氨基嘌呤抗病毒剂在治疗和预防潜伏性疱疹病毒感染中的用途

摘要

本发明涉及治疗包括人在内的哺乳动物潜伏性疱疹病毒感染的一种方法,该法包括给需要这种治疗的哺乳动物有效量的式(A)化合物或其生物前体,或它们中任何一种的药学上适用的盐,磷酸酯和/或酰基衍生物。

说明书

本发明涉及潜伏性疱疹病毒感染的治疗。

在这里“治疗”包括适当的预防。

EP-A-141927(Beecham Group p.l.c)公开了作为抗病毒剂的贲昔洛韦(penciclovir)，即式(A)化合物：及其盐，磷酸酯和酰基衍生物。贲昔洛韦的水合钠盐公开于EP-A-216459(Beecham Group p.l.c)。贲昔洛韦和其抗病毒活性也公布于国际第14次微生物学会议摘要P.V 11-5 P193，1986年9月7-13日英国曼彻斯特(Abstract P.V 11-5 P.193 of Abstracts of 14th Int.Congressof Microbio1ogy′，Manchester，England 7-13 September 1986(Boyd et：al))。

用于口服的式(A)化合物活性生物前体是式(B)以及如同对式(A)所定义的它的盐和衍生物：

其中X是C_1-6烷氧基，NH₂或氢。X是C_1-6烷氧基或NH₂的式(B)化合物公开于EP-A-141927，而公开于EP-A-182024(BeechamGroup p.l.c)的其中X是氢的式(B)化合物是优选的前药。式(B)化合物的特别优选的实例如EP-A-182024中实例2所述，其中X是氢且其中两个OH是以乙酰衍生物的形式存在，以后称其为法昔洛韦(famciclovir)。

已提到式(A)和式(B)化合物及其盐和衍生物可用于治疗疱疹病毒感染，例如由单纯疱疹病毒1型和单纯疱疹病毒2型所致的感染。

前期研究表明，如果感染后几小时内没有抗病毒治疗即可发展成潜伏性感染。一旦发生潜伏性感染，此感染可能复发。

现已证明，当用法昔洛韦治疗感染后18小时(第一项实验)和感染达4天(第二项实验)的鼠时，可预防持久的潜伏性感染的发生。实验还表明，在具有免疫抑制的鼠中也可预防潜伏性感染的发生。用法昔洛韦治疗感染4天以内的病人不仅可预防急性感染也防止了潜伏性感染的发展，从而避免了复发感染，这是潜在的临床优越性。此外，据认为也可能潜伏感染的细胞慢慢自然消失，要保持潜伏感染的细胞的负荷，则需要通过在新细胞内建立潜伏性感染发生复发感染。因此，用法昔洛韦长期地(达几年)进行抑制治疗可预防新细胞的潜伏性感染。有效治疗的结果可使病人以后不复发感染。

因此，本发明提供了台疗人体的潜伏性疱疹病毒感染的方法，该法包括给需要治疗的人有效量的式(A)化合物或其生物前体，或它们中任何一种的药学上适用的盐，磷酸酯和/或酰基化衍生物：

用在这里的术语“酰基化衍生物”包括任何一种式(A)化合物的衍生物，这些衍生物中存在着一个或多个酰基。该衍生物中除了本身具有生物活性的衍生物外还包括式(A)化合物的生物前体。

式(A)化合物可以是公开于EP-A-216459(Beecharm Groupp.l.c.)中的一种形式。

生物前体、药学上适用的盐和衍生物的实例与在前述欧洲专利参考文献中所述的相同，其主要内容在此引入本文作为参考。

重要的典型式(B)化合物是9-(4-乙酰氧基-3-乙酰氧甲基丁-1-基)-2-氨基嘌呤，即熟知的法昔洛韦(FCV)，是吸收良好的贲昔洛韦(PCV)的口服形式。

式(A)化合物，生物前体，盐和衍生物可按前述欧洲专利参考文献中所述的方法制备。

化合物，尤其是法昔洛韦，可经口服给予人体并且可制成糖浆剂、片剂或胶囊剂。制片剂的时候，可使用任何适合于制成该固体组合物的药物载体，例如，硬脂酸镁，淀粉，乳糖，葡萄糖，米粉，面粉和白垩粉。本发明化合物也可制成含该化合物的可食性胶囊，例如明胶胶囊，或糖浆，溶液或悬浮液剂型。适用的液态药物载体包括乙醇、甘油、盐水和水，向这些载体中可加入调味剂或着色剂以形成糖浆剂。也可设计成缓释制剂，例如有肠溶包衣的片剂。

为了非肠道给药，制备含有本化合物和灭菌溶媒的流体单位剂型。或者可将其制成悬浮液或可制成溶液，这主要取决于溶媒和药物浓度。通常是将本化合物溶解在溶媒中并过滤灭菌后装入合适的小瓶或安瓿中封好来制备非肠道给药的溶液。在溶媒中最好是溶有辅助剂，例如局麻剂，防腐剂和缓冲剂。为了增加稳定性，可将组合物装入小瓶后冷冻并在真空下去水。

按照基本上与制备溶液剂相同的方法制备非肠道给药的悬浮剂，只不过化合物是悬浮而不是溶解在溶媒中并且在悬浮于灭菌溶媒中之前先将化合物暴露在环氧乙烷中灭菌。为使本发明化合物易于均匀分布，最好是在组合物中加入表面活性剂或湿润剂。

优选的非肠道制剂包括用灭菌水或生理盐水制成的pH为7.4或更高的水溶性制剂，尤其含有贲昔洛韦水合钠盐的制剂。

通常的作法是，组合物附有书写或印刷的药物治疗用法说明。

适合的剂量单位可以在50mg～1g活性成分范围内，例如100～500mg。该剂量每天可给药1-4次或更常用的2次或3次。通常，化合物的有效剂量为每千克体重每天0.2～40mg或更普遍为10～20mg。法昔洛韦单位制剂为125mg，250mg，500mg或750mg，优选为125mg或250mg。

为预防持久的潜伏性感染，接触到病毒后最好尽可能早期治疗，尽管感染在4天内治疗可行，但优选在感染18小时内治疗。治疗期通常是3-14天，更普遍的是5-10天，常常为7天。

为治疗已确定的复发性疾病，治疗期可长达5年，例如长达1，2，3，4和5年。

本发明也提供了式(A)化合物或其生物前体，或者两者中任一种的药学上适用的盐，磷酸酯和/或酰基化衍生物在制备用于治疗潜伏性疱疹病毒感染药物中的用途。该治疗可按照上述的方法进行。

本发明进一步提供了治疗潜伏性疱疹病毒感染的药物组合物，该组合物包括有效量的式(A)化合物或其生物前体，或它们两者中任一者的药学上适用的盐，磷酸酯和/或酰基化衍生物，以及药物上适用的载体。该组合物可按下面所述的方法制备。

式(A)化合物和其前药与干扰素合用显示出协同的抗病毒效果；因此，使用组合的产品，包括由相同或不同给药途径的相继或合并给药的两种成分，也属于本发明的范围。这类产品描述于EP-A-271270(Beecham Group p.l.c.)。

下面的动物研究结果说明本发明。用单纯1型疱疹病毒感染的鼠实验

用单纯1型疱疹病毒(SC16)接种在鼠耳廓中建立皮肤感染并且研究口服法昔洛韦对潜伏性病毒感染的治疗效果。

购买出生3-4周大的BALB/c雌性鼠(Bantin and King man，Kingston，Hull，UK)一周后接种。将含有5×10⁴ p.f.u病毒悬浮液(10μl)接种到鼠左耳廓皮肤中。用一种工程师用的测微螺旋计每天测量每只鼠皮肤的厚度(参考Nash et al，1980，普通病毒学杂志(J.Gen.Virol)48，351-357)。将这些鼠养3(实验1)或4(实验2)个月后杀死。取出三叉神经节和颈部背根神经节后一起培养。记录显示病毒复制的培养体作为阳性。实验1

在第一项实验中，鼠感染后18小时内开使治疗到第10天治疗停止。

24只没被治疗的对照鼠中，有12只在三叉神经节(TG)出现潜伏性感染而20只在脊背侧根神经节(DRG)出现潜伏性感染。而用法昔洛韦治疗的鼠无一例出现任何潜伏性感染。实验2

在第二项实验中，鼠感染后(P，i)1，2，3，4或5天开始抗病毒治疗，第10天停止治疗。以饮水的方式按1mg/ml不限量地服用该化合物(约100mg/kg/天)其结果显示在下列表中：(注：组1和组2的治疗方法相同但各自进行结果分析)

潜伏感染数  组1潜伏感染数  组2 总的潜伏感染数 总的急性感染数抗病毒治疗(天)三叉神经节+ve/8背根神经节+ve/8三叉神经节+ve/8背根神经节+ve/8当天神经节为病毒感染阳性鼠的百分数％ 120(n＝16)当天神经节为病毒感染阳性鼠的百分数％  8(n＝8) Lt  Rt Lt  Rt Lt  Rt Lt  Rt  左/右三叉神经节+背根神经节  左/右三叉神经节+背根神经节无5-104-103-102-101-10 8 4 2 0 0 0  4  0  0  0  0  0 8 4 2 0 0 0   5   0   0   0   0   0  8  2  0  0  0  0   6   0   0   0   0   0 8 2 0 0 0 0  2  0  0  0  0  0    100    38    13     0     0     0    100    100    100     0     0     0

4个月后，潜伏性病毒在所有16个对照鼠的节移出物(同侧和对侧的三叉神经和背根神经节)中均可复活。由法昔洛韦治疗的鼠，其节中的潜伏性病毒，除了同侧神经节并且仅仅当感染后治疗被耽误4天(2/16)或5天(6/16)的情形以外，没有出现潜伏性病毒的复活。

当平均按50mg/kg剂量每日两次管饲该化合物时可收到相似的效果。实例3

感染后2-10天(0天为感染日)内使用环孢菌素A(CyA)使感染后的鼠产生免疫抑制。1或4个月后检查未受治疗组的鼠(对照)，或感染后22小时到5.5天或10.5天每天两次按50mg/kg剂量口服法昔洛韦治疗的组中鼠神经节感染病毒的复活情况，其结果显示于下表：

           LTG         RTG           LDR          RDR

         (n＝6)       (n＝6)       (n＝6)        (n＝6)

对照       6             4            6             3  法昔洛韦     0             0            0            0TG＝三叉神经节  DRG＝背根神经节  L/R＝左/右用单纯2型疱疹病毒感染的鼠实验

用单纯2型疱疹病毒(Bry)在鼠耳廓接种建立皮肤感染，并研究口服法昔洛韦对潜伏性病毒感染的效果。感染后22小时开始按50mg/kg每天两次治疗5天。

下表列出了每组鼠在三叉神经或颈部背根神经节中有阳性潜伏性感染的数量

   No.神经节为阳性鼠的数量          至少有一只神经节为病毒

        /所试验的鼠的数量           感染阳性的鼠的百分数组      LeftT/G  RightT/G  LeftT/G  RightT/G对照     10/10    10/10     10/10    6/10      100法昔洛韦  0/10    0/10       0/10    0/10       0  T/G＝三叉神经节  CRG＝颈部背根神经节