一种制备人载脂蛋白A－Ⅰ的方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，涉及一种制备人载脂蛋白A－I(ApoA－I)的方法。具体涉及利用毕赤酵母系统，通过构建重组工程菌株、表达、分离纯化获得高效生产人载脂蛋白A－I的方法。本发明通过基因工程手段将来源于天然的apoA－I基因重组至P.pastoris宿主菌，表达水平可高达200mg/L，表达产物经冷丙酮分级沉淀和－Sepharose分离纯化获得电泳纯的ApoA－I蛋白。经Western－blot鉴定、蛋白质谱检测、N端氨基酸测序、细胞结合活性测定均与人血来源的ApoA－I蛋白一致。