热保护微粒组合物及其最终蒸汽灭菌的方法

摘要

由热保护试剂稳定的水不溶性生物活性物质的亚微米级至微米级粒子的组合物最终可被蒸汽灭菌而不会引起平均粒子大小任何显著的增大。这些组合物明显显示出在最终的蒸汽灭菌处理中减少了热致聚沉、絮凝或粒子大小的增长。

说明书

背景

在专利文献中已经描述了一些水不溶性或难溶于水的生物活性物质(如药物制剂)的微米级和纳米级粒子悬浮体组合物以及制备这些悬浮体的方法。这些组合物使用表面活性剂分子作为表面改性剂吸附在所述微米级或纳米级粒子的表面阻止了它们的大小的生长。这些表面稳定的微粒从注射或口服或其它给药方式给药中显示出它们的药物优点。

在文献(D.H.Haynes,“磷脂包裹的微晶：水不溶性药物的可注射剂型”美国专利5,091,187和5,091,188)中描述了利用微粒悬浮体的给药系统。我们相信这些悬浮体是第一次应用含有构成纯药品的囊心物的粒子的表面改性的微粒含水悬浮体并采用天然或合成的双极性类脂包括磷脂和胆固醇稳定。随后，在文献(G.G.Liversidge等，“表面改性的纳米级颗粒药物”美国专利5,145,684；K.J.Illig和P.Sarpotdar,“含阻止粒子聚集和提高稳定性的Olin 10-G的制剂”美国专利5,340,564；H.William Bosch等，“制备含纳米级颗粒的治疗组合物的方法”美国专利5,510,118)中描述的利用这些原理的类似给药系统强调了利用粒子含水悬浮体的给药方法的有用之处。

药物制剂的亚微米级至微米级粒子悬浮体的灭菌对于它们的胃肠外给药是必需的。胃肠外药物制剂的灭菌的优选方法为通过高压灭菌进行最终灭菌。人们已经发现许多表面改性的亚微米级至微米级粒子悬浮体在高压灭菌过程中将发生粒子大小的增长。这是由于在高压灭菌温度下从小粒子表面释放出表面活性剂分子并随后发生聚沉。不含表面活性剂的小粒子变得不稳定并通过各种机理发生粒子大小的增长。表面活性剂分子发生聚沉的温度即称为该表面活性剂的浊点。我们相信加入浊点改性剂(仅仅是另外一种表面活性剂)提高了原表面活性剂的浊点并由此在高压灭菌过程中保持所述表面改性剂包覆在所述纳米级粒子上。在大多数公开的文献(美国专利5,298,262,美国专利5,336,507和美国专利5,340,564)中描述的浊点改性剂分子为离子表面活性剂，包括带电荷的磷脂。

磷脂稳定的乳液和磷脂脂质体的成功的最终蒸汽灭菌已经在文献[1-4]中报导。然而，在本发明报导之前还未见有仅含有磷脂作为表面改性剂的水不溶性或难溶的药品的微米级或亚微米级大小的粒子悬浮剂的成功的最终蒸汽灭菌的例子的报导。

本发明的描述

我们惊讶地发现所选择的含有药学可接受水溶性多羟基化合物的水不溶性或难溶于水的药物制剂的亚微米级至微米级粒子悬浮体的组合物可进行高压灭菌而不会引起平均粒子大小任何明显的增长。

而我们又惊讶地发现所述组合物可经受众所周知的促进粒子大小增长或絮凝或附聚的应力。例如所述经蒸汽灭菌的组合物可被摇荡几天，能够经受在40和5℃下交替贮存的应力、经受重复冷冻和解冻、或经受剧烈的沉降力而在粒子大小上没有任何明显的增长。

我们还惊讶地发现可在蒸汽灭菌之前或之后成功地将这些组合物冻干。另外，可通过添加水将所述经冻干的制剂再生以制得具有与原始悬浮体质量相似的含水悬浮体。

这些组合物不使用任何需要用在最终的蒸汽灭菌处理中抵抗聚沉、絮凝、晶体生长或粒子大小增长的浊点改性分子的表面活性剂。在本发明中描述的可蒸汽灭菌制剂与本领域已知的不含表面活性剂的那些(如聚乙烯吡咯烷酮)不同，后者在蒸汽灭菌中有聚沉的倾向，并存在如下面描述的“热保护赋形剂以及其它热保护条件”。

本发明主要涉及如何采用这里定义为“热保护试剂”的某些类型的试剂和选择这里定义为“热保护条件”的加工条件以在水不溶性或难溶的药物制剂的微米级和亚微米级粒子在最终的蒸汽灭菌过程期间和之后阻止这些粒子的增长。

“热保护试剂”和“热保护条件”的特征在于它们能够在最终的蒸汽灭菌过程期间和之后限制粒子悬浮体的容重平均直径的增长至所述经蒸汽灭菌后的悬浮体能够通过静脉内或其它胃肠外给药方式注射而没有危及患者的安全的限度。人们认为至多为大约3μm的容重平均直径对于静脉内注射是安全的。然而，根据USP微粒检验标准，这类悬浮体不得含有多于3000颗10μm或更大的粒子和不超过300颗25μm或更大的粒子。由此我们定义术语“成功的蒸汽灭菌”为一种方法，采用该方法人们可制备不含高出指定的直径限度的粒子或优选悬浮体的容重平均粒子直径的增长经过蒸汽灭菌后不超过大约两倍的制剂。

虽然在减少粒子大小的处理中表面改性剂可以吸附到药物粒子的新制的表面上，并(a)将亲脂药物表面转化为增强了稳定性的亲水表面，和(b)可以改变所述药物粒子表面的表面电荷，然而这里描述的热保护试剂和热保护条件有助于在最终的蒸汽灭菌条件过程期间和之后维持所述悬浮体的粒子大小的分布。

适宜的热保护试剂的例子包括一种或多种药学可接受水溶性多羟基化合物(同时也作为张力改性剂)，如葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、葡聚糖、海藻糖、乳糖。这些试剂在Remington’s PharmaceuticalSciences，第18版，1990,Mack Publishing Co.,PA；和Theory andPractice of Industrial Pharmacy,Lachman等，1986中有详细描述。

适宜的热保护条件包括不存在高离子强度，特别是不存在高浓度的氢离子或氢氧根离子。一些其它适宜的热保护条件包括不存在如聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮等试剂，这些试剂本身在高温下具有天然的聚沉倾向性。

不想将本发明限制于任何具体的理论，我们想表面活性或非表面活性热保护试剂和热保护条件的结合的一些与本发明有关的功能为：·在最终的蒸汽灭菌的冷却环节过程期间抑制了奥氏熟化，由此保持  了粒子大小、增加了贮存稳定性、最大程度地降低了沉降，和在冻  干和再生中减少了粒子生长。·增强了表面改性剂和药物粒子的相互作用，因此所述粒子周围的保  护环境可在最终蒸汽灭菌处理过程期间维持在一般的温度和压力的  较宽范围内。·提高水不溶性药物粒子和液体的界面相容性。·辅助定向所述表面改性剂，使其亲水部分优先进入水相而其亲脂部  分保持较强地吸附在所述水不溶性药物粒子的表面，以及增强这种  定向作用的稳定性。

可将本发明的方法用于生产这些稳定的亚微米级和微米级粒子，包括将药物与磷脂、其它表面活性剂、热保护试剂和其它成分混合，接着通过声波振荡、研磨、均化作用、微观流化作用、逆溶剂和溶剂沉淀、压缩常规或超临界溶剂的溶液的喷雾干燥法。

一些优选的水不溶性药物的例子包括防真菌剂、免疫抑制剂和免疫活化剂、抗病毒剂、抗瘤剂、镇痛剂和消炎剂、抗生素、抗癫痫剂、麻醉剂、安眠药、镇静剂、抗紧张剂、安定剂、抗抑郁剂、抗焦虑剂、抗惊厥剂、拮抗剂、神经元阻断剂、抗胆碱能药物和拟胆碱药、抗毒蕈碱剂和毒蕈碱剂、肾上腺能阻断剂和抗心律不齐药、抗高血压药、抗瘤剂、激素和营养素。这些药物的详细描述可参见Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，1990,Mack PublishingCo.,PA。

实施例

实施例1

表Ⅰ中总结了一些组合物和观察数据的例子。在表Ⅰ中显示了在制备那些制剂中使用的药品(伊曲康唑)、卵磷脂(表面改性剂)和张力试剂(各种多羟基化合物)的量。这些组合物不需要添加所谓的浊点改性剂阻止卵磷脂分离和聚沉。在最终蒸汽灭菌之前和之后制备的悬浮体的特性也包括在该表中。

通过以下步骤制备这些制剂：将所述成分与适量的水混合，采用所需量的氢氧化钠水溶液调整pH值，随后在10,000psi至25,000psi的压力下对所述分散体进行高压均化作用或高压微观流化作用。在进行所述均化作用或微观流化作用处理过程中，将所述处理的流体冷却维持温度在5-35℃之间。将最终产物装入5或10mL的硼硅酸盐USPⅠ型玻璃管瓶中。在氮气气氛下将这些管瓶密封并在121℃进行最终蒸汽灭菌15至30分钟。

对伊曲康唑的成功的最终蒸汽灭菌操作(试验1-A至1-G)列于表Ⅰ中。在该实施例中的术语“成功的最终蒸汽灭菌操作”可理解为所述悬浮体的容重平均粒子直径经过蒸汽灭菌后增长不超过2倍。为了说明这一点，在表Ⅰ中显示了在高压灭菌之后的平均粒子大小与灭菌之前的平均粒子大小的比在1.04至1.18内。我们已经采用MalvernMastersizer Microplus,利用基于所述微粒悬浮体的光衍射的方法测定了这些悬浮体的容重直径。

描述于表Ⅰ中的制剂1-A和1-G为经过成功的蒸汽灭菌而粒子大小没有任何明显增大的产物的实例。经过对所述制剂进行最终蒸汽灭菌，所述悬浮体的容重平均直径增大的因子不会超过2。表Ⅰ：经过最终蒸汽灭菌的微粒-伊曲康唑悬浮体和它们在灭菌之前和之后的特性的实例。

    制剂编号1-A1-B1-C1-D1-E1-F1-G药物量，％251099910Lipoid E80,％0.51.13.52.72.72.72.0其它添加剂*TRETRETREDE38DE77LACMAN其它添加剂，％1212131010105.5水适量100％适量100％适量100％适量100％适量100％适量100％适量100％药物∶类脂的比4∶14.5∶12.86∶13.33∶13.33∶13.33∶15∶1灭菌前粒子大小，μm1.071.010.91.301.301.310.75灭菌后粒子大小，μm1.161.161.031.531.51.451.27灭菌之后与之前的粒子大小比1.081.141.141.181.151.111.69*化学品的符号和来源：Itraconazol(Wyckoff Chemical Co.)；TRE=海藻糖(Pfanstiehl,Waukegan,IL)；DE38=葡聚糖-平均分子量=38,100(Sigma,St.Louis,MO)；DE 77=葡聚糖-平均分子量=77,000(Sigma,St.Louis,MO)；LAC=乳糖(BDH Inc.,Toronto,Canada)；MAN=甘露醇(J.T.Baker,Phillipsburg,NJ)；GLY=甘油。

实施例2

在表Ⅱ中显示了一些负对照试验的结果。作为对照试验，尝试了没有添加任何热保护剂和表面改性剂的伊曲康唑制剂(2-A)。所述固体药物不能在水中分散。所述药物的主要部分保持飘浮在水的表面上。因此，无法将其均化。我们发现有必要加入表面活性剂(同时也作为润湿剂)。在没有任何表面改性剂的情况下，这个制剂无法进行配制。因此没有进行蒸汽灭菌和粒子大小测定。

按照在实施例1中描述的方法配制制剂2-B和2-E。表Ⅱ：经过最终蒸汽灭菌的微粒-伊曲康唑悬浮体和它们在灭菌之前和之后的特性的实例。

    制剂编号2-A2-B2-C2-D2-E    药物：Itraconazole10％10％2.5％8.1％8.1％Lipoid E800％10％10％2.4％2.4％其它添加剂¹0％MAN:5.5    ％GLY:2.5％TRE:12％MRJ:2.0％TRE:12％PF68:2.0％水适量100％适量100％适量100％适量100％适量100％药物∶类脂的比NA1∶10.25∶13.4∶13.4∶1灭菌前粒子大小，umND²0.59ND⁴0.860.86灭菌后粒子大小，μmND²ND³ND⁴7.844.22灭菌之后与之前的粒子大小比ND²ND³ND⁴9.14.9注：1化学品的符号和来源：Itraconazol(Wyckoff Chemical Co.)；Lipoid E80(Lipoid gmbH)；TRE=海藻糖(Pfanstiehl,Waukegan,IL)； MRJ=Myrj52S(ICI表面活性剂)；PF68=Pluronic F68(BASF)；MAN= 甘露醇(J.T.Baker,Phillipsburg,NJ)；GLY=甘油。2所述固体药物不能在水中分散，因此无法将其均化。我们发现有 必要加入表面活性剂(同时也作为润湿剂)。在没有任何表面改性剂 的情况下，这个制剂无法进行配制。因此没有进行蒸汽灭菌和粒子 大小测定。3制剂2-B说明了在所述经过高压灭菌后的物质的表面的絮凝或聚 集和形成的大量的浮渣，这些浮渣在剧烈的搅拌下缓慢地分散。4制剂2-C(含有2.5％的甘油作为张力改性剂)的粒子大小显示出非常 不稳定的粒子大小，因此没有进行最终蒸汽灭菌。

制剂2-B说明了在所述经过高压灭菌后的物质的表面的絮凝或聚集和形成的大量的浮渣，这些浮渣在剧烈的搅拌下缓慢地分散。我们猜想在制剂2-B的蒸汽灭菌中的絮凝物或乳状液分层来源于过量的磷脂。这个制剂具有药物与LipoidE80的比为1∶1，即各为10％(w/w)。我们相信过量的磷脂在蒸汽灭菌过程中导致产生一些交联结构因而产生絮凝物和乳状液分层。

另外，在所述蒸汽灭菌条件过程中在大量过量的表面活性剂的存在下粒子大小的增长是由于在表面活性剂分子的微结构中的药物的溶解，接着在冷却下的重结晶导致发生的。这类微结构包括与由所述表面活性剂分子形成的其它结构相平衡的微量的胶束或脂质体。这些微结构部分将随着所述表面活性剂的量的增加而增加。因此我们认识到在制剂中保持适量的表面改性剂以避免粒子大小在最终蒸汽灭菌中出现增长是重要的。

我们发现通常通过将所述磷脂减少至最低量(如～10％(重量)至大约2-5％(重量))可成功地进行所述微粒制剂的最终蒸汽灭菌，所述最低量指可将所述磷脂有效地覆盖在所述药物微粒上而避免产生认为是在蒸汽灭菌中引起大尺寸交联结构的不符需要的磷脂结构。药物对磷脂的比高于大约3∶1时似乎可得到较好的结果(实施例1的制剂1-A至1-G)。当药物与磷脂的比降低，如从制剂1-G(实施例1)的5∶1降至制剂2-B的1∶1，可在所述经过高压灭菌的物质的表面上观察到大范围的絮凝或聚集和形成大量的浮渣。

制剂2-C(含有2.5％的甘油作为张力改性剂)的粒子大小是不稳定并因此没有进行最终的蒸汽灭菌。这个制剂具有大量的磷脂(相对于药物而言)，具有低的药物对磷脂比(0.25∶1)。另外，这个制剂应用2.5％(重量)的甘油作为张力改性剂。我们相信不利的药物：磷脂比和/或使用甘油作为张力改性剂，甚至没有在最终的蒸汽灭菌的热应力下也将引起所述制剂的粒子大小的明显增大。

制剂2-D和2-E表示加入某些常用的表面活性剂的效果。在制剂2-D中除了2.4％的Lipoid E80和8.1％的伊曲康唑外，还存在2.0％的表面活性剂Myrj-52S(聚乙二醇-40硬脂酸酯)。同样，在制剂2-E中除了2.4％的Lipoid E80和8.1％的伊曲康唑外，还存在2.0％的的表面活性剂Pluronic F68(聚羟体)。

虽然制剂2-D和2-E在高压灭菌前的悬浮体的平均粒子大小保持在0.86μm，然而在蒸汽灭菌中它们分别急剧增长至7.84和4.22μm。两种制剂经过蒸汽灭菌后粘度变高。制剂2-D和2-E显示在灭菌后与灭菌前的粒子大小比分别为9.1和4.9。该试验表明往含有LipiodE80的微粒制剂中加入某些表面活性剂导致粒子大小的更大生长。

实施例3

在该试验中使用实施例1的制剂“C”(微粒-伊曲康唑(10％))。将大约5g的制剂放在管瓶中并在氮气气氛下密封。如下给出冷冻/解冻应力。通过在冷藏箱(大约-20℃)中贮存至少6小时将所述管瓶中的物质冷冻。随后通过将所述管瓶在室温下放置0.5-1小时解冻所述冷冻的样品。通过上述方法测量所述解冻样品的粒子大小分布。记录所述解冻样品的外观。随后再次将所述管瓶在氮气气氛下密封以在该试验的下一环节中使用。该试验的结果总结在表Ⅲ中。所述制剂在冷冻/解冻条件的去稳定应力(destabilizing stress)下显示出非常好的粒子大小稳定性。

实施例4

通过将实施例1的制剂“1-C”贮存在大约4℃的冰箱中大约24小时并随后在大约40℃的恒温器中贮存大约24小时施加给所述制剂热交替应力(thermal cycling stress)。在每个交替的终结时测量粒子大小和记录外观。重复这种交替。结果在下表Ⅳ中给出。所述结果表明所述制剂的粒子大小和外观在热交替应力中具有非常好的稳定性。经过4次交替，在本研究结束后所述制剂保持稳定。表Ⅲ：在冷冻/解冻应力中的微粒-伊曲康唑(10％)的粒子大小稳定性。

    交替#    容重粒子大小，μm    外观    平均    90％    99.9％    0    1.04    1.60    2.52    均匀    白色    悬浮体    1    1.04    1.60    2.52    2    1.01    1.53    2.47    3    1.01    1.52    2.44    4    1.05    1.61    2.53    5    1.02    1.52    2.44    6    1.01    1.50    2.38    7    1.02    1.54    2.41    8    1.03    1.55    2.42    9    1.02    1.53    2.44    10    1.03    1.57    2.47表Ⅳ：在热交替(4-40℃)应力中的微粒-伊曲康唑(10％)的粒子大小稳定性。    交替#    容重粒子大小分布(μm)    外观    平均    90％    99.9％    0    1.04    1.60    2.52    均匀    白色    悬浮体    1    1.01    1.52    2.45    2    1.02    1.56    2.47    3    1.02    1.57    2.50    4    1.03    1.59    2.76实施例5

该实施例还说明了在摇荡应力下所述制剂的良好稳定性(参见表Ⅴ)。测试实施例“1-C”的经过蒸汽灭菌的制剂。如下给出摇荡应力。将装有所述制剂的管瓶水平放在轨道式摇动器上并以大约100rpm的转速摇荡。每天将管瓶取下观察外观。每隔一天测量粒子的大小。在7天的摇荡中所述容重平均粒子大小和其90％以及99.9％的粒子大小没有显著改变。7天后停止所述研究。表Ⅴ：在摇荡应力中微粒-伊曲康唑(10％)的粒子大小稳定性

   摇荡应力    时间点    容重粒子大小(μm)    平均    90％    99.9％    外观    第0天    1.04    1.60    2.52均匀白色悬浮体    第3天    1.05    1.64    2.83    第5天    1.10    1 77    3.28    第7天    1.06    1.68    2.83实施例6

通过离心试验评价长期的沉降行为并通过粒子分级测定所述制剂的质量(表Ⅵ)。测试实施例1的制剂“1-C”。以3000rpm的转速离心大约20分钟无法把所述制剂沉降。将离心速率提高至大约5000至6000rpm再进行20分钟可观察到明显的沉降，然而该沉降物在摇荡下难于再悬浮。再悬浮能力分级为：容易：通过用手轻微摇荡沉降的悬浮体可观察到变得均匀；中等：通过用手剧烈摇荡沉降的悬浮体可观察到变得均匀；困难：需要对所述沉降的悬浮体产生涡流才可观察到变得均匀。

在这些沉降中没有发生粒子大小的增大。另外，在光学显微镜下没有观察到聚集或絮凝。通过光学显微镜得到的平均粒子大小与Malvern Mastersizer得到的结果一致。表Ⅵ：在沉降应力中微粒-伊曲康唑(10％)的稳定性。

    离心条件                  沉降再悬浮能力    容重粒子大小(μm) 速率(rpm)持续时间(分钟)平均90％99.9％    离心前没有NA^*1.05 1.58 2.48 1000    5没有NA ND^*ND ND 1500    10没有NA ND ND ND 2000    15轻微容易1.02 1.51 2.39 3000    15轻微中等0.99 1.47 2.20 5000    15明显困难0.97 1.43 2.19 6000    15明显困难0.99 1.46 2.17

*NA=没有实施；ND=没有测定。

实施例7

在该试验中使用实施例1的制剂“1-C”(微粒-伊曲康唑(10％))。将大约5g未经高压灭菌的产物放在玻璃管瓶中并冻干。同样将经过最终蒸汽灭菌的管瓶冻干。经过冻干的物质为灰白色的块。所述冻干的块很容易采用水通过4-5次对所述管瓶轻微翻转再生得到均匀白色悬浮体。初始的悬浮体以及冻干和再生制剂的外观和粒子大小列于表Ⅶ中。未经高压灭菌和经过高压灭菌的制剂在冻干和再生中显示出较好的粒子大小稳定性。

实施例8

该实施例的制剂和它们的特性在于表Ⅷ中给出。通过实施例1中的方法制备这些制剂。在微粒-环孢菌素制剂8-A中，在预混合物中没有加入作为热保护剂或张力改性剂的多羟基化合物。我们发现该粒子大小减少曲线的效果很差。在均化作用终结时所述悬浮体的容重平均粒子直径为大约4μm。在121℃下对该悬浮体进行蒸汽灭菌15分钟得到了具有几毫米的严重聚沉块的固体粒子。可观察到几乎所有的药品均沉降留下澄清的上清液。表Ⅶ：微粒-伊曲康唑(10％)悬浮体在冻干和再生中的粒子大小的稳定性

    制剂条件    外观        容重粒子大小(μm)    平均90％99.9％    冻干前未经灭菌的悬浮体均匀白色悬浮体    0.9 1.31 2.08未经灭菌的冻干和再生的悬浮体均匀白色悬浮体    1.00 1.60 2.56    冻干前经过灭菌的悬浮体均匀白色悬浮体    1.03 1.59 2.51经过灭菌的冻干和再生的悬浮体均匀白色悬浮体    1.10 1.71 2.51表Ⅷ：经过最终蒸汽灭菌的微粒制剂的更多的实例。    制剂编号    8-A    8-B    药物    环孢菌素    环孢菌素    药物量，％    10    10    海藻糖，％    没有    12    Lipoid E80,％    3.0    3.0灭菌前的粒子大小，μm    ～4    0.72灭菌后的粒子大小，μm通过目视检测为大粒子    1.03灭菌之后和之前的粒子    大小比    远大于2    1.43

将除了实施例8-A的组分外还含有海藻糖的制剂8-B预混合。中途停止对该制剂的均化作用处理，将其在氮气气氛及室温下静置过夜。第二天继续完成所述均化作用。观察到有效粒子大小降低至容重平均直径为0.72μm。另外，该制剂可成功地在121℃下经过15分钟的蒸汽灭菌，其粒子大小可接受地增大至大约1.03，增长因子仅为1.43。我们相信所述多羟基化合物和海藻糖的存在使得粒子大小得到有效地降低。所述制剂能够抵抗高压灭菌的热应力而没有极大增大其粒子大小。实施例9

在表Ⅸ中显示了一些含有羟基孕二酮的制剂和它们在蒸汽灭菌之前和之后的特性。这些制剂通过实施例1的方法制备。表Ⅸ：经过最终蒸汽灭菌的微粒-羟基孕二酮制剂的例子。

    制剂编号    9-A    9-B    9-C    药物量，％    3.0    3.0    3.0    Lipoid E80,％    2.0    2.0    1.0    DSPC,％^*    1.0    1.0    0.5    DMPG,％^**    0.2    0.2    0.1    葡聚糖，％    20    ---    20    氯化钠，M    ---    ---    ---    水    适量    100％    适量    100％    适量    100％灭菌前的平均粒子大小，μm    1.38    1.38    1.42灭菌后的平均粒子大小，μm    2.95    5.24    2.71灭菌之后和之前的平均粒子大    小比    2.1    3.8    1.9*DSPC=二甾酰基磷脂酰胆碱*DMPG=二肉豆蔻酰磷脂酰甘油

含有结合了磷脂(Lipoid E80,DSPC和DMPG)和葡聚糖作为热保护剂的制剂9-A说明在121℃下蒸汽灭菌15分钟后粒子大小增长了大约2倍。另一方面，除了不含葡聚糖外，其它与9-A的组成相似的制剂9-B显示出更高的平均粒子大小(5.24μm)和灭菌之后和之前的平均粒子大小的比为3.8。在制剂9-A中葡聚糖的存在比制剂9-B具有改进的粒子大小稳定性。除了表面改性剂的量稍有不同外，制剂9-C与制剂9-A非常相似。同样在该制剂中粒子大小的增长限定在大约2个因子内。其平均粒子大小为2.71μm和灭菌之后和之前的平均粒子大小的比仅为1.9。

除了上述实施例的组合物外，本发明的制剂可另外含有适合量的pH缓冲盐和pH调节剂如氢氧化钠和/或药学可接受的酸。本领域的技术人员熟知在低于5和高于9的pH值下处理磷脂时，所述磷脂分子将大量地水解。因此，通常在均化作用前调节所述悬浮体的pH值在所述范围内，并如果必要时在蒸汽灭菌前重新进行调整。

虽然通过似乎可认为是最具实用性和优选的实施方案对本发明及其实施例进行了描述，然而应该明白本发明并不限定于所公开的实施方案中，相反，本发明覆盖各种在以下权利要求书的宗旨和范围内的修改和等同的改编。

                           参考文献

1．“环孢菌素乳液”，Parikh,Indu；和Mishra,Awadhesh；美国#5660858,1997。

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4．“脂质体”Klaveness,Jo；Berg,Arne；Jacobsen,Trond Vegard；Rongved,Pal；Ege,Thorfinn；Kikuchi,Hiroshi；Yachi,Kiyoto；美国5676928,1997。