罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物、其制备及应用

摘要

罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物、其制备及应用，其特征是总黄酮含量为50－95％，其所含黄酮成分为：芦丁0.2－30.0％、金丝桃苷0.5－30.0％、异槲皮苷10.0－30.0％、三叶豆苷3.0－20.0％、黄芪苷2.0－5.0％、6″－O－乙酰基异槲皮苷1.0－6.0％、槲皮素0.5－4.0％、山柰酚0.2－3.0％，以及其他数种黄酮类成分。本发明还公开了罗布麻叶总黄酮提取物的制备方法及罗布麻叶总黄酮提取物不同制剂的制备方法。本发明并公开了罗布麻叶总黄酮提取物在制备治疗心脑缺血药物中的应用。

说明书

技术领域：

本发明涉及罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物、该提取物的制备方法、中药制剂，及其在治疗心脑缺血药物中的应用。

背景技术：

我国罗布麻叶资源有三种：罗布麻属植物罗布麻叶(Apocynum venetum L.)又称红麻、白麻属植物大花罗布麻叶[Poacynum hendersonni(Hook.f.)Wodson]和白麻属植物紫斑罗布麻叶[Poacynum pictum(Schrenk)Baill]，统称为罗布麻叶，因属不同属植物，其黄酮成分也有异，相互之间并无可比性。本发明所涉及的是罗布麻属植物罗布麻叶(Apocynumvenetum L.)，包括新疆产的罗布麻属植物红麻叶(Apocynum venetum L.)。

目前研究罗布麻有效成分的方法可归纳为两种：

1、先用水或醇提取，将回收溶剂后的提取物混悬于水中，分别用氯仿、醋酸乙酯、正丁醇提取，划分成几个提取部分。再用硅胶柱或葡聚糖凝胶柱层析、分离成单组分物质。

2、申请号02110431.X的发明专利申请“罗布麻有效部位的提取分离方法”，和申请号200410064551.0的发明专利申请“一种罗布麻提取物及其提取方法”。

上述的第一种方法是试验室研究单一黄酮成分的方法，不适合总黄酮的制备。第二种方法中，前一项专利申请对于罗布麻有效部位的提取分离方法为：罗布麻提取液经处理后通过大孔吸附树脂柱，先采用水洗脱至水洗脱液无色，并用20-39％的乙醇水溶液洗脱，再用40-70％的乙醇水溶液洗脱。收集40-70％的洗脱液浓缩后形成的浸膏即为有效部位，总黄酮含量为50-60％，该技术方案的缺点是：不能明确所提供的有效部位由哪些黄酮成分组成，虽提供有效部位总黄酮含量为50-60％，但还未达到静脉注射用二类原料药的标准，即80％以上。第二项专利申请中对于罗布麻高纯提取物的制备方法是：取罗布麻叶300g，用10倍量40％乙醇水回流提取3次，每次0.5hr，合并提取液，室温下静置过夜、过滤，去沉淀，滤液减压浓缩至总体积900mL，浓缩液加1％壳聚糖的乙酸溶液180mL，搅拌2min，室温静置2-4hr，抽滤，弃去残渣，上清液过处理好的聚酰胺树脂柱，随后以600mL水，用盐酸调pH为3后，进行洗脱除杂，然后用70％乙醇水溶液洗脱至无AlCl₃反应，收集70％乙醇水溶液并减压浓缩至近干，水浴蒸干后，80℃烤箱干燥，得黄棕色至黄色粉末，为罗布麻高纯提取物，出膏率为1.8％。罗布麻高纯提取物的金丝桃苷含量为17.8％、总黄酮(以金丝桃苷计)含量为42.8％、水解后的槲皮素含量为36.7％。该技术方案所存在的问题是：虽然提供了金丝桃苷含量、总黄酮含量、水解后的槲皮素含量，但不能明确提取物由哪些黄酮成分组成，不能完整地反映该提取物质量；该提取物总黄酮(以金丝桃苷计)含量为42.8％，这一含量既未达到静脉注射用二类原料药的标准，即80％以上，也未达到口服用二类原料药的标准，即50％以上。

据文献报道罗布麻叶(Apocynum venetum L.)含有黄酮及其糖苷、三萜及甾醇、木脂素、香豆素、有机酸及酯、环醇、糖类和氨基酸等10余类成分。药理研究表明黄酮类成分是其中的主要活性成分类别之一，化学研究表明罗布麻叶黄酮类成分以芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、三叶豆苷、黄芪苷、6″-O-乙酰基异槲皮苷、槲皮素和山柰酚等8种成分含量较高。不同的提取方法得到的提取物由于包含不同的黄酮类化合物、不同的含量，其药理、药性存在很大差异，都是一种新的物质。因此在保证药效的前提下，尽可能提高提取物总黄酮的纯度和明确提取物中主要黄酮类成分是技术难点。

中药罗布麻及其制剂目前临床是用于治疗高血压疾病，尚未见到用于治疗脑缺血性疾病的报道。

发明内容：

本发明是为避免上述现有技术所存在的问题，提供一种高含量罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物，药理和化学研究表明该提取物活性成分明确，质量可控。

本发明另一目的是提供该罗布麻叶总黄酮提取物的制备方法。

本发明又一目的在于提供所述提取物的中药制剂。

本发明目的还在于提供该罗布麻叶总黄酮提取物在治疗心脑缺血疾病中的应用。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

本发明罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物，其特征是所述提取物总黄酮含量为50-95％；其中所含黄酮成分包括：芦丁0.2-30.0％、金丝桃苷0.5-30.0％、异槲皮苷10.0-30.0％、三叶豆苷3.0-20.0％、黄芪苷2.0-5.0％、6″-O-乙酰基异槲皮苷1.0-6.0％、槲皮素0.5-4.0％、山柰酚0.2-3.0％，其他黄酮类成分余量。

本发明罗布麻叶总黄酮提取物制备方法是按如下步骤操作：

a、将干燥的罗布麻叶粉碎成粗粉，用8-10倍量的30-95％乙醇加热回流提取1-2小时，共提取2-3次；

其中，用于回流提取的乙醇优选为60-80％乙醇。

b、将提取液在低于60℃的条件下减压浓缩至60℃时比重为1.13-1.16的浸膏，加入原生药量3-5倍量沸水，分次溶解，静置24小时过滤；

c、滤液通过聚酰胺柱层析，首先用水冲洗8-12个柱体积，再用不同浓度醇水溶液分段洗脱、收集、浓缩，所述分段洗脱、收集、浓缩的操作过程为：

用10％-20％乙醇水溶液或10％-20％甲醇水溶液洗脱1-2个柱体积、去除洗脱液；

用40-50％乙醇水溶液或40-50％甲醇水溶液洗脱，按照洗脱时间的先后顺序，分段收集，分别获得前段洗脱液、中段洗脱液和后段洗脱液，去除前段洗脱液，

用70-80％乙醇水溶液或70-80％甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液；将该洗脱液与所述后段洗脱液合并后，在低于60℃条件下减压浓缩，真空干燥得总黄酮含量达到50％-70％的罗布麻叶总黄酮提取物；

将所述中段洗脱液在低于60℃条件下减压浓缩，真空干燥得总黄酮含量达到80％-95％的罗布麻叶总黄酮提取物。

本发明罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物的中药制剂，其特征是所述中药制剂是以所述罗布麻叶总黄酮提取物为药物有效成份，加入药用辅料后制成的滴丸、片剂、胶囊剂、软胶囊、颗粒剂、混悬剂、口服液、粉针剂、注射剂、输液。

本发明罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物用于治疗心脑缺血性疾病。

与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：

1、本发明罗布麻提取物是以总黄酮含量、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、三叶豆、黄芪苷、6″-O-乙酰基异槲皮苷、槲皮素、山柰酚的含量对其进行确切的表征，以这一表征方式进行表征的黄酮类物质以及罗布麻叶总黄酮提取物具有显著的抗脑缺血性作用，均未见相关文献的报道。

2、本发明采用高效液相色谱法，可以对提取物中对芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、三叶豆苷、黄芪苷、6″-O-乙酰基异槲皮苷、槲皮素、山柰酚的黄酮成分进行明确定性和定量。

3、本发明罗布麻叶提取物是以新的提取方法从罗布麻叶中提取所得，对于心脑缺血性疾病有可靠的疗效。

4、本发明根据罗布麻叶中黄酮等酚性成分的酚羟基与聚酰胺的酰胺基形成氢键而被聚酰胺吸附的原理，设计了罗布麻叶乙醇提取物用水溶解，通过聚酰胺柱吸附，先用水洗去不被吸附的杂质，并用10％-20％乙醇水溶液洗去低酚性为成分如氯原酸等酚酸性成分，再用40％-80％乙醇水溶液涕度洗脱黄酮成分，而多酚性成分鞣质保留在柱上，从而达到富集黄酮成分；在40％-80％乙醇水溶液涕度洗脱黄酮成分时，根据洗脱曲线，分段收集浓缩，从而得到总黄酮含量为50％-95％两个原料药，分别作为口服和静脉注射制剂的原料。

5、本发明可以满足个广大心脑缺血患者对不同剂型的要求。

本发明罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物，其提取分离工艺不仅限于上述工艺，亦可采用其他提取分离手段得到。

利用上述工艺得到的罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物的总黄酮含量及各组成成分含量测定方法为：

1、罗布麻叶总黄酮提取物干燥后，总黄酮含量的测定采用NaNO₂-Al(NO₂)₃-NaOH络合比色法进行测定，本品含总黄酮(以芦丁计)为50-95％。

2.罗布麻叶总黄酮提取物干燥后，组成成分：芦丁(Rutin)、金丝桃苷(Hyperin)、异槲皮苷(Isoquercetin)、三叶豆苷(Trifolin)、黄芪苷(Astragalin)、6″-O-乙酰基异槲皮苷(Isoquercetin-6″-O-acetate)、槲皮素(Quercetin)和山柰酚(Kaempferol)的含量测定均采用高效液相色谱法，各成分含量见实施例1-3。

下面用药理实验结果阐明其药效作用

一、罗布麻叶总黄酮(AVTF)对脑缺血损伤的影响

1、AVTF对小鼠断头后张口喘气时间的影响

结果如表1所示，40、80、100mg.kg^-1 AVTF可明显延长小鼠断头后张口喘气时间，并呈一定的量效关系。

表1 AVTF对小鼠断头后张口喘气时间的影响(x±s)

  组别  剂量  (mg.kg^-1)  N  张口喘气时间  (sec)  延长百分率  (％)  对照  EGB  AVTF  -  60  40  80  100  10  8  8  10  8  18.0±2..2  19.5±1.6  21.0±1.6**  22.8±1.8**  24.8±3.0**  -  8.3  16.7  26.7  37.8

与对照组比较，^*P＜0.05。

2、AVTF对脑梗塞组织重量的的影响

结果如表2所示，大鼠MCAO后有明显的脑梗塞发生，AVTF可显著降低脑梗塞组织重量百分比，在25～100mg.kg^-1范围内呈一定的量效关系。

表2 AVTF对MCAO致大鼠脑梗塞组织重量的影响(x±s)

  组别  剂量  mg.kg^-1  N  梗塞脑组织重量  百分比(％)  抑制率(％)  Sham  对照  EGB  AVTF  -  -  100  25  50  100  8  8  8  8  8  8  1.5±0.4^**  18.4±1.7  13.6±2.0^**  14.6±3.1^*  14.4±3.2^**  13.6±3.0^**  -  -  26.0  20.5  21.6  26.0

与对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

二、罗布麻叶总黄酮(AVTF)对血栓形成的影响

结果如表4所示，大鼠颈总动脉-静脉环路可致血栓的形成，25、50、100mg.kg^-1AVTF可明显降低血栓的湿重。

表3对胶原致血小板聚集率的影响(x±s，n＝8)

  组别  浓度  (mg.ml^-1)           2min(％)          5min(％)  聚集率 抑制百分率  聚集率  抑制百分率  对照   EGB   AVTF      -   0.10   0.025   0.050   0.100  23.8±3.0   11.9±2.8^**   10.2±1.9^**   6.6±2.3^**   5.2±2.0^** -  50.1  57.0  72.1  78.0  26.8±3.4   13.1±3.0^**   11.8±4.0^**   6.5±3.4^**   5.9±1.6^**  -   51.0   60.1   75.5   78.1

与对照组比较，^**P＜0.01。

表4 AVTF对大鼠颈总动脉-静脉环路致血栓形成的影响(x±s)

组别    剂量    (mg.kg^-1)    n    血栓湿重(mg)对照EBGAVTF    -    100    25    50    100    9    10    10    8    4    8.39±2.51    6.12±1.92^*    5.65±1.11^*    5.10±2.51^**    3.01±1.24^**

与对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

三、结论

l、小鼠断头后张口喘气模型是一筛选研究抗脑缺血、缺氧药物较好的实验方法，其特点为重复性好、快速简便。在该模型上，本研究发现40、80、100mg.kg^-1罗布麻叶总黄酮(AVTF)可明显延长小鼠断头后张口喘气时间；大鼠MCAO是一常用的研究脑缺血损伤的动物模型，与人脑梗塞损伤较为接近。本研究在该模型上发现，与100mg.kg^-1 EGB一样，在25-100mg.kg^-1范围内，罗布麻叶总黄酮能显著减轻脑组织梗塞重量，并呈一定的量效关系。这些结果表明罗布麻叶总黄酮对脑缺血、缺氧性损伤有保护作用。

2、罗布麻叶总黄酮在0.025-0.100mg.ml^-1范围内，能显著抑制Coll诱发的家兔血小板聚集反应，表明罗布麻叶总黄酮有明显的抗血小板聚集作用。

3、在大鼠颈总动脉-静脉旁路血栓形成模型上，25、50、100mg.kg^-1罗布麻叶总黄酮可明显降低血栓的湿重，提示罗布麻叶总黄酮对血栓形成有抑制作用。

综上所述，罗布麻叶总黄酮对缺血性脑损伤有保护作用。

附图说明：

图1为罗布麻属植物罗布麻叶(Apocynum venetum L.)总黄酮提取物HPLC图谱。

该图谱能对罗布麻叶总黄酮提取物组成成分：芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、三叶豆苷、黄芪苷、6″-O-乙酰基异槲皮苷、槲皮素、山柰酚的黄酮成分进行明确定性和定量。

图2为罗布麻属植物新疆红麻叶(Apocynum venetum L.)总黄酮提取物HPLC图谱。

该图谱能对红麻叶总黄酮提取物组成成分：芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、三叶豆苷、黄芪苷、6″-O-乙酰基异槲皮苷、槲皮素、山柰酚的黄酮成分进行明确定性和定量。

具体实施方式：

下面通过实施例对罗布麻属植物罗布麻叶总黄酮提取物提取方法及其制剂的制备方法作进一步详述。

对于罗布麻叶总黄酮提取物的制备，具体操作过程如下：

1、将干燥的罗布麻叶粉碎成粗粉，用8-10倍量的30-95％乙醇水溶液加热回流提取1-2小时，共提取2-3次；

2、将提取液在低于60℃的条件下减压浓缩至60℃时比重为1.13-1.16的浸膏，加入原生药量3-5倍量沸水，分次溶解，静置24小时过滤；

3、滤液通过聚酰胺柱层析，首先用水冲洗8-12个柱体积，再用不同浓度醇水溶液分段洗脱、收集、浓缩，操作过程为：

用40-50％乙醇水溶液或40-50％甲醇水溶液洗脱3个柱体积、以每0.5个柱体积的洗脱液为1份，按照洗脱时间的先后顺序，分段收集，分别获得第一段至第六段共6份洗脱液，去除第一段洗脱液，并合其中第2至第4段洗脱液得中段洗脱液，并合其中第5、第6段洗脱液得后段洗脱液；

用70-80％乙醇水溶液或70-80％甲醇水溶液洗脱1-2个柱体积，收集洗脱液；将该洗脱液与后段洗脱液合并后，在低于60℃条件下减压浓缩，真空干燥得总黄酮含量达到50％-70％的罗布麻叶总黄酮提取物；

将中段洗脱液在低于60℃条件下减压浓缩，真空干燥得总黄酮含量达到80％-95％的罗布麻叶总黄酮提取物。

实施例1：

取罗布麻属植物罗布麻叶生药粗粉1kg，加10倍量80％乙醇水溶液加热回流提取2小时，共提取3次，合并提取液，放冷，过滤，减压回收乙醇至无醇时，并浓缩至60℃相对密度为1.13的浸膏；加相当于生药5倍量的沸水，分次搅拌使溶解，过滤，滤液加于按常规方法处理好的聚酰胺柱上，用水冲洗10个柱体积后，用10％乙醇水溶液洗脱2个柱体积，50％乙醇水溶液洗脱3个柱体积，70％乙醇水溶液洗脱2个柱体积，分段收集50％乙醇水溶液，每0.5柱体积的洗脱液为1份，收集第2-第4份洗脱液；70％乙醇水溶液洗脱液和50％乙醇水溶液的第5、第6份洗脱液合并，分别在低于60℃条件下减压浓缩，真空干燥得罗布麻叶总黄酮提取物A和罗布麻叶总黄酮提取物B。

50％乙醇水溶液得罗布麻叶总黄酮提取物A收得率为1.2％，其总黄酮(以芦丁计)含量为90.5％、芦丁1.10％、金丝桃苷24.41％、异槲皮苷25.60％、三叶豆苷5.50％、黄芪苷4.10％、6″-O-乙酰基异槲皮苷2.81％、槲皮素2.07％、山柰酚1.50％，以及其他数种黄酮类成分。

70％乙醇水溶液得罗布麻叶总黄酮提取物B收得率为0.6％，其总黄酮(以芦丁计)含量为61.5％、芦丁0.51％、金丝桃苷5.21％、异槲皮苷23.10％、三叶豆苷8.75％、黄芪苷4.21％、6″-O-乙酰基异槲皮苷5.15％、槲皮素2.95％、山柰酚1.90％，以及其他数种黄酮类成分。

实施例2：

取红麻叶生药粗粉1kg，加8倍量70％乙醇水溶液加热回流提取2小时，共提取3次，合并提取液，放冷，过滤，减压回收乙醇至无醇时，并浓缩至60℃相对密度为1.14的浸膏；加相当于生药4倍量的沸水，分次搅拌使溶解，过滤，滤液加于按常规方法处理好的聚酰胺柱上，用水冲洗10个柱体积后，用10％乙醇水溶液洗脱1个柱体积，用50％乙醇水溶液洗脱3个柱体积，80％乙醇水溶液洗脱2个柱体积，分段收集50％乙醇水溶液，每0.5个柱体积的洗脱液为1份，收集第2-第4份洗脱液；80％乙醇水溶液洗脱液和50％乙醇水溶液的第5和第6份洗脱液合并，分别在低于60℃条件下减压浓缩，真空干燥得红麻叶总黄酮提取物A和红麻叶总黄酮提取物B。

50％乙醇水溶液得红麻叶总黄酮提取物A收得率为1.7％，其总黄酮(以芦丁计)含量为85.0％、芦丁25.81％、金丝桃苷1.93％、异槲皮苷28.70％、三叶豆苷12.47％、黄芪苷3.61％、6″-O-乙酰基异槲皮苷1.38％、槲皮素0.80％、山柰酚0.50％，以及其他数种黄酮类成分。

80％乙醇水溶液得红麻叶总黄酮提取物B收得率为0.4％，其总黄酮(以芦丁计)含量为60.5％、芦丁1.05％、金丝桃苷2.59％、异槲皮苷25.06％、三叶豆苷15.08％、黄芪苷3.99％、6″-O-乙酰基异槲皮苷4.05％、槲皮素1.50％、山柰酚0.78％，以及其他数种黄酮类成分。

实施例3：

取罗布麻叶生药粗粉1kg，加8倍量60％乙醇水溶液加热回流提取2小时，共提取3次，合并提取液，放冷，过滤，减压回收乙醇至无醇时，并浓缩至60℃相对密度为1.16的浸膏；加相当于生药4倍量的沸水，分次搅拌使溶解，过滤，滤液加于按常规方法处理好的聚酰胺柱上，用水冲洗10个柱体积，用10％乙醇水溶液洗脱1个柱体积，用40％甲醇水溶液洗脱3个柱体积，70％甲醇水溶液洗脱2个柱体积，分段收集40％甲醇水溶液，每0.5个柱体积的洗脱液为1份，收集第2-第4份洗脱液；70％甲醇水溶液洗脱液和40％甲醇水溶液的第5和第6份洗脱液合并，分别在低于60℃条件下减压浓缩，真空干燥得罗布麻叶总黄酮提取物A和罗布麻叶总黄酮提取物B。

40％甲醇水溶液得罗布麻叶总黄酮提取物A收得率为1.4％，其总黄酮(以芦丁计)含量为81.5％、芦丁1.20％、金丝桃苷23.05％、异槲皮苷25.57％、三叶豆苷5.21％、黄芪苷4.07％、6″-O-乙酰基异槲皮苷1.80％、槲皮素2.60％、山柰酚0.75％，以及其他数种黄酮类成分。

70％甲醇水溶液得罗布麻叶总黄酮提取物B收得率为0.65％，其总黄酮(以芦丁计)含量为60.0％、芦丁0.50％、金丝桃苷5.20％、异槲皮苷23.05％、三叶豆苷8.20％、黄芪苷3.75％、6″-O-乙酰基异槲皮苷4.50％、槲皮素2.10％、山柰酚1.80％，以及其他数种黄酮类成分。

实施例4：罗布麻叶总黄酮片

组分                        量

罗布麻叶总黄酮提取物        1-100g

糊精                        90g

微晶纤维素                  105g

低取代羟丙甲纤维素          15g

70％的乙醇溶液              15ml

硬脂酸镁                    1g

制备过程：罗布麻叶总黄酮提取物、糊精、硬脂酸镁、低取代羟丙甲纤维素分别粉碎过80目筛；将罗布麻总黄酮与糊精、2/3量的低取代羟丙甲纤维素及70％的乙醇溶液混合研磨，使均匀，制软材；再20目筛制颗粒，干燥，整粒后加入剩余的低取代羟丙甲纤维素，混匀，再加入硬脂酸镁混匀，压1000片；检验合格后包装。

实施例5：罗布麻叶总黄酮滴丸

组分                        量

罗布麻叶总黄酮提取物        1-50g

PEG4000                     15g

PEG6000                      22g

制备过程：将聚乙二醇4000、聚乙二醇6000加热，再将熔融罗布麻叶总黄酮提取物加入其中，充分搅拌，使药物充分分散于基质中；将上述药液转移至滴丸机上，70℃～80℃密闭保温10～20分钟，用无水甲基硅油作冷却剂，10℃～20℃梯度冷却，用30～60滴/分速度进行滴制，即得成型丸粒。再收集滴丸，用无水石油醚洗涤用30～60滴/分速度进行滴制，即得成型丸粒。再收集滴丸，用无水石油醚洗涤2次，凉干，包装即可。

实施例6：罗布麻叶总黄酮输液

以制备含量为0.04％(g/ml)的罗布麻叶总黄酮输液制剂250ml瓶为例。

将2g罗布麻叶总黄酮提取物加入到1000ml新鲜注射用水加热溶解后，加入5克针用活性炭，加热煮沸20分钟后过滤，滤液冷却至40℃以下，用新鲜注射用水稀释至5000ml，再用1mol/L的碳酸氢钠调PH为7.0左右，加入45克药用氯化钠及6g药用亚硫酸氢钠搅拌溶解，使之成为1L溶液中含0.4克罗布麻总黄酮。测pH、含量合格后，无菌罐装到250ml输液瓶中，于115℃下热压灭菌30分钟，即得每瓶250ml溶液含0.1g罗布麻叶总黄酮输液制剂。

实施例7：罗布麻叶总黄酮冻干粉针

组分                          量

罗布麻叶总黄酮提取物          5-100g

吐温80                        120g

活性炭                        4g

甘露醇                        400g

泊络沙姆                      8g

制备过程：称取罗布麻叶总黄酮提取物干粉、吐温、泊络沙姆将其熔融放入研钵中研磨使其充分分散，加入二氧化碳饱和过的新鲜注射用水到3500ml，加入甘露醇，在水浴(50-70℃)加入针用活性炭，边加入边搅拌，煮沸5-10分钟后，冷却至40℃用垂熔滤器滤过。用新鲜注射用水稀释至4000ml，测pH、含量合格后，，过0.45um膜，再过0.22um膜，灌装1000个西林瓶中，预冻，冷冻即得每瓶含5-100mg罗布麻总黄酮提取物冻干粉。

实施例8：罗布麻叶总黄酮注射液

组分                          量

罗布麻叶总黄酮提取物          5-50g

碳酸氢钠                      12g

焦亚硫酸钠                    2g

注射用水                      1000m

制备过程：取注射用水1000ml，煮沸，冷却至室温，备用。按处方取配置量20％的注射取注射用水1000ml，煮沸，冷却至室温，备用。按处方取配置量20％的注射用水，加入罗布麻叶总黄酮提取物使溶解，分次缓慢加入碳酸氢钠并不断搅拌，待液面无气泡产生时，加入焦亚硫酸钠溶解，加剩余的注射用水至全量。用PH酸度计测定药液PH值应为5.5-8.0、若不在此范围内，可用硫酸氢钠调节。药液用3号垂熔玻璃滤斗滤过至澄明，灌封500支安瓿，100℃，30分钟灭菌，即得。

实施例9：罗布麻叶总黄酮软胶囊

组分                          量

罗布麻叶总黄酮提取物          5-100g

蜂蜡                          10g

食用植物油                    150g

明胶                          10g

甘油                          3g

水                            13g

制备过程：称取罗布麻叶总黄酮提取物与经过加热灭菌、澄清的食用植物油及蜂蜡熔融物混合，充分搅匀即得囊心物。取明胶加入适量水使其膨胀；另将甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70℃～80℃，混合均匀，加入膨胀的明胶搅拌，熔化，保温1-2小时，静置，使泡沫上浮，除去上浮的泡沫，以洁净白布滤过，保温待用。将已制好的明胶液，置明胶液贮槽中控制温度在60℃左右，将罗布麻叶总黄酮提取物放入药液贮槽内；液状石蜡温度以10-25℃为宜，室温10-20℃，滴头温度30-60℃，开始滴丸。滴出的胶丸先均匀地摊于纱网上，在10℃以下低温吹风4小时以上，再用擦丸机擦去表面的石蜡，然后再低温(10℃以下)吹风20小时以上，于40-50℃干燥约24小时。取出干燥的胶丸，灯检，除去废丸后，用95％乙醇洗涤，再在40-50℃以下吹干，经质量检查合格后，即可包装。

实施例10：罗布麻叶总黄酮胶囊剂

组分                           量

罗布麻叶总黄酮提取物           5-100g

淀粉                           125g

70％乙醇                       适量

制备过程：将淀粉、罗布麻叶总黄酮提取物混匀，过80目筛，加入适量的70％乙醇，制软材，再用20目筛制颗粒，干燥，整粒，装胶囊，共制成1000粒，每粒含罗布麻叶总黄酮提取物5-100mg，即可。

实施例11：罗布麻叶总黄酮颗粒剂

组分                           量

罗布麻叶总黄酮提取物           1-10g

糊精                           28g

糖粉                           10g

酒石酸                         1g

50％乙醇(体积分数)             适量

将罗布麻叶总黄酮提取物、糊精、糖粉分别过100目筛，按等体积递增配研法将罗布麻叶总黄酮组合物与辅料混匀，再将酒石酸溶于50％乙醇(体积分数)中，一次加入上述混合物中，混匀，制软材，过16目尼龙筛，60℃以下干燥，整粒后用塑料袋包装，每袋2g，含罗布麻叶总黄酮提取物50-500mg。

实施例12：罗布麻叶总黄酮混悬剂

组分                           量

罗布麻叶总黄酮提取物           5-50g

羟甲基纤维素钠                 5g

甘油                           100ml

蒸馏水                         适量

制备过程：取罗布麻叶总黄酮提取物于乳钵中，加甘油研磨成细腻糊状，另将羟甲基纤维素钠用200ml水制成胶浆，在搅拌下缓缓加入乳钵中研匀，移入量器中，加蒸馏水至全量，搅匀，即得。

实施例13：罗布麻叶总黄酮口服液

组分                           量

罗布麻叶总黄酮提取物           2-50g

炼蜜                           30g

山梨酸                         5g

枸橼酸钠                       5g

香精                           1ml

水                             适量

制备过程：将罗布麻叶总黄酮提取物溶于水中，加入炼蜜、山梨酸、枸橼酸钠、香精混匀，制成200ml，封装，即得。

以上实施例仅为了对本发明作进一步说明，而本发明范围不受所举实施例的局限。