遗传改造枯草芽孢杆菌的方法及其获得的菌株和应用

摘要

本发明公开了一种遗传改造枯草芽孢杆菌的方法，包括下列步骤：（一）出发菌株MK3‑MEP123‑ΔdhbB的构建；（二）过表达甘油激酶基因glpK和甘油‑3‑磷酸脱氢酶基因glpD；（三）敲除丙酮醛合成酶编码基因mgsA和甘油‑1‑磷酸脱氢酶编码基因araM。本发明依次过表达glpK、glpD，增加甘油利用率，促进二羟丙酮磷酸的合成，进而增加MK‑7的合成；依次敲除mgsA、araM，分别阻断丙酮醛及甘油1‑磷酸的合成，减少二羟丙酮磷酸的消耗，促进MK‑7的合成，得到的重组菌株BSMK_4，在500 mL摇瓶中发酵96 h，MK‑7产量为70.3 mg/L，较出发菌MK3‑MEP123‑ΔdhbB（55.6 mg/L）提高26.4%。