连续灌流式培养杂交瘤、CHO细胞制备抗体的工艺方法

摘要

该连续灌流式培养杂交瘤、CHO细胞制备抗体工艺方法,由接种细胞——连续灌流培养——检测方法——细胞代谢、生长速率、产物合成平衡调控分析——产物回收纯化过程完成,接种细胞是采用固定床填充巨载体,细胞代谢、生长速率、产物合成平衡调控是对葡萄糖、乳酸以及pH值等指标进行分析,在细胞由对数生长期进入衰退期之前,添加相应的氨基酸,并降低葡萄糖和血清浓度,细胞由以生长代谢为主转为以产物合成为主,进入稳态培养,此方法反复应用,实现多个稳态,达到高密度、高产量的长期培养;产物回收纯化是采用StreamlineSP介质,一步回收培养上清中的抗体,DEAE－Sepharose FF阴离子交换剂去除纯化后抗体产品中的热源质,成品冻干。