作为体外检测试剂的真核通用表达载体系统及其构建方法

摘要

一种作为体外检测试剂的真核通用表达载体系统，含有一个转录单位，该单位包括：(1)一个在毕赤酵母中可以启动基因表达的遗传因子；(2)信号肽；(3)合适的多克隆位点；(4)小鼠IgG1 Fc段的脱氧核糖核酸片段；(5)六个组氨酸组成的短肽；(6)转录及翻译的起始及终止序列。构建方法包括如下步骤：从毕赤酵母表达载体pPIC9出发，克隆入小鼠抗体Fc片段、并引入合适的酶切位点以及HIS(6)－tag，分别作为引入目的基因和融合蛋白纯化之用。该真核通用表达载体系统可用于生产融合蛋白以作为体外检测试剂。此表达载体系统具有显著的通用性：易于检测，所表达的融合蛋白易于、分离纯化，使用方便。