败酱科植物及其提取物在制备治疗前列腺增生的药物中的用途

摘要

本发明提供了败酱科植物及其提取物在制备治疗前列腺增生的药物中的用途，本发明还提供了含有败酱科植物的药物组合物及其制备方法。本发明药物治疗前列腺增生，药效确切，可控性强，质量稳定，为临床提供了一种新的选择。

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物的新用途，具体地，是败酱科植物及其提取物在制备治疗前列腺增生的药物中的用途，属药物领域。

背景技术

随着老龄化社会进程的加快，许多老年疾病的发病率逐渐上升，其中，男性前列腺增生是发生几率较多的常见病之一。据统计分析，良性前列腺增生(BPH)患者约占老年男性的20％左右，其发病率也与种族、地区有一定关系，东方人的发生几率小于西方民族，国外BPH的发病率明显高于国内，一般有前列腺增生家族史的人群中发病率偏高，约占1/2以上。

多年来的研究表明，良性前列腺增生发病机制与体内激素比例失调，双氢睾酮在前列腺内聚积有关，前腺增生后，可压迫腺体中的尿道，引起排尿困难，长期不能缓解易发生双侧输尿管、肾孟积水，病症晚期肾实质萎缩，可引起尿毒症。在有效的治疗药物问世以前，手术是治疗该病的主要手段，也是病症严重者所选择的治疗方法，效果较好，但仍有发生性功能障碍、尿失禁等不良预后。随着前列腺治疗药物的不断开发，非手术治疗受到多数人的青睐，已逐渐降低了手术的几率，目前治疗良性前列腺增生市场药物种类虽然较多，但主要由α受体抑制剂、抗雄性激素药物和植物性药物三大类组成。

α-受体抑制剂：临床应用的α-受体抑制剂主要有：酚苄明、坦洛新、特拉唑嗪、多沙唑嗪、阿夫唑嗪等，在国外该类药物占据BPH市场中60％以上的份额，在我国约占30％左右，是前列腺增生市场中主要品种之一，其中，盐酸酚苄明属于非选择性α肾上腺素受体抑制剂，该药能使收缩的前列腺肌体组织松弛，尿路梗塞得到显著缓解，具有见效快、持续时间短，效果好的特点，其不足之处是对少数心血管病人有一定的影响，限制了部分老年人的使用，影响了临床与市场推广。特拉唑嗪是第二代长效选择性α1-受体抑制剂，由美国雅培公司开发成功，特拉唑嗪对心肌磷酸二酯酶具有一定的活性，通过抑制血管平滑肌，使全身小动脉和小静脉血管舒张，达到减小血管阻力目的，同时兼有降低总胆固醇、低密度脂蛋白，调节血脂作用。盐酸坦洛新系第三代超选择性长效α1的抑制剂，亦称坦索罗辛，由日本山之内制药研发成功，该药能特异地抑制前列腺平滑肌的收缩，迅速缓解BPH临床症状，疗效好，不良反应更少，上市后销售额快速增长，是目前国内外畅销品种。抗雄性激素药物：主要包括：5α-还原酶抑制剂和雄性激素受体拮抗剂。该类药物能抑制双氢睾酮(DHT)浓度，提高前列腺素水平，使上皮及基质细胞萎缩，能有效减小增生的前列腺体积，从根本上改善增生症状。主要品种是非那雄胺、依立雄胺和舍尼通。

上述药物多具有一定的毒副作用，且价格高。在植物药中寻找治疗前列腺增生是成了一种可能。蜘蛛香，败酱科缬草属植物Valeriana jatamansi Jones的根茎及根，性热，味辛，入热经。具有理气止痛，活血，散寒，调经功能。目前尚无蜘蛛香及同科缬草属植物治疗前列腺增生的相关报道。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种药物的新用途。进一步地，是败酱科植物及其提取物在制备治疗前列腺增生的药物中的用途，本发明还提供了含有败酱科植物及其提取物为活性成分的药物组合物及其制备方法。

本发明提供了败酱科植物及其提取物在制备治疗前列腺增生的药物中的用途。

其中，所述的败酱科植物为败酱科缬草属Valeriana植物或黄花败酱Patriniascabiosaefolia Fisch.的根茎及根。

其中，所述的败酱科缬草属植物是：

缬草为败酱科缬草属植物缬草Valeriana officinalis L的根和根茎；蜘蛛香为败酱科缬草属植物Valeriana jatamansi Jones的根茎及根、黑水缬草Valeriana amurensis Smir.ex Kom.或宽叶缬草Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq.的根茎及根。

进一步地，所述的缬草属植物是：蜘蛛香。

其中，所述的败酱科植物提取物为：水提取物或有机溶剂提取物。

进一步地，所述的有机溶剂是：乙醇、石油醚、二氯甲烷中的一种。

本发明还提供了一种治疗前列腺增生的药物组合物，它是含有由败酱科植物或其提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成份制备而成药剂。

其中，所述的药剂是口服制剂、注射制剂。

本发明还提供了制备该药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、称取原料败酱科植物，粉碎；

b、以水、乙醇、石油醚、二氯甲烷为溶媒采用浸泡、煎煮、渗漉、蒸馏、超声、超临界流体提取方法制备的提取物；

c、将b步骤制备的提取物加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。

步骤b所述的溶媒是1％～990％乙醇或石油醚；所述的提取方法是浸渍法。

本发明药物以败酱科植物为原料，治疗前列腺增生，药效确切，可控性强，质量稳定，为临床提供了一种新的选择。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以作出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1 本发明药物的制备

取蜘蛛香药材粉碎成最粗粉，用3倍量90％乙醇浸渍24h，滤过，收集滤液，滤渣再加入2倍量90％乙醇浸渍24h，滤过，合并两次滤液，40℃以下减压浓缩，得干膏，收率为13.85％，总缬草素含量为3.11％。

所述蜘蛛香为败酱科缬草属植物Valeriana jatamansi Jones的根茎及根、黑水缬草Valeriana amurensis Smir.ex Kom.或宽叶缬草Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq.的根茎及根。

实施例2 本发明药物的制备

取蜘蛛香药材粉碎成最粗粉，用3倍量60％乙醇浸渍24h，滤过，收集滤液，滤渣再加入2倍量60％乙醇浸渍24h，滤过，合并两次滤液，40℃以下减压浓缩，得干膏，加入淀粉，制颗粒、整粒，即得颗粒剂。

实施例3 本发明药物的制备

取蜘蛛香药材粉碎成最粗粉，用3倍量70％乙醇浸渍24h，滤过，收集滤液，滤渣再加入2倍量70％乙醇浸渍24h，滤过，合并两次滤液，40℃以下减压浓缩，得干膏，加入淀粉，制颗粒，装胶囊，得胶囊剂。

实施例4 本发明药物的制备

取蜘蛛香药材粉碎成最粗粉，用4倍量60％乙醇浸渍24h，滤过，收集滤液，滤渣再加入2倍量70％乙醇浸渍24h，滤过，合并两次滤液，40℃以下减压浓缩，得干膏，精制，加入注射用水，调节渗透压，制备成注射液。

实施例5 本发明药物提取溶剂筛选试验

取蜘蛛香根茎粉末(60目)4份，每份1Kg，分别加甲醇、二氯甲烷、氯仿、石油醚，超声提取1小时，滤过，30℃减压回收溶剂，得总缬草素提取物，用电位滴定法测定总缬草素含量，结果见表1：

          表1 不同溶剂提取结果表

  提取溶剂  提取物重量  总缬草素含量  甲醇  二氯甲烷  氯仿  石油醚  132g  44g  41g  24g  33.02％  53.34％  56.83％  80.14％

实施例6 本发明药物原料最佳提取方法筛选试验

取蜘蛛香最粗粉两份，每份1Kg，一份用90％乙醇润湿，密闭1h，装入渗漉筒，加入90％乙醇浸泡24h，渗漉，收集渗漉液。另一份先用90％乙醇浸渍24h，滤过，再加入90％乙醇浸渍24h，滤过，合并两次滤液。测定总缬草素含量和干膏收率，结果见表。

             表2 提取方法的调整

  提取方法  干膏收率  总缬草素/生药  渗漉  浸渍  17.68％  15.73％  2.94％  3.02％

通过上述试验说明，本发明原料以水、乙醇、石油醚、二氯甲烷为溶媒采用浸渍、煎煮、渗漉、蒸馏、超声、超临界流体等提取方法制备的提取物均能达到本发明的效果，其中浸渍法有其中更优选的提取方法。

以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1 本发明药物对丙酸睾酮致大小鼠前列腺增生的影响

1.实验材料

1.1受试药物

本发明药物，由实施例1制备。在实验中以相当于原生药量g/100ml表示百分比浓度，以原生药量g/kg·b.w.(体重)表示给药剂量。

1.2实验动物

SD大鼠，昆明种小鼠：清洁级(二级)合格动物，生产许可证号：SCXK(川)2004-16号。动物数依实验内容而定，由四川省医学科学院实验动物研究所提供。

1.3药物及试剂

非那雄胺片(保列治)：杭州默沙东制药有限公司进口分装。规格：每片5mg，批号：245089，有效期至：2007.09。

丙酸睾酮注射液：广州明兴制药有限公司生产，规格：1ml：25mg，批号：040401，有效期至：2007.03。

戊巴比妥钠：由中国医药(集团)上海化学试剂公司进口分装，含量≥95.0％，批号：F20020915，规格：25g/瓶。

橄榄油：成都科龙化工试剂厂生产，批号：040718，规格：500ml/瓶。

甲醛：汕头市西陇化工厂生产，规格：每瓶500ml，批号：040526。

3.4实验环境条件

本实验在四川省中医管理局重点机构、四川省新药筛选与药理研究中心，应用设施符合SPF(三)级标准动物实验室内进行。室内通过自动空调器控制室温在19～21℃，相对湿度50～65％，日光与荧光结合照明，12hr明，12hr暗。实验动物分笼饲养，小鼠每笼不超过5只。自由饮水，常规标准全价饲料，定时定量喂养(每天下午4点左右)。食量：大鼠30g/200g·b.w.，小鼠6g/20g·b.w.。

2、试验方法与结果：

2.1对丙酸睾酮致大鼠前列腺增生的影响

(1)本发明药物对丙酸睾酮致大鼠前列腺增生的影响

取雄性健康大鼠60只，体重250～300g，随机取10只大鼠游离但不切除睾丸作为空白对照组。另50只动物ip 0.35％戊巴比妥钠35mg/kg，待动物麻醉后，无菌操作下摘除双侧睾丸。为防感染，手术后im青霉素钠20万单位/kg·d×3d。术后7天，眶静脉丛取血，分离血清，用放免法测定相应激素水平。然后将动物随机分为5组(具体分组及剂量见表3)，sc 0.2％丙酸睾酮橄榄油溶液1.0mg/kg。给丙酸睾酮当日起ig给药，每天1次，连续30天，末次给药后24小时处死大鼠，取前列腺各叶、精液囊，以感量1mg天平称湿重，取一侧头叶和腹叶测定脏器激素水平，另一侧头叶和腹叶固定于10％甲醛液中常规石蜡制片，HE镜检。在图像分析系统下观察前列腺组织结构变化及作半定量检测。另取大鼠血清用放免法测定相应激素水平。结果见表3：

表3本发明药物对丙酸睾酮致大鼠前列腺增生相关器官湿重的影响

组别  剂量  (g/kg)  n  凝固腺指数  (mg/100g体重)  腹叶指数  (mg/100g体重)  背叶指数  (mg/100g体重)  精囊指数  (mg/100g体重)空白组模型组保列治本发明药物本发明药物本发明药物  /  /  0.5mg/kg  10.0  5.0  2.5  10  10  10  10  10  10  36.2±10.8  63.1±12.4^##  41.9±15.8^**  39.6±14.3^**  42.0±12.4^**  46.5±15.2^**  85.3±18.2  156.3±23.5^##  99.6±26.6^**  96.5±19.8^**  104.3±21.0^**  112.9±17.9^**    84.2±25.1  163.9±35.6^##  92.1±19.8^**  88.9±21.4^**  108.6±32.4^**  121.7±28.1^**  108.4±39.3  203.4±45.6^##  125.8±32.6^**  132.6±45.1  143.2±46.5  152.1±44.0^**

^##：P＜0.01，与空白组比较；^**：P＜0.01与模型组比较

由表3可知，模型组凝固腺指数、腹叶指数、背叶指数、精囊指数与空白组比较均有显著性差异(P＜0.01)，说明造模成功。本发明药物各剂量组与模型组比较，均有显著性差异(P＜0.01)，说明本发明药物对丙酸睾酮致大鼠前列腺增生有明显的抑制作用。

2.2对丙酸睾酮致小鼠前列腺增生的影响

取雄性健康小鼠60只，体重35～40g，将动物随机分为6组(具体分组及剂量见表4)，除空白组外，各组动物sc 0.2％丙酸睾酮橄榄油溶液1.0mg/kg。给丙酸睾酮当日起ig给药，每天1次，连续30天，空白组、模型组ig给药组同体积生理盐水，末次给药后24小时处死小鼠，取前列腺各叶、精液囊，以感量1mg天平称湿重，取一侧头叶和腹叶测定脏器激素水平，另一侧头叶和腹叶固定于10％甲醛液中常规石蜡制片，HE镜检。在图像分析系统下观察前列腺组织结构变化及作半定量检测。结果见表4。

表4本发明药物对丙酸睾酮致小鼠前列腺增生相关器官湿重的影响

组别  剂量  (g/kg)  n    凝固腺指数    (mg/10g体    重)    腹叶指数    (mg/10g体    重)    背叶指数    (mg/10g体    重)    精囊指数    (mg/10g体    重)空白组模型组保列治本发明药物本发明药物本发明药物  /  /  0.7m/kg  10.0  5.0  2.5  10  10  10  10  10  10    11.4±2.6    16.3±2.1^##    11.8±2.2^**    11.6±2.4^**    12.5±3.1^**    13.6±2.6    4.1±1.8    6.3±2.1^#    4.2±1.4    4.3±1.6    4.8±1.7    5.2±1.8    5.6±1.2    8.7±1.6^##    5.4±1.6    5.7±1.3^**    6.0±1.4^**    6.5±1.7    62.3±15.2    85.4±12.2^##    63.2±14.1^**    62.3±13.8    66.7±12.6^**    70.1±14.9

^#：P＜0.05，^##：P＜0.01与空白组比较；^*：P＜0.05，^**：P＜0.01与模型组比较由表4可知，模型组凝固腺指数、腹叶指数、背叶指数、精囊指数与空白组比较均有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05)，说明造模成功。本发明药物各剂量组与模型组比较，除本发明药物中、小剂量组对腹叶指数无显著影响外，均有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05)，说明本发明药物对丙酸睾酮致小鼠前列腺增生有明显的抑制作用。

试验例2 缬草提取物对大鼠前列腺组织5-α还原酶活性的抑制作用

取蜘蛛香粗粉100g，分别以石油醚、二氯甲烷、乙醇为溶媒超声提取1小时，滤过，30℃减压回收溶剂，得总缬草素提取物(A、B、C)；取黄花败酱(Patriniascabiosaefolia Fisch.)100g，以乙醇为溶媒同法制得提取物(D)；将二氯甲烷为溶媒制得的样品在100℃下加热处理1小时(E)；取蜘蛛香粗粉100g以乙醇为溶媒冷浸48小时得提取物(F)。

取大鼠前列腺组织，加入匀浆缓冲液，匀浆缓冲液的组成为：0.88M蔗糖，1.5MmCaCl₂，组织匀浆液经高速离心(10000rpm，15min，4℃)，取上清液与待测提取物样品或阳性药物(保列治)反应30分钟，加入100nM睾酮、2mM NADPH，在450nm条件下测定吸光值，并计算抑制率：抑制率(％)＝(A₀-A₁)/A₀×100，结果见下表5：

  样品名称  抑制率(％)  细胞对照  匀浆液+睾酮  保列治  A  B  C  D  E  F  0  100  208.92  127.53  195.78  173.05  218.73  88.29

上述药效学试验可知，本发明缬草提取物中蜘蛛香的不同提取物，均对大鼠前列腺组织5-α还原酶活性有较好的抑制作用，尤其是蜘蛛香的石油醚提取物，具有较好的抑制活性。此外，同属其它植物缬草、黑水缬草或宽叶缬草及同科植物黄花败酱均具有较好的活性，可推知败酱科植物均具有相同的药理活性。综上，本发明药物治疗前列腺增生，药效确切，可控性强，质量稳定，为临床提供了一种新的选择。