高耐汞恶臭假单孢菌株CHY－7及其在治理汞污染中的应用

摘要

本发明公开了一种高耐汞恶臭假单孢菌株CHY－7及其在治理汞污染中的应用，属利用微生物实施环保治理的项目。该菌株为恶臭假单孢菌(pseudomonasputida)CHY－7，已保藏“中国典型培养物保藏中心”。该菌株是从汞污染的土壤中分离得到的；适宜在中性及弱酸性或弱碱性培养介质中常温培养，也可在自来水和土壤中生长；其细菌学形态特征：为革兰氏阴性杆菌，长度为2.0－4.0×0.7－1.1μm，不产生芽孢，专性好氧；属于恶臭假单孢菌，菌落淡黄色、边缘光滑隆起，在色素生成培养基中可产生荧光。本发明从土壤中直接分离、筛选高耐汞、生长营养要求低、适应自然生态环境且生存能力强、具有高效还原离子态汞(Hg2+)为易挥发的元素汞(Hg0)的细菌菌株，能在治理汞污染的环境中广泛应用。

说明书

技术领域

本发明涉及利用微生物实施环保治理的项目，具体的说是一种高耐汞恶臭假单孢菌CHY-7菌株及其在治理汞污染中的应用。

背景技术

2003年联合国环境规划署发表了一份报告显示，自工业革命以来，汞在大气、水、土壤中的含量已增加了3倍左右，在工业区附近汞的含量更高，汞污染的不断加剧对人类健康和环境造成了极大的危害。

汞作为自然环境里的一种天然成分，在自然界的本底水平并不高，例如地表水含量不到0.1μg/m³，大气中含量为0.001~50μg/m³，土壤中含量平均为0.1μg/g。然而，有色金属的开采和加工、氯碱的生产、造纸、电气等工业汞用量逐年增加，以及含汞农药一段时间广泛使用，导致含汞物质不断排入外环境，造成严重的汞污染。另外，含汞物质的自然转化速度十分缓慢，即使在清除污染源之后，汞在局部环境中仍可长期存留。

汞污染主要通过食物链作用，在水生生物体内大量富集，人类食用汞污染的鱼类等而带入体内。有报告显示，在美国1/12或接近500万妇女体内汞的含量高于安全标准。环境中任何形式的汞在一定条件下均可转化为剧毒的甲基汞，甲基汞进入人体后主要侵害神经系统，引起脑神经病变。1953年日本九洲百余例水洖病的发生就是一个典型的例子。甲基汞可通过胎盘屏障侵害胎儿，使新生儿发生先天性疾病。汞污染还可导致心血管系统等疾病。

在我国汞的污染同样严重，一些地方的水质、土壤、稻田、鱼鸭等都受到不同程度的污染。山东南四湖水产品调查中发现，有的池养鱼鸭体内汞超标最高可达2.7倍。贵州省调查发现，由于长期引用汞污染河水灌田，结果造成汞在稻田土壤中显著积累。河北的调查也发现，一些土壤、蔬菜、鱼、土地水中汞残留超过正常范围。1998年江苏对一无公害蔬菜基地土壤有害金属污染调查发现汞污染最突出，这可能与当时种菜历史长及使用含汞农药有关。另外，研究调查结果显示三峡库区江段的沉积物也普遍受到汞污染，汞的富集因子EF值高达1.4-9.2。

目前环境汞污染的处理都是针对工业废水中汞的去除，主要采用物理化学的方法，常用的有活性炭吸附法、混凝法、还原法、硫化物沉淀法和离子交换法。这些措施成本昂贵，还可能留下危险的副产物。而对于自然界水体和土壤中汞污染除了切断污染源外，这些方法都不适用。

1960年首次报道从自然界中分离到耐汞菌株，随后的研究发现微生物具有不同的耐汞分子机制，其中最复杂、普遍的耐汞机制涉及Mer蛋白家族及其相关的mer基因：A、B、C、D、P、R和T。这些基因位于耐汞操纵元(mer operon)，已经鉴定至少有11个mer操纵元，其中merA基因编码无机汞还原酶，在NADPH-依赖的反应中，将2价离子汞(Hg²⁺)还原成相对无毒的易挥发的元素汞(Hg⁰)。MerB基因编码有机汞水解酶，将强毒的有机汞水解成毒性相对弱的无机汞(Hg²⁺)，其他mer基因主要是调节基因。目前，认为具有mer操纵元的耐汞微生物可作为修复水体和土壤汞污染最有效的工具。另外，通过接合作用，mer操纵元可在微生物间水平传递，使其在生物降解汞污染方面具有更广泛的应用前景。

1993年Brunke等人以自然界分离到的和merA基因工程菌为实验材料，证明这些细菌可以清除污水中的HgCl₂。1999年以后德国科研工作者从Spittelwasser河流污泥中通过含50μg/L Hg²⁺的LB选择性培养基分离得到Pseudomonas Putida Spi3菌株的，该菌株清除氯碱工厂电解废液中Hg²⁺的清除效率达97％，具体实验条件是：第一天，将细菌培养物以20ml/h的流速通过生物反应器(柱床体积为20ml)；接着，将培养基流过生物反应器2天、5天或10天，让细菌在生物反应器的生物膜上生长繁殖；最后，以流速2ml/h的培养基和18ml/h的电解废液(Hg²⁺浓度为1.5mg/L)通过生物反应器的生物膜，检测流出液体的Hg的含量。另外，该菌株的清除电解废液中的Hg²⁺的最高浓度范围为7-9mg/L。20002年他们将规模放大到1000L。由于采用微生物降解汞污染简易，对环境的不良影响轻，成本低，可望成为清除汞污染的重要手段之一。

从包括中国专利在内的有关资料检索表明，从汞污染的土壤中分离出耐汞菌株，以及利用耐汞微生物清除汞污染尚未见到其相关的报道。

发明内容

本发明的目的在于从自然界中土壤中直接分离、筛选高耐汞、生长营养要求低、适应自然生态环境且生存能力强、具有高效还原离子态汞(Hg²⁺)为易挥发的元素汞(Hg⁰)的细菌菌株及其在治理汞污染环境中的应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

本发明提供的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株，其特征在于：该菌株为pseudomonas putida CHY-7，于2004年12月7日保藏于“中国典型培养物保藏中心”，其保藏号：CCTCC NO.M 204093.

该pseudomonas putida CHY-7菌株是从某一废弃日光灯厂厂区汞污染的土壤中分离得到的；菌株适宜在中性及弱酸性或弱碱性培养介质中常温培养，也可在自来水和土壤中生长；其细菌学形态特征：为革兰氏阴性杆菌，其长度为2.0-4.0×0.7-1.1um，不产生芽孢，以多根极毛运动，专性好氧；属于恶臭假单孢菌，菌落淡黄色、边缘光滑隆起，在色素生成培养基中可产生荧光。

其具体筛选步骤如下：

采集日光灯厂厂区汞污染的土壤，加入含HgCl₂的LB液体培养基(Hg²⁺浓度为25mg/L)，捣匀，自然沉淀后，离心取上清，涂布于含25mg/L Hg²⁺的LB平板，28℃温育24h。挑选7株耐汞细菌进行耐汞药性水平检测。

用HgCl₂配制Hg²⁺浓度为1.25-100mg/L倍比稀释的LB液体培养基，接种对数生长期的待测菌液，28℃静置培养48h；根据细菌生长情况，判定菌株的耐Hg²⁺水平，见下表-1.

表-1：耐汞菌株耐汞水平检测

菌株编耐Hg²⁺水平

号     (mg/L)

CHY-1  100

CHY-2  25

CHY-3  25

CHY-4  25

CHY-5  25

CHY-6  25

CHY-7  100

按照参考文献：痢疾杆菌耐药性变异的研究I478株痢菌传递性R质粒的检测(包幼迪，俞树高，代庚孙等。中华微生物学和免疫学杂志，1982，2(5)：304-307)的方法，选择其中4株耐汞菌株CHY-1、CHY-3、CHY-6和CHY-7进行细菌耐抗生素药性检测，结果见下表-2。

表-2：菌株耐抗生素药性检测

注：链霉素(SM)、氯霉素(CM)、四环素(TC)、安卞青霉素(AP)、卡那霉素(KM)、庆大霉素(GM)、红霉素(Ery)和头孢拉叮(Cep)

由于CHY-7菌株耐Hg²⁺高达100mg/L，对抗生素耐药性较少(表-2)，故对CHY-7菌株的生物学特性作进一步研究。

API 20NE试剂盒(BioMerieux公司)及其它生化鉴定高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株的生理生化特征见下表-3。

参考《Bergy’s Manual of systemic Bacteriology》Vol.VIII的内容和API 20NE试剂盒说明，根据形态特征与细胞壁化学组分定属的原则，证明CHY-7菌株为革兰氏阴性杆菌，其长度为2.0-4.0X0.7-1.1μm，不产生芽孢，以多根极毛运动，专性好氧；生化鉴定属于恶臭假单孢菌(pseudomonas putida)，其菌落淡黄色、边缘光滑隆起，在色素生成培养基中可产生荧光。

表-3：高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株的生理生化特征

实验名称结果实验名称结果硝酸盐还原  -阿拉伯糖  -吲哚反应  -甘露醇  -明胶液化  -N-乙酰基葡萄糖  -脲酶  -麦芽糖  -二氢乳清酸酶  -葡萄糖酸盐  +葡萄糖发酸  -癸酸盐  +七叶甙水解  -己二酸  -β-半乳糖水解  -草酸乙酸  +葡萄糖同化作用  +柠檬酸盐  +阿拉伯糖同化作用  -苯乙酸  +荧光  +细胞色素氧化酶  +N-乙酰葡(萄)糖胺  -甘露糖mannose  +乙酸苯酯  +苹果酸盐  -42℃  -蕈糖  -4℃  +硫化氢  -

进一步利用16S rRNA基因的保守DNA序列分类鉴定CHY-7菌株与恶臭假单孢菌ATTC17484和ATTC17522的16SrRNA基因序列100％的同源，即CHY-7菌株属于恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida)。该序列已递交GenBank数据库(GenBank Accession No.AY834215)。

本发明的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株既可以在含Hg²⁺(100mg/ml)的LB等营养培养基中培养，也可以在灭菌自来水和灭菌土壤中生长。该菌株适应pH值范围广(pH5.0-10.0)，能在4℃-39℃之间生长，但不能在42℃生长。

该高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株耐离子汞水平高达100mg/L，具有催化离子汞(Hg²⁺)转化为元素汞(Hg⁰)的能力，在Hg²⁺浓度为5-50mg/L的范围内，48小时的转化率为94.3％-82.8％以上，Hg²⁺浓度越低转化率越高。而德国工业化用的Pseudomonas Putida Spi3菌株在清除电解废液中的Hg²⁺的最高浓度范围为7-9mg/L。

本发明提供的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株的基因组DNA含有merA基因，编码无机汞还原酶(merA)，催化离子汞(Hg²⁺)转化为相对无毒的易挥发的元素汞(Hg⁰)。该菌株的部分merA基因片段(约700bp)与GenBank数据库的merA相应的DNA序列同源性分别为93.1％(GenBank gi：21322678)、91.2％(gi：24411176)、91.9％(gi：150631)、92.1％(gi：23821228)和92.9％(gi：21322688)；该DNA序列递交GenBank数据库(GenBank accessionNo.AY834216)。

本发明提供的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株具有高耐Hg²⁺水平以及很强的还原离子汞的能力，适用于汞污染的治理；由于该菌株营养要求不高，生长的pH范围宽(pH5.0-10.0)，在灭菌自然水中可维持生长至少1个月以上，而灭菌的普通土壤中保持菌数达18天，30天时还有80％的活菌体数，6个月后仍能分离到该菌株，显示CHY-7菌株有很强的自然界生存能力，尤其适用于工业汞污水的处理、无公害蔬菜基地汞污染土壤的修复和鱼、虾等水产养殖场汞污染水质的处理。

本发明的有益效果是：由于本发明的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株在液体中耐离子汞水平高达100mg/L，比德国用于工业清除电解废液的PseudomonasPutidaSpi3菌株耐离子汞水平(最高为10mg/L)高10倍；本发明的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株在离子汞浓度为5-50mg/L范围内48小时清除离子汞的效率为94.3％-82.8％，而德国用于工业清除电解废液的Pseudomonas PutidaSpi3菌株清除电解废液中的Hg²⁺的最高浓度范围为7-9mg/L；所以本发明的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株具有处理更高浓度的离子汞污染和更高清除汞污染的效率，适用于工业汞污水的处理；另外，由于该菌株对人、畜无致病性作用，也特别适用于无公害蔬菜基地汞污染土壤的修复以及鱼、虾等水产养殖场汞污染水质的处理。

附图说明

附图1为本发明CHY-7菌在水体和土壤环境中的生长曲线，图中横坐标为时间(天)，纵坐标为细菌浓度(×10⁷/ml or ×10⁷/g)。

附图2为本发明CHY-7菌株还原Hg²⁺的能力检测，图中横坐标为Hg²⁺起始浓度(mg/L)，纵坐标为残留汞浓度(mg/L)。

附图3为本发明CHY-7菌株的merA基因的PCR法鉴定。

具体实施方式

实施例1：本发明的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株的筛选步骤如下：

从福建省某一废弃的日光灯泡厂的汞污染土壤中采集土壤样品，取样品10g，捣匀，加入10ml含HgCl₂的LB液体培养基(Hg²⁺浓度为25mg/L)悬浮，自然沉淀后，100g离心取上清，涂布于含25mg/L Hg²⁺的LB平板，28℃温育24h。

从Hg²⁺选择性培养基(Hg²⁺的LB平板)上生长的单菌落中，挑选7株耐汞菌株(编号为CHY-1、CHY-2、CHY-3、CHY-4、CHY-5、CHY-6和CHY-7)进行耐汞药性水平检测。将待测菌落接种于含25mg/L Hg²⁺的LB培养液中，细菌生长至对数期，以1∶100比例接种于HgCl₂配制的Hg²⁺浓度为1.25-100mg/L倍比稀释的LB液体培养液中，28℃静置培养48h。根据细菌生长情况，判定该菌株的耐Hg²⁺水平；然后，利用API20NE System(BioMerieux Inc.)细菌生化分类鉴定试剂盒对菌株进行分类鉴定。7株耐汞细菌的生化鉴定及其耐Hg²⁺水平见下表-1。

表-1：耐汞细菌的生化鉴定及其耐Hg²⁺水平测定

菌株编号  生化分类鉴定   耐Hg²⁺水平(mg/L)

CHY-1     假单孢菌       100

CHY-2     假单孢菌       25

CHY-3     假单孢菌       25

CHY-4     枯草杆菌       25

CHY-5     枯草杆菌       25

CHY-6     假单孢菌       25

CHY-7     假单孢菌       100

采用液体培养法对4株耐汞假单孢菌进行抗生素耐药性分析，选用的抗生素为链霉素(SM)、氯霉素(CM)、四环素(TC)、安卞青霉素(AP)、卡那霉素(KM)、庆大霉素(GM)、红霉素(Ery)和头孢拉叮(Cep)；具体方法参考文献：痢疾杆菌耐药性变异的研究I 478株痢菌传递性R质粒的检测(包幼迪，俞树高，代庚孙等。中华微生物学和免疫学杂志，1982，2(5)：304-307)。结果见表-2。

表-2：菌株耐抗生素药性检测

注：“+”敏感，“-”耐药。

通过离子汞选择性培养基的筛选、细菌生化分类鉴定、耐汞水平和抗生素耐药性检测，得到一株高耐Hg²⁺、对抗生素耐药性较少的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株；并将该菌株于2004年12月7日保藏于“中国典型培养物保藏中心”，其保藏号CCTCC No.M 204093。

该高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株适宜在pH5.0-10.0的培养介质以及自来水和普通土壤中生长，最适pH值为6.0-8.0；能在4℃-39℃之间生长，但不能在42℃生长，最适温度为28-30℃；其细菌学形态特征：为革兰氏阴性杆菌，长度为2.0-4.0X0.7-1.1um，不产生芽孢，以多根极毛运动，专性好氧；属于恶臭假单孢菌(pseudomonas putida)其菌落淡黄色、边缘光滑隆起，在色素生成培养基中可产生荧光。

实施例2：利用16S rRNA基因的分类鉴定高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株

采用Wizard Genomic DNA purification Kit提取CHY-7细菌基因组DNA，依据细菌16S rRNA基因中保守的序列设计及合成引物。PCR引物：上游引物16S-F：5’-TgCCAgCAgCCgCggTAA-3’；下游引物16S-R：5’-AggCCCgggAACgTATTCAC-3’。PCR反应条件为94℃/3mim；94℃/45s，56℃/30s，72℃/1min，30个循环；72℃/7min。PCR产物由大连宝生物公司进行测序。DNA测序结果如下：

ACTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGTTTGTTAAGTTGGATGTGAAATCCC

CGGGCTCAACCTGGGAACTGCATTCAAACTGACAAGCTAGAGTATGGTA

GAGGGTGGTGGAATTTCCTGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATAGGAAGG

AACACCAGTGGCGAAGGCGACCACCTGGACTGATACTGACACTGAGGTGC

GAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTA

AACGATGTCAACTAGCCGTTGGGAGCCTTGAGCTCTTAGTGGCGCAGCTA

ACGCATTAAGTTGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAA

ATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGA

AGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGCCTTGACATCCAATGAACTTTCCAGA

GATGGATTGGTGCCTTCGGGAACATTGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGT

CAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGTAACGAGCGCAACCCTT

GTCCTTAGTTACCAGCACGTAATGGTGGGCACTCTAAGGAGACTGCCGGTG

ACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGG

CCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGTCGGTACAGAGGGTTGCCAAGCCG

CGAGGTGGAGCTAATCCCATAAAACCGATCGTAGTCCGGATCGCAGTCTGC

AACTCGACTGCGTGAAGTCGGAATC

将以上DNA序列在NCBI基因数据库中通过BLASTN分析，结果发现与恶臭假单孢菌ATTC17484和ATTC17522的16SrRNA基因序列100％的同源，即CHY-7菌株属于恶臭假单孢菌(Pseudomnonas putida)；该序列已递交GenBank数据库(GenBank Accession No.AY834215)。

实施例3：巢式PCR鉴定高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株的mer4基因

根据GenBank数据库提供的merA基因序列及同源性比较分析，利用Generunner等生物软件在merA基因高度保守DNA序列区设计PCR引物(merA-F45：5’-ggCgCACgTCAAggAAgC-3’；merA-F352：5’-gTCgAgCAAggCgCgCAg-3’；merA-R541：5’-gACACgggCCTgCTgCTg-3’；merA-R756：5’-gTCCAgTAgggTgACTCTTTC-3’；共组成4对引物即merA-F45/merA-R541、merA-F45/merA-R756、merA-F352/merA-R541和merA-F352/merA-R756)，以CHY-7细菌基因组DNA为模板，PCR扩增相应的DNA片断。PCR反应条件为94℃/3min：94℃/45s，54-58℃/30s，72℃/1min，共30循环；72℃/7min。

PCR产物经琼脂糖凝胶电泳、溴化乙锭染色和紫外成像系统成像分析，结果表明PCR产物的DNA片断大小与预期一致(见附图3)。

将MerA-F45/MerA-756引物扩增的PCR产物(为4对引物中扩增的DNA片断最长，约700bp)直接测序(大连宝生物公司)；DNA测序结果如下：

CAGTCTGCCGTTGTGTCCTACGCCAAGGGCGCGGCCCAGCTCGACCTTGA

CCCCGGTACCGCATCAGACGCACTGACTGCCGTCGTGGCCGGACTCGGCT

ACAGGGCGACGCTCGCTGATACCTCATCGACGGACAACCGCACCGGACTG

CACGACAAGGTACGCGGCTGGATGGGAACCGCCGATAAGGGCAGCGACG

GCGAGCGCCAGTTGCATATCGCCGTCATCGGCAGCGGCGGCGCTGCAATG

GCGGCGGCGCTGAAGGCCGTCGAGCAAGGCGCAAAGGTCACGCTGATCG

AGCGCGGCACCATCGGCGGCACCTGCGTCAACGTCGGTTGTGTGCCGTCC

AAGATCATGATCCGCGCCGCCCACATCGCCCATCTGCGCCGGGAAAGCCCA

TTCGACGGCGGCATGCCACCCACACCGCCGACGATCTTGCGCGAGCGGCT

GCTGGCCCAGCAGCAGGCCCGTGTCGAAGAACTCCGTCATGCCAAGTACG

AAGGCATCCTGGACGGCAATTCAGCCATCACCGTTCTGCACGGTGAAGCG

CGTTTCAAGGACGACCAGAGCCTTATCGTTAGTTTGAACGAGGGTGGTGA

GCGCGTCGTGATGTTCGACCGCTGCCTGGTCGCCACGGGTGCCAGTCCGG

CCATGCCGCCGATTCCGGGCCTGAAAGAGTCACCCTACTGGACA

预测的蛋白序列如下：

QSAVVSYAKGAAQLDLDPGTASDALTAVVAGLGYRATLADTSSTDNRTGLHD

KVRGWMGTADKGSDGERQLHIAVIGSGGAAMAAALKAVEQGAKVTLIERGT

IGGTCVNVGCVPSKIMIRAAHIAHLRRESPFDGGMPPTPPTILRERLLAQQQAR

VEELRHAKYEGILDGNSAITVLHGEARFKDDQSLIVSLNEGGERVVMFDRCL

VATGASPAMPPIPGLKESPYWT

将以上DNA序列在NCBI基因数据库中通过BLASTN分析，结果发现CHY-7菌株基因组DNA扩增的merA基因片段(693bp)与GenBank数据库的merA相应的DNA序列同源性分别为93.1％(GenBank gi：21322678)、91.2％(gi：24411176)、91.9％(gi：150631)、92.1％(gi：23821228)和92.9％(gi：21322688)，从而证明CHY-7菌株具有耐汞性及其将Hg²⁺转化为Hg⁰的能力是由于该菌株基因组含有merA基因；该DNA序列递交GenBank数据库(GenBankaccession No.AY834216)

实施例4：高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株在水体和土壤中的生长特性

对数生长期的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌液离心，初始接种约10×10⁶菌数/ml于3ml灭菌自来水中，室温(25℃)静置培养，定期采集水样，稀释涂布LB平板，菌落计数。同样，将待测菌液均匀混于灭菌的土壤中，每份10g土壤，初始接种量约为10×10⁶菌数/g，土壤为农田土；定期采集土壤样本，加灭菌水混匀悬浮，自然沉淀，取上清稀释涂布LB平板，菌落计数。三次重复实验，连续观察30天。

结果表明该菌株在灭菌自然水中可维持生长至少1个月以上，而灭菌的普通土壤中保持菌数达18天，30天时还有80％的活菌体数(见附图1)。

实施例5：高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株催化离子汞(Hg²⁺)转化为元素汞(Hg⁰)的能力分析

用HgCl₂配制Hg²⁺浓度为5.0、10.0、35.0和50.0mg/L的LB液体培养基，分装于15ml灭菌试管中，接种对数生长期的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株，接种量约10×10⁶菌数/ml，30℃静置培养48h。离心取培养液上清，用双道原子荧光光度计测定汞含量；同时设平行对照组，三次重复实验。细菌转化Hg²⁺为Hg⁰的效率的计算公式如下：转化率(％)＝(对照组汞浓度-试验组汞浓度)/对照组汞浓度×100％。

由附图2结果可以看出，本发明的高耐汞恶臭假单胞菌CHY-7菌株具有很强的转化离子汞的能力，在离子汞浓度为5-50mg/L范围内48小时清除离子汞的效率达94.3％-82.8％。