基因工程改造外泌体递送miRNA-146a在糖尿病足溃疡治疗方面的应用

摘要

本发明涉及一种基因工程改造外泌体递送miRNA‑146a在糖尿病足溃疡治疗方面的应用，包括：⑴构建质粒：以pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP慢病毒表达载体为基础，整合miRNA‑146a基因，得到miRNA‑146a过表达慢病毒载体pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑146a；⑵包装获得慢病毒，转染293T：使用慢病毒包装质粒pSPAX2和pMD2.G对pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑146a进行包装，转染293T细胞，富集高滴度的病毒液；⑶侵染脐带充间质干细胞：用包装好的病毒侵染脐带间充质干细胞，得到过表达miRNA‑146a的脐带间充质干细胞hucMSC‑146a；⑷培养hucMSC‑146a，从培养基中分离过表达miRNA‑146a的外泌体Exso‑146a。