抗辐射菌属－大肠杆菌间的穿梭载体及其构建方法

摘要

抗辐射菌属－大肠杆菌间的穿梭载体及其制备方法。以抗辐射菌Deinococcus radiopugnans由来的质粒为基础，与大肠杆菌中能自我复制的质粒进行重组而成穿梭载体。载体与具有北美产萤火虫(Photinus pyralis)的寄主DNA由来的荧光素酶基因lux领域的DNA片段重组成具有荧光素酶基因的质粒，将该质粒导入抗辐射菌属细菌，用构建的质粒转化Deinococcus grandis，得到氯霉素抗性的菌株。本发明的穿梭载体在抗辐射菌属细菌及大肠杆菌细胞内能够自我复制，可利用于载体DNA的基因重组及将外源基因导入到抗辐射菌属细菌中。可使用在野外开放封闭环境的各种领域，载体具有荧光素酶基因，在实时监控重组转化子的生育、分布及对环境的影响等方面也非常有用。