gta cga tat caa          5339

Ala Glu Met Ala Glu Ala Leu Arg Gly Leu Pro Val Arg Tyr Gln

    1735                1740                1745

act tca gca gtg cag aga gag cac caa ggg aat gaa ata gtg gat          5384

Thr Ser Ala Val Gln Arg Glu His Gln Gly Asn Glu Ile Val Asp

    1750                1755                1760

gtg atg tgc cac gcc act ctg acc cat aga ctg atg tca ccg aac          5429

Val Met Cys His Ala Thr Leu Thr His Arg Leu Met Ser Pro Asn

    1765                1770                1775

aga gtg ccc aac tac aac cta ttt gtc atg gat gaa gct cat ttc          5474

Arg Val Pro Asn Tyr Asn Leu Phe Val Met Asp Glu Ala His Phe

    1780                1785                1790

acc gac cca gcc agt ata gcc gca cga gga tac att gct acc aag          5519

Thr Asp Pro Ala Ser Ile Ala Ala Arg Gly Tyr Ile Ala Thr Lys

    1795                1800                1805

gtg gaa tta ggg gag gca gca gcc atc ttt atg aca gcg acc ccg          5564

Val Glu Leu Gly Glu Ala Ala Ala Ile Phe Met Thr Ala Thr Pro

    1810                1815                1820

cct gga acc acg gat cct ttt cct gac tca aat gcc cca atc cat          5609

Pro Gly Thr Thr Asp Pro Phe Pro Asp Ser Asn Ala Pro Ile His

    1825                1830                1835

gat ttg caa gat gag ata cca gac agg gcg tgg agc agt gga tac          5654

Asp Leu Gln Asp Glu Ile Pro Asp Arg Ala Trp Ser Ser Gly Tyr

    1840                1845                1850

gaa tgg atc aca gaa tat gcg gga aaa acc gtg tgg ttt gtg gca          5699

Glu Trp Ile Thr Glu Tyr Ala Gly Lys Thr Val Trp Phe Val Ala

    1855                1860                1865

agc gtg aaa atg ggg aac gag att gca atg tgc ctc caa aga gcg          5744

Ser Val Lys Met Gly Asn Glu Ile Ala Met Cys Leu Gln Arg Ala

    1870                1875                1880

ggg aaa aag gtc atc caa ctc aac cgc aag tcc tat gac aca gaa          5789

Gly Lys Lys Val Ile Gln Leu Asn Arg Lys Ser Tyr Asp Thr Glu

    1885                1890                1895

tac cca aaa tgt aag aat gga gac tgg gat ttt gtc atc acc act          5834

Tyr Pro Lys Cys Lys Asn Gly Asp Trp Asp Phe Val Ile Thr Thr

    1900                1905                1910

gac att tct gaa atg ggg gcc aac ttc ggt gcg agc agg gtc atc          5879

Asp Ile Ser Glu Met Gly Ala Asn Phe Gly Ala Ser Arg Val Ile

    1915                1920                1925

gac tgt aga aag agc gtg aag ccc acc atc tta gaa gag gga gaa          5924

Asp Cys Arg Lys Ser Val Lys Pro Thr Ile Leu Glu Glu Gly Glu

    1930                1935                1940

ggc aga gtc atc ctc gga aac cca tcg ccc ata acc agt gca agc          5969

Gly Arg Val Ile Leu Gly Asn Pro Ser Pro Ile Thr Ser Ala Ser

    1945                1950                1955

gca gct caa cgg agg ggc aga gta ggc aga aac cct aac cag gtt          6014

Ala Ala Gln Arg Arg Gly Arg Val Gly Arg Asn Pro Asn Gln Val

    1960                1965                1970

gga gat gaa tac cac tat ggg ggg gcc acc agt gaa gat gac agt          6059

Gly Asp Glu Tyr His Tyr Gly Gly Ala Thr Ser Glu Asp Asp Ser

    1975                1980                1985

aac cta gcc cat tgg aca gag gca aag atc atg tta gat aac ata          6104

Asn Leu Ala His Trp Thr Glu Ala Lys Ile Met Leu Asp Asn Ile

    1990                1995                2000

cac atg ccc aat gga ctg gtg gcc cag ctc tat gga cca gag agg          6149

His Met Pro Asn Gly Leu Val Ala Gln Leu Tyr Gly Pro Glu Arg

    2005                2010                2015

gaa aag gcc ttc aca atg gat ggc gaa tac cgt ctc aga ggt gaa          6194

Glu Lys Ala Phe Thr Met Asp Gly Glu Tyr Arg Leu Arg Gly Glu

    2020                2025                2030

gaa aag aaa aac ttc tta gag ctg ctt agg acg gct gac ctc ccg          6239

Glu Lys Lys Asn Phe Leu Glu Leu Leu Arg Thr Ala Asp Leu Pro

    2035                2040                2045

gtg tgg ctg gcc tac aag gtg gcg tcc aat ggc atc cag tac acc          6284

Val Trp Leu Ala Tyr Lys Val Ala Ser Asn Gly Ile Gln Tyr Thr

    2050                2055                2060

gat aga aag tgg tgt ttt gat ggg ccg cgt acg aat gcc ata ctg          6329

Asp Arg Lys Trp Cys Phe Asp Gly Pro Arg Thr Asn Ala Ile Leu

    2065                2070                2075

gag gac aac acc gag gta gag ata gtc acc cgg atg ggt gag agg          6374

Glu Asp Asn Thr Glu Val Glu Ile Val Thr Arg Met Gly Glu Arg

    2080                2085                2090

aaa atc ctc aag ccg aga tgg ctt gat gca aga gtt tat gca gat          6419

Lys Ile Leu Lys Pro Arg Trp Leu Asp Ala Arg Val Tyr Ala Asp

    2095                2100                2105

cac caa gct ctc aag tgg ttc aaa gac ttc gca gca gga aag aga          6464

His Gln Ala Leu Lys Trp Phe Lys Asp Phe Ala Ala Gly Lys Arg

    2110                2115                2120

tca gcc gtt agc ttc ata gag gtg ctc ggt cgt atg cct gag cat          6509

Ser Ala Val Ser Phe Ile Glu Val Leu Gly Arg Met Pro Glu His

    2125                2130                2135

ttc atg gga aag acg cgg gaa gct tta gac acc atg tac ttg gtt          6554

Phe Met Gly Lys Thr Arg Glu Ala Leu Asp Thr Met Tyr Leu Val

    2140                2145                2150

gca acg gct gag aaa ggt ggg aaa gca cac cga atg gct ctc gaa          6599

Ala Thr Ala Glu Lys Gly Gly Lys Ala His Arg Met Ala Leu Glu

    2155                2160                2165

gag ctg cca gat gca ctg gaa acc att aca ctt att gtt gct atc          6644

Glu Leu Pro Asp Ala Leu Glu Thr Ile Thr Leu Ile Val Ala Ile

    2170                2175                2180

act gtg atg aca gga gga ttc ttt cta ctc atg atg cag cga aag          6689

Thr Val Met Thr Gly Gly Phe Phe Leu Leu Met Met Gln Arg Lys

    2185                2190                2195

ggt ata ggg aag atg ggt ctt gga gct cta gtg ctc acg cta gct          6734

Gly Ile Gly Lys Met Gly Leu Gly Ala Leu Val Leu Thr Leu Ala

    2200                2205                2210

acc ttc ttc ctg tgg gcg gca gag gtt ccc gga aca aaa ata gca          6779

Thr Phe Phe Leu Trp Ala Ala Glu Val Pro Gly Thr Lys Ile Ala

    2215                2220                2225

ggg acc ctg ctg atc gcc ctg ctg ctt atg gtg gtt ctc atc cca          6824

Gly Thr Leu Leu Ile Ala Leu Leu Leu Met Val Val Leu Ile Pro

    2230                2235                2240

gaa ccg gaa aag cag agg tca caa aca gat aat caa ctg gcg gtg          6869

Glu Pro Glu Lys Gln Arg Ser Gln Thr Asp Asn Gln Leu Ala Val

    2245                2250                2255

ttt ctc atc tgt gtc ttg acc gtg gtt gga gtg gtg gca gca aac          6914

Phe Leu Ile Cys Val Leu Thr Val Val Gly Val Val Ala Ala Asn

    2260                2265                2270

gag tac ggg atg cta gaa aaa acc aaa gca gac ctc aag agc atg          6959

Glu Tyr Gly Met Leu Glu Lys Thr Lys Ala Asp Leu Lys Ser Met

    2275                2280                2285

ttt ggc gga aag acg cag gca tca gga ctg act gga tta cca agc          7004

Phe Gly Gly Lys Thr Gln Ala Ser Gly Leu Thr Gly Leu Pro Ser

    2290                2295                2300

atg gca ctg gac ctg cgt cca gcc aca gct tgg gca ctg tat ggg          7049

Met Ala Leu Asp Leu Arg Pro Ala Thr Ala Trp Ala Leu Tyr Gly

    2305                2310                2315

ggg agc aca gtc gtg cta acc cct ctt ctg aag cac ctg atc acg          7094

Gly Ser Thr Val Val Leu Thr Pro Leu Leu Lys His LeuIle Thr

    2320                2325                2330

tcg gaa tac gtc acc aca tcg cta gcc tca att aac tca caa gct          7139

Ser Glu Tyr Val Thr Thr Ser Leu Ala Ser Ile Asn Ser Gln Ala

    2335                2340                2345

ggc tca tta ttt gtc ttg cca cga ggc gtg cct ttt acc gac cta          7184

Gly Ser Leu Phe Val Leu Pro Arg Gly Val Pro Phe Thr Asp Leu

    2350                2355                2360

gac ttg acc gtt ggc ctc gtc ttc ctt ggc tgt tgg ggt caa atc          7229

Asp Leu Thr Val Gly Leu Val Phe Leu Gly Cys Trp Gly Gln Ile

    2365                2370                2375

acc ctc aca acg ttt ttg aca gcc atg gtt ctg gcg aca ctt cac          7274

Thr Leu Thr Thr Phe Leu Thr Ala Met Val Leu Ala Thr Leu His

    2380                2385                2390

tat ggg tac atg ctc cct gga tgg caa gca gaa gca ctc agg gca          7319

Tyr Gly Tyr Met Leu Pro Gly Trp Gln Ala Glu Ala Leu Arg Ala

    2395                2400                2405

gcc cag aga agg aca gcg gct gga ata atg aag aat gcc gtt gtt          7364

Ala Gln Arg Arg Thr Ala Ala Gly Ile Met Lys Asn Ala Val Val

    2410                2415                2420

gac gga atg gtc gcc act gat gtg cct gaa ctg gaa agg acc act          7409

Asp Gly Met Val Ala Thr Asp Val Pro Glu Leu Glu Arg Thr Thr

    2425                2430                2435

cct ctg atg caa aag aaa gtc gga cag gtg ctc ctc ata ggg gta          7454

Pro Leu Met Gln Lys Lys Val Gly Gln Val Leu Leu Ile Gly Val

    2440                2445                2450

agc gtg gca gcg ttc ctc gtc aac cct aat gtc acc act gtg aga          7499

Ser Val Ala Ala Phe Leu Val Asn Pro Asn Val Thr Thr Val Arg

    2455                2460                2465

gaa gca ggg gtg ttg gtg aca gcg gct acg ctc act ttg tgg gac          7544

Glu Ala Gly Val Leu Val Thr Ala Ala Thr Leu Thr Leu Trp Asp

    2470                2475                2480

aac gga gcc agt gcc gtt tgg aat tcc acc act gcc acg gga ctc          7589

Asn Gly Ala Ser Ala Val Trp Asn Ser Thr Thr Ala Thr Gly Leu

    2485                2490                2495

tgc cat gta atg cga ggt agc tac ctg gct gga ggc tcc att gct          7634

Cys His Val Met Arg Gly Ser Tyr Leu Ala Gly Gly Ser Ile Ala

    2500                2505                2510

tgg act ctc atc aag aac gct gac aag ccc tcc tta aaa agg gga          7679

Trp Thr Leu Ile Lys Asn Ala Asp Lys Pro Ser Leu Lys Arg Gly

    2515                2520                2525

agg cct ggg ggc agg acg cta ggg gag cag tgg aag gaa aaa cta          7724

Arg Pro Gly Gly Arg Thr Leu Gly Glu Gln Trp Lys Glu Lys Leu

    2530                2535                2540

aat gcc atg agc aga gaa gag ttt ttt aaa tac cgg aga gag gcc          7769

Asn Ala Met Ser Arg Glu Glu Phe Phe Lys Tyr Arg Arg Glu Ala

    2545                2550                2555

ata atc gag gtg gac cgc act gaa gca cgc agg gct aga cgt gaa          7814

Ile Ile Glu Val Asp Arg Thr Glu Ala Arg Arg Ala Arg Arg Glu

    2560                2565                2570

aat aac ata gtg gga gga cat ccg gtt tcg cga ggc tca gca aaa          7859

Asn Asn Ile Val Gly Gly His Pro Val Ser Arg Gly Ser Ala Lys

    2575                2580                2585

ctc cgt tgg ctc gta gag aaa gga ttt gtc tcg cca ata gga aaa          7904

Leu Arg Trp Leu Val Glu Lys Gly Phe Val Ser Pro Ile Gly Lys

    2590                2595                2600

gtc att gat cta ggg tgt ggg cgt gga gga tgg agc tac tac gca          7949

Val Ile Asp Leu Gly Cys Gly Arg Gly Gly Trp Ser Tyr Tyr Ala

    2605                2610                2615

gca acc ctg aag aag gtc cag gaa gtc aga gga tac acg aaa ggt          7994

Ala Thr Leu Lys Lys Val Gln Glu Val Arg Gly Tyr Thr Lys Gly

    2620                2625                2630

ggg gcg gga cat gaa gaa ccg atg ctc atg cag agc tac ggc tgg          8039

Gly Ala Gly His Glu Glu Pro Met Leu Met Gln Ser Tyr Gly Trp

    2635                2640                2645

aac ctg gtc tcc ctg aag agt gga gtg gac gtt ttt tac aaa cct          8084

Asn Leu Val Ser Leu Lys Ser Gly Val Asp Val Phe Tyr Lys Pro

    2650                2655                2660

tca gag ccc agt gac act ctg ttc tgc gac ata ggg gaa tcc tcc          8129

Ser Glu Pro Ser Asp Thr Leu Phe Cys Asp Ile Gly Glu Ser Ser

    2665                2670                2675

cca agt cca gaa gta gaa gaa caa cgc aca cta cgc gtc cta gag          8174

Pro Ser Pro Glu Val Glu Glu Gln Arg Thr Leu Arg Val Leu Glu

    2680                2685                2690

atg aca tct gac tgg ttg cac cga gga cct aga gag ttc tgt ata          8219

Met Thr Ser Asp Trp Leu His Arg Gly Pro Arg Glu Phe Cys Ile

    2695                2700                2705

aaa gtt ctt tgc ccc tac atg ccc aag gtt ata gaa aaa atg gaa          8264

Lys Val Leu Cys Pro Tyr Met Pro Lys Val Ile Glu Lys Met Glu

    2710                2715                2720

gtc ctg cag cgc cgc ttc gga ggt ggg cta gtg cgt ctt ccc ctg          8309

Val Leu Gln Arg Arg Phe Gly Gly Gly Leu Val Arg Leu Pro Leu

    2725                2730                2735

tcc cgc aac tcc aat cac gag atg tac tgg gtt agt gga ccg gct          8354

Ser Arg Asn Ser Asn His Glu Met Tyr Trp Val Ser Gly Pro Ala

    2740                2745                2750

ggc aat gtg gtg cac gct gtg aac atg acc agc cag gta cta ctg          8399

Gly Asn Val Val His Ala Val Asn Met Thr Ser Gln Val Leu Leu

    2755                2760                2765

ggg cga atg gat cgc aca gtg tgg aga ggg cca aag tat gag gaa          8444

Gly Arg Met Asp Arg Thr Val Trp Arg Gly Pro Lys Tyr Glu Glu

    2770                2775                2780

gat gtc aac tta ggg agc gga aca aga gcc gtg gga aag gga gaa          8489

Asp Val Asn Leu Gly Ser Gly Thr Arg Ala Val Gly Lys Gly Glu

    2785                2790                2795

gtc cat agc aat cag gag aaa atc aag aag aga atc cag aag ctt          8534

Val His Ser Asn Gln Glu Lys Ile Lys Lys Arg Ile Gln Lys Leu

    2800                2805                2810

aaa gaa gaa ttc gcc aca acg tgg cac aaa gac cct gag cat cca          8579

Lys Glu Glu Phe Ala Thr Thr Trp His Lys Asp Pro Glu His Pro

    2815                2820                2825

tac cgc act tgg aca tac cac gga agc tat gaa gtg aag gct act          8624

Tyr Arg Thr Trp Thr Tyr His Gly Ser Tyr Glu Val Lys Ala Thr

    2830                2835                2840

ggc tca gct agt tct ctc gtc aac gga gtg gtg aag ctc atg agc          8669

Gly Ser Ala Ser Ser Leu Val Asn Gly Val Val Lys Leu Met Ser

    2845                2850                2855

aaa cct tgg gac gcc att gcc aac gtc acc acc atg gcc atg act          8714

Lys Pro Trp Asp Ala Ile Ala Asn Val Thr Thr Met Ala Met Thr

    2860                2865                2870

gac acc acc cct ttt gga cag caa aga gtt ttc aag gag aaa gtt          8759

Asp Thr Thr Pro Phe Gly Gln Gln Arg Val Phe Lys Glu Lys Val

    2875                2880                2885

gac acg aag gct cct gag cca cca act gga gct aag gaa gtg ctc          8804

Asp Thr Lys Ala Pro Glu Pro Pro Thr Gly Ala Lys Glu Val Leu

    2890                2895                2900

aac gag acc acc aac tgg ctg tgg gcc tac ttg tca cgg gaa aaa          8849

Asn Glu Thr Thr Asn Trp Leu Trp Ala Tyr Leu Ser Arg Glu Lys

    2905                2910                2915

aga ccc cgc ttg tgc acc aag gaa gaa ttc ata aag aaa gtc aat          8894

Arg Pro Arg Leu Cys Thr Lys Glu Glu Phe Ile Lys Lys Val Asn

    2920                2925                2930

agc aac gcg gct ctt gga gca gtg ttc gct gaa cag aat caa tgg          8939

Ser Asn Ala Ala Leu Gly Ala Val Phe Ala Glu Gln Asn Gln Trp

    2935                2940                2945

agc acg gcg cgt gag gct gtg gat gac ccg cgg ttt tgg gag atg          8984

Ser Thr Ala Arg Glu Ala Val Asp Asp Pro Arg Phe Trp Glu Met

    2950                2955                2960

gtt gat gaa gag agg gaa aac cat ctg cga gga gag tgt cac aca          9029

Val Asp Glu Glu Arg Glu Asn His Leu Arg Gly Glu Cys His Thr

    2965                2970                2975

tgt atc tat aac atg atg gga aaa aga gag aag aag cct gga gag          9074

Cys Ile Tyr Asn Met Met Gly Lys Arg Glu Lys Lys Pro Gly Glu

    2980                2985                2990

ttt gga aaa gct aaa gga agc agg gcc att tgg ttc atg tgg ctt          9119

Phe Gly Lys Ala Lys Gly Ser Arg Ala Ile Trp Phe Met Trp Leu

    2995                3000                3005

gga gca cgg tat cta gag ttt gaa gct ttg ggg ttc ctg aat gaa          9164

Gly Ala Arg Tyr Leu Glu Phe Glu Ala Leu Gly Phe Leu Asn Glu

    3010                3015                3020

gat cat tgg ctg agc cga gag aat tca gga ggt gga gtg gaa ggc          9209

Asp His Trp Leu Ser Arg Glu Asn Ser Gly Gly Gly Val Glu Gly

    3025                3030                3035

tca ggc gtc caa aag ctg gga tac atc ctc cgt gat ata gca gga          9254

Ser Gly Val Gln Lys Leu Gly Tyr Ile Leu Arg Asp Ile Ala Gly

    3040                3045                3050

aag caa gga gga aaa atg tac gct gat gat acc gcc ggg tgg gac          9299

Lys Gln Gly Gly Lys Met Tyr Ala Asp Asp Thr Ala Gly Trp Asp

    3055                3060                3065

act aga att acc aga act gat tta gaa aat gaa gcc aag gtg ctg          9344

Thr Arg Ile Thr Arg Thr Asp Leu Glu Asn Glu Ala Lys Val Leu

    3070                3075                3080

gag ctt cta gac ggt gaa cac cgc atg ctc gcc cga gcc ata att          9389

Glu Leu Leu Asp Gly Glu His Arg Met Leu Ala Arg Ala Ile Ile

    3085                3090                3095

gaa ttg act tac agg cac aaa gtg gtc aag gtc atg aga cct gca          9434

Glu Leu Thr Tyr Arg His Lys Val Val Lys Val Met Arg Pro Ala

    3100                3105                3110

gca gaa gga aag acc gtg atg gac gtg ata tca agg gag gat caa          9479

Ala Glu Gly Lys Thr Val Met Asp Val Ile Ser Arg Glu Asp Gln

    3115                3120                3125

agg ggg agt gga cag gtg gtc act tat gct ctt aac act ttc acg          9524

Arg Gly Ser Gly Gln Val Val Thr Tyr Ala Leu Asn Thr Phe Thr

    3130                3135                3140

aac atc gct gtc cag ctc gtc agg ctg atg gag gct gag ggg gtc          9569

Asn Ile Ala Val Gln Leu Val Arg Leu Met Glu Ala Glu Gly Val

    3145                3150                3155

att gga cca caa cac ttg gaa cag cta cct aga aaa aac aag ata          9614

Ile Gly Pro Gln His Leu Glu Gln Leu Pro Arg Lys Asn Lys Ile

    3160                3165                3170

gct gtc agg acc tgg ctc ttt gag aat gga gag gag aga gtg tcc          9659

Ala Val Arg Thr Trp Leu Phe Glu Asn Gly Glu Glu Arg Val Ser

    3175                3180                3185

agg atg gct atc agc gga gac gac tgt gtc gtc aag ccg ctg gac          9704

Arg Met Ala Ile Ser Gly Asp Asp Cys Val Val Lys Pro Leu Asp

    3190                3195                3200

gac aga ttc gcc acg gcc ctc cac ttc ctc aac gca atg tca aag          9749

Asp Arg Phe Ala Thr Ala Leu His Phe Leu Asn Ala Met Ser Lys

    3205                3210                3215

gtc aga aaa gac atc cag gaa tgg aag cct tca cat ggc tgg cac          9794

Val Arg Lys Asp Ile Gln Glu Trp Lys Pro Ser His Gly Trp His

    3220                3225                3230

gat tgg cag caa gtt ccc ttc tgc tct aac cat ttt cag gag att          9839

Asp Trp Gln Gln Val Pro Phe Cys Ser Asn His Phe Gln Glu Ile

    3235                3240                3245

gtg atg aaa gat gga agg agt ata gtt gtc ccg tgc aga gga cag          9884

Val Met Lys Asp Gly Arg Ser Ile Val Val Pro Cys Arg Gly Gln

    3250                3255                3260

gat gag ctg ata ggc agg gct cgc atc tcc cca gga gct gga tgg          9929

Asp Glu Leu Ile Gly Arg Ala Arg Ile Ser Pro Gly Ala Gly Trp

    3265                3270                3275

aat gtg aag gac aca gct tgt ctg gcc aaa gca tat gca cag atg          9974

Asn Val Lys Asp Thr Ala Cys Leu Ala Lys Ala Tyr Ala Gln Met

    3280                3285                3290

tgg cta ctc cta tac ttc cat cgt agg gac ttg cgt ctc atg gca         10019

Trp Leu Leu Leu Tyr Phe His Arg Arg Asp Leu Arg Leu Met Ala

    3295                3300                3305

aat gcg att tgc tca gca gtg cca gtg gat tgg gtg ccc acg ggc         10064

Asn Ala Ile Cys Ser Ala Val Pro Val Asp Trp Val Pro Thr Gly

    3310                3315                3320

agg aca tcc tgg tcg ata cac tcg aaa gga gag tgg atg acc aca         10109

Arg Thr Ser Trp Ser Ile His Ser Lys Gly Glu Trp Met Thr Thr

    3325                3330                3335

gaa gac atg ctg cag gtc tgg aac aga gtc tgg att gaa gaa aat         10154

Glu Asp Met Leu Gln Val Trp Asn Arg Val Trp Ile Glu Glu Asn

    3340                3345                3350

gaa tgg atg gtg gac aag act cca ata aca agc tgg aca gac gtt         10199

Glu Trp Met Val Asp Lys Thr Pro Ile Thr Ser Trp Thr Asp Val

    3355                3360                3365

ccg tat gtg gga aag cgg gag gac atc tgg tgt ggc agc ctc atc         10244

Pro Tyr Val Gly Lys Arg Glu Asp Ile Trp Cys Gly Ser Leu Ile

    3370                3375                3380

gga acg cga tcc aga gca acc tgg gct gag aac atc tac gcg gcg         10289

Gly Thr Arg Ser Arg Ala Thr Trp Ala Glu Asn Ile Tyr Ala Ala

    3385                3390                3395

ata aac cag gtt aga gct gtc att ggg aaa gaa aat tat gtt gac         10334

Ile Asn Gln Val Arg Ala Val Ile Gly Lys Glu Asn Tyr Val Asp

    3400                3405                3410

tac atg acc tca ctc agg aga tac gaa gat gtc ttg atc cag gaa         10379

Tyr Met Thr Ser Leu Arg Arg Tyr Glu Asp Val Leu Ile Gln Glu

    3415                3420                3425

gac agg gtc atc tagtgtgatt taaggtggaa aagcagatta tgtaaataat         10431

Asp Arg Val Ile

    3430

gtaaatgaga aaatgcatgc atatggagtc aggccagcaa aagctgccac cggatactgg   10491

gtagacggtg ctgtctgcgt cccagtccca ggaggactgg gttaacaaat ctgacaacag   10551

aaagtgagaa agccctcaga accgtctcgg aagcaggtcc ctgctcactg gaagttgaag   10611

gaccaacgtc aggccacaaa tttgtgccac tccgctgagg agtgcggcct gcgcagcccc   10671

aggaggactg ggttaccaaa gccgttgagc ccccacggcc caagcctcgt ctaggatgca   10731

atagacgagg tgtaaggact agaggttaga ggagaccccg tggaaacaac aacatgcggc   1079l

ccaagccccc tcgaagctgt agaggaggtg gaaggactag aggttagagg agaccccgca   10851

tttgcatcaa acagcatatt gacacctggg aatagactgg gagatcttct gctctatctc   10911

aacatcagct actaggcaca gagcgccgaa gtatgtagct ggtggtgagg aagaacacag   10971

gatct                                                               10976

<210>4

<211>3432

<212>PRT

<213>日本脑炎病毒

<400>4

Met Thr Lys Lys Pro Gly Gly Pro Gly Lys Asn Arg Ala Ile Asn Met

1               5                   10                  15

Leu Lys Arg Gly Leu Pro Arg Val Phe Pro Leu Val Gly Val Lys Arg

            20                  25                  30

Val Val Met Ser Leu Leu Asp Gly Arg Gly Pro Val Arg Phe Val Leu

        35                  40                  45

Ala Leu Ile Thr Phe Phe Lys Phe Thr Ala Leu Ala Pro Thr Lys Ala

    50                  55                  60

Leu Leu Gly Arg Trp Lys Ala Val Glu Lys Ser Val Ala Met Lys His

65                  70                  75                  80

Leu Thr Ser Phe Lys Arg Glu Leu Gly Thr Leu Ile Asp Ala Val Asn

                85                  90                  95

Lys Arg Gly Arg Lys Gln Asn Lys Arg Gly Gly Asn Glu Gly SerIle

            100                 105                 110

Met Trp Leu Ala Ser Leu Ala Val Val Ile Ala Cys Ala Gly Ala Met

        115                 120                 125

Lys Leu Ser Asn Phe Gln Gly Lys Leu Leu Met Thr Ile Asn Asn Thr

    130                 135                 140

Asp Ile Ala Asp Val Ile Val Ile Pro Thr Ser Lys Gly Glu Asn Arg

145                 150                 155                 160

Cys Trp Val Arg Ala Ile Asp Val Gly Tyr Met Cys Glu Asp Thr Ile

                165                 170                 175

Thr Tyr Glu Cys Pro Lys Leu Ala Met Gly Asn Asp Pro Glu Asp Val

            180                 185                 190

Asp Cys Trp Cys Asp Asn Gln Glu Val Tyr Val Gln Tyr Gly Arg Cys

        195                 200                 205

Thr Arg Thr Arg His Ser Lys Arg Ser Arg Arg Ser Val Ser Val Gln

    210                 215                 220

Thr His Gly Glu Ser Ser Leu Val Asn Lys Lys Glu Ala Trp Leu Asp

225                 230                 235                 240

Ser Thr Lys Ala Thr Arg Tyr Leu Met Lys Thr Glu Asn Trp Ile Ile

                245                 250                 255

Arg Asn Pro Gly Tyr Ala Phe Leu Ala Ala Val Leu Gly Trp Met Leu

            260                 265                 270

Gly Ser Asn Asn Gly Gln Arg Val Val Phe Thr Ile Leu Leu Leu Leu

        275                 280                 285

Val Ala Pro Ala Tyr Ser Phe Asn Cys Leu Gly Met Gly Asn Arg Asp

    290                 295                 300

Phe Ile Glu Gly Ala Ser Gly Ala Thr Trp Val Asp Leu Val Leu Glu

305                 310                 315                 320

Gly Asp Ser Cys Leu Thr Ile Met Ala Asn Asp Lys Pro Thr Leu Asp

                325                 330                 335

Val Arg Met Ile Asn Ile Glu Ala Ser Gln Leu Ala Glu Val Arg Ser

            340                 345                 350

Tyr Cys Tyr His Ala Ser Val Thr Asp Ile Ser Thr Val Ala Arg Cys

        355                 360                 365

Pro Thr Thr Gly Glu Ala His Asn Glu Lys Arg Ala Asp Ser Ser Tyr

    370                 375                 380

Val Cys Lys Gln Gly Phe Thr Asp Arg Gly Trp Gly Asn Gly Cys Gly

385                 390                 395                 400

Leu Phe Gly Lys Gly Ser Ile Asp Thr Cys Ala Lys Phe Ser Cys Thr

                405                 410                 415

Ser Lys Ala Ile Gly Arg Thr Ile Gln Pro Glu Asn Ile Lys Tyr Lys

            420                 425                 430

Val Gly Ile Phe Val His Gly Ala Thr Thr Ser Glu Asn His Gly Asn

        435                 440                 445

Tyr Ser Ala Gln Val Gly Ala Ser Gln Ala Ala Lys Phe Thr Val Thr

    450                 455                 460

Pro Asn Ala Pro Ser Ile Thr Leu Lys Leu Gly Asp Tyr Gly Glu Val

465                 470                 475                 480

Thr Leu Asp Cys Glu Pro Arg Ser Gly Leu Asn Thr Glu Ala Phe Tyr

                485                 490                 495

Val Met Thr Val Gly Ser Lys Ser Phe Leu Val His Arg Glu Trp Phe

            500                 505                 510

His Asp Leu Ala Leu Pro Trp Thr Ser Pro Ser Ser Thr Ala Trp Arg

        515                 520                 525

Asn Arg Glu Leu Leu Met Glu Phe Glu Glu Ala His Ala Thr Lys Gln

    530                 535                 540

Ser Val Val Ala Leu Gly Ser Gln Glu Gly Gly Leu His Gln Ala Leu

545                 550                 555                 560

Ala Gly Ala Ile Val Val Glu Tyr Ser Ser Ser Val Lys Leu Thr Ser

                565                 570                 575

Gly His Leu Lys Cys Arg Leu Lys Met Asp Lys Leu Ala Leu Lys Gly

            580                 585                 590

Thr Thr Tyr Gly Met Cys Thr Glu Lys Phe Ser Phe Ala Lys Asn Pro

        595                 600                 605

Ala Asp Thr Gly His Gly Thr Val Val Ile Glu Leu Ser Tyr Ser Gly

    610                 615                 620

Ser Asp Gly Pro Cys Lys Ile Pro Ile Val Ser Val Ala Ser Leu Asn

625                 630                 635                 640

Asp Met Thr Pro Val Gly Arg Leu Val Thr Val Asn Pro Phe Val Ala

                645                 650                 655

Thr Ser Ser Ala Asn Ser Lys Val Leu Val Glu Met Glu Pro Pro Phe

            660                 665                 670

Gly Asp Ser Tyr Ile Val Val Gly Arg Gly Asp Lys Gln Ile Asn His

        675                 680                 685

His Trp His Lys Ala Gly Ser Thr Leu Gly Lys Ala Phe Ser Thr Thr

    690                 695                 700

Leu Lys Gly Ala Gln Arg Leu Ala Ala Leu Gly Asp Thr Ala Trp Asp

705                 710                 715                 720

Phe Gly Ser Ile Gly Gly Val Phe Asn Ser Ile Gly Lys Ala Val His

                725                 730                 735

Gln Val Phe Gly Gly Ala Phe Arg Thr Leu Phe Gly Gly Met Ser Trp

            740                 745                 750

Ile Thr Gln Gly Leu Met Gly Ala Leu Leu Leu Trp Met Gly Val Asn

        755                 760                 765

Ala Arg Asp Arg Ser Ile Ala Leu Ala Phe Leu Ala Thr Gly Gly Val

    770                 775                 780

Leu Val Phe Leu Ala Thr Asn Val His Ala Asp Thr Gly Cys Ala Ile

785                 790                 795                 800

Asp Ile Thr Arg Lys Glu Met Arg Cys Gly Ser Gly Ile Phe Val His

                805                 810                 815

Asn Asp Val Glu Ala Trp Val Asp Arg Tyr Lys Tyr Leu Pro Glu Thr

            820                 825                 830

Pro Arg Ser Leu Ala Lys Ile Val His Lys Ala His Lys Glu Gly Val

        835                 840                 845

Cys Gly Val Arg Ser Val Thr Arg Leu Glu His Gln Met Trp Glu Ala

    850                 855                 860

Val Arg Asp Glu Leu Asn Val Leu Leu Lys Glu Asn Ala Val Asp Leu

865                 870                 875                 880

Ser Val Val Val Asn Lys Pro Val Gly Arg Tyr Arg Ser Ala Pro Lys

                885                 890                 895

Arg Leu Ser Met Thr Gln Glu Lys Phe Glu Met Gly Trp Lys Ala Trp

            900                 905                 910

Gly Lys Ser Ile Leu Phe Ala Pro Glu Leu Ala Asn Ser Thr Phe Val

        915                 920                 925

Val Asp Gly Pro Glu Thr Lys Glu Cys Pro Asp Glu His Arg Ala Trp

    930                 935                 940

Asn Ser Met Gln Ile Glu Asp Phe Gly Phe Gly Ile Thr Ser Thr Arg

945                 950                 955                 960

Val Trp Leu Lys Ile Arg Glu Glu Ser Thr Asp Glu Cys Asp Gly Ala

                965                 970                 975

Ile Ile Gly Thr Ala Val Lys Gly His Val Ala Val His Ser Asp Leu

            980                 985                 990

Ser Tyr Trp Ile Glu Ser Arg Tyr Asn Asp Thr Trp Lys Leu Glu Arg

        995                 1000                1005

Ala Val Phe Gly Glu Val Lys Ser Cys Thr Trp Pro Glu Thr His

    1010                1015                1020

Thr Leu Trp Gly Asp Gly Val Glu Glu Ser Glu Leu Ile Ile Pro

    1025                1030                1035

His Thr Ile Ala Gly Pro Lys Ser Lys His Asn Arg Arg Glu Gly

    1040                1045                1050

Tyr Lys Thr Gln Asn Gln Gly Pro Trp Asp Glu Asn Gly Ile Val

    1055                1060                1065

Leu Asp Phe Asp Tyr Cys Pro Gly Thr Lys Val Thr Ile Thr Glu

    1070                1075                1080

Asp Cys Gly Lys Arg Gly Pro Ser Val Arg Thr Thr Thr Asp Ser

    1085                1090                1095

Gly Lys Leu Ile Thr Asp Trp Cys Cys Arg Ser Cys Ser Leu Pro

    1100                1105                1110

Pro Leu Arg Phe Arg Thr Glu Asn Gly Cys Trp Tyr Gly Met Glu

    1115                1120                1125

Ile Arg Pro Val Arg His Asp Glu Thr Thr Leu Val Arg Ser Gln

    1130                1135                1140

Val Asp Ala Phe Asn Gly Glu Met Val Asp Pro Phe Gln Leu Gly

    1145                1150                1155

Leu Leu Val Met Phe Leu Ala Thr Gln Glu Val Leu Arg Lys Arg

    1160                1165                1170

Trp Thr Ala Arg Leu Thr Ile Pro Ala Val Leu Gly Ala Leu Leu

    1175                1180                1185

Val Leu Met Leu Gly Gly Ile Thr Tyr Thr Asp Leu Ala Arg Tyr

    1190                1195                1200

Val Val Leu Val Ala Ala Ala Phe Ala Glu Ala Asn Ser Gly Gly

    1205                1210                1215

Asp Val Leu His Leu Ala Leu Ile Ala Val Phe Lys Ile Gln Pro

    1220                1225                1230

Ala Phe Leu Val Met Asn Met Leu Ser Thr Arg Trp Thr Asn Gln

    1235                1240                1245

Glu Asn Val Val Leu Val Leu Gly Ala Ala Phe Phe Gln Leu Ala

    1250                1255                1260

Ser Val Asp Leu Gln Ile Gly Val His Gly Ile Leu Asn Ala Ala

    1265                1270                1275

Ala Ile Ala Trp Met Ile Val Arg Ala Ile Thr Phe Pro Thr Thr

    1280                1285                1290

Ser Ser Val Thr Met Pro Val Leu Ala Leu Leu Thr Pro Gly Met

    1295                1300                1305

Arg Ala Leu Tyr Leu Asp Thr Tyr Arg Ile Ile Leu Leu Val Ile

    1310                1315                1320

Gly Ile Cys Ser Leu Leu Gln Glu Arg Lys Lys Thr Met Ala Lys

    1325                1330                1335

Lys Lys Gly Ala Val Leu Leu Gly Leu Ala Leu Thr Ser Thr Gly

    1340                1345                1350

Trp Phe Ser Pro Thr Thr Ile Ala Ala Gly Leu Met Val Cys Asn

    1355                1360                1365

Pro Asn Lys Lys Arg Gly Trp Pro Ala Thr Glu Phe Leu Ser Ala

    1370                1375                1380

Val Gly Leu Met Phe Ala Ile Val Gly Gly Leu Ala Glu Leu Asp

    1385                1390                1395

Ile Glu Ser Met Ser Ile Pro Phe Met Leu Ala Gly Leu Met Ala

    1400                1405                1410

Val Ser Tyr Val Val Ser Gly Lys Ala Thr Asp Met Trp Leu Glu

    1415                1420                1425

Arg Ala Ala Asp Ile Ser Trp Glu Met Asp Ala Ala Ile Thr Gly

    1430                1435                1440

Ser Ser Arg Arg Leu Asp Val Lys Leu Asp Asp Asp Gly Asp Phe

    1445                1450                1455

His Leu Ile Asp Asp Pro Gly Val Pro Trp Lys Val Trp Val Leu

    1460                1465                1470

Arg Met Ser Cys Ile Gly Leu Ala Ala Leu Thr Pro Trp Ala Ile

    1475                1480                1485

Val Pro Ala Ala Phe Gly Tyr Trp Leu Thr Leu Lys Thr Thr Lys

    1490                1495                1500

Arg Gly Gly Val Phe Trp Asp Thr Pro Ser Pro Lys Pro Cys Ser

    1505                1510                1515

Lys Gly Asp Thr Thr Thr Gly Val Tyr Arg Ile Met Ala Arg Gly

    1520                1525                1530

Ile Leu Gly Thr Tyr Gln Ala Gly Val GlyVal Met Tyr Glu Asn

    1535                1540                1545

Val Phe His Thr Leu Trp His Thr Thr Arg Gly Ala Ala Ile Met

    1550                1555                1560

Ser Gly Glu Gly Lys Leu Thr Pro Tyr Trp Gly Ser Val Lys Glu

    1565                1570                1575

Asp Arg Ile Ala Tyr Gly Gly Pro Trp Arg Phe Asp Arg Lys Trp

    1580                1585                1590

Asn Gly Thr Asp Asp Val Gln Val Ile Val Val Glu Pro Gly Lys

    1595                1600                1605

Ala Ala Val Asn Ile Gln Thr Lys Pro Gly Val Phe Arg Thr Pro

    1610                1615                1620

Phe Gly Glu Val Gly Ala Val Ser Leu Asp Tyr Pro Arg Gly Thr

    1625                1630                1635

Ser Gly Ser Pro Ile Leu Asp Ser Asn Gly Asp Ile Ile Gly Leu

    1640                1645                1650

Tyr Gly Asn Gly Val Glu Leu Gly Asp Gly Ser Tyr Val Ser Ala

    1655                1660                1665

Ile Val Gln Gly Asp Arg Gln Glu Glu Pro Val Pro Glu Ala Tyr

    1670                1675                1680

Thr Pro Asn Met Leu Arg Lys Arg Gln Met Thr Val Leu Asp Leu

    1685                1690                1695

His Pro Gly Ser Gly Lys Thr Lys Lys Ile Leu Pro Gln Ile Ile

    1700                1705                1710

Lys Asp Ala Ile Gln Gln Arg Leu Arg Thr Ala Val Leu Ala Pro

    1715                1720                1725

Thr Arg Val Val Ala Ala Glu Met Ala Glu Ala Leu Arg Gly Leu

    1730                1735                1740

Pro Val Arg Tyr Gln Thr Ser Ala Val Gln Arg Glu His Gln Gly

    1745                1750                1755

Asn Glu Ile Val Asp Val Met Cys His Ala Thr Leu Thr His Arg

    1760                1765                1770

Leu Met Ser Pro Asn Arg Val Pro Asn Tyr Asn Leu Phe Val Met

    1775                1780                1785

Asp Glu Ala His Phe Thr Asp Pro Ala Ser Ile Ala Ala Arg Gly

    1790                1795                1800

Tyr Ile Ala Thr Lys Val Glu Leu Gly Glu Ala Ala Ala Ile Phe

    1805                1810                1815

Met Thr Ala Thr Pro Pro Gly Thr Thr Asp Pro Phe Pro Asp Ser

    1820                1825                1830

Asn Ala Pro Ile His Asp Leu Gln Asp Glu Ile Pro Asp Arg Ala

    1835                1840                1845

Trp Ser Ser Gly Tyr Glu Trp Ile Thr Glu Tyr Ala Gly Lys Thr

    1850                1855                1860

Val Trp Phe Val Ala Ser Val Lys Met Gly Asn Glu Ile Ala Met

    1865                1870                1875

Cys Leu Gln Arg Ala Gly Lys Lys Val Ile Gln Leu Asn Arg Lys

    1880                1885                1890

Ser Tyr Asp Thr Glu Tyr Pro Lys Cys Lys Asn Gly Asp Trp Asp

    1895                1900                1905

Phe Val Ile Thr Thr Asp Ile Ser Glu Met Gly Ala Asn Phe Gly

    1910                1915                1920

Ala Ser Arg Val Ile Asp Cys Arg Lys Ser Val Lys Pro Thr Ile

    1925                1930                1935

Leu Glu Glu Gly Glu Gly Arg Val Ile Leu Gly Asn Pro Ser Pro

    1940                1945                1950

Ile Thr Ser Ala Ser Ala Ala Gln Arg Arg Gly Arg Val Gly Arg

    1955                1960                1965

Asn Pro Asn Gln Val Gly Asp Glu Tyr His Tyr Gly Gly Ala Thr

    1970                1975                1980

Ser Glu Asp Asp Ser Asn Leu Ala His Trp Thr Glu Ala Lys Ile

    1985                1990                1995

Met Leu Asp Asn Ile His Met Pro Asn Gly Leu Val Ala Gln Leu

    2000                2005                2010

Tyr Gly Pro Glu Arg Glu Lys Ala Phe Thr Met Asp Gly Glu Tyr

    2015                2020                2025

Arg Leu Arg Gly Glu Glu Lys Lys Asn Phe Leu Glu Leu Leu Arg

    2030                2035                2040

Thr Ala Asp Leu Pro Val Trp Leu Ala Tyr Lys Val Ala Ser Asn

    2045                2050                2055

Gly Ile Gln Tyr Thr Asp Arg Lys Trp Cys Phe Asp Gly Pro Arg

    2060                2065                2070

Thr Asn Ala Ile Leu Glu Asp Asn Thr Glu Val Glu Ile Val Thr

    2075                2080                2085

Arg Met Gly Glu Arg Lys Ile Leu Lys Pro Arg Trp Leu Asp Ala

    2090                2095                2100

Arg Val Tyr Ala Asp His Gln Ala Leu Lys Trp Phe Lys Asp Phe

    2105                2110                2115

Ala Ala Gly Lys Arg Ser Ala Val Ser Phe Ile Glu Val Leu Gly

    2120                2125                2130

Arg Met Pro Glu His Phe Met Gly Lys Thr Arg Glu Ala Leu Asp

    2135                2140                2145

Thr Met Tyr Leu Val Ala Thr Ala Glu Lys Gly Gly Lys Ala His

    2150                2155                2160

Arg Met Ala Leu Glu Glu Leu Pro Asp Ala Leu Glu Thr Ile Thr

    2165                2170                2175

Leu Ile Val Ala Ile Thr Val Met Thr Gly Gly Phe Phe Leu Leu

    2180                2185                2190

Met Met Gln Arg Lys Gly Ile Gly Lys Met Gly Leu Gly Ala Leu

    2195                2200                2205

Val Leu Thr Leu Ala Thr Phe Phe Leu Trp Ala Ala Glu Val Pro

    2210                2215                2220

Gly Thr Lys Ile Ala Gly Thr Leu Leu Ile Ala Leu Leu Leu Met

    2225                2230                2235

Val Val Leu Ile Pro Glu Pro Glu Lys Gln Arg Ser Gln Thr Asp

    2240                2245                2250

Asn Gln Leu Ala Val Phe Leu Ile Cys Val Leu Thr Val Val Gly

    2255                2260                2265

Val Val Ala Ala Asn Glu Tyr Gly Met Leu Glu Lys Thr Lys Ala

    2270                2275                2280

Asp Leu Lys Ser Met Phe Gly Gly Lys Thr Gln Ala Ser Gly Leu

    2285                2290                2295

Thr Gly Leu Pro Ser Met Ala Leu Asp Leu Arg Pro Ala Thr Ala

    2300                2305                2310

Trp Ala Leu Tyr Gly Gly Ser Thr Val Val Leu Thr Pro Leu Leu

    2315                2320                2325

Lys His Leu Ile Thr Ser Glu Tyr Val Thr Thr Ser Leu Ala Ser

    2330                2335                2340

Ile Asn Ser Gln Ala Gly Ser Leu Phe Val Leu Pro Arg Gly Val

    2345                2350                2355

Pro Phe Thr Asp Leu Asp Leu Thr Val Gly Leu Val Phe Leu Gly

    2360                2365                2370

Cys Trp Gly Gln Ile Thr Leu Thr Thr Phe Leu Thr Ala Met Val

    2375                2380                2385

Leu Ala Thr Leu His Tyr Gly Tyr Met Leu Pro Gly Trp Gln Ala

    2390                2395                2400

Glu Ala Leu Arg Ala Ala Gln Arg Arg Thr Ala Ala Gly Ile Met

    2405                2410                2415

Lys Asn Ala Val Val Asp Gly Met Val Ala Thr Asp Val Pro Glu

    2420                2425                2430

Leu Glu Arg Thr Thr Pro Leu Met Gln Lys Lys Val Gly Gln Val

    2435                2440                2445

Leu Leu Ile Gly Val Ser Val Ala Ala Phe Leu Val Asn Pro Asn

    2450                2455                2460

Val Thr Thr Val Arg Glu Ala Gly Val Leu Val Thr Ala Ala Thr

    2465                2470                2475

Leu Thr Leu Trp Asp Asn Gly Ala Ser Ala Val Trp Asn Ser Thr

    2480                2485                2490

Thr Ala Thr Gly Leu Cys His Val Met Arg Gly Ser Tyr Leu Ala

    2495                2500                2505

Gly Gly Ser Ile Ala Trp Thr LeuIle Lys Asn Ala Asp Lys Pro

    2510                2515                2520

Ser Leu Lys Arg Gly Arg Pro Gly Gly Arg Thr Leu Gly Glu Gln

    2525                2530                2535

Trp Lys Glu Lys Leu Asn Ala Met Ser Arg Glu Glu Phe Phe Lys

    2540                2545                2550

Tyr Arg Arg Glu Ala Ile Ile Glu Val Asp Arg Thr Glu Ala Arg

    2555                2560                2565

Arg Ala Arg Arg Glu Asn Asn Ile Val Gly Gly His Pro Val Ser

    2570                2575                2580

Arg Gly Ser Ala Lys Leu Arg Trp Leu Val Glu Lys Gly Phe Val

    2585                2590                2595

Ser Pro Ile Gly Lys Val Ile Asp Leu Gly Cys Gly Arg Gly Gly

    2600                2605                2610

Trp Ser Tyr Tyr Ala Ala Thr Leu Lys Lys Val Gln Glu Val Arg

    2615                2620                2625

Gly Tyr Thr Lys Gly Gly Ala Gly His Glu Glu Pro Met Leu Met

    2630                2635                2640

Gln Ser Tyr Gly Trp Asn Leu Val Ser Leu Lys Ser Gly Val Asp

    2645                2650                2655

Val Phe Tyr Lys Pro Ser Glu Pro Ser Asp Thr Leu Phe Cys Asp

    2660                2665                2670

Ile Gly Glu Ser Ser Pro Ser Pro Glu Val Glu Glu Gln Arg Thr

    2675                2680                2685

Leu Arg Val Leu Glu Met Thr Ser Asp Trp Leu His Arg Gly Pro

    2690                2695                2700

Arg Glu Phe Cys Ile Lys Val Leu Cys Pro Tyr Met Pro Lys Val

    2705                2710                2715

Ile Glu Lys Met Glu Val Leu Gln Arg Arg Phe Gly Gly Gly Leu

    2720                2725                2730

Val Arg Leu Pro Leu Ser Arg Asn Ser Asn His Glu Met Tyr Trp

    2735                2740                2745

Val Ser Gly Pro Ala Gly Asn Val Val His Ala Val Asn Met Thr

    2750                2755                2760

Ser Gln Val Leu Leu Gly Arg Met Asp Arg Thr Val Trp Arg Gly

    2765                2770                2775

Pro Lys Tyr Glu Glu Asp Val Asn Leu Gly Ser Gly Thr Arg Ala

    2780                2785                2790

Val Gly Lys Gly Glu Val His Ser Asn Gln Glu Lys Ile Lys Lys

    2795                2800                2805

Arg Ile Gln Lys Leu Lys Glu Glu Phe Ala Thr Thr Trp His Lys

    2810                2815                2820

Asp Pro Glu His Pro Tyr Arg Thr Trp Thr Tyr His Gly Ser Tyr

    2825                2830                2835

Glu Val Lys Ala Thr Gly Ser Ala Ser Ser Leu Val Asn Gly Val

    2840                2845                2850

Val Lys Leu Met Ser Lys Pro Trp Asp Ala Ile Ala Asn Val Thr

    2855                2860                2865

Thr Met Ala Met Thr Asp Thr Thr Pro Phe Gly Gln Gln Arg Val

    2870                2875                2880

Phe Lys Glu Lys Val Asp Thr Lys Ala Pro Glu Pro Pro Thr Gly

    2885                2890                2895

Ala Lys Glu Val Leu Asn Glu Thr Thr Asn Trp Leu Trp Ala Tyr

    2900                2905                2910

Leu Ser Arg Glu Lys Arg Pro Arg Leu Cys Thr Lys Glu Glu Phe

    2915                2920                2925

Ile Lys Lys Val Asn Ser Asn Ala Ala Leu Gly Ala Val Phe Ala

    2930                2935                2940

Glu Gln Asn Gln Trp Ser Thr Ala Arg Glu Ala Val Asp Asp Pro

    2945                2950                2955

Arg Phe Trp Glu Met Val Asp Glu Glu Arg Glu Asn His Leu Arg

    2960                2965                2970

Gly Glu Cys His Thr Cys Ile Tyr Asn Met Met Gly Lys Arg Glu

    2975                2980                2985

Lys Lys Pro Gly Glu Phe Gly Lys Ala Lys Gly Ser Arg Ala Ile

    2990                2995                3000

Trp Phe Met Trp Leu Gly Ala Arg Tyr Leu Glu Phe Glu Ala Leu

    3005                3010                3015

Gly Phe Leu Asn Glu Asp His Trp Leu Ser Arg Glu Asn Ser Gly

    3020                3025                3030

Gly Gly Val Glu Gly Ser Gly Val Gln Lys Leu Gly Tyr Ile Leu

    3035                3040                3045

Arg Asp Ile Ala Gly Lys Gln Gly Gly Lys Met Tyr Ala Asp Asp

    3050                3055                3060

Thr Ala Gly Trp Asp Thr Arg Ile Thr Arg Thr Asp Leu Glu Asn

    3065                3070                3075

Glu Ala Lys Val Leu Glu Leu Leu Asp Gly Glu His Arg Met Leu

    3080                3085                3090

Ala Arg Ala IleIle Glu Leu Thr Tyr Arg His Lys Val Val Lys

    3095                3100                3105

Val Met Arg Pro Ala Ala Glu Gly Lys Thr Val Met Asp Val Ile

    3110                3115                3120

Ser Arg Glu Asp Gln Arg Gly Ser Gly Gln Val Val Thr Tyr Ala

    3125                3130                3135

Leu Asn Thr Phe Thr Asn Ile Ala Val Gln Leu Val Arg Leu Met

    3140                3145                3150

Glu Ala Glu Gly Val Ile Gly Pro Gln His Leu Glu Gln Leu Pro

    3155                3160                3165

Arg Lys Asn Lys Ile Ala Val Arg Thr Trp Leu Phe Glu Asn Gly

    3170                3175                3180

Glu Glu Arg Val Ser Arg Met Ala Ile Ser Gly Asp Asp Cys Val

    3185                3190                3195

Val Lys Pro Leu Asp Asp Arg Phe Ala Thr Ala Leu His Phe Leu

    3200                3205                3210

Asn Ala Met Ser Lys Val Arg Lys Asp Ile Gln Glu Trp Lys Pro

    3215                3220                3225

Ser His Gly Trp His Asp Trp Gln Gln Val Pro Phe Cys Ser Asn

    3230                3235                3240

His Phe Gln Glu Ile Val Met Lys Asp Gly Arg Ser Ile Val Val

    3245                3250                3255

Pro Cys Arg Gly Gln Asp Glu Leu Ile Gly Arg Ala Arg Ile Ser

    3260                3265                3270

Pro Gly Ala Gly Trp Asn Val Lys Asp Thr Ala Cys Leu Ala Lys

    3275                3280                3285

Ala Tyr Ala Gln Met Trp Leu Leu Leu Tyr Phe His Arg Arg Asp

    3290                3295                3300

Leu Arg Leu Met Ala Asn Ala Ile Cys Ser Ala Val Pro Val Asp

    3305                3310                3315

Trp Val Pro Thr Gly Arg Thr Ser Trp Ser Ile His Ser Lys Gly

    3320                3325                3330

Glu Trp Met Thr Thr Glu Asp Met Leu Gln Val Trp Asn Arg Val

    3335                3340                3345

Trp Ile Glu Glu Asn Glu Trp Met Val Asp Lys Thr Pro Ile Thr

    3350                3355                3360

Ser Trp Thr Asp Val Pro Tyr Val Gly Lys Arg Glu Asp Ile Trp

    3365                3370                3375

Cys Gly Ser Leu Ile Gly Thr Arg Ser Arg Ala Thr Trp Ala Glu

    3380                3385                3390

Asn Ile Tyr Ala Ala Ile Asn Gln Val Arg Ala Val Ile Gly Lys

    3395                3400                3405

Glu Asn Tyr Val Asp Tyr Met Thr Set Leu Arg Arg Tyr Glu Asp

    3410                3415                3420

Val Leu Ile Gln Glu Asp Arg Val Ile

    3425                3430

<210>5

<211>34

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>5

agaagtttat ctgtgtgaac ttcttggctt agta                                  34

<210>6

<211>35

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>6

gcaaagagaa tgctttttcc ccatgctttc cagcc                                 35

<210>7

<211>35

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>7

tcctgctcaa agagaatgca gtggacctca gtgtg                                 35

<210>8

<211>35

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>8

gtcatgaaga tggctgctgc ctcccctaat tccac                                 35

<210>9

<211>36

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>9

actgatgtca ccgaacagag tgcccaacta caacct                                36

<210>10

<211>35

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>10

ttttctataa ccttgggcat gtaagggcag agaac                                 35

<210>11

<211>35

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>11

gggaatcctc tccaagtcca gaagtagaag aacaa                                 35

<210>12

<211>34

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>12

agatcctgtg ttcttcctca ccaccagcta cata                                  34

<210>13

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>13

agaagtttat ctgtgtgaac                                                  20

<210>14

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>14

aaggctcaat catgtggctc                                                  20

<210>15

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>15

gaaagccaca cggtatctca                                                  20

<210>16

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>16

ctgacatctc gacggtggct                                                  20

<210>17

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>17

tggactgaac actgaagcgt                                                  20

<210>18

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>18

ttgtcattga actatcctac                                                  20

<210>19

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>19

gaacactctt tgggggaatg                                                  20

<210>20

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>20

tgtggaagtg gcatctttgt                                                  20

<210>21

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>21

tgaacaagcc cgtgggaaga                                                  20

<210>22

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>22

acttggccag agacacacac                                                  20

<210>23

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>23

atggtgaaat ggttgaccct                                                  20

<210>24

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>24

agcatggatg attgtccgag                                                  20

<210>25

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>25

agaaaggagc tgtactcttg                                                  20

<210>26

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>26

cctacgtggt gtcaggaaaa                                                  20

<210>27

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>27

ttttccacac actatggcac                                                  20

<210>28

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>28

gaccgtcagg aggaaccagt                                                  20

<210>29

<211>19

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>29

aaggtggaat taggggagg                                                   19

<210>30

<211>19

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>30

aagagggaga aggcagagt                                                   19

<210>31

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>31

atgccatact ggaggacaac                                                  20

<210>32

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>32

gaaagggtat agggaagatg                                                  20

<210>33

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>33

caccacatcg ctagcctcaa                                                  20

<210>34

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>34

ggtattggtg acggcggcta                                                  20

<210>35

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>35

tgtgggcgtg gaggatggag                                                  20

<210>36

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>36

ctagtgcgtc tccccctgtc                                                  20

<210>37

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>37

ctgacaccac cccttttgga                                                  20

<210>38

<211>19

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>38

gctttggggt tcctgaatg                                                   19

<210>39

<211>19

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>39

agaagatcaa agggggagt                                                   19

<210>40

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>40

ccgtgcagag gacaggatga                                                  20

<210>41

<211>18

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>41

tatgcggcga taaaccag                                                    18

<210>42

<211>18

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>42

gcgcagcccc aggaggac                                                    18

<210>43

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>43

cgtcaatgag tgttccaagt                                                  20

<210>44

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>44

caatccagta cgacaagtca                                                  20

<210>45

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>45

tgaccttttt ccccgctctt                                                  20

<210>46

<211>20

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>46

ttcttgattt tctcctgatt                                                  20

<210>47

<211>22

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>47

agatcctgtg ttcttcctca cc                                               22

<210>48

<211>62

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>48

aaatttaata cgactcacta taagaagttt atctgtgtga acttcttggc ttagtatcgt      60

tg                                                                     62

<210>49

<211>45

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>49

cgtcatcaaa agcttcccct ggaaattcga caactttatt gctcc                      45

<210>50

<211>46

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>50

cgcaagcttg gcagttgtca tagcttacgc aggagcaata aagttg                     46

<210>51

<211>45

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>51

gctccaatct agtgacagat ctgactccgc acacgccttc cttgt                      45

<210>52

<211>47

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>52

cacaagaaaa gagatgagat gtggaagtgg catctttgtg cacaacg                    47

<210>53

<211>40

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>53

agatcctgtg ttcttcctca ccaccagcta catacttcgg                            40

<210>54

<211>45

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>54

ggtaaatacc acgcgttgac cgttggtact gccaaccatc cagcc                      45

<210>55

<211>45

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>55

ttcctggcgg cgacacttgg ctggatgctt ggcagtacca acggt                      45

<210>56

<211>46

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>56

aagccggagc gaccaacagc aggaggatgg taaataccac gcgttg                     46

<210>57

<211>46

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>57

caacgcgtgg tatttaccat cctcctgctg ttggtcgctc cggctt                     46

<210>58

<211>62

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>58

aaatttaata cgactcacta taagaagttt atctgtgtga acttcttggc ttagtatcgt      60

tg                                                                     62

<210>59

<211>70

<212>DNA

<213>人工的

<220>

<223>源自日本脑炎病毒和西尼罗病毒

<400>59

ccaagaagtc tctgttgctc attccaaggc agttgaaact gtaagccgga gcgaccagca      60

gcaggaggat                                                             70

<210>60

<211>70

<212>DNA

<213>人工的

<220>

<223>源自日本脑炎病毒和西尼罗病毒

<400>60

caccatcctc ctgctgctgg tcgctccggc ttacagtttc aactgccttg gaatgagcaa      60

cagagacttc                                                             70

<210>61

<211>73

<212>DNA

<213>人工的

<220>

<223>源自日本脑炎病毒和西尼罗病毒

<400>61

ctcttttctt gtgatgtcaa tggcacatcc agtgtcagcg tgcacgttca cggagaggaa      60

gagcagaact cct                                                         73

<210>62

<211>75

<212>DNA

<213>人工的

<220>

<223>源自日本脑炎病毒和西尼罗病毒

<400>62

ggaggagttc tgctcttcct ctccgtgaac gtgcacgctg acactggatg tgccattgac      60

atcacaagaa aagag                                                       75

<210>63

<211>40

<212>DNA

<213>日本脑炎病毒

<400>63

agatcctgtg ttcttcctca ccaccagcta catacttcgg                            40