用乙二胺二琥珀酸增强金属软体动物灭杀剂的作用

摘要

一种可吞食的软体动物毒药,它含有简单金属化合物,增强活性的添加剂诸如乙二胺二琥珀酸( EDDS)及其衍生物,和软体动物可食用的载体材料。在一个实施方案中,该软体动物毒药的活性剂可以是EDDS的金属配合物形式。该组合物可以单独使用,或者与灭杀软体动物的共活性剂和/或肥料联合使用。

说明书

关于联邦政府资助研究的声明不适用。

发明领域

本发明涉及害虫控制化合物，更具体地说，涉及能通过增强软体动物吸收金属毒药的有效性而有效控制有害软体动物的组合物。

发明背景

陆地上的有肺腹足纲软体动物，诸如鼻涕虫和蜗牛，是影响商业性农业和园艺业以及家庭花木栽培的重要的植物害虫。这些生物体是杂食性的，在它们每天搜寻粮草的过程中，要消耗大量的植物性物质。结果，它们在生长周期的所有阶段都会严重破坏蔬菜园，甚至是植物农作物。由于它们具有破坏性潜力，因此必须对其采取控制措施，以确保对生长植物的充分保护。

水生软体动物，包括淡水蜗牛Bulinsu sp.，泡螺(Bulinus)，Biomphalaria和钉螺(Oncomeania)，以及寄生虫(例如血吸虫(Schistosoma))的载体，也都是害虫。水生软体动物可利用许多合成和植物性化合物进行控制。

陆地上有肺的腹足纲软体动物和水生软体动物在本文中统称为“软体动物”。

已使用了各种各样的方法来对抗有害软体动物。大概最常见的是使用叫做软体动物灭杀剂的有毒化合物。软体动物灭杀剂包含不同的一组化学物质，包括食盐(NaCl)、砷酸钙、硫酸铜和聚乙醛。软体动物杀灭剂根据其作用方式可分成主要的两组：(1)接触毒药或(2)吞食毒药。作为接触毒药，软体动物灭杀剂必须与软体动物的外部发生物理接触，或者是通过外部施用，或者是软体动物横过地上的毒饵的结果。毒药被软体动物的蛋白质粘液层吸收，在软体动物的体内积累，直至达到致死比例。接触型软体动物灭杀剂的一个主要缺点是，如果软体动物不与该化学灭杀剂发生物理接触的话，它们就几乎没有什么作用。如果鼻涕虫或蜗牛躲藏起来或迁移到一个已施用了接触型软体动物灭杀剂的区域中，将不会受到什么影响。

少数既可作为接触毒药又可作为吞食毒药的化合物之一是聚乙醛。该化合物通常用作长效毒饵，吸引软体动物并在它们吞食了该化合物后将它们杀死。尽管聚乙醛效率高且在商业上很流行，但其对于高级哺乳动物来说是有毒的，并且在美国和欧洲是家养动物中毒的主要原因。

重金属，包括锌、铝、铜和铁，它们对软体动物来说都是有毒的，且已知当它们以盐或螯合物的形式用作接触毒药时是有效的软体动物灭杀剂(Henderson等，1990年)。但是，它们当中几乎没有已获得商业成功的，大概是因为许多这类化合物对软体动物来说并不可口，因此不能以有效的足够量被吞食。最近，Henderson等(英国专利申请2207866A，1988年)发现，铝和戊二酮化合物的特定配合物以及铁和亚硝基化合物的特定配合物既可作为吞食毒药，又可作为接触毒药。

美国专利第5,437,870号(Puritch等)公开了一种可吞食的软体动物毒药，它含有载体(例如毒饵)、简单铁化合物和附加组分。该附加组分可以是乙二胺四乙酸(EDTA),EDTA的盐，羟乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)或HEDTA的盐。澳大利亚专利申请第77420/98号也公开了一种胃作用型软体动物灭杀剂，它包括金属氨羧配合剂(complexone)(即，乙二胺四乙酸铁)和载体。

使用基于金属的吞食毒药时，鼻涕虫必须吃掉并吸收足够大量的毒药以达到致死阈值。这些化合物比接触毒药更加难以配制和使用，因为它们对于鼻涕虫来说并不总是适口的。为了有效，这些化合物必须被软体动物吞食并在它们的消化道中以足够高的浓度消化，从而产生杀虫作用。然而，这类软体动物灭杀剂的活性必须足够慢地起作用，以防止鼻涕虫在吞食了致死剂量之前过早地感到不舒服而停止摄食毒药(Henderson和Parker,1986年)。许多接触毒药(例如硫酸铝、硫酸铜、硼砂等)作为吞食毒药时对鼻涕虫没有威慑力，因此是无效的。

因此，需要提供一种能增强软体动物对胃作用型软体动物毒药的吸收而又不影响其对该毒药的吞食的组合物。

发明概述

本发明提供了一种胃作用型软体动物毒药组合物，该组合物包含简单金属化合物、增强该金属的活性和吸收的添加剂、和软体动物可食用的载体材料。该组合物能在被软体动物吞食后有效地杀死它们。

简单金属化合物可包括选自下列成员的金属：铁、铜、锌、铝、及其混合物。本文中所用的术语“铁”应理解为包括三价铁和亚铁形式的铁。增强活性的添加剂是选自下列成员的化合物：乙二胺二琥珀酸，乙二胺二琥珀酸的异构体，乙二胺二琥珀酸的盐，乙二胺二琥珀酸的金属配合物及其混合物。载体材料是一种软体动物可食用的物质，它优选为软体动物的食物。

在另一个实施方案中，该组合物包含乙二胺二琥珀酸或其异构体的金属配合物。可以形成该配合物的金属包括铁、铜、锌和铝。

在另一个实施方案中，该软体动物毒药组合物还包括共活性成分，诸如聚乙醛。在另一个实施方案中，该组合物可包括或与肥料化合物一起使用，诸如颗粒肥料。

在本文中，术语“软体动物”是指陆地和水生软体动物。发明详述

本发明提供了一种组合物，该组合物是一种可吞食的软体动物毒药。在一个实施方案中，该组合物包括简单金属化合物，据信能提高该金属化合物功效的增强活性的添加剂，和软体动物可食用的载体。也可包含其他增强制剂功能的添加剂。这类化合物的实例包括pH调节化合物，防腐剂，抗微生物剂，吞噬刺激剂，和矫味添加剂。

简单金属化合物可以是包括金属诸如铁、铜、锌、铝或其混合物的化合物。这样的化合物可以是还原的元素铁，金属蛋白(例如铁蛋白，铜蛋白，锌蛋白，铝蛋白)，金属盐(例如铁盐，铜盐，锌盐，铝盐及其混合物)，金属糖类(metal carbohydrates)(例如含铁糖类，含铜糖类，含锌糖类，含铝糖类及其混合物)。这类化合物的具体实例包括醋酸铁，氯化铁，磷酸铁，磷酸铁/柠檬酸钠混合物，磷酸钠铁，焦磷酸铁，硝酸铁，硫酸铁铵，清蛋白化铁，硫酸铁，硫化铁，柠檬酸铁胆碱(iron choline citrate)，磷酸铁甘油(iron glycerol phosphate)，柠檬酸铁，柠檬酸铁铵，富马酸铁，葡糖酸铁，乳酸铁，糖二酸铁，果糖酸铁(iron fructate)，葡聚糖酸铁(iron dextrate)，琥珀酸铁，酒石酸铁，醋酸铜，氯化铜，磷酸铜，焦磷酸铜，硝酸铜，硫酸铜铵，清蛋白化铜，硫酸铜，葡糖酸铜，乳酸铜，糖二酸铜，果糖酸铜(copperfructate)，葡聚糖酸铜(copper dextrate)，醋酸锌，氯化锌，磷酸锌，焦磷酸锌，硝酸锌，硫酸锌铵，清蛋白化锌，硫酸锌，葡糖酸锌，乳酸锌，糖二酸锌，果糖酸锌(zinc fructate)，葡聚糖酸锌(zinc dextrate)，醋酸铝，氯化铝，磷酸铝，焦磷酸铝，硝酸铝，硫酸铝铵，清蛋白化铝，硫酸铝，葡糖酸铝，乳酸铝，糖二酸铝，果糖酸铝(aluminumfructate)，和葡聚糖酸铝(aluminum dextrate)。应理解的是，本文中所用的术语“铁”包括该元素的高铁和亚铁形式。

如上所述，增强活性的添加剂是能通过增强该金属的消化吸收而改善该金属化合物功效的添加剂。优选的增强活性的添加剂是乙二胺二琥珀酸(EDDS)，包括其天然产形式和合成形式。另外，该增强活性的添加剂也可以是乙二胺二琥珀酸的异构体、乙二胺二琥珀酸的盐、乙二胺二琥珀酸的金属配合物及其混合物等形式。

增强活性的添加剂诸如EDDS、其异构体和其衍生物，据信有助于将简单金属化合物从软体动物的消化道迅速吸收到动物的内脏中。这导致了对软体动物细胞完整性的迅速且不可逆转的破坏，从而阻止软体动物继续摄食植物性物质，最终导致其死亡。EDDS据信能通过使金属更自由而快速地分散到整个软体动物体内而影响软体动物的部分消化系统。金属的这种过载结果导致对软体动物系统的病理学损害。

EDDS是一种天然产的六配位体，它由许多微生物生成，包括放线菌，日本拟无枝酸菌(Amycolatopsis japonicum sp.nov.)(Nishikori等，J.Antibiot.(抗生素杂志)37:426-427(1994)；Goodfellow等，Systematics and Applied Microbiology(分类学和应用微生物学)20:78-84(1997)。该化合物的酸的分子式为C₁₀H₁₆N₂O₂，三钠盐的分子式为C₁₀H₁₃N₂O₈Na₃。酸的分子量为292.25，三钠盐的分子量为358.19。该化合物可以以三种立体异构体存在，即，[R,R],[R,S/S,R]和[S,S]。EDDS也可如美国专利第5,554,791中所公开的，通过L-天冬氨酸与1,2-二卤代乙烷的反应来合成。

EDDS已在商业上开发成功，由Associated Octel CompanyLtd.以OctaquestE-30为商标作为三钠盐化合物出售。该化合物具有与金属配合而充当螯合剂的能力。它具有易生物降解且不会在环境中留存的优点(Schowanek等，Chemosphere(臭氧层)34:2375-2391(1997))。因此，如美国专利第4,704,233号中所公开的，它已被建议用作洗衣剂中的表面活性剂。

可按照本发明充当增强活性的添加剂的有用的乙二胺二琥珀酸的盐包括该化合物的碱金属盐，碱土金属盐，铵盐和取代铵盐，以及它们的混合物。优选的盐包括钠盐、钾盐和铵盐。

该增强活性的添加剂也可以是乙二胺二琥珀酸的金属配合物形式。这类配合物的实例包括EDDS铁配合物，以及EDDS的铜、锌和铝配合物。在一个实施方案中，该组合物使用时可以不含作为一个单独组分的简单金属化合物。取而代之，该化合物可以以EDDS的金属配合物加上选自铁、铜、锌和铝等的金属的形式使用。

合适的载体材料是软体动物可食用的那些。软体动物食物是载体材料优选类型的一个例子。适宜的软体动物食物载体的实例包括小麦粉，谷类(wheat cereal)，琼脂，明胶，油渣饼，宠物食品小麦，大豆，燕麦，玉米，柑橘泥，稻米，水果，鱼类副产品，糖，包膜蔬菜种子，包膜谷类植物种子，酪蛋白，血粉，骨粉，酵母，脂肪，啤酒产品，和它们的混合物。特别有用的软体动物食物的实例包括骨粉-小麦粉混合物，其中骨粉与小麦粉的比例为50∶50-90∶10，和一种用小麦粉和糖以小麦粉与糖按约90∶10-95∶5的比例混合形成的食物。

如上所述，其他化合物可以作为增强制剂功能的添加剂而加入到该组合物中。这类化合物包括防腐剂或抗微生物剂，吞噬刺激剂，防水剂，矫味剂和pH调节剂。

例举性的防腐剂包括Legend MK^，它可以从宾夕法尼亚州费城的Rohm & Hass Company获得；和CA-24，它可以从德国Memmingen/Allgaeu的Dr.Lehmann and Co.获得。防腐剂诸如通常可以与水混合形成储备溶液的这些将以约10-750ppm的浓度加入到该制剂中。

可以向该组合物中加入吞噬刺激剂来吸引软体动物并诱导软体动物摄食该组合物。可以使用的吞噬刺激剂有多种，包括糖、酵母产物和酪蛋白。糖，诸如蔗糖，是其中更优选的吞噬刺激剂。这些添加剂通常以干燥形式加入到组合物中。一般来说，它们可以以占该组合物总重约1-2.5％的比例加入到该组合物中。

该组合物中可加入防水剂(也可用作结合剂)来改善该组合物的耐气候性。它们一般是水不溶性化合物，诸如蜡状物质和其他烃类。合适的防水剂的实例是石蜡，硬脂酸盐，蜂蜡，和类似化合物。一种优选的蜡状化合物是PAROWAX^，它可以从加拿大安大略省Scarborough市的Conros Corp.获得。防水剂可以以干燥形式加入到该组合物中，比例为该组合物总重的约5-12％。

该组合物中还需要包括矫味化合物，该矫味化合物可使该组合物变得对动物诸如人和宠物来说不可口。例举性的组合物包括带苦味的那些。一种这样的化合物是可从苏格兰爱丁堡的McFarlane Smith Ltd.购得的BITREX^。这些化合物一般以非常低的浓度加入。例如，0.1％BITREX溶液可以以占该组合物总重约1-2％的量加入到该组合物中。

有用的影响pH的添加剂包括碳酸钙、碳酸钾、氢氧化钾、抗坏血酸、酒石酸和柠檬酸。这类添加剂的使用浓度可以是约0.2-5.0％重量，并且它们应能有效地将pH调节到约pH5-9的范围内。

在简单金属化合物中，金属与增强活性的添加剂的摩尔比可以在约1∶0.02-1∶58的范围内。该比例更优选在1∶0.3-1∶12的范围内。另外，在该简单金属化合物中，金属可以以约200-20,000ppm(0.02-2.0％重量)的浓度存在，而增强活性的添加剂可以以约2,000-60,000ppm(0.2-6.0％组合物重量)的浓度存在。一个例举性的浓度范围是，金属为该组合物的约0.1-0.5wt.％,EDDS组分为约0.8-6.0wt.％。

当所使用的组合物不含简单金属化合物，即，以EDDS的金属配合物形式使用时，该金属配合物可以以5,000-90,000ppm(0.5-9.0wt.％)的浓度存在。

在一个实施方案中，该组合物还可包括灭杀软体动物的共活性剂。一个这样的灭杀软体动物的共活性剂是聚乙醛。其他可能的灭杀软体动物的共活性剂包括甲硫威(methiocarb)、甲萘威(carbaryl)、异索威(isolan)、兹克威(mexcarbate)、杀螺胺(niclosamide)、杀螺吗啉(trifenmorph)、克百威(carbofuran)、阿那卡地酸(anarcardic acid)和植物来源的皂甙。这类共活性成分可以以约0.2-5.0wt.％的浓度加入组合物中。

在另一个实施方案中，该组合物还可包括肥料，诸如实质上的任何植物性肥料。适宜的肥料一般是颗粒状的，一个有用的肥料的例子是可从亚利桑那州Scottsdale的Ironite Products Company获得的Ironite^。当存在肥料时，它可以以该组合物重量的约0.5-10.0％的浓度使用。

本发明的组合物一般以干燥形式使用，该组合物的许多组分都以干燥形式包含其中。不过，在该组合物中包含足量的水以形成生面团，从而使各种成分更易混合，这通常也是有用的。水一般以占该组合物总重约15-60％的浓度加入。不过，在使用软体动物灭杀毒饵之前，一般通过加热和干燥将水去除。该组合物也可配制成液体，尤其是当该组合物利用EDDS的金属配合物时。

如上所述，本发明的组合物一般以干燥、可铺展的形式使用，诸如粉末、颗粒、方块或小丸等形式。该组合物可以铺展在已被软体动物感染的面积上或其周围，也可铺展在要防止软体动物感染的面积上。当用该组合物对抗水生软体动物时，可以简单地将其加入到软体动物栖息的环境中。

为了制备该组合物，可以将适量的简单金属化合物和增强活性的添加剂同干燥载体材料以干燥形式混合。之后，将其他干燥成分(诸如吞噬刺激剂和防水剂)与该毒饵掺合并混合。接着，向该干燥混合物中加入适量液体添加剂(诸如防腐剂、矫味剂和水)以形成生面团。将该毒饵用诸如塑料套包裹起来，并加热。一种优选的加热技术是在微波炉中加热30秒至10分钟。加热后，该生面团可以用食品研磨机加工成数根软体动物灭杀组合物。这些材料在升高的温度或室温下干燥后，可以将其制成所需形式，诸如粉末、小丸或颗粒。

一个例举性的软体动物灭杀组合物可以用下述方法制备。首先，将金属化合物，例如含铁糖类或铁盐，干燥混合到谷粉(小麦)中，金属浓度为1,000-20,000ppm wt/wt。然后将干燥EDDS或其钠盐以根据铁加入量的摩尔浓度加入该粉末中。该浓度可以在金属：EDDS的摩尔比为约1∶0.02-1∶58的范围内变化。将EDDS加入到该混合物中，同时不断搅拌。也可向该混合物中加入其他成分，诸如抗微生物剂(Legend^)，防水剂，和吞噬刺激剂(例如糖)。将水溶性添加剂溶解在水中，然后将水掺合到干燥小麦/铁化合物加EDDS的混合物中。该生面团用研磨设备充分混合，并挤压成面条形式。所得毒饵进行测试前在40℃下干燥24小时。

金属配合物可以通过将实质上任何可溶的金属化合物，诸如硫酸亚铁，与可溶的EDDS或EDDS的实质上任何可溶的衍生物组合而合成。组合后，可以用适宜的制剂如浓氢氧化钾溶液调节其pH值(例如在约pH5-9的范围内)。例举性的金属化合物包括还原的元素铁，金属蛋白(例如铁蛋白，铜蛋白，锌蛋白，铝蛋白)，金属盐(例如铁盐，铜盐，锌盐，铝盐及其混合物)，金属糖类(例如含铁糖类，含铜糖类，含锌糖类，含铝糖类及其混合物)。这类化合物的具体实例包括醋酸铁，氯化铁，磷酸铁，磷酸铁/柠檬酸钠混合物，磷酸钠铁，焦磷酸铁，硝酸铁，硫酸铁铵，硫化铁，清蛋白化铁，柠檬酸铁胆碱，磷酸铁甘油，柠檬酸铁，柠檬酸铁铵，富马酸铁，葡糖酸铁，乳酸铁，糖二酸铁，果糖酸铁，葡聚糖酸铁，琥珀酸铁，酒石酸铁，醋酸铜，氯化铜，磷酸铜，焦磷酸铜，硝酸铜，硫酸铜铵，清蛋白化铜，硫酸铜，葡糖酸铜，乳酸铜，糖二酸铜，果糖酸铜，葡聚糖酸铜，醋酸锌，氯化锌，磷酸锌，焦磷酸锌，硝酸锌，硫酸锌铵，清蛋白化锌，硫酸锌，葡糖酸锌，乳酸锌，糖二酸锌，果糖酸锌，葡聚糖酸锌，醋酸铝，氯化铝，磷酸铝，焦磷酸铝，硝酸铝，硫酸铝铵，清蛋白化铝，硫酸铝，葡糖酸铝，乳酸铝，糖二酸铝，果糖酸铝和葡聚糖酸铝。例举性的EDDS的衍生物包括乙二胺二琥珀酸的异构体，乙二胺二琥珀酸的盐，包括碱土金属盐、碱金属盐、铵盐、取代铵盐、这些盐的混合物，乙二胺二琥珀酸的金属配合物及其混合物。

以下非限制性实施例用来进一步说明本发明。

实施例1

用每桶20只庭园灰蛞蝓(Deroceras reticulatum)和两棵莴苣植物建立一项木桶试验，其中每次用铁处理三个桶，用对照物处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入2g毒饵。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵磷酸铁/EDDSDSA14/79/1-作为磷酸铁的2800ppm铁+10800ppmEDDS,6.0％糖，余量为小麦粉对照R4/118/1-用面粉和糖(96∶4)制成对照毒饵^*，^*除非另有说明，否则对照物由面粉和糖制成，其中含有94份面粉和6份糖。

在评估期间，木桶保存在温室中。在处理后的第3天和第7天采集数据，所得结果显示于表1和表2中。表1、3 DAT^*时观察的死亡率

处理REP1REP2REP3磷酸铁/EDDS7/20，毒饵迅速被吃掉，摄食非常少量食物6/20,1只失踪，毒饵迅速被吃掉；摄食非常少量食物7/20，毒饵迅速被吃掉；未摄食植物对照0/20，摄食少量植物1/20，摄食少量植物na^*DAT=处理后的天数表2、7 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2REP3总杀死％磷酸铁/EDDS9/13，不再摄食植物8/14，不再摄食植物9/13，不再摄食植物46/60,76.7％对照2/20，摄食大量植物1/19，摄食大量植物na4/40,10.0％实施例2

用每桶15只庭园灰蛞蝓和两棵莴苣植物建立一项木桶试验，其中每个毒饵处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入2g毒饵。用EDDS和氯化铁合成EDDS铁。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵EDDS铁2000R4/122/1-作为EDDS铁的2000ppm铁，6.0％糖，余量为小麦粉EDDS铁2400R4/122/2-作为EDDS铁的2400ppm铁，6.0％糖，余量为小麦粉EDDS铁2800R4/122/3-作为EDDS铁的2800ppm铁，6.0％糖，余量为小麦粉对照R4/118/1-用面粉和糖制成对照毒饵

在评估期间，木桶保存在温室中。在处理后的第3天和第6天采集数据，所得结果显示于表3和表4中。表3、4 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP2EDDS铁20003/15，摄食少量植物3/15，摄食少量植物EDDS铁24004/15，未摄食植物11/15，未摄食植物EDDS铁28009/15，未摄食植物6/15，摄食少量植物对照0/150/15表4、6 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％EDDS铁20004/120/1210/30,33.3％EDDS铁24001/112/418/30,60.0％EDDS铁28000/64/919/30,63.3％对照0/150/150/30,0％实施例3

用每桶15只庭园灰蛞蝓和两棵莴苣植物建立一项木桶试验，其中每个毒饵处理两个桶，但硝酸铝处理只用于具有22只鼻涕虫的一个平行测定。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入2g毒饵。实验过程中，木桶放在外面。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵10AR4/123/1-作为醋酸铜的2800ppm铜和10800ppmEDDS,6.0％糖，余量为小麦粉10BR4/123/2-作为氯化铜的2800ppm铜和10800ppmEDDS,6.0％糖，余量为小麦粉10CR4/123/3-用作为氧化铜的2800ppm铜和10800ppmEDDS,6.0％糖，余量为小麦粉10DR4/123/6-作为氯化锌的2800ppm锌和10800ppmEDDS,6.0％糖，余量为小麦粉10ER4/122/3-用作为磷酸铁的2800ppm铁和10800ppmEDDS10FR4/118/1-用面粉和糖制成对照毒饵10GR4/123/5-用作为硝酸铝的2800ppm铝和10800ppmEDDS,6.0％糖，余量为小麦粉

在评估期间，木桶保存在温室中。在处理后的第3天和第7天采集数据，所得结果显示于表5和表6中。表5、3 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP210A0/15，未摄食植物2/15，未摄食植物10B0/15，两棵植物均被吃2/15，一棵植物被吃10C1/15，摄食中等量植物1/15，摄食少量植物10D2/15，摄食少量植物2/15，摄食少量植物10E7/15，未摄食植物5/17，未摄食植物10F1/150/1510G0/22，两棵植物均被吃na表6、7 DAT时观察的死亡率    处理    REP1    REP2    总杀死％    10A3/153/11^*8/28,28.6％    10B0/151/133/30,10.0％    10C0/142/144/30,13.3％    10D3/131/138/30,28.6％    10E7/810/1229/32,90.1％    10F0/141/152/30,6.6％    10G4/22na4/22,18.2％*=2只鼻涕虫失踪

实施例4

建立一项木桶试验，其中进行两个平行测定，每次处理10只黑阿勇蛞蝓(Arion ater)。每个桶中放置两棵莴苣植物。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入5g毒饵。实验期间，木桶放在室外。将EDDS钠和含铁糖溶于水，加入面粉并用K₂C0₃调节pH，从而制得毒饵。实验的持续过程中，木桶放在外面。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

8AR4/139/1,0.28％铁(含铁糖)+1.08％NaEDDS,pH7.338BR4/139/2,0.28％铁(含铁糖)+1.08％NaEDDS,pH8.458CR4/139/3,0.28％铁(含铁糖)+1.08％NaEDDS,pH9.538DR4/139/4,0.28％铁(含铁糖)+1.08％NaEDDS,pH10.58ER4/139/5,0.28％铁(含铁糖)+1.08％NaEDDS，未预混合8FDSA/120/1，用面粉和糖制成对照毒饵

在评估期间，木桶放在室外。在处理后的第4天和第6天采集数据，所得结果显示于表7和表8中。表7、4 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP28A0/10，毒饵吃掉55％，未摄食植物0/10，毒饵吃掉100％，未摄食植物8B0/10，毒饵吃掉100％，未摄食植物0/10，毒饵吃掉100％，摄食中等量植物8C0/10，毒饵吃掉70％，摄食大量植物0/10，毒饵吃掉100％，摄食大量植物8D0/10，毒饵吃掉5.0％，摄食大量植物0/10，毒饵吃掉5％，摄食中等量植物8E1/10，毒饵吃掉100％，摄食少量植物0/10，毒饵吃掉100％，摄食中等量植物8F0/100/10表8、6 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％8A7/105/913/20,65.0％8B8/105/1013/20,65.0％8C8/105/1013/20,65.0％8D0/101/101/20,5.0％8E6/96/1013/20,65.0％8F0/100/100/20,0.0％实施例5

建立一项木桶试验，其中进行两个平行测定，每次处理10只黑阿勇蛞蝓。每个桶中放置一棵大卷心菜植物。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入5g毒饵。实验期间木桶放在室外。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

7AR4/138/4，作为磷酸铁的2800ppm铁+1.08％EDDS7BR4/140/1，作为磷酸铁的2800ppm铁+2.5％EDDS7CR4/138/1，作为磷酸铁的4000ppm铁+2.5％EDDS7DR4/138/2，作为磷酸铁的4500ppm铁+2.5％EDDS7EDSA/120/1，用面粉和糖制成对照毒饵

在评估期间，木桶放在室外。在处理后的第4天和第7天采集数据，所得结果显示于表9和表10中。表9、4 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP27A2/10，未摄食植物，大多数毒饵被吃掉3/10，摄食中等量植物，剩余大量毒饵7B5/10，未摄食植物，大多数毒饵被吃掉5/10，摄食少量植物，大多数毒饵被吃掉7C5/10，摄食大量植物，剩余大量毒饵8/10，摄食大量植物，剩余一些毒饵7D7/10，未摄食植物，剩余大量毒饵6/10，未摄食植物，剩余大量毒饵7E0/100/10表10、7 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％7A7/84/716/20,80.0％7B3/53/516/20,80.0％7C3/51/217/20,85.0％7D3/31/417/20,85.0％7E0/100/100/20,0.0％实施例6

用每桶15只庭园灰蛞蝓和一棵莴苣植物建立一项标准木桶试验，其中每次处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入2g毒饵。实验期间，木桶放在室外。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵6AR4/155/1，作为磷酸铁的0.28％铁和1.50％EDDS6BR4/155/2，作为磷酸铁的0.28％铁和1.75％EDDS6CR4/153/1，作为磷酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS6DR4/155/3，作为磷酸铁的0.28％铁和2.75％EDDS6ER4/140/2，作为磷酸铁的0.28％铁和3.00％EDDS6FR4/120/1，用面粉和糖制成对照毒饵

在处理后的第4天和第7天采集数据，所得结果显示于表11和表12中。表11、4 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP26A2/151/156B4/154/156C2/150/156D2/151/156E1/151/156F0/150/16表12、7 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％6A4/134/1411/30,36.7％6B2/119/1119/30,63.3％6C5/137/1514/30,46.7％6D7/133/1413/30,43.3％6E5/143/1410/20,33.3％6F1/150/161/31,3.3％实施例7

用每桶15只庭园灰蛞蝓和一棵莴苣植物建立一项标准木桶试验，其中每次处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入2g毒饵。实验期间，木桶放在室外。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵5AR4/154/1，磷酸铁/EDDS，存在于骨粉∶面粉50∶50的毒饵中5BR4/154/2，磷酸铁/EDDS，存在于骨粉∶面粉90∶10的毒饵中5CR4/143/3，用面粉和糖制成对照毒饵

在处理后的第4天和第7天采集数据，所得结果显示于表13和表14中。表13、4 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP25A6/153/155B2/154/14^**5C0/150/15**=1只鼻涕虫失踪表14、7 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％5A7/98/1224/30,80.0％5B5/137/1018/29,62.1％5C0/150/150/30,0.0％

实施例8

用每桶15只庭园灰蛞蝓和一棵莴苣植物建立一项标准木桶试验，其中每次处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入29毒饵。实验期间，木桶放在室外。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵4AR4/159/1，作为含铁糖的0.28％铁和2.25％EDDS4BR4/159/2，作为葡糖酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS4CR4/159/3，磷酸铁+2.25％EDDS+0.5％葡糖酸钠4DR4/159/4，磷酸铁+2.25％EDDS+0.5％柠檬酸钙4ER4/153/1，磷酸铁+2.25％EDDS4FR4/143/3，用面粉和糖制成对照毒饵

在处理后的第4天和第7天采集数据，所得结果显示于表15和表16中。表15、4 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP24A8/155/154B2/152/154C1/151/154D0/151/154E5/152/154F0/150/15表16、7 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％4A4/75/1023/30,76.7％4B5/139/1318/30,60.0％4C1/143/13,1只失踪6/29,20.7％4D6/154/1411/30,36.7％4E3/10na7/15,46.7％4F0/150/150/30,0.0％实施例9

用每桶10只黑阿勇蛞蝓和一棵莴苣植物建立一项标准木桶试验，其中每次处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入6g毒饵和两棵卷心菜植物。实验期间，木桶放在室外。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵3AR4/161/1，作为含铁糖的0.28％铁和2.25％EDDS3BR4/161/6，作为硫酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS3CR4/161/4，用乳酸铁制成的作为EDDS铁的0.28％铁3DR4/159/4，用硫酸铁制成的作为EDDS铁的0.28％铁3ER4/143/3，用面粉和糖制成对照毒饵

在处理后的第6天采集数据，所得结果显示于表17中。表17、6 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP2总杀死％3A10/10，未摄食植物7/10，摄食非常少量植物17/20,85.0％3B9/10，摄食非常少量植物6/10，摄食少量植物15/20,75.0％3C3/10，未摄食植物3/10，未摄食植物6/20,30.0％3D4/10，未摄食植物1/10，未摄食植物5/20,25.0％3E0/100/100/20,0.0％实施例10

用每桶15只庭园灰蛞蝓和两棵莴苣植物建立一项标准木桶试验，其中每次处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入2g毒饵。实验期间，木桶放在室外。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵2AR4/164/2，作为硫酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS,pH3.582BR4/167/1,作为硫酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS,pH5.542CR4/167/2，作为硫酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS,pH7.342DR4/167/3，作为硫酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS,pH9.302ER4/167/4，作为硫酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS,pH9.782FR4/162/2，作为磷酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS2GR4/162/1，用面粉和糖制成对照毒饵

在处理后的第4天和第7天采集数据，所得结果显示于表18和表19中。表18、4 DAT时观察的死亡率

处理REP1REP22A6/16，未摄食植物6/16，未摄食植物2B5/15，未摄食植物7/15，未摄食植物2C5/15，未摄食植物6/15，未摄食植物2D5/15，未摄食植物4/15，未摄食植物2E2/15，未摄食植物1/15，未摄食植物2F1/15，未摄食植物2/15，摄食少量植物2G0/150/15表19、7 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％2A6/108/1026/30，86.7％2B7/107/826/30,86.7％2C8/107/926/30,86.7％2D4/107/1120/30,66.7％2E5/137/1415/30,50.0％2F7/148/1318/30,60.0％2G0/150/150/30,0.0％实施例11

用每桶15只庭园灰蛞蝓和一棵莴苣及一棵卷心菜植物建立一项标准木桶试验，其中每次处理两个桶。在桶底覆盖堆肥土壤。从野外搜集鼻涕虫并将它们加入桶中，同时加入2g毒饵。实验期间，木桶放在室外。在使用前的那天制备下表中记录的各型毒饵。

代号毒饵1AR4/170/1，作为硫酸亚铁的0.28％铁和2.25％EDDS1BR4/170/2，作为硫酸亚铁的0.15％铁和2.25％EDDS1CR4/164/2，作为硫酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS1DR4/170/3，作为含铁糖(10％)的0.28％铁和2.5％EDDS1ER4/161/1，作为含铁糖(20％)的0.28％铁和2.5％EDDS1FR4/1 62/2，作为磷酸铁的0.28％铁和2.25％EDDS1GR4/162/1，用面粉和糖制成对照毒饵

在处理后的第4天和第7天采集数据，所得结果显示于表20和表21中。表20、4 DAT时观察的死亡率和摄食植物情况

处理REP1REP21A3/15，未摄食植物3/15，未摄食植物1B2/15，未摄食植物3/15，未摄食植物1C3/15，未摄食植物1/15，未摄食植物1D3/15，未摄食植物5/15，未摄食植物1E5/15，未摄食植物4/15，未摄食植物1F2/15，未摄食植物1/15，未摄食植物1G0/150/15表21、7 DAT时观察的死亡率处理REP1REP2总杀死％1A9/127/1222/30,73.3％1B9/137/1221/30,70.0％1C10/1211/1425/30,83.3％1D11/128/1027/30,90.0％1E8/106/1123/30,76.7％1F6/135/1414/30,46.7％1G0/151/151/30,3.3％

经过对本发明优选实施方案的描述，对于本领域普通技术人员来说显而易见的是，体现这些优选实施方案概念的其他实施方案也可以使用。因此，相信这些实施方案不应被限制在所公开的实施方案中，而是仅受到所附权利要求书的精神和范围的限制。本文中提及的所有出版物和参考文献均明确地整个结合在此作为参考。除非另有说明，所有重量百分数均是组合物总重的百分数。