丙烯酰取代的偏端霉素衍生物,其制备方法,及其作为抗肿瘤和抗病毒剂的应用

摘要

本发明提供了式(Ⅰ)丙烯酰取代的偏端霉素衍生物及其可药用盐,其中n为2,3,或4;R1和R2各自独立地选自:氢,卤素,和C1－C4烷基;R3为氢或卤素;B选自:(1),(2),(3),(4),(5),(6)和(7);其中R4,R5,R6,R7,和R8各自独立地为氢或C1－C4烷基,其条件是R4、R5和R6中至少一个为C1－C4烷基。这些化合物可用作抗肿瘤和抗病毒剂。

说明书

本发明涉及新的烷基化抗肿瘤和抗病毒剂，它们与已知的抗生素偏端霉素A相关：上述偏端霉素A属于吡咯脒抗生素类。据报道，偏端霉素A能够可逆和选择性地与DNA-AT序列相互作用，干扰其复制和转录[自然杂志(Nature),203,1064(1964)；FEBS通讯(FEBS Letters),7(1970)90；核酸研究及分子生物学进展(Prog.Nucleic Acids Res.Mol.Biol.),15,285(1975)]。

DE-A-1795539中描述了一种制备偏端霉素衍生物的方法，其中偏端霉素的甲酰基被氢或被C₁-C₄有机脂肪酸或环戊基丙酸的酸残基置换。EP-B-246,868中也记载了一些偏端霉素类似物，其中偏端霉素的甲酰基基团被载有烷基化基团的芳族、脂环族或杂环族基团取代。

国际专利申请WO 90/11277中公开了一大类丙烯酰取代的偏端霉素衍生物，其中丙烯酰部分通过单键或芳族或杂环二甲酰胺基团与吡咯环连接。

现已发现一类新的定义如下的偏端霉素衍生物，其中偏端霉素的甲酰基被丙烯酰类基团取代，而脒基则被不同含氮端基取代。这些化合物显示出有价值的生物特性。

因此，本发明涉及如下文所述的新的式(Ⅰ)偏端霉素衍生物，其制备方法，含有它们的药物组合物，以及它们在治疗方面，尤其是作为抗肿瘤剂和抗病毒剂的应用。

因而，本发明的目的是提供下式丙烯酰取代的偏端霉素衍生物或其可药用盐：其中：n为2,3或4；R₁和R₂各自独立地选自：氢，卤素，和C₁-C₄烷基；R₃为氢或卤素；B选自：-C≡N，和其中R₄,R₅,R₆,R₇，和R₈各自独立地为氢或C₁-C₄烷基，其条件是R₄、R₅和R₆中至少一个为C₁-C₄烷基。

在本发明范围之内，还包括式(Ⅰ)的所有可能异构体(包括分离的及其混合物形式)，以及式(Ⅰ)化合物的代谢物和其可药用生物前体(另外也可称作前药)。

烷基可以为支链或直链的。C₁-C₄烷基优选甲基或乙基。卤原子优选氯，溴或氟。优选R₄、R₅、R₆、R₇、和R₈各自独立地为氢，甲基，或乙基，其条件是R₄、R₅和R₆中至少一个为甲基或乙基。

式(Ⅰ)化合物的可药用盐是它们与可药用的无机或有机酸所成的盐。无机酸的实例包括盐酸，氢溴酸，硫酸和硝酸；有机酸的实例包括乙酸，丙酸，琥珀酸，丙二酸，柠檬酸，酒石酸，甲磺酸和对-甲苯磺酸。

一类优选的本发明化合物为式(Ⅰ)化合物或其可药用盐，其中：n为3或4；R₁和R₂都为氢；R₃为氯或溴；B选自：-C≡N和其中R₄,R₅,R₆,R₇和R₈各自独立地为氢或甲基，其条件是R₄、R₅和R₆中至少一个为甲基。

本发明具体化合物，尤其是其盐形式(优选与盐酸所成的盐)的实例如下：(1)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒腈(propioncyanamidine)；(2)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒腈；(3)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒腈；(4)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基-丙眯；(5)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基-丙脒；(6)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基丙脒；(7)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二甲基-丙脒；(8)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二甲基-丙脒；(9)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二甲基-丙脒；(10)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒肟；(11)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-丙脒肟；(12)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒肟；(13)2-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)乙基胍；(14)2-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)乙基胍；(15)2-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)乙基胍；(16)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙腈；(17)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙腈；(18)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙腈；(19)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-丙酰胺；(20)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙酰胺；(21)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙酰胺；(22)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基-丙酰胺；(23)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N-二甲基丙脒；(24)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N-二甲基-丙脒；(25)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N-二甲基-丙脒；(26)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基-丙脒；(27)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲-基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二甲基-丙脒；(28)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒肟；(29)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-丙脒腈；和(30)3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙酰胺。

本发明式(Ⅰ)化合物及其盐可按照下列方法中的任一种制备，所述方法包括：(a)使式Ⅱ化合物：其中n为2,3或4；m为0或1；B选自：-C≡N，和其中R₄、R₅、R₆、R₇和R₈各自独立地为氢或C₁-C₄烷基，其条件是R₄、R₅和R₆中至少一个为C₁-C₄烷基；与式(Ⅲ)化合物反应：其中：R₁和R₂各自独立地选自：氢，卤素，和C₁-C₄烷基；R₃为氢或卤素；X为羟基或离去基团；且m同上定义；或：(b)当B为-C≡N时，使式(Ⅳ)化合物：其中n,R₁,R₂和R₃的定义同上；与琥珀酸酐反应，并且，如果需要的话，转化式(Ⅰ)化合物为其可药用盐。

在式(Ⅲ)化合物中，X为羟基或为选自例如氯、2,4,5-三氯苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、琥珀酰亚氨基-N-氧基、咪唑基等的离去基团。

方法(a)中，式(Ⅱ)化合物与式(Ⅲ)化合物间的反应可按照已知方法(例如EP-B-246,868中所述方法)进行。

式(Ⅱ)化合物与其中X为羟基的式(Ⅲ)化合物之间的反应优选在有有机或无机碱以及缩合剂存在下以1∶1-1∶2(Ⅱ)∶(Ⅲ)摩尔比在有机溶剂(例如二甲亚砜，六甲基磷酰三胺，二甲基乙酰胺，二甲基甲酰胺，乙醇，苯或吡啶)中进行，其中所述的有机或无机碱例如为三乙胺，二异丙基乙胺，或钠或钾的碳酸盐或碳酸氢盐；所述的缩合剂为例如N-乙基-N′-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺，N,N′-二环己基-碳二亚胺，或1-羟基苯并三唑水合物。反应温度可以在大约-10℃至大约100℃之间变化，且反应时间为大约1-大约24小时。

式(Ⅱ)与其中X为如上定义的离去基团的式(Ⅲ)化合物之间的反应可任选地在有机碱(如N,N＇-二异丙基乙胺、三乙胺)或无机碱(如碳酸氢钠或碳酸氢钾)存在下，以大约1∶1-约1∶2的式(Ⅱ)∶(Ⅲ)摩尔比在有机溶剂(如二甲基甲酰胺，二噁烷，吡啶，苯，四氢呋喃)或与水的混合物中进行，反应温度为大约0℃-大约100℃，反应时间在大约2小时-大约48小时之间变化。

式(Ⅰ)化合物任选转化为其可药用盐的反应可采用常规已知方法进行。

式(Ⅱ)化合物为已知化合物，或者可按已知方法制得(例如，参见，四面体通讯(Tetrahedron Letters),31,1299(1990)，抗癌药物设计(Anticancer Drug Design)9,511(1994))，例如，按下述方法制备：(ⅰ)在碱性或酸性介质中，将下式化合物水解脱甲酰化：或者(ⅱ)按照已知方法还原式(Ⅵ)化合物中的硝基：其中在式(Ⅴ)和(Ⅵ)化合物中：n为2,3或4；m为0或1；B选自：

  -C≡N，和其中R₄,R₅,R₆,R₇，和R₈各自独立地为氢或C₁-C₄烷基，但条件是R₄,R₅和R₆中至少一个为C₁-C₄烷基。

其中B不为的式(Ⅴ)化合物本身又可以式(Ⅶ)偏端霉素类似物为原料与下述反应物反应制备：(ⅰ)与H₂N-CN反应，这样得到其中B为：的式(Ⅰ)化合物；(ⅱ)与H₂N-OH反应，这样得到其中B为：的式(Ⅰ)化合物；(ⅲ)与H₂N-NH₂反应，这样得到其中B为：的式(Ⅰ)化合物；(ⅳ)与HNR₄R₅反应，这样得到其中B为：的式(Ⅰ)化合物，然后任选地与H₂NR₆反应，从而得到其中B为下式基团的式(Ⅰ)化合物：其中R₄,R₅，和R₆各自独立地为氢或C₁-C₄烷基，其条件是R₄、R₅、和R₆中至少一个为C₁-C₄烷基；(ⅴ)与琥珀酐反应，这样得到其中B为-C≡N的式(Ⅰ)化合物；(ⅵ)在碱性介质中与水反应，从而得到其中B为-CO-NR₇R₈的式(Ⅰ)化合物，其中R₇和R₈均为氢；(ⅶ)与HNR₇R₈反应，这样得到其中B为：的式(Ⅰ)化合物，然后在碱性介质中与水反应，从而得到其中B为-CONR₇R₈的式(Ⅰ)化合物，其中R₇和R₈各自独立地为氢或C₁-C₄烷基，其条件是R₇和R₈中至少一个为C₁-C₄烷基。

式(Ⅶ)化合物与(ⅰ)、(ⅱ)、(ⅲ)、(ⅳ)、或(ⅶ)部分所述的反应物之间的反应可按照已知方法进行，例如采用下列文献中所报道的方法：US-4,766,142，化学评论(Chem.Revs.)1961,155；药物化学杂志(J.Med.Chem.)1984,27,849-857；化学评论1970,151；和S.Patai编辑，JohnWiley & Sons,N.Y.(1975)出版的“脒和亚胺酸酯化学”(The Chemistry ofAmidines and Imidates)一书。

式(Ⅶ)化合物与琥珀酐(参见上面(ⅴ)部分)的反应优选在有有机或无机碱(如三乙胺，二异丙基乙胺，碳酸钠或碳酸钾等)存在下，以1∶1-1∶3(Ⅶ)：琥珀酐摩尔比在有机溶剂(如二甲亚砜，二甲基甲酰胺)中进行。反应温度可以在大约25℃-大约100℃之间变化，且反应时间为大约1小时至大约12小时。

在碱性介质中与水的反应(参见上面(ⅵ)和(ⅶ)部分)可按照碱水解反应中通常采用的已知方法进行，例如，通过在大约50℃-大约100℃温度下，用溶在水中或溶在水与有机溶剂(如二噁烷，四氢呋喃，或丙酮)混合溶剂中的过量氢氧化钠或氢氧化钾处理底物大约2小时-大约48小时进行。

式(Ⅲ)化合物也为已知化合物，或者可按照有机化学领域中公知的反应以已知化合物为原料制备，例如，参见，英国化学会会志(J.C.S.),1947-1032和美国化学会会志(JACS)62,3495(1940)。

式(Ⅴ)化合物可按下所述制得：(ⅰ)当B不为：时，使式(Ⅷ)化合物：其中n,m和X的定义同上，与式(Ⅸ)化合物反应：其中B＇选自：-C≡N，和(ⅱ)当B不为时，使下式化合物：与上面(ⅰ),(ⅱ),(ⅲ)或(ⅳ)部分所述的合适胺化合物进行Pinner反应。

式(Ⅶ)、(Ⅷ)、(Ⅸ)和(Ⅹ)化合物均为已知化合物，或者它们可通过已知方法制得(例如，参见，四面体(Tetrahedron).34.2389-2391,1978；有机化学杂志46,3492-3497,1981)。

方法(b)的反应优选在有有机或无机碱(如三乙胺，二异丙基乙胺，碳酸钠或碳酸钾等)存在下，以1∶1-1∶3(Ⅳ)∶琥珀酸酐摩尔比在有机溶剂(如二甲亚砜，二甲基甲酰胺)中进行。反应温度可以在大约25℃-大约100℃之间变化，且反应时间为大约1小时至大约12小时。

式(Ⅳ)化合物可以按已知方法制得，例如，WO 90/11277中所述的方法。

式(Ⅰ)化合物的成盐反应，以及由盐制备游离化合物的反应都可采用已知的标准方法进行。

随后，还可采用熟知的方法，例如分级结晶或层析法，将式(Ⅰ)异构体的混合物分离为单一异构体。

式(Ⅰ)化合物可采用诸如硅胶或氧化铝柱层析、和/或用有机溶剂(如低级脂肪醇，像甲醇，乙醇或异丙醇，或二甲基甲酰胺)重结晶之类的常规技术纯化。药理学

本发明式(Ⅰ)化合物可用作抗肿瘤和抗病毒剂。具体讲，它们对肿瘤细胞显示出细胞抑制特性，因而它们可用于抑制各种哺乳动物(包括人)的肿瘤的生长，例如癌，如乳腺癌，肺癌，膀胱癌，结肠癌，卵巢癌和子宫内膜瘤。本发明化合物所适用的其它肿瘤包括，例如，肉瘤，如软组织肉瘤和骨肉瘤，以及血癌如白血病。

采用L₁₂₁₀鼠白血病细胞研究细胞毒性，以此评价体外抗肿瘤活性。细胞由体内肿瘤得到并在细胞培养基中培养。使用直至第十代的细胞。处理48小时后，通过计数存活细胞测定细胞毒性。

比较对照组与处理培养中的细胞生长百分数，根据剂量-效应曲线推算IC₅₀值(与对照组相比，抑制50％细胞生长的浓度)。

采用下述方法，体内测试本发明化合物对L₁₂₁₀鼠白血病和鼠M5076网状细胞肉瘤的作用，结果显示出非常优良的抗肿瘤活性。

通过静脉连续体内移植维持L₁₂₁₀鼠白血病。试验中，将10⁵个细胞腹膜内注射到得自意大利Charles River的CD2F1雌性小鼠体内。试验开始时，选用8-10周龄动物。注入肿瘤细胞后的第一天静脉施用本发明化合物。

通过肌内连续移植在体内维持M5076网状细胞肉瘤。为进行试验，将5×10⁵个细胞肌内注射到得自意大利Charles River的C57816雌性小鼠体内。试验开始时，动物为8-10周龄。肿瘤注射后第3、7和11天静脉注射本发明化合物。

计算小鼠的存活时间和肿瘤生长情况，并以T/C％和T.I.％表示活性。T.I.=相对于对照组的肿瘤生长抑制百分数Tox：死于中毒的小鼠数量。

在观察到对照组和/或受试组小鼠体重显著下降和/或脾和/或肝明显变小之前有小鼠死亡时，进行Tox测定。

本发明化合物还显示出干扰病原性病毒复制活性的显著效力，从而保护组织免受病毒感染。例如，它们对下述病毒显示出抵抗活性：DNA病毒，例如疱疹病毒，像单纯疱疹病毒和带状疱疹病毒，痘病毒，RNA病毒如鼻病毒和腺病毒，以及逆转录病毒如肉瘤病毒，像鼠肉瘤病毒和白血病病毒，像Friend白血病病毒。

例如，抗疱疹，苛萨奇及呼吸道合胞体病毒的效力如下所述在液体介质中测试。将200-1.5mcg/ml化合物的连续两倍稀释液一式两份分配到96孔组织培养用微量滴定板内，每孔0.1ml。立刻向0.1ml/孔内加入用大约5×10^-3TCID₅₀病毒/细胞感染的细胞悬浮液(2×10⁵细胞/ml)。

在5％CO₂,37℃下培养3-5天后，通过显微镜观察评价细胞培养物，并测定最小抑制浓度(MIC),MIC是与感染的对照组相比降低细胞病变效应的最小浓度。

本发明化合物可通过常规途径施予包括人在内的哺乳动物，例如经非肠道途径，如静脉注射或输注，肌内，皮下，局部或经口施用。施用剂量取决于患者的年龄，体重和病情以及给药途径。例如，对于成人来讲，合适的给药剂量可以为大约0.1到大约150-200mg每剂，每天1-4次。

本发明的进一步目的是提供药物组合物，其中包括式(Ⅰ)化合物作为活性成分，以及一种或多种可药用载体和/或稀释剂。

本发明的药物组合物通常用下述常规方法制备，并以适当的药剂形式施用。例如，供静脉注射或输注用的溶液可含有，例如，作为载体的无菌水，或者它们优选为无菌等渗盐水溶液形式。

供肌内注射用的悬浮液或溶液可含有活性化合物和可药用载体，例如无菌水，橄榄油，油酸乙酯，二元醇(例如丙二醇)，如果需要的话，还含有适当量的盐酸利多卡因。

在用于表皮治疗的局部施用剂型如霜剂，洗剂或糊剂中，活性成分可以与常规油性或乳化性赋形剂混合。

固体口服剂型如片剂和胶囊剂中可包含活性化合物和稀释剂，如乳糖，葡萄糖，蔗糖，纤维素，玉米淀粉和马铃薯淀粉；润滑剂，如二氧化硅，滑石，硬脂酸，硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇；粘合剂，如淀粉，阿拉伯胶，明胶，甲基纤维素，羧甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂，如淀粉，藻酸，藻酸盐，淀粉甘醇酸钠；泡腾混合物；染料；甜味剂，湿润剂，例如卵磷脂，吐温，十二烷基硫酸盐；以及药物制剂中广泛使用的无毒非药理活性物质。所述药物制剂可采用公知方法制备，例如通过混合，成粒，压片，包糖衣或包膜方法制备。

本发明的再一目的是提供了在治疗人或动物体的方法中使用的式(Ⅰ)化合物。

此外，本发明还对需要如此治疗的患者提供了一种治疗肿瘤和病毒感染的方法，该方法包括向所述患者施用本发明组合物。

本发明的又一目的是提供了一种联合治疗包括人在内的哺乳动物癌症患者的癌症或缓解其症状的方法，所述方法包括在足够接近的时间内对患者施用能产生有效治疗作用的量的式(Ⅰ)化合物或其可药用盐以及其它抗肿瘤剂。

本发明还提供了可同时、分开或先后用于癌症治疗的联合制剂，其中包括式(Ⅰ)化合物或其可药用盐和其它抗肿瘤剂。

术语“抗肿瘤剂”不仅是指单一抗肿瘤药物，而且还指“合剂”(“cocktails”)，即临床实践中这类药的混合物。可与式(Ⅰ)化合物配制，或者，可以联合疗法施用的抗肿瘤剂的实例包括阿霉素，柔红霉素，表柔霉素，依达比星，依托泊甙，氟尿嘧啶，苯丙氨酸氮芥，环磷酰胺，4-去甲氧基柔红霉素，搏来霉素，长春碱，和丝裂霉素，或它们的混合物。

下面所给出的实施例用于更好地说明本发明，但它们并不限制本发明范围。实施例13-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈；步骤Ⅰ中间体3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈盐酸盐

向324mg氨基氰的20ml DMF溶液中加入186mg氢化钠。室温下搅拌混合物30分钟，然后加到1g偏端霉素A在10ml DMF中的溶液内。室温下搅拌此溶液两小时，然后加乙酸直至pH=7。减压除去溶剂，粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：9/1)，得到900mg 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-甲酰氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈。随后将所得产物溶于50ml甲醇中，加入5ml 2N盐酸。室温下搅拌反应物2天，然后真空蒸发溶剂，并将固体残渣悬浮在200ml乙酸乙酯内，过滤后得到600mg上述中间体。FAB-MS:m/z 479,(65,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.11(s,1H),9.97(s,1H),9.80-9.60(b.s.,2H),8.50-8.00(b.s.,3H),7.40(t,J=5.8Hz,1H),7.25(d,J=1.7Hz,1H),7.19(d,J=1.7Hz,1H),7.08(d,J=1.7Hz,1H),7.06(d,J=1.7Hz,1H),6.94(d,J=1.7Hz,1H),6.88(d,J=1.7Hz,1H),3.81(s,3H),3.79(s,3H),3.75(s,3H),3.41(m,2H),2.70(m,2H).步骤Ⅱ中间体1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯

1小时内，在α-溴丙烯酸(1.7g)的无水CH₃CN(5ml)溶液内加入N,N′-二环己基碳二亚胺(1.2g)的20ml CH₃CN溶液，并在25℃下搅拌所得悬浮液20分钟。滤出白色沉淀，并将所得溶液加到1-甲基-4-氨基吡咯-2-羧酸盐酸盐(1g)和1.4g NaHCO₃在20ml H₂O中的溶液内。将所得溶液在25℃搅拌1小时，然后加2N HCl至pH=3。减压除去溶剂，并将所得粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：95/5)，得到1.2g 1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-羧酸，继而再溶于苯(40ml)，加入10ml SOCl₂。回流溶液1小时，然后真空蒸发至干，得到1.4g中间体。

通过类似方法，采用适当原料可制得下列产物：1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯。步骤Ⅲ标题化合物

向206mg步骤Ⅰ所得中间体、100mg NaHCO₃在40ml水和20ml二噁烷中的溶液内加入175mg步骤Ⅱ所得中间体的40ml二噁烷溶液。将所形成的溶液在25℃搅拌2小时，然后真空蒸发溶剂，并将粗制残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：10/1)，得到150mg标题化合物，系黄色固体。FAB-MS: m/z 732,(42,[M-H]^-)PMR(DMSO-d₆ 45℃)δ:10.27(s,1H),9.95(s,1H),9.92(s,1H),9.88(s,1H),8.3(b.s.,2H),8.1(b.s.,1H),6.8-7.3(m,8H),6.67(d,J=2.9Hz,1H),6.22(d,J=2.9Hz,1H),3.85(s,6H),3.84(s,3H),3.79(s,3H),3.45(b.s.,2H),2.6(b.s.,2H).

通过类似方法，采用适当原料可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈。实施例23-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐。步骤Ⅰ中间体3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基-丙脒二盐酸盐

将2g偏端霉素A在50ml DMF中的溶液用0.38ml 80％甲胺盐酸盐处理。8小时后，再加入0.25当量80％甲胺盐酸盐。蒸发溶液至干，将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到1.5g 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-甲酰氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐。随后将此产物溶于40ml甲醇，加入5ml 2N盐酸。在室温下搅拌反应2天，然后真空蒸发溶剂，并将固体残留物悬浮在200ml乙酸乙酯中，过滤后得到1.4g中间体。FAB-MS:m/z 468,(40,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.20(s,3H),10.18(s,1H),9.65(m,1H),9.20(s,1H),8.63(s,1H),8.25(t,J=5.8Hz,1H),7.25(d,J=1.7Hz,1H),7.19(d,J=1.7Hz,1H),7.11(d,J=1.7Hz,1H)7.08(d,J=1.7Hz,1H),7.05(d,J=1.7Hz,1H),6.91(d,J=1.7Hz,1H),3.90(s,3H),3.85(s,3H),3.79(s,3H),3.60-3.40(m,2H),2.80(d,J=6Hz,3H),2.61(m,2H).

通过类似方法，采用适当原料可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N-二甲基-丙脒二盐酸盐。步骤Ⅱ标题化合物

将170mg 1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯(如实施例1步骤Ⅱ所述制得)的30ml二噁烷溶液加到步骤Ⅰ所得中间体(162mg)和75mg NaHCO₃在25ml H₂O中的溶液内。室温搅拌溶液2小时，加2N HCl酸化至pH=5，然后真空蒸发。将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到120mg黄色固体标题化合物。FAB-MS:m/z 722,(18,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.34(s,1H),9.98(s,1H),9.95(s,1H),9.92(s,1H),9.5(b.s.,1H),9.1(b.s.,1H),8.5(b.s.,1H),8.22(t,J=5.9Hz,1H),6.9-7.3(m,8H),6.68(d,J=2.8Hz,1H),6.22(d,J=2.8Hz,1H),3.85(s,6H),3.84(s,3H),3.80(s,3H),3.48(b.s.,2H),2.79(s,3H),2.62(b.s.,2H).

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N-二甲基丙眯盐酸盐；FAB-MS:m/z 736,(100,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.37(s,1H),9.99(s,1H),9.95(s,1H),9.94(s,1H),9.0(b.s.,1H),8.3(b.s.,1H),8.31(t,J=5.8Hz,1H),6.9-7.3(m,8H),6.70(d,J=2.9Hz,1H),6.22(d,J=2.9Hz,1H),3.84(s,6H),3.83(s,3H),3.80(s,3H),3.46(m,2H),3.22(b.s.,3H),3.03(b.s.,3H),2.77(t,J=6.5Hz,2H)；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N-二甲基丙脒盐酸盐；和3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N-二甲基丙脒盐酸盐。实施例33-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N′-二甲基丙脒盐酸盐步骤Ⅰ中间体3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N′-二甲基-丙脒二盐酸盐；

将1.5g偏端霉素A在40ml DMF中的溶液在80℃下加热，并用4ml80％甲胺盐酸盐处理。4小时后，再加入5当量(4ml)80％甲胺盐酸盐。蒸发溶液至干，将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到1.2g 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-甲酰氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N＇-二甲基丙脒盐酸盐。随后将此产物溶于40ml甲醇，加入5ml 2N盐酸。在室温下搅拌反应2天，然后真空蒸发溶剂，并将固体残留物悬浮在200ml乙酸乙酯中，过滤后得到1.4g中间体。FAB-MS: m/z 482,(45,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.21(s,3H),10.18(s,1H),9.61(m,1H),8.85(s,1H),8.39(t,J=5.8Hz,1H),8.00-7.70(b.s.,1H),7.28(d,J=1.7Hz,1H),7.22(d,J=1.7Hz,1H),7.12(d,J=1.7Hz,1H)7.08(d,J=1.7Hz,1H),7.03(d,J=1.7Hz,1H),6.92(d,J=1.7Hz,1H),3.92(s,3H),3.89(s,3H),3.86(s,3H),3.60-3.40(m,2H),3.02(d,J=6Hz,3H),2.80(d,J=6Hz,3H),2.72(m,2H).步骤Ⅱ标题化合物

将200mg 1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯(如实施例1步骤Ⅱ所述制得)的10ml苯溶液加到步骤Ⅰ所得中间体(250mg)和76mg NaHCO₃在5ml H₂O中的溶液内。室温搅拌溶液1小时，然后减压蒸发，并将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：85/15)，得到185mg黄色固体标题化合物。FAB-MS:m/z 736,(70,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.38(s,1H),10.00(s,1H),9.96(s,1H),9.94(s,1H),9.2(b.s.,2H),8.33(t,J=6.0Hz,1H),6.9-7.3(m,8H),6.71(d,J=2.9Hz,1H),6.22(d,J=2.9Hz,1H),3.85(s,6H),3.84(s,3H),3.80(s,3H),3.44(b.s.,2H),3.00(s,3H),2.79(s,3H),2.73(b.s.,2H).UV:c=18.1mg/l(EtOH 95％)λ_MAX=312ε=44375

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N′-二甲基丙脒盐酸盐；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N′-二甲基丙脒盐酸盐。实施例43-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-丙脒肟步骤Ⅰ中间体3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒肟盐酸盐

将2g偏端霉素A在35ml DMF中的溶液加热至80℃，用0.46ml 1M羟胺的DMF溶液处理。30分钟后，再加入1当量1M羟胺的DMF溶液。蒸发溶液至干，将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：9/1)，得到1.50g 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-甲酰氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-丙脒肟。随后将此产物溶于50ml甲醇，加入10ml 2N盐酸。在室温下搅拌反应2天，然后真空蒸发溶剂，并将固体残渣悬浮在200ml乙酸乙酯中，过滤后得到1.4g中间体。FAB-MS: m/z 480(20,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.18(b.s.,3H)；9.98(s,1H)；8.32(t,J=5.7Hz,1H)；7.25(d,J=1.7Hz,1H)；7.20(d,J=1.7Hz,1H)；7.16(d,J=1.7Hz,1H)；7.12(d,J=1.7Hz,1H)；7.10(d,J=1.7Hz,1H)；6.93(d,J=1.7Hz,1H)；3.89(s,3H)；3.86(s,3H)；3.82(b.s.,7H)；3.50(m,2H)；2.22(m,2H).步骤Ⅱ标题化合物

在277mg步骤Ⅰ所得中间体和137mg NaHCO₃在55ml H₂O中的溶液内加入203mg 1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯(如实施例1步骤Ⅱ所述制得)的55ml二噁烷溶液。室温搅拌溶液5小时，然后真空蒸发，并将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：85/15)，得到90mg淡褐色固体标题化合物。FAB-MS:m/z 724,(10,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.27(s,1H),9.94(s,1H),9.91(s,1H),9.88(s,1H),9.5(b.s.,2H),8.5(b.s.,1H),7.98(t,J=5.9Hz,1H),7.3-6.8(m,8H),6.66(d,J=2.9Hz,1H),6.21(d,J=2.9Hz,1H),3.84(s,6H),3.83(s,3H),3.79(s,3H),3.38(b.s.,2H),2.31(b.s.,2H).UV:c=4.16mg/l(MeOH)λ_MAX=307.8 ε=51155

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒肟；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒肟。实施例52-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]乙基胍盐酸盐步骤Ⅰ中间体2-氨基乙基胍二盐酸盐

将市售的N-BOC-乙二胺(1g)在无水乙醇(100ml)中的溶液和2-甲基-2-硫代假脲氢碘酸盐(1.5g)回流8小时。然后减压除去溶剂，并将粗制残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：9/1)，得到1.5g N-BOC-2-氨基乙基胍氢碘酸盐黄色油状物。然后将此产物溶于氢氯酸甲醇溶液5N(20ml)并在室温下搅拌3小时。收集白色沉淀物，经无水乙醇洗涤后，得到700mg中间体。FAB-MS:m/z 103,(20,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:8.38(b.s.,3H),7.97(t,J=6Hz,1H),7.51(b.s.,4H),3.45(m,2H),2.92(m,2H).步骤Ⅱ中间体2-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]乙基胍二盐酸盐

将1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-硝基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-羧酸(590mg)(按四面体34,2389-2391,1978中所报道的方法制备)在20ml DMF中的溶液、2-氨基乙基胍二盐酸盐(500mg)、1-羟基苯并三唑水合物(350mg)，二环己基碳二亚胺(880mg)、和碳酸氢钠(385mg)于70℃搅拌4小时。过滤后真空蒸发所得溶液，残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到800mg 2-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-硝基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]乙基胍盐酸盐。然后将此产物溶于甲醇(100ml)，加入1N盐酸溶液(2ml)，在Parr装置中于Pd催化剂(1％，负载在木炭上)存在下在氢气压(50psi)下还原。滤除催化剂后，真空蒸发所得溶液，固体残渣用无水乙醇洗涤，得到750mg所要中间体，为棕色粉末。FAB-MS:m/z469,(15,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.38-10.11(b.s.,4H),9.98(s,1H),8.28(b.s.,1H),8.19(d,J=1.7Hz,1H),7.73,(b.s.,1H),7.63(d,J=1.7Hz,1H),7.60-7.00(b.s.,4H),7.28(d,J=1.7Hz,1H),7.20(d,J=1.7Hz,1H),7.1(d,J=1.7Hz,1H),6.92(d,J=1.7Hz,1H),3.93(s,3H),3,90(s,3H),3.82(s,3H),3.28(m,4H).

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-丙脒肟盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒二盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N＇-二甲基丙脒二盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙酰胺盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙酰胺盐酸盐；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈盐酸盐。步骤Ⅲ标题化合物

将250mg 1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯(如实施例1步骤Ⅱ所述制得)的15ml苯溶液加到步骤Ⅱ所得中间体(250mg)和82mg NaHCO₃在5ml H₂O中的溶液内。室温下剧烈搅拌溶液8小时，然后真空蒸发，并将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到220mg黄色固体标题化合物。FAB-MS:m/z723,(32,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.30(s,1H),9.95(s,1H),9.92(s,1H),9.90(s,1H),8.10(t,J=5.9Hz,1H),7.56(t,J=5.9,1H),7.2(b.s.,4H),6.9-7.3(m,8H),6.68(d,J=2.9Hz,1H),6.21(d,J=2.9Hz,1H),3.85(s,3H),3.84(s,3H),3.83(s,3H),3.80(s,3H),3.30(b.s.,4H).UV:c=15.3mg/l(EtOH95％)λ_MAX=312.0 ε=48792

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：2-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]乙基胍盐酸盐；2-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]乙基胍盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒腈；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒腈；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒腈；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒肟；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒肟；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒肟；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙酰胺；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙酰胺；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙酰胺；和3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基丙酰胺。实施例63-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈步骤Ⅰ中间体3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈盐酸盐

在1g偏端霉素A的20ml DMF溶液中加入550mg琥珀酸酐和950mgK₂CO₃。将所得溶液在60℃加热3小时，然后蒸发至干，并将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：9/1)，得到750mg 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-甲酰氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈，继而将其溶于20ml甲醇中，加入5ml 2M HCl。室温搅拌溶液2天，然后真空蒸发溶剂，并将所得固体残渣悬浮在20ml乙酸乙酯中，过滤后得到560mg所需中间体。步骤Ⅱ标题化合物

在80mg α-溴丙烯酸的10ml DMF溶液中加入57mg二环己基碳二亚胺。室温搅拌所得溶液20分钟，然后加入110mg步骤Ⅰ所得中间体和20mg碳酸氢钠。室温搅拌混合物8小时，然后真空蒸发溶剂，并将所得粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：9/1)，得到100mg黄色固体标题化合物。FAB-MS:m/z 571,(10,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.29(s,1H),9.96(s,1H),9.92(s,1H),8.32(t,J=5.9Hz,1H),6.9-7.3(m,6H),6.67(d,J=2.8Hz,1H),6.22(d,J=2.8Hz,1H),3.85(s,3H),3.84(s,3H),3.80(s,3H),3.39(m,2H),2.7(t,J=6.3Hz,2H).UV:c=15.1mg/l(EtOH95％)λ_MAX=308.4 ε=37068

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基-丙脒盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N′-二甲基丙脒盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒肟；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-丙酰胺。实施例73-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙酰胺步骤Ⅰ中间体3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙酰胺盐酸盐

向1g偏端霉素A在50ml乙腈和50ml水中的溶液内加入10ml 1NNaOH，并将溶液在60℃加热4小时。蒸发溶剂至干，粗产物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：9/1)，得到800mg 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-甲酰氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙酰胺，进而再溶于20ml甲醇中，加入5ml2N HCl。室温下搅拌反应2天，然后真空蒸发溶剂，并将固体残渣悬浮在50ml乙酸乙酯中，过滤后得到600mg所要中间体，为浅棕色固体。

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙酰胺盐酸盐步骤Ⅱ标题化合物

将260mg 1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯(如实施例1步骤Ⅱ所述制得)的25ml二噁烷溶液加到步骤Ⅰ所得中间体(420mg)在25ml乙腈和25ml二噁烷及0.27ml三乙胺中的溶液内。室温下搅拌溶液1小时，然后真空蒸发，并将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到220mg黄色固体标题化合物。FAB-MS:m/z 711,(36,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.27(s,1H),9.94(s,1H),9.92(s,1H),9.86(s,1H),7.94(t,J=5.9Hz,1H),6.8-7.3(m,8H),7.31(b.s.,1H),6.79(b.s.,1H),6.66(d,J=2.9Hz,1H),6.21(d,J=2.9Hz,1H),3.84(s,6H),3.83(s,3H),3.79(s,3H),3.33(m,2H),2.30(t,J=7.2Hz,2H).UV:c=15.1mg/l(EtOH95％)λ_MAX=311.0 ε=53146

通过类似方法，采用适当起始物质制备下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙酰胺；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙酰胺；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙酰胺。实施例83-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐步骤Ⅰ中间体3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒二盐酸盐

将1.2g 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-硝基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈(按药物化学杂志22,1296-1301,1979中所述制备)悬浮在无水乙醇中，并将此溶液用无水氯化氢饱和。室温下放置24小时后，真空蒸发溶剂，残留物用两当量甲胺的无水乙醇溶液处理。室温下放置24小时后，真空蒸发溶剂，并通过快速层析纯化所得残留物，得到500mg 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-硝基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐。随后将此产物溶于甲醇-二噁烷-10％盐酸(4∶1∶1)混合物中，在Parr装置中于Pd催化剂(10％/木炭)存在下于50psi氢气压下还原。真空蒸发滤除催化剂后所得的溶液，将固体残渣悬浮在无水乙醇内，经过滤后得到500mg中间体。FAB-MS:m/z468,(40,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.20(s,3H),10.18(s,1H),9.98(s,1H),9.65(m,1H),9.20(s,1H),8.63(s,1H),8.25(t,J=5.8Hz,1H),7.25(d,J=1.7Hz,1H),7.19(d,J=1.7Hz,1H),7.11(d,J=1.7Hz,1H)7.08(d,J=1.7Hz,1H),7.05(d,J=1.7Hz,1H),6.91(d,J=1.7Hz,1H),3.90(s,3H),3.85(s,3H),3.79(s,3H),3.60-3.40(m,2H),2.80(d,J=6 Hz,3H),2.61(m,2H).

通过类似方法，采用适当起始物质可制得下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒腈盐酸盐；3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒肟盐酸盐；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-氨基吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N,N＇-二甲基丙脒二盐酸盐。步骤Ⅱ标题化合物

向70mgα-溴丙烯酸在8ml DMF中的溶液内加入51mg二环己基碳二亚胺。室温下搅拌此溶液20分钟，然后加入108mg步骤Ⅰ所得中间体和17mg碳酸氢钠。室温搅拌此混合物10小时，然后真空蒸发溶剂，并将粗制残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到50mg黄色固体标题化合物。FAB-MS:m/z600,(20,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.28(s,1H),9.93(s,1H),9.88(s,1H),9.4(b.s.,1H),9.1(b.s.,1H),8.5(b.s.,1H),8.18(t,J=5.9Hz,1H),6.8-7.3(m,6H),6.64(d,J=2.9 Hz,1H),6.18(d,J=2.9Hz,1H),3.80(s,3H),3.79(s,3H),3.76(s,3H),3.48(m,2H),2.75(s,3H),2.62(m,2H).

通过类似方法，采用适当起始物质制备下列产物：3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒腈；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N-甲基丙脒盐酸盐；3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)-N,N′-二甲基丙脒盐酸盐；和3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙脒肟。实施例93-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈

向350mg 3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙脒盐酸盐(如WO 90/11277中所述制备)的20ml DMF溶液中加入120mg琥珀酸酐和165mg K₂CO₃。将所得溶液在60℃加热3小时，然后减压蒸发，并将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：95/5)，得到150mg浅黄色固体标题化合物。FAB-MS: m/z 693,(100,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.32(s,1H),10.00(s,1H),9.97(s,1H),9.95(s,1H),8.36(t,J=5.9Hz,1H),6.9-7.3(m,8H),6.70(d,J=2.7Hz,1H),6.25(d,J=2.7Hz,1H),3.88(s,6H),3.87(s,3H),3.60(s,3H),3.42(m,2H),2.75(t,J=6.5Hz,2H).UV:c=20.3mg/l(EtOH95％)λ_MAX=312.6 ε=45606

通过类似方法，采用适当起始物质制备下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]丙腈。实施例103-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐

向如实施例2步骤Ⅰ所述制得的中间体和100mg NaHCO₃在15ml水中的溶液内加入395mg 1-甲基-4-(α-氯丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氯的15ml苯溶液。剧烈搅拌反应4小时，然后真空蒸发溶剂，并将粗残留物通过快速层析纯化(二氯甲烷/甲醇：8/2)，得到135mg黄色粉末标题化合物。FAB-MS:m/z 678,(45,[M+H]⁺)PMR(DMSO-d₆)δ:10.29(s,1H),9.96(s,1H),9.92(s,1H),9.89(s,1H),8.9(b.s.,3H),8.19(t,J=5.9Hz,1H),6.9-7.3(m,8H),6.37(d,J=2.2Hz,1H),5.99(d,J=2.2Hz,1H),3.84(s,6H),3.83(s,3H),3.79(s,3H),3.48(m,2H),2.78(s,3H),2.59(m,2H)．UV:c=18.5mg/l(EtOH95％)λ_MAX=312.6 ε=44232通过类似方法，采用适当起始物质制备下列产物：3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐；和3-[1-甲基-4-[1-甲基-4-[1-甲基-4-(α-溴丙烯酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]吡咯-2-甲酰氨基]-N-甲基丙脒盐酸盐。