检索和确定表达信使RNAs的相对浓度的方法

摘要

在一个mRNA库中进行同步序列特异的mRNAs鉴定的一个改进方法,该方法允许通过一个组织表达的几乎每个mRNA在一个凝胶上作为一个明显条带是可见的,该条带的强度大致和mRNA的浓度相对应。总的说来,该方法包括用锚定引物固定3’－末端点的cDNA的形成,从克隆插入产生克隆插入片段,制备cRNA,从cRNA转录cDNA,而且进行两个cDNA的序列特异的PCR的扩增。在一个优先可取的具体体现中,本方法包括比较PCR产物的长度和至少核苷酸序列的一部分和来源于核苷酸序列数据库所确定的期望的数值。本方法能鉴定mRNA表达的变化同药物的配给或生理学或病理学的情况的联系。对于改进方法的应用有用的载体和引物也被提供了。