一种治疗糖尿病药物《消渴丸》的质量控制方法

摘要

一种治疗糖尿病药物《消渴丸》的质量控制方法，属于医药领域，具体涉及中、西药物组合物的质量控制方法。它是在原质量控制标准的鉴别项增加了(1)采用薄层色谱法，黄芪甲苷阳性对照鉴别消渴丸中含有黄芪；(2)采用薄层色谱法，五味子甲素和南五味子阳性对照鉴别消渴丸中含有南五味子；(3)采用高效色谱法测定消渴丸中含有格列本脲的百分重量为0.07～0.11％。本发明提高了治疗糖尿病药物《消渴丸》的质量控制的方法，增加了专属性强的消渴丸中是否有黄芪和南五味子的鉴别方法，并能定量测定格列本脲的含量，更有效地控制产品的质量，确保人体的用药安全。

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及中、西药物组合物的质量控制方法。

背景技术

一种治疗糖尿病的药物，消渴丸是上市多年，临床应用疗效肯定的药物，且是已收载于中国国家卫生部部颁标准的药物。消渴丸是由中药材葛根、地黄、天花粉、玉米须的水提物和黄芪、南五味子、山药的粉末和合成药(俗称西药)格列本脲制成的复方组合物，按中药制备丸剂的常规工艺制备。控制最终产品的质量是按中国卫生部部颁标准MS-B-3476-98执行，而标准中仅有黄芪、南五味子、山药的显微鉴别，专属性较差，用薄层色谱法观察斑点面积的大小来检查格列本脲的限度，这种薄层法测定限度，操作过程影响的因素很多，观察斑点大小的主观因素影响很大，不能准确地反应出产品中格列本脲的含量，故有必要进一步研究该品种的质量控制方法。

发明内容

本发明的目的是改进一种治疗糖尿病药物《消渴丸》的质量控制的方法。

本发明的技术方案是：在原质量控制标准的鉴别项增加了(1)采用薄层色谱法，黄芪甲苷阳性对照鉴别消渴丸中含有黄芪；(2)采用薄层色谱法，五味子甲素和南五味子阳性对照鉴别消渴丸中含有南五味子；(3)采用高效色谱法测定消渴丸中含有格列本脲的百分重量为0.07～0.11％，相当于标示量的70～110％。

用黄芪甲苷作阳性对照鉴别消渴丸中含有黄芪的较佳的薄层色谱条件是：(1)供试品溶液的制备：取消渴丸粉碎，加甲醇溶解，滤过，取滤液蒸干，加正丁醇溶解，滤过，滤液用氢氧化钠溶液洗涤，弃去碱液，用正丁醇饱和的水洗涤，弃去水洗液，蒸干正丁醇，残渣加甲醇溶解，为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取黄芪甲苷加甲醇溶解，制成1mg/ml的溶液；

(3)薄层制备：点样于硅胶G薄层板，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水为20∶40∶22∶10作展开剂，喷以10％硫酸乙醇溶液后于365nm紫外光下显色。

用五味子甲素和南五味子作阳性对照鉴别消渴丸中含有南五味子的较佳的薄层色谱条件是：(1)供试品溶液的制备：取消渴丸粉碎，加氯仿溶解，滤过，取滤液蒸干，加氯仿溶解，为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取五味子甲素加氯仿溶解，制成1mg/ml的溶液；取南五味子药材，加氯仿照供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；

(3)薄层制备：点样于硅胶GF₂₅₄薄层板，以石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸为20∶5∶1的上层溶液作展开剂，于254nm紫外光下检视。

用高效色谱法测定消渴丸中含格列本脲含量的较佳的条件是：

(1)对照品溶液的制备：取格列本脲加甲醇溶解，制成1ml中含0.025mg的溶液；

(2)供试品溶液的制备：取消渴丸加甲醇溶解，按消渴丸的投料量计算，制成1ml含格列本脲相当于0.025mg悬浮液，滤过取滤液；

(3)色谱条件：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

流动相：体积比为0.05mol/L磷酸二氢铵∶乙腈＝52∶48的溶液。

检测波长：228nm；

理论塔板数：按格列本脲计为1000。

(4)测定法：分别取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，测定，即得。

该测定方法经过方法学验证，阴性样品对测定无干扰，线性相关关系为r＝0.99998，表明格列本脲在0.2724～0.8172μg范围内呈良好的线性关系。回收率为102％(n＝5)，RSD为1.32％。用本方法测定20批消渴丸样品，格列本脲的含量结果如下：

批号          含量％       相当标示量％    批号         含量％       相当标示量％

99090787      0.085        85              99090856     0.079        79

99090917      0.078        78              99010167     0.099        99

00060510      0.11         110             00040350     0.091        91

00040410      0.072        72              00040310     0.076        76

01080985      0.083        83              01091344     0.085        85

01111519      0.092        92              01060505     0.079        79

E00159        0.108        108             E00180       0.072        72

E00155        0.070        70              E00169       0.089        89

E00306        0.084        84              E00170       0.081        81

E00171        0.090        90              E00137       0.097        97

本发明的积极效果是：本发明提高了治疗糖尿病药物《消渴丸》的质量控制的方法，增加了专属性强的消渴丸中是否含有黄芪和南五味子的鉴别方法，并能定量测定消渴丸中格列本脲的含量，更有效地控制产品的质量，确保人体的用药安全。

附图说明

图1.是用黄芪甲苷作对照的消渴丸样品的薄层色谱图。

图2.是用南五味子作对照的消渴丸样品的薄层色谱图。

图3.是消渴丸样品的高效液相色谱图。

图4.是格列本脲样品的高效液相色谱图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图详细叙述本发明的技术方案。

实施例：取广州中一药业有限公司生产的批号为E00532的消渴丸。

1.鉴别消渴丸中含有黄芪：

取消渴丸5.5g粉碎，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，加95％正丁醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液用1％氢氧化钠溶液洗涤3次，每次20ml，弃去碱液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次30ml，弃去水洗液，蒸干正丁醇，残渣加甲醇1ml溶解，为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇溶解，制成1ml中含1mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2000版一部附录中的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点样于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水(20∶40∶22∶10)10℃以下放置过夜的下层溶液作展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在90～100℃加热约5分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的荧光斑点；于紫外光灯(365nm)下显相同颜色的荧光斑点，如图1所示。

2.鉴别消渴丸中含有南五味子：

取消渴丸3g，粉碎，加氯仿20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试品溶液；另取南五味子药材2g，加氯20ml，同法制成对照药材溶液；再取五味子甲素对照品，加氯仿制成每1ml中含1mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2000版一部附录中的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点样于同一以羧甲基纤维素钠为粘合    剂的硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60-90℃)∶醋酸乙酯∶甲酸(20∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，如图2所示。

3.消渴丸中格列本脲含量的测定：照中国药典2000版一部附录中的高效液相色谱法测定。

(1)对照品溶液的制备：精密称定格列本脲对照品13.62mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液；精密量取对照品储备溶液5ml置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(27.24μg/ml)。

(2)供试品溶液的制备：取消渴丸20丸，研细，取约5丸量(相当于格列本脲1.25mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇40ml，超声处理15分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取滤液即得。

(3)色谱条件：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂

流动相：体积比为0.05mol/L磷酸二氢铵∶乙腈＝52∶48；

检测波长：228nm；

理论塔板数：按格列本脲计为1000。

(3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，结果如图3、4所示，图3是消渴丸样品的高效液相色谱图。图4是格列本脲样品的高效液相色谱图。计算结果含量为0.097％，相当于标示量的97％。