含有松三糖作为稀释剂的粉剂

摘要

一种医药用多肽的粉剂,该粉剂包括医药用多肽如用作稀释剂的松三糖。

说明书

发明领域

本发明涉及含有医药用多肽的粉剂。

技术背景

可制备含有医药用多肽和可药用载体或稀释剂的多肽粉末供吸入或其它方式给药。吸入用多肽粉末制剂已在WO95/00127和WO95/00128中描述。

药物制剂特别是吸入用制剂中常含有稀释剂。它们用于在生产和贮存中稳定药物以及调整组成单位剂量的粉末量一般而言，粉末吸入剂仅在某些剂量范围可精确给药，但是不同的药物具有不同的效力，因此必须以不同的剂量给药。由于这些剂量常常太小以致于不能保证适当的剂量准确度，因此加入稀释剂以获得所需的剂量大小。

先前，在多肽粉剂中已使用还原糖如乳糖和葡萄糖作为稀释剂。但是它们易于与多肽反应，因此不令人满意。

在涉及吸入用多肽粉末的WO95/00127和WO95/00128中建议，在多肽粉末中以非还原糖如棉子糖、松三糖、乳糖醇、麦芽糖醇、海藻糖、蔗糖、甘露糖醇和淀粉为优选的添加剂。

现已发现，松三糖与其它可能用于多肽粉剂的非还原糖稀释剂相比，是一种特别好的稀释剂，吸入后可得到意外高的可呼吸部分。发明概述

因此，本发明提供了用于给予医药用多肽的粉剂，其含有医药用多肽和作为稀释剂的松三糖。

优选通过吸入给药。

松三糖可包括如D-松三糖(α-D-松三糖)、β-D-吡喃葡糖甙、O-α-D-吡喃葡糖甙基-1，3-β-D-呋喃果糖甙及(β-D-松三糖)或异松三糖。松三糖可以是如一水或二水合形式。

已发现本发明的粉剂经口吸入时非常有效，与本文所述的使用其它稀释剂的粉剂相比，本发明粉剂可获得更多的可呼吸颗粒。因此，有更多的吸入粉末到达肺，从而可利用更多的多肽。

本发明的粉剂也适用于鼻吸入。

本发明的粉剂适用于全身和局部治疗。当需要在呼吸道发挥局部作用时，粉剂中可不含其它组分。当需要全身作用时，通常在制剂中应包括促进剂，即可促进多肽在呼吸道吸收的物质。这些物质包括在WO95/00127和WO95/00128中，在此引入作为参考。在某些情况下，小的多肽可在呼吸道吸收而不必借助促进剂。在这些情况下，松三糖和医药用多肽的制剂可不含促进剂。因此，本发明的不同实例中提供了含有医药用多肽和松三糖的粉末；含有医药用多肽和松三糖并特定包含促进剂的粉末；含有医药用多肽和松三糖并特定不合促进剂的粉末。本发明中不含促进剂的粉末在以下情况特别有用：(a)当需要多肽的局部作用时；或(b)当需要即可在不必借助促进剂呼吸道吸收的较小多肽的全身作用时。不必借助促进剂即可在呼吸道吸收的多肽可用常规细胞或者优选动物模型来识别，后者通过比较服用含有及不含促进剂的粉末后的血浆多肽水平来识别，例如通过Wright Dust Feed装置测定。当需要多肽的全身作用时(该多肽在没有促进剂的帮助下不能在呼吸道吸收)，本发明中特定包含促进剂的粉末最有用。

优选的促进剂包括C_8-16脂肪酸及其盐、胆汁盐、磷脂和烷基糖类。

在脂肪酸及其盐中，优选C_8-16脂肪酸盐。优选的脂肪盐的例子有辛酸(C₈)、癸酸(C₁₀)、月桂酸(C₁₂)和肉豆蔻酸(C₁₄)的钠盐、钾盐和赖氨酸盐。由于相反离子的性质不特别显著，因此脂肪酸的任何盐都有用。特别优选的脂肪酸盐是癸酸钠。

适当的胆汁酸盐如胆汁酸、鹅脱氧胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、甘鹅脱氧胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸、甘脱氧胆酸、牛磺脱氧胆酸、石胆酸和熊脱氧胆酸的盐。

在胆汁盐中，优选三羟基胆汁盐。更优选的是胆酸、甘胆酸和牛磺胆酸的盐，特别是其钠盐和钾盐。最优选的胆汁盐是牛磺胆酸钠。

适当的磷脂如单链磷脂，例如溶血磷脂胆碱、溶血磷脂甘油、溶血磷脂乙醇胺、溶血磷脂肌醇和溶血磷脂丝氨酸或双链磷脂，例如二酰基磷脂胆碱、二酰基磷脂甘油、二酰基磷脂乙醇胺、二酰基磷脂肌醇和二酰基磷脂丝氨酸。

在磷脂中，优选二酰基磷脂甘油和二酰基磷脂胆碱，例如二辛酰磷脂甘油和二辛酰磷脂胆碱。

适当的烷基糖有如烷基葡糖甙或烷基麦芽糖甙，例如癸基葡糖甙和十二烷基麦芽糖甙。

最优选的促进剂是胆汁盐。

多肽可以是任何医药用或诊断用小至中等大小(即至约40kD的分子量(MW))的肽或蛋白质。预计分子量至30kD的多肽是本发明最有用的，例如分子量达25kD或20kD，特别是分子量达15kD、10kD或5kD的多肽。

该多肽优选为肽激素，例如胰岛素、胰高血糖素、胰岛素的C-肽、后叶加压素、去氨加压素、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促性腺激素释放激素(GnRH)、促性腺激素释放激素激动剂和拮抗剂，促性腺激素(促黄体生成激素，或LHRH)，降钙素、甲状旁腺激素(PTH)、PTH生物活性片断如PTH(34)和PTH(38)、生长激素(GH)(例如人生长激素(hGH)、生长激素释放激素(GHRH))、生长抑素、催产素、心钠素(ANF)、促甲状腺素释放激素(TRH)、脱氧核糖核酸酶(DNase)、催乳素和促卵泡成熟激素(FSH)以及上述各肽激素类似物。

其它可能的多肽包括生长因子、白介素、多肽疫苗、酶、内啡肽、糖蛋白、脂蛋白和参与凝血级联的多肽。

优选的多肽是胰岛素。

在本发明的粉剂中，松三糖的量可以占总粉末重量的几乎100％。例如，松三糖的量可占粉末总重量的20％和几乎100％之间，例如在30％和几乎100％之间或者40％和几乎100％之间，或者50％和几乎100％之间，即60％和几乎100％之间，或者65％和几乎100％之间，例如65％和99％之间，或者约70％和约99％之间，例如在80％和98％之间。

和所有药物制剂一样，在本制剂中也可含有某些添加剂，例如用于调节pH值的有机或无机盐，用于调味或用于增加稳定性如防腐剂、碳水化合物、氨基酸、肽和蛋白质。

当本发明的粉剂用于经口吸入时，多肽应有以下组成：(a)直径小于约10微米的主要颗粒，例如0.01和10微米之间，优选0.1和6微米之间，例如0.01和5微米之间，或者(b)所述颗粒的团块。优选至少50％的多肽由所需粒度范围的颗粒组成。当需要经口吸入时，例如至少60％，优选至少70％，更优选至少80％，最优选至少90％的多肽由所需粒度范围的颗粒组成。

经口吸入的制剂中的松三糖可主要由直径小于约10微米的颗粒组成，这样所得粉末总体由选择性成团的直径小于约10微米的主要颗粒组成；另外，松三糖可主要由更大的颗粒(“粗颗粒”)组成，这样可在活性化合物和松三糖之间形成“有序混合物”。在混合物中(也称作相互作用或粘合混合物)，多肽颗粒可相当均匀地分布在粗松三糖表面上。在这种情况下，优选活性化合物在形成混合物之前不是团块形式。粗颗粒的直径可超过20微米，例如超过60微米。在这些下限之上，粗颗粒的直径并不十分主要，因此如果需要，可根据特殊制剂的实际要求使用各种粗颗粒粒度。粗颗粒在混合物粒度不强求一致，但是粗颗粒混合物之中粒度近似更好。优选，粗颗粒的直径为60-800微米。

颗粒的粒度在鼻吸入剂中不太重要，但使用小颗粒更好。通常鼻吸入剂不使用有序混合物所定混合物不应用于鼻吸入剂中粒度近似更好。

一种可将粉末释放到患者呼吸道中的实用设备是适于干粉吸入的便携式吸入装置。市场上有许多这种装置出售，它们的设计主要是用于平喘药或抗炎药的呼吸系统给药。

所述的粉剂可以用常规技术以几种方式生产。可通过任何已知方法，例如冷冻干燥或控制结晶法(例如用超临界流体结晶)或者微粉化法获得所需粒度范围的颗粒。例如，可干燥混合多肽和松三糖(即所选促进剂)粉，然后将这些物质一起微粉化；或者，可分别将这些物质微粉化，然后混合。如果要混合的化合物具有不同的物理性质例如硬度和脆性，对微粉化的抗性不同，则需要不同的压力使之破碎成适当的颗粒度。因此，当一起微粉化时，其中一种组分所得的颗粒度可能不令人满意。在这种情况下，将不同组分分别微粉化然后再将其混合会更为有利。

当不需制备有序混合物时，亦可先将各组分溶于适当溶剂如水中，在分子水平混合。这一方法也可使pH值调节到所需水平。为了得到粉末，必需通过一种可保持多肽生物活性的方法除去溶剂。适当的干燥方法包括真空浓缩、开放干燥、喷雾干燥和冷冻干燥。通常应避免温度超过40℃数分钟，因为多肽可能会发生某些降解。干燥步骤后，如果需要，可将固体物质研磨成粗粉，然后，如果需要，再微粉化。

如果需要，可处理粉末以改善流动性，例如在填充入预定吸入装置前，可通过干法制粒形成具有优良处理特性的球形团块。在这种情况下，应设计装置使之确保团块在离开装置前基本上解聚，这样进入患者呼吸道的颗粒主要在所需粒度范围之内。

当需要混合物时，可处理活性化合物，如微粉化，以获得特定粒度范围内的颗粒。也可处理松三糖以获得所需粒度和期望的表面特性，例如特定的表面与重量比，或者一定的粗糙度，以确保所定混合物中最佳的粘合力。这种对有序混合物的物理要求是众所周知的，同样为得到满足这些要求的有序混合物所采取的不同手段也是为人们所熟悉的，同时是否达到这些要求也可由技术人员在特定场合下方便地测得。

本发明的粉剂可用于局部或全身治疗疾病，可以经过上下呼吸道(包括鼻途径)给药。因此本发明也提供了所述粉剂在治疗中的用途；该粉剂在生产用于经呼吸道治疗疾病的药物中的用途；治疗需治疗患者的方法，该方法包括给予所述患者治疗有效量的本发明粉剂。

可以用本发明粉剂治疗的疾病是那些在各病例中可用特种多肽治疗的疾病；例如本发明中含有胰岛素的粉剂可用于例如糖尿病的治疗；含有促肾上腺皮质激素的粉剂可用于例如炎症疾病的治疗；含有GnRH的粉剂可用于例如男性不育症的治疗。所述多肽的适应症是众所周知的。本发明的粉剂也可用于预防治疗。

尽管本发明的粉剂特别涉及从干粉吸入装置吸入的多肽粉剂，该多肽粉剂也可包含在其它给药形式的组合物中，例如在注射溶液和气雾剂中。

经口吸入本发明粉剂的可呼吸部分可以通过本文实施例所述的方法确定。

以下实施例阐述了某些实例，其不应被认为是限定本发明：实施例1

将胰岛素(0.6克)溶于蒸馏水(50毫升)。加入稀释剂(14.4克)并溶解，将pH值调节至7.4。压碎所得固体块，过筛，在气流粉碎机中微粉化。微粉化后的粉末结成团块，填充到Turbuhaler干粉吸入器中，在不同情况下以60L/分钟的空气流速释放剂量。

用多步尘埃测定器(multi-statge impinger)收集释放的剂量；用液相色谱法(在235nm检测)测定尘埃测定器每一步骤胰岛素的含量。结果如下

粒度小于6.8微米的颗粒部分，％稀释剂  30％RH，  60L/分钟 75％RH， 60L/分钟 30％RH， 60L/分钟，开 放吸湿^**肌醇    52    18    3麦芽糖醇    66    10    8甘露糖醇    65    17    9海藻糖    58    22    17棉子糖    40    l7 palatinite    30    18    15水苏糖    52    5松三糖    73    39    32

^**该制剂在敞口盘中吸湿三天。

可明显看出，在所有情况下松三糖给出最大部分的可呼吸颗粒。另外，当松三糖为稀释剂时，可呼吸部分不取决于外部因素。实施例2

将胰岛素(12份)溶于蒸馏水。加入牛磺胆酸钠(促进剂，4份)。加入不同稀释剂(84份)并溶解，将pH值调节至7.4。通过蒸发水浓缩溶液。压碎固体块，过筛，在气流粉碎机中微粉化。微粉化后的粉末结成团块，填充到Turbuhaler干粉吸入器中，在不同情况下以60L/分钟的空气流速释放剂量。

用多步尘埃测定器(multi-statge impinger)收集释放的剂量；用液相色谱法(在235nm检测)测定尘埃测定器每一步骤胰岛素的含量。结果如下。

粒度小于6.8微米的颗粒部分，％30％RH60L/分钟 90％RH 60L/分钟松三糖65.5 21.7海藻糖60.5 6.3肌醇71.6 10.9甘露糖醇79.4 4.4麦芽糖醇44.7 0.1

这些结果表明，含有松三糖的制剂受空气中高湿度的影响更小。实施例3

将含有脱氧核糖核酸酶(DNase)、表面活性剂(牛磺胆酸钠或二辛酰基磷脂甘油)和松三糖的微粉化制剂(DNase：表面活性剂：松三糖的比为1∶0.33∶98.67，总重量是50毫克)加到塑料包封玻璃瓶中的助推剂134a或助推剂227(约10毫升)中。用ultra turrax将制剂混合约10分钟。

制备相同的制剂，用ultraturrax装置混合约10分钟前加5％乙醇。

即刻以及20小时后评价所形成悬浮液的质量。在所有情况下都观察到了良好的悬浮液。

这表明，本发明含有松三糖的制剂适于用在干粉吸入剂以外的制剂中，本实施例为气雾剂。