一种测定药盒中2β－N,N'－双(2－巯乙基)乙撑二胺甲基－3β－(4－氯苯基)托烷含量的方法

摘要

一种测定药盒中2β－[N，N’－双(2－巯乙基)乙撑二胺]甲基－3β－(4－氯苯基)托烷(以下简称：TRODAT－1)含量的方法，涉及TRODAT－1的含量测定技术领域。本发明提供了一种测定药盒中TRODAT－1含量的方法，该方法用于测定药盒中TRODAT－1的含量时，操作简单易行，重复性好，在国际上未见相同报道。

说明书

技术领域

一种测定药盒中2β-[N，N’-双(2-巯乙基)乙撑二胺]甲基-3β-(4-氯苯基)托烷含量的方法，涉及TRODAT-1的含量测定技术领域。

背景技术

锝[^99mTc]-2β-[N，N’-双(2-巯乙基)乙撑二胺]甲基-3β-(4-氯苯基)托烷(^99mTc-TRODAT-1)是第一个锝[^99mTc]标记的成功用于人体的多巴胺转运蛋白显像剂，它能与脑内的多巴胺转运蛋白特异结合而浓聚于纹状体，提供清晰的图像，提示多巴胺能系统的变化信息。国内外大量的人体研究显示：以^99mTc-TRODAT-1为显像剂进行单光子发射计算机断层(SPECT)显像，对有关的疾病特别是对帕金森病的早期诊断具有极佳的临床应用潜力，该显像剂即将在国内外上市。

临床上使用的^99mTc-TRODAT-1是由TRODAT-1药盒在使用前制备的，因此TRODAT-1药盒的质量关系到^99mTc-TRODAT-1的质量能否应用于人体。在对TRODAT-1药盒进行质量控制时，药盒中TRODAT-1的含量是一个关键的指标，目前国内外均没有测定药盒中TRODAT-1的含量的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种测定药盒中TRODAT-1含量的方法，便于进行TRODAT-1药盒的质量控制。

本发明的技术方案：(1)确定标准曲线方程：精密吸取浓度为1mg/ml的TRODAT-1标准溶液从40～150μL范围内均衡选取5～6个点值，各置于分液漏斗中，依次加入三氯甲烷，溴麝香草酚兰溶液，pH缓冲液，振摇后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥后置比色皿中，以不加TRODAT-1标准溶液，按上述相同步骤制成的三氯甲烷溶液为空白，于紫外分光光度计上分别测定吸光度值，根据吸光度值与加入的TRODAT-1量计算出标准曲线方程；(2)测定药盒中TRODAT-1的含量：再将TRODAT-1药盒用pH缓冲液溶解，加入分液漏斗中，加入三氯甲烷，溴麝香草酚兰溶液，振摇后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥后置比色皿中，测定吸光度值，将吸光度值代入标准曲线方程，计算出药盒中TRODAT-1的含量。

所用pH缓冲液是磷酸盐、柠檬酸盐、铵盐、醋酸盐、酒石酸盐、碳酸盐、硼酸盐、巴比妥盐、邻苯二钾酸盐中的一种或一种以上的混合物溶液，其pH值范围为3.0-5.0。

吸光度值的测定波长为410-420nm，各种试剂的用量为：pH缓冲液5ml，三氯甲烷8ml，溴麝香草酚兰溶液4ml。

制备标准溶液所用的pH缓冲液的pH值为4.0，溶解TRODAT-1药盒所用的pH缓冲液的pH值为3.58，吸光度值的测定波长为414nm。

本发明的有益效果：本发明提供了一种测定药盒中TRODAT-1含量的方法，操作简单易行，重复性好，可以用来对药盒中TRODAT-1的含量进行控制。

附图说明

图1以TRODAT-1的吸光度值对含量所作的标准曲线。

具体实施方式

实施例1

标准曲线方程的获取：精密吸取浓度为1mg/ml的TRODAT-1标准溶液40、60、100、120、150μL各置于30ml分液漏斗中，依次加入下列溶液：三氯甲烷8.0ml，溴麝香草酚兰溶液4.0ml，pH 4.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液5.0ml，振摇2分钟后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥后置1cm比色皿中，以不加TRODAT-1标准溶液，按上述相同步骤制成的三氯甲烷溶液为空白，于414nm波长处分别测定吸光度值(如表1)。以吸光度值(A)对TRODAT-1的含量C(μg)进行线性回归计算，得出标准曲线方程(回归方程)为：A＝0.0049C+0.1143。

以TRODAT-1的吸光度值对含量所作的标准曲线如图1所示。

           表1

TRODAT-1含量(Cμg)  吸光度值(A)  40  60  100  120  150  0.312  0.387  0.631  0.710  0.830

实施例2

测定药盒中TRODAT-1的含量：在三个30ml分液漏斗中，各依次精密加入下列溶液：三氯甲烷8.0ml，溴麝香草酚兰溶液4.0ml，取3个不同批号的TRODAT-1药盒各2支，共6支，每2支(同一批号)加入pH 3.58的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液2.5ml，摇匀，使溶解，转移至上述分液漏斗中，再加入pH 3.58的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液2.5ml，摇匀，使溶解，转移至上述分液漏斗中，振摇2分钟后静置使分层，分取澄清的三氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥后置1cm比色皿中，以实施例1中的空白溶液为空白，于414nm波长处分别测定吸光度值，并代入实施例1中的回归方程计算其含量，3个不同批号的TRODAT-1的药盒按上述方法分别进行测定吸光度值和通过标准曲线方程计算其含量，结果(相当于标示量％)分别为103.0％，89.7％，91.7％，如表2所示。

                           表2

  吸光度值(A)  两支药盒中  TRODAT-1的总量(Cμg)  平均每支药盒中含量  相当于标示量(30μg)的百分数  0.417  0.378  O.384  61.8  53.8  55  103.0％  89.7％  91.7％