适用于链霉菌染色体基因敲除的双功能科斯载体

摘要

一种适用于链霉菌染色体基因敲除的双功能科斯载体，其特征在于它由以下DNA元件组成：①包含来自大肠杆菌质粒CoIE1复制起始位点(ori)，②包含氨苄青霉素抗性基因(bla)，③包含来自链霉菌质粒pIJ101复制起始位点(ori)和复制子，④包含硫链丝菌素抗性基因(tsr)，⑤包含来自链霉菌质粒pIJ101的质粒强不相容区(sti)，⑥包含λ噬菌体科斯(cos)位点，⑦包含来自RP4的接合转移起始位点(oriT)，⑧包含可被T3和T7噬菌体RNA聚合酶特异性识别的启动子，⑨包含来自Tn5的不包含启动子的新霉素抗性基因(neo)。本发明可方便有效地用于链霉菌染色体基因敲除，同时包含有大肠杆菌质粒和链霉菌质粒复制子和抗性筛选标记，可同时在两种宿主进行自主复制和遗传的功能。