家蚕基于CRISPR/Cas9系统的全基因组敲除载体文库及构建方法

摘要

本发明涉及家蚕基于CRISPR/Cas9系统的全基因组敲除载体文库及构建方法，包含用于递送CRISPR/Cas9系统的递送载体系统piggyBac转座子载体系统和家蚕全部编码蛋白的基因的打靶位点的sgRNA序列共同组成的载体文库pB‑CRISPR‑library。本发明基于piggyBac转座子系统的强大的承载容量，可以将CRISPR/Cas9系统的两个组成原件Cas9蛋白表达框和sgRNA表达框整合到一个载体上，同时该载体还包含筛选标记Zeocin抗性基因表达框，共同组成了一个用于家蚕的CRISPR/Cas9敲除的all‑in‑one载体pB‑CRISPR。