一种参麦葡萄糖注射液及其质量控制方法

摘要

本发明公开了一种参麦葡萄糖注射液及其质量控制方法，本发明注射液由如下原料制成：红参总皂苷、麦冬总皂苷、葡萄糖、聚乙二醇；所述聚乙二醇也可由吐温－80，羟丙基－β－环糊精或伯洛沙姆代替；原料中还可加入抗氧剂，如：L－甲硫氨酸或L－谷胱甘肽；或金属络合剂，如依地酸二钠或依地酸钙钠。本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法不仅通过对参麦葡萄糖注射液中有效成分人参皂苷和麦冬皂苷进行鉴别和对参麦葡萄糖注射液中人参皂苷Rg1和Re、麦冬皂苷D和总皂苷的含量进行测定的方法来控制参麦葡萄糖注射液的质量，还采用了指纹图谱测定，保证了本发明参麦葡萄糖注射液的质量和疗效。

说明书

技术领域

本发明涉及一种葡萄糖注射液及其质量控制方法，特别是涉及一种参麦葡萄糖注射液及其质量控制方法。

背景技术

参麦注射液由人参和麦冬组成，有益气养阴、生津止渴、敛阴固脱作用，目前已经广泛用于临床，治疗心血管、呼吸系统等疾病。用法为肌内注射或静脉滴注，但静脉滴注时需用5％葡萄糖注射液250～500ml稀释后才能使用，使用起来比较麻烦。目前，已有2个与参麦注射液相关的专利：一种注射用参麦冻干粉及其制备方法(申请号：99115061.9)和一种注射用参麦无菌粉及其制备方法(申请号：99115060.0)。但这两个专利主要涉及参麦无菌粉末及参麦冻干粉的配比及制备工艺。但是，现有技术还没有对参麦葡萄糖注射液制剂展开研究，更没有采用现代指纹图谱对参脉葡萄糖注射液进行质量控制。

发明内容

本发明目的在于提供一种参麦葡萄糖注射液；本发明目的还在于提供该注射液的质量控制方法，包括鉴别、含量测定和/或指纹图谱测定方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的。

本发明参麦葡萄糖注射液是由如下重量份的原料制成100体积份的注射液：

红参总皂苷10-34重量份    麦冬总皂苷7-10重量份

葡萄糖825-1750重量份

本发明参麦葡萄糖注射液的原料组成优选配比为：

红参总皂苷18重量份       麦冬总皂苷9重量份

葡萄糖1000重量份

本发明参麦葡萄糖注射液的原料组成优选配比为：

红参总皂苷24重量份  麦冬总皂苷8重量份  葡萄糖1500重量份

本发明参麦葡萄糖注射液的原料组成优选配比为：

红参总皂苷34重量份  麦冬总皂苷8.5重量份  葡萄糖1200重量份

上述本发明参麦葡萄糖注射液原料中还应加入0.1～10体积份的聚乙二醇，优选为4-10体积份，更优选8体积份或10体积份，聚乙二醇可以是聚乙二醇₁₅₀₀、聚乙二醇₂₀₀₀、聚乙二醇₄₀₀₀、聚乙二醇₆₀₀₀、聚乙二醇₁₀₀₀₀或聚乙二醇₂₀₀₀₀中的任意一种。

所述聚乙二醇也可由10～2000重量份的吐温-80，10～400重量份的羟丙基-β-环糊精或10～5000重量份的伯洛沙姆代替。

其中吐温-80优选为1000-2000重量份，更优选1500重量份或2000重量份。

羟丙基-β-环糊精优选为50-400重量份，更优选200重量份、300重量份或400重量份。

伯洛沙姆优选为100-1000重量份，更优选200重量份、400重量份、600重量份或800重量份。

上述本发明参麦葡萄糖注射液原料中还可加入抗氧剂，如50～500重量份的L-甲硫氨酸或50～500重量份的L-谷胱甘肽；其中L-甲硫氨酸与L-谷胱甘肽优选50重量份、80重量份、100重量份、300重量份或500重量份。上述本发明参麦葡萄糖注射液原料中还可加入金属络合剂，如100～750重量份的依地酸二钠或100～750重量份的依地酸钙钠；其中依地酸二钠或依地酸钙钠优选200-500重量份，更优选200重量份、300重量份或500重量份。

上述重量份与体积份的对应关系为mg与ml或g与L的对应关系。

上述本发明参麦葡萄糖注射液的制备方法为：

将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得。每瓶规格可以为100ml、250ml或500ml等。

本发明参麦葡萄糖注射液每100ml中，含人参皂苷Rg₁和Re共计4.4～6.6mg，含麦冬皂苷D0.15～0.28mg，总皂苷为28.0～42.0mg。本发明参麦葡萄糖注射液具有益气固脱，养阴生津，生脉的功能，用于治疗气阴两虚之休克、冠心病等。

上述本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法包括如下指纹图谱测定、鉴别和/或含量测定方法。

本发明参麦葡萄糖注射液的指纹图谱测定方法为：

照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；

色谱条件和系统适应用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B进行梯度洗脱，流速为1mL/min；柱温30℃；使用蒸发光散射检测器；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000；

人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg₁对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得；

麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.35mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备方法：精密取本品25ml，注入C18固相萃取小柱，先用水洗脱10mL，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液至2mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液；

测定法：分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得；以人参皂苷Rg₁的色谱峰即S峰的相对保留时间和峰面积为1计算保留时间和峰面积比值；

供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于90％；对照指纹图谱见附图1。

共有峰峰号的相对保留时间按分钟计分别为：1号峰为0.1533，2号峰为0.1841，3号峰为0.2219，4号峰为0.2657，5号峰为0.3151，6号峰为0.3687，7号峰为0.4252，8号峰为0.4830，9号峰为0.5411，10号峰为0.5978，11号峰为0.6544，12号峰即S峰为1，13号峰为1.0288，14号峰为1.5150，15号峰为1.5975，16号峰为1.6284，17号峰为1.6596，18号峰为1.7288，19号峰为1.7483，20号峰为1.7740，21号峰为1.9042，21号峰为麦冬皂苷D的特征峰，22号峰为1.9439，23号峰为2.0637，24号峰为2.0852，25号峰为2.1639，26号峰为2.1955。

部分共有峰的峰形描述：1-11号峰为辅料峰，基本都能达到基线分离，12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减；除21和22号峰外，17号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。

上述所用蒸发光散射检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.8bar；C18固相萃取小柱的规格为500mg。

上述测定方法中流动相梯度洗脱程序为：0～18min流动相A体积比由15％线性上升到20％，流动相B体积比由85％线性下降到80％，18～35min流动相A体积比由20％线性上升到21％、流动相B体积比由80％线性下降到79％，35～50min流动相A体积比由21％线性上升到37％、流动相B体积比由79％线性下降到63％，50～85min流动相A体积比由37％线性上升到60％、流动相B体积比由63％线性下降到40％；85～95min流动相A体积比由60％线性上升到80％、流动相B体积比由40％线性下降到20％。

本发明参麦葡萄糖注射液的鉴别方法为：

量取本品50ml，通过经预处理的大孔树脂，先用水50-500ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇20-100ml洗脱，弃去洗脱液，最后用80％的乙醇20-100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为12-18∶32-48∶18-26∶8-12的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。

所述大孔树脂柱是指1.5×12cm NKA大孔树脂柱。

所述展开剂还可以是比例为12-18∶4-6∶1-2∶0.1的乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸的溶液。

本发明含量测定方法包括如下方法中的一种或几种：

A.人参皂苷Rg₁和Re的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为18∶82的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000；

对照品溶液的制备，精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备，精密称取本发明参麦葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用50％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液；

测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本发明参麦葡萄糖注射液每100ml含人参皂苷Rg₁和Re总和应为4.4-6.6mg；

B、麦冬皂苷D的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为45∶65的乙腈-水溶液为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器；理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000；

对照品溶液的制备，精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：制备人参皂苷Rg1和Re含量测定的供试品溶液后，再用80％的乙醇100ml洗脱大孔树脂，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液；

测定法，分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本发明参麦葡萄糖注射液每100ml含麦冬皂苷D应为0.15-0.28mg；

C、总皂苷的含量测定

对照品溶液的制备，精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得；

标准曲线的制备，精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加入比例为1-3∶9-7的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法，《中国药典》2000年版一部附录V B，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法，精密称取本发明参麦葡萄糖注射液2ml，过经预处理的大孔树脂，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用85％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇10ml溶解，作为供试品溶液；精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入比例为1-3∶9-7的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得；

本发明参麦葡萄糖注射液每100ml中含总皂苷以人参皂苷Re计应为28.0-42.0mg。

其中所述大孔树脂柱是指1.5×12cm NKA大孔树脂柱；麦冬皂苷D含量测定所用蒸发光散射检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.0bar。

现有的中药注射剂存在着稳定差、微粒不合格、不良反应多等现象。采用本发明原料制成的参麦葡萄糖注射液与现有技术相比具有不溶性微粒合格、长期稳定性好，且安全性试验表明该制剂刺激性小、安全性高。

本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法不仅通过对参麦葡萄糖注射液中有效成分人参皂苷和麦冬皂苷进行鉴别和对参麦葡萄糖注射液中人参皂苷Rg1和Re、麦冬皂苷D和总皂苷的含量进行测定的方法来控制参麦葡萄糖注射液的质量，还采用了指纹图谱测定，保证了本发明参麦葡萄糖注射液的质量和疗效。

本发明所提供的质量控制方法尤其是指纹图谱测定方法简便、分离效果好。

取样品(批号：040725)，按技术方案所述供试品溶液的制备方法制备，分别在0，5，10，15，20小时检测指纹图谱，计算相似度，进行稳定性试验，结果表明各色谱峰的相似度均符合指纹图谱的要求。

取样品(批号：040725)，按技术方案所述供试品溶液的制备方法制备，连续进样5次，检测指纹图谱，计算相似度，进行精密度试验，结果表明各色谱峰的相似度均符合指纹图谱的要求。

取样品(批号：040725)，按技术方案所述供试品溶液的制备方法制备供试品5份，检测指纹图谱，计算相似度，进行重现性试验，结果表明各色谱峰的相对保留时间和色谱峰的相似度均符合指纹图谱的要求。

下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1  本发明葡萄糖注射液原料筛选试验

1、抗氧剂的筛选

筛选了抗坏血酸、亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、谷光苷肽、甲硫氨酸作为抗氧剂，结果见表1。

                     表1  抗氧剂的筛选

  处方号  抗氧剂  处方稳定性  1  2  3  4  5  6  7  无  抗坏血酸  0.02％无水亚硫酸钠  0.02％焦亚硫酸钠  0.05％L-甲硫氨酸  0.05％L-谷胱甘肽  0.5％L-甲硫氨酸  放置3个月出现沉淀  仅放置1个月已产生沉淀  放置1月主成分下降接近15％  放置1月主成分下降达20％以上  放置3月主成分下降了约8.7％  放置3月主成分下降了约11.6％  放置3月主成分基本稳定

确定使用L-甲硫氨酸和L-谷胱甘肽，范围为0.05％～0.5％(g/ml)。

2.增溶剂的筛选

筛选了吐温-80、羟丙基-β-环糊精、聚乙二醇400、伯洛沙姆，研究结果表明以上四种增溶剂均能使输液不溶性微粒在一年内保持合格。(g/ml)

                    表2  增溶剂的筛选

  处方号    增溶剂  处方稳定性  1  2  3  4  4    无    2％吐温-80    0.4％羟丙基-β-环糊精    10％聚乙二醇400    0.6％伯洛沙姆  放置6月不溶性微粒不合格  放置1年不溶性微粒仍合格  放置1年不溶性微粒仍合格  放置6月不溶性微粒仍合格  放置6月不溶性微粒仍合格

3.金属络合剂的使用

加入金属络合剂，可明显提高输液的稳定性。如依地酸二钠和依地酸钙钠，范围为0.05～0.5％(g/ml)。

                  表3  金属络合剂的使用

  处方号  金属络合剂    处方稳定性  1  2  3  无  0.05％依地酸二钠  0.05％依地酸钙钠    灭菌后沸水浴中4小时产生沉淀    灭菌后沸水浴中4小时未产生沉淀    灭菌后沸水浴中4小时未产生沉淀

实验例2  本发明参麦葡萄糖注射液鉴别方法的研究

鉴别  本品由红参总皂苷和麦冬总皂苷组成，采用红参总皂苷和麦冬总皂苷有效部位的薄层色谱鉴别条件，对两类成分进行TLC鉴别，主要针对注射液样品的处理进行了试验研究。

(1)样品处理方法的比较

样品中有效成分浓度较低并含有大量辅料，根据研究结果，选用大孔树脂富集有效成分并除杂，比较不同水洗量及醇洗量(表4)，薄层图显示上样后水洗300ml与500ml无显著差异，100ml水洗效果略差；但不用30％醇洗对样品的层析和显色则有影响，30％醇50ml洗和100ml洗无显著差异，最终确定选用300ml水洗，再用30％醇50ml洗，最后用80％乙醇50ml洗脱有效成分。

            表4  样品处理方法列表

  水洗体积(ml)    30％醇洗体积(ml)   100  300  500  500     100    100    50    0

(2)点样溶液的配制

①参照有效部位鉴别所用浓度，以浓度和点样量较大的麦冬皂苷计，依照处方的理论值计算，应以50ml输液上样，并将80％乙醇洗脱液蒸干后溶于2ml甲醇中点样。

②依照处方比例配制阴性样品，并以同样的方法处理。

③取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。另取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。

(3)点样，展开

照薄层色谱法(附录VI B)试验，分别吸取上述三种对照品溶液、两种阴性溶液和供试品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

同样再点一块板，以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(15∶5∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。层析结果显示，辅料及红参对麦冬皂苷的鉴别无干扰，三种有效成分的斑点清晰，相互之间无干扰。以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液或以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(15∶5∶1∶0.1)的混合溶液为展开剂，有效成分斑点清晰、圆整，均可作为使用的展开条件。

实验例3  本发明参麦葡萄糖注射液含量测定方法的研究

1.人参皂苷Rg₁和Re的含量测定

三批中试产品人参皂苷的含量测定

按【含量测定】方法配制供试品溶液，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，计算，即得。测定结果见表5。

       表5  三批中试产品人参皂苷含量测定结果

  批号    人参皂苷Rg₁和Re的总含量(mg/瓶)  041116  041123  041130    6.56    6.61    6.44

根据测定结果，确定本品每瓶(100ml)含人参皂苷Rg1和Re总和为4.4-6.6mg。

2、麦冬皂苷D的含量测定

三批中试产品麦冬皂苷D的含量测定

按【含量测定】方法配制供试品溶液，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，计算，即得。测定结果见表6。

表6  三批中试产品麦冬皂苷含量测定结果

 批号    麦冬皂苷D的含量(mg/瓶) 041116 041123 041130    0.145    0.151    0.136

根据测定结果，确定本品每瓶(100ml)含麦冬皂苷D为0.14毫克。由于麦冬皂苷D极低，将含量限度定为0.15-0.28mg。

3、总皂苷的含量测定

测定方法及对照品的选择：本品主要含有皂苷类成分，以人参皂苷为主，故参考《部颁标准》小容量参麦注射液的质量标准，选用人参皂苷Re作为对照品，用高氯酸香草醛显色法测定总皂苷的含量。

三批中试产品总皂苷的含量测定

按【含量测定】方法配制供试品溶液，显色，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。测定结果见表7。

表7  三批中试产品总皂苷含量测定结果

批号    总皂苷的含量(mg/瓶)041116041123041130    35.51    39.46    35.09

根据测定结果，确定本品每瓶(100ml)总皂苷为28.0-42.0毫克。

实验例4  本发明参麦葡萄糖注射液指纹图谱的研究

1.参照物的选择：本品是由红参总皂苷和麦冬总皂苷按一定配比，加入抗氧化剂等敷料配制而成的输液注射制剂，因此参照物选择2个主要原料中的特征成分人参皂苷Rg1和麦冬皂苷D较为合适。

2.供试品的制备方法：本品为大输液注射制剂，制剂中除了红参总皂苷和麦冬总皂苷的成分外，还加入了抗氧化剂、络合剂等辅料，因此在供试品的制备过程中就要尽可能除去辅料对指纹图谱检测的干扰，尽可能富集红参总皂苷和麦冬总皂苷的成分，并能使成分信息尽可能体现在图谱中，在研究中我们选择了正丁醇萃取法、大孔树脂吸附法、C18固相萃取法，最终还是以C18固相萃取法较为理想，具有除杂效果好、重现性好、操作简单、快捷等优点，经过考察：以将本品注入C18固相萃取小柱(规格：500mg)，先用水洗脱10mL，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液2mL即可将红参总皂苷和麦冬总皂苷中的主要成分基本洗脱下来，因此就确定以上方法作为供试品的制备方法。

3.检测方法的选择：根据红参总皂苷中主要含的皂苷类化学成分的理化性质，我们认为选择HPLC方法最为合适，HPLC方法较其他方法有准确定量，误差小，重现性好，应用广泛的优点，因此优选HPLC方法。

4.检测器的选择：由于红参的皂苷类成分绝大多数都没有紫外吸收，尽管用紫外检测器在200-210nm之间做检测，也会影响皂苷类成分的检测，因此我们选用蒸发光散射检测器做检测，这类检测器属于质量型检测器，特别适用于没有紫外吸收的化学成分的检测，我们通过试验证明此检测器检测效果好，干扰少，较为理想。

5.色谱条件与系统适用性试验

色谱柱的考察：选择了Agilent公司的ZOBAX Eclipse XDB-C18色谱柱、ZOBAXEetend-C18色谱柱和Waters C18色谱柱三种色谱柱进行了考察，结果以Agilent公司的ZOBAX Eclipse XDB-C18色谱柱分离效果好，峰形较好，故选用Agilent公司的ZOBAX Eclipse XDB-C18色谱柱。

流动相的考察：选择三种流动相系统：乙腈-水梯度系统、乙腈-1％冰醋酸梯度系统和甲醇-水梯度系统，结果以乙腈-水梯度系统为佳，各色谱峰分离度好，保留时间适中，故选择乙腈-水梯度系统为流动相。

流速和柱温的考察：流速和柱温对分离的影响较小，以1ml/min和30℃为流速和温度较为合适。

6.参麦葡萄糖注射液的指纹图谱相似度检测

按供试品指纹图谱检测方法，对10批参麦输液的指纹图谱进行了检测，结果，10批参麦输液的指纹图与共有模式比较的相似度均大于90％，故规定药品的指纹相似度不低于90％。

附图说明：

附图1：本发明参麦葡萄糖注射液对照指纹图谱

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

实施例1：本发明参麦葡萄糖注射液

处方

人参总皂苷    34.0g    麦冬总皂苷    8.5g

聚乙二醇400   5L       L-甲硫氨酸    500g

葡萄糖        1500g

注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得1000瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶100ml。

功能与主治  益气固脱，养阴生津，生脉。用于治疗气阴两虚之休克。

用法与用量  静脉滴注，每次1瓶，一日2次，或遵医嘱。

实施例2：本发明参麦葡萄糖注射液

处方

人参总皂苷    18.0g    麦冬总皂苷    9.0g

吐温-80       2000g    葡萄糖        1300g

注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得400瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶250ml。

功能与主治  益气固脱，养阴生津，生脉。用于治疗气阴两虚之休克。

用法与用量  静脉滴注，每次1瓶，一日2次，或遵医嘱。

实施例3：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷    34.0g    麦冬总皂苷    7.0g

伯洛沙姆      800g     L-甲硫氨酸    50g

葡萄糖        1700g

注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得200瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶500ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例4  本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷  34.0g     麦冬总皂苷   8.5g

葡萄糖      1500g     聚乙二醇400  5L

L-甲硫氨酸  500g      注射用水     加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得1000瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶100ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例5：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷  27.0g    麦冬总皂苷     9.0g

葡萄糖      1000g    聚乙二醇2000   8L

注射用水    加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得200瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶500ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例6：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷  10.0g    麦冬总皂苷    10.0g

葡萄糖      1500g    聚乙二醇6000  4L

L-谷胱甘肽  300g     注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得400瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶250ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例7：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷    28.0g    麦冬总皂苷          7.0g

葡萄糖        1200g    羟丙基-β-环糊精    200g

L-谷胱甘肽    80g      依地酸二钠          50g

注射用水   加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得1000瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶100ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例8：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷    20.0g    麦冬总皂苷  9.0g

葡萄糖        1700g    伯洛沙姆    600g

L-甲硫氨酸    80g      依地酸钙钠  500g

注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得400瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶250ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例9：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷    32.0g    麦冬总皂苷    7.5g

葡萄糖        1600g    吐温-80       400g

依地酸钙钠    750g     注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得1000瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶100ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例10：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷       40.0g    麦冬总皂苷         9.0g

葡萄糖           900g     羟丙基-β-环糊精   400g

L-甲硫氨酸       300g     注射用水           加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得200瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶500ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例11：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷    39.0g    麦冬总皂苷    7.0g

葡萄糖        1750g    聚乙二醇      6L

依地酸钙钠    250g     注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得200瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶500ml。

用法与用量：同实施例1。

实施例12：本发明参麦葡萄糖注射液

人参总皂苷    28.0g    麦冬总皂苷    10.0g

葡萄糖        825g     伯洛沙姆      1000g

依地酸二钠    100g     L-谷胱氨肽    500g

注射用水      加至100L

制法  将红参总皂苷和麦冬总皂苷溶于适量的注射用水，加入其它辅料使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7～9，超滤，除菌过滤，灌装，灭菌，即得1000瓶参麦葡萄糖注射液，每瓶100ml。

实施例13：本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法

鉴别：

取实施例1制备葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水300ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，最后用80％的乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。

指纹图谱测定：

照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件和系统适应用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。

人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。

麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备方法：精密取实施例1制备的本发明参麦葡萄糖注射液25ml，注入C₁₈固相萃取小柱(规格：500mg)，先用水洗脱10mL，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液至2mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。以人参皂苷Rg1的色谱峰(S峰)的相对保留时间和峰面积为1计算保留时间和峰面积比值。

供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于90％。对照指纹图谱见附图1。

共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.1533)，2(0.1841)，3(0.2219)，4(0.2657)，5(0.3151)，6(0.3687)，7(0.4252)，8(0.4830)，9(0.5411)，10(0.5978)，11(0.6544)，12(S峰)(1)，13(1.0288)，14(1.5150)，15(1.5975)，16(1.6284)，17(1.6596)，18(1.7288)，19(1.7483)，20(1.7740)，21(1.9042)(麦冬皂苷D)，22(1.9439)，23(2.0637)，24(2.0852)，25(2.1639)，26(2.1955)。

部分共有峰的峰形描述：1-11号峰为辅料峰，基本都能达到基线分离，12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除21和22号峰外，17号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。

实施例14：本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法

鉴别：

取实施例2制备葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水300ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，最后用80％的乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(15∶5∶1∶0.1)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。

指纹图谱测定：

照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件和系统适应用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。

人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。

麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备方法：精密取实施例2制备的本发明参麦葡萄糖注射液25ml，注入C₁₈固相萃取小柱(规格：500mg)，先用水洗脱10mL，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液至2mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。以人参皂苷Rg1的色谱峰(S峰)的相对保留时间和峰面积为1计算保留时间和峰面积比值。

供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于90％。对照指纹图谱见附图1。

共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.1533)，2(0.1841)，3(0.2219)，4(0.2657)，5(0.3151)，6(0.3687)，7(0.4252)，8(0.4830)，9(0.5411)，10(0.5978)，11(0.6544)，12(S峰)(1)，13(1.0288)，14(1.5150)，15(1.5975)，16(1.6284)，17(1.6596)，18(1.7288)，19(1.7483)，20(1.7740)，21(1.9042)(麦冬皂苷D)，22(1.9439)，23(2.0637)，24(2.0852)，25(2.1639)，26(2.1955)。

部分共有峰的峰形描述：1-11号峰为辅料峰，基本都能达到基线分离，12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除21和22号峰外，17号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。

实施例15：本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法

指纹图谱测定：

照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件和系统适应用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。

人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。

麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备方法：精密取实施例3制备的本发明参麦葡萄糖注射液25ml，注入C₁₈固相萃取小柱(规格：500mg)，先用水洗脱10mL，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液至2mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。以人参皂苷Rg1的色谱峰(S峰)的相对保留时间和峰面积为1计算保留时间和峰面积比值。

供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于90％。对照指纹图谱见附图1。

共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.1533)，2(0.1841)，3(0.2219)，4(0.2657)，5(0.3151)，6(0.3687)，7(0.4252)，8(0.4830)，9(0.5411)，10(0.5978)，11(0.6544)，12(S峰)(1)，13(1.0288)，14(1.5150)，15(1.5975)，16(1.6284)，17(1.6596)，18(1.7288)，19(1.7483)，20(1.7740)，21(1.9042)(麦冬皂苷D)，22(1.9439)，23(2.0637)，24(2.0852)，25(2.1639)，26(2.1955)。

部分共有峰的峰形描述：1-11号峰为辅料峰，基本都能达到基线分离，12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除21和22号峰外，17号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。

含量测定：

A、人参皂苷Rg₁和Re的含量测定  照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(18∶82)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  精密量取实施例3制备葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用50％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每100ml含人参皂苷Rg₁和Re总和应为4.4-6.6mg。

B、麦冬皂苷D的含量测定  照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水溶液(44∶56)为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)。理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  制备人参皂苷Rg₁和Re含量测定的供试品溶液后，再用80％的乙醇100ml洗脱大孔树脂，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每100ml含麦冬皂苷D应为0.15-0.28mg。

C、总皂苷的含量测定

对照品溶液的制备  精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得。

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法(《中国药典》2000年版一部附录V B)，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法  精密量取实施例3制备葡萄糖注射液2ml，过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用85％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇10ml溶解，作为供试品溶液。精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。

本品每100ml中含总皂苷以人参皂苷Re计应为28.0-42.2mg。

实施例16：本发明参麦葡萄糖注射液的指纹图谱测定方法

照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件和系统适应用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。

人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。

麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备方法：精密取实施例1制备的本发明参麦葡萄糖注射液25ml，注入C₁₈固相萃取小柱(规格：500mg)，先用水洗脱10mL，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液至2mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。以人参皂苷Rg1的色谱峰(S峰)的相对保留时间和峰面积为1计算保留时间和峰面积比值。

供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于90％。对照指纹图谱见附图1。

共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.1533)，2(0.1841)，3(0.2219)，4(0.2657)，5(0.3151)，6(0.3687)，7(0.4252)，8(0.4830)，9(0.5411)，10(0.5978)，11(0.6544)，12(S峰)(1)，13(1.0288)，14(1.5150)，15(1.5975)，16(1.6284)，17(1.6596)，18(1.7288)，19(1.7483)，20(1.7740)，21(1.9042)(麦冬皂苷D)，22(1.9439)，23(2.0637)，24(2.0852)，25(2.1639)，26(2.1955)。

部分共有峰的峰形描述：1-11号峰为辅料峰，基本都能达到基线分离，12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除21和22号峰外，17号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。

实施例17：本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法

鉴别：取实施例4制备葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水300ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，最后用80％的乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(15∶5∶1∶0.1)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。

含量测定：

A、人参皂苷Rg₁和Re的含量测定照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(18∶82)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  精密量取实施例4制备葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用50％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每瓶含人参皂苷Rg₁和Re总和应为4.4-6.6mg。

B、麦冬皂苷D的含量测定  照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水溶液(44∶56)为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)。理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  制备人参皂苷Rg₁和Re含量测定的供试品溶液后，再用80％的乙醇100ml洗脱大孔树脂，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每瓶含麦冬皂苷D应为0.15-0.28mg。

C、总皂苷的含量测定

对照品溶液的制备  精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得。

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法(《中国药典》2000年版一部附录V B)，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法  精密量取实施例4制备葡萄糖注射液2ml，过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用85％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇10ml溶解，作为供试品溶液。精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。

本品每1瓶中含总皂苷以人参皂苷Re计应为28.0-42.0mg。

实施例18：本发明参麦葡萄糖注射液的质量控制方法

鉴别：取实施例1制备葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水300ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，最后用80％的乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。

含量测定：

A、人参皂苷Rg₁和Re的含量测定  照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(18∶82)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  精密量取实施例1制备葡萄糖注射液50ml，通过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用50％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每100ml含人参皂苷Rg₁和Re总和应为4.4-6.6mg。

B、麦冬皂苷D的含量测定  照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水溶液(44∶56)为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)。理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备  制备人参皂苷Rg₁和Re含量测定的供试品溶液后，再用80％的乙醇100ml洗脱大孔树脂，收集洗脱液，蒸干，加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每100ml含麦冬皂苷D应为0.15-0.28mg。

C、总皂苷的含量测定

对照品溶液的制备  精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得。

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法(《中国药典》2000年版一部附录V B)，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法  精密量取实施例1制备葡萄糖注射液2ml，过经预处理的大孔树脂(NKA柱1.5×12cm)，先用水100ml洗脱，弃去水液，再用85％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇10ml溶解，作为供试品溶液。精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。

本品每100ml中含总皂苷以人参皂苷Re计应为28.0-42.0mg。

指纹图谱：

照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。

色谱条件和系统适应用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。

人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。

麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备方法：精密取实施例1制备葡萄糖注射液25ml，注入C₁₈固相萃取小柱(规格：500mg)，先用水洗脱10mL，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液至2mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。以人参皂苷Rg1的色谱峰(S峰)的相对保留时间和峰面积为1计算保留时间和峰面积比值。

供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于90％。对照指纹图谱见附图1。

共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.1533)，2(0.1841)，3(0.2219)，4(0.2657)，5(0.31 51)，6(0.3687)，7(0.4252)，8(0.4830)，9(0.5411)，10(0.5978)，11(0.6544)，12(S峰)(1)，13(1.0288)，14(1.5150)，15(1.5975)，16(1.6284)，17(1.6596)，18(1.7288)，19(1.7483)，20(1.7740)，21(1.9042)(麦冬皂苷D)，22(1.9439)，23(2.0637)，24(2.0852)，25(2.1639)，26(2.1955)。

部分共有峰的峰形描述：1-11号峰为辅料峰，基本都能达到基线分离，12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除21和22号峰外，17号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。